硫化氢、同型半胱氨酸和环格列酮对胱硫醚-γ-裂解酶基因及蛋白表达的影响 被引量：3

1

作者 刘会娟 雍小兰 +3 位作者 何冠军 罗丽君 胥正敏 周春阳 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2015年第11期1250-1255,共6页

目的:探讨硫化氢、同型半胱氨酸及环格列酮对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)内胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)基因及其蛋白表达的影响。方法:应用不同浓度的硫氢化钠(300、1 000μmol/L)、同型半胱氨酸(10、100、1 000μmol/L)及环格列酮(10... 目的:探讨硫化氢、同型半胱氨酸及环格列酮对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)内胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)基因及其蛋白表达的影响。方法:应用不同浓度的硫氢化钠(300、1 000μmol/L)、同型半胱氨酸(10、100、1 000μmol/L)及环格列酮(10、100μmol/L)作用于HUVEC,48 h后提取细胞总RNA,应用荧光定量PCR(realtime fluores-cence quantitative PCR,RTFQ PCR)及蛋白质印迹技术(Western blot)检测CSE基因和蛋白表达的变化。结果:硫氢化钠在生理浓度(300μmol/L)时可增加HUVEC CSE基因及蛋白的表达(P<0.05)。高浓度同型半胱氨酸引起HUVEC CSE基因及蛋白表达减弱(P<0.05)。环格列酮适宜浓度(10μmol/L)时也可增加HUVEC CSE基因及蛋白的表达(P<0.05)。结论:高浓度同型半胱氨酸对细胞水平上CSE的转录与翻译有抑制作用。从基因水平和蛋白质水平检测发现硫化氢和环格列酮可以调节CSE的转录与翻译,并可逆转高浓度同型半胱氨酸对CSE的作用。 展开更多

关键词 硫化氢 同型半胱氨酸 过氧化物酶体增殖激活受体 环格列酮 胱硫醚-γ-裂解酶

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游泳运动后自发性高血压大鼠主动脉一氧化氮的变化及其对胱硫醚-γ-裂解酶/硫化氧体系的影响 被引量：2

2

作者 齐洁 马智超 张钧 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期899-903,共5页

目的:观察运动对自发性高血压大鼠(SHR)主动脉一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)、胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)和硫化氢(H_2S)的影响,探讨运动干预后SHR大鼠内源性NO的变化对主动脉CSE/H_2S体系的调节作用。方法:选用雄性SHR大鼠16只,随机分... 目的:观察运动对自发性高血压大鼠(SHR)主动脉一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)、胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)和硫化氢(H_2S)的影响,探讨运动干预后SHR大鼠内源性NO的变化对主动脉CSE/H_2S体系的调节作用。方法:选用雄性SHR大鼠16只,随机分为高血压对照组(SC组)和高血压运动组(ST组),每组8只。同时选用雄性Wistar大鼠8只,为正常对照组(WC组)。ST组大鼠进行8周、每周6次、每次90min中等强度的无负重游泳运动。结果:8周90min游泳运动后,SC组大鼠血压较实验前显著升高(P<0.01),ST组大鼠血压较SC组大鼠血压显著下降(P<0.01),且与实验前相比无显著性差异(P>0.05);ST组大鼠较SC组大鼠主动脉NOS、NO、CSE和H_2S水平显著升高(P<0.05)。结论:运动可抑制SHR的血压上升,增加SHR主动脉NOS和NO的含量,内源性NO对SHR主动脉CSE/H_2S体系在运动缓解血压上升中呈促进作用,这一过程参与了运动降压的调控机制。 展开更多

关键词 高血压 运动 一氧化氮 胱硫醚-γ-裂解酶 硫化氢

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L-蛋氨酸γ-裂解酶的研究进展 被引量：4

3

作者 夏立亮 于源华 +1 位作者 薛冉 王保学 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期70-74,共5页

L-蛋氨酸γ-裂解酶是一种磷酸吡哆醛依赖型多功能酶,属于γ-蛋白家族。它能催化L-蛋氨酸及同型半胱氨酸的α,γ-裂解反应,被应用于肿瘤治疗及同型半胱氨酸血症的诊断。综述了蛋氨酸γ-裂解酶的来源,酶学性质,基因克隆与表达,酶的空间结... L-蛋氨酸γ-裂解酶是一种磷酸吡哆醛依赖型多功能酶,属于γ-蛋白家族。它能催化L-蛋氨酸及同型半胱氨酸的α,γ-裂解反应,被应用于肿瘤治疗及同型半胱氨酸血症的诊断。综述了蛋氨酸γ-裂解酶的来源,酶学性质,基因克隆与表达,酶的空间结构、活性位点及其应用,并对其在制备及应用中存在的问题和前景作了分析与展望。 展开更多

关键词 蛋氨酸γ-裂解酶酶学性质基因工程抗肿瘤药物 同型半胱氨酸血症

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胱硫醚-γ-裂解酶在大鼠耳蜗的分布及其在噪声刺激后的表达变化

4

作者 毛小波 乔莉 +3 位作者 邱建华 何亚 韩宇 米文娟 《中华耳科学杂志》 CSCD 2009年第1期55-59,共5页

目的探讨大鼠耳蜗胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase,CSE)的分布情况及在噪声刺激后的表达变化。方法通过免疫组织化学及免疫荧光染色技术,观察CSE在正常成年SD大鼠耳蜗内的分布及定位。32只SD大鼠被分成4组:正常对照组、1天组、... 目的探讨大鼠耳蜗胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase,CSE)的分布情况及在噪声刺激后的表达变化。方法通过免疫组织化学及免疫荧光染色技术,观察CSE在正常成年SD大鼠耳蜗内的分布及定位。32只SD大鼠被分成4组:正常对照组、1天组、1周组、3周组,后3组分别暴露于110dBSPL宽带白噪声中。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测大鼠接受强噪声刺激前后CSE在耳蜗内的表达变化。结果CSE主要表达在大鼠耳蜗的血管纹,螺旋突,以及耳蜗微小血管处;在耳蜗内外毛细胞、各类支持细胞、盖膜及蜗神经节处未见明显表达。随着噪声刺激时间的延长,CSE在mRNA水平的表达呈先增长后下降的趋势。结论CSE在耳蜗内的分布及其在噪声刺激后的表达变化,提示其在改善耳蜗血循环方面可能发挥重要作用。 展开更多

关键词 胱硫醚-γ-裂解酶 大鼠 耳蜗 噪声暴露

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重组同型半胱氨酸α,γ-裂解酶的表达纯化及表征

5

作者 王利群 孙培培 +2 位作者 曹利民 奚学志 王炜煜 《医药导报》 CAS 2015年第S01期4-7,共4页

目的研究以包涵体形式表达的重组同型半胱氨酸α,γ-裂解酶的表达、纯化,对其活性进行检测并对其酶学性质进行表征.方法将同型半胱氨酸α,γ-裂解酶的重组表达载体pET-15 b/rHCYase转化大肠埃希菌BL21中,进行优化大量表达.使用Ni^(2+)... 目的研究以包涵体形式表达的重组同型半胱氨酸α,γ-裂解酶的表达、纯化,对其活性进行检测并对其酶学性质进行表征.方法将同型半胱氨酸α,γ-裂解酶的重组表达载体pET-15 b/rHCYase转化大肠埃希菌BL21中,进行优化大量表达.使用Ni^(2+)亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,再通过His-Trap脱盐柱脱盐,采用MBTH法检测目的蛋白活性,并对该酶进行了表征.结果重组蛋白在大肠埃希菌中可以高效表达,产量为204 mg·L^(-1),比活约206 U·mg^(-1).相对分子质量为45200.重组酶的最适反应温度为35℃,酶活性稳定的温度范围为20~35℃.重组酶的最适反应pH为7.5,4℃下在pH7.5的缓冲溶液中保温5h酶稳定性最高.结论成功克隆和表达了rHCYase蛋白,并得到高产高酶活的可溶性蛋白,对同型半胱氨酸检测试剂的开发有一定的潜在应用价值. 展开更多

关键词 同型半胱氨酸α γ-裂解酶 表达纯化 表征

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心脏横纹肌中胱硫醚-γ-裂解酶的表达及意义 被引量：1

6

作者 张涛 张海涛 +3 位作者 刘朝中 谈诚 黄丛春 王俊华 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期499-501,共3页

目的探讨心脏横纹肌中胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase,CSE)的表达及意义。方法以SD大鼠心肌为研究对象,采用免疫组化SP法观察心脏横纹肌中CSE的表达,棕褐色为阳性表达。结果心脏横纹肌组织中无CSE阳性表达,心脏血管组织中有CS... 目的探讨心脏横纹肌中胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase,CSE)的表达及意义。方法以SD大鼠心肌为研究对象,采用免疫组化SP法观察心脏横纹肌中CSE的表达,棕褐色为阳性表达。结果心脏横纹肌组织中无CSE阳性表达,心脏血管组织中有CSE阳性表达。结论心脏横纹肌不含有CSE。在心血管系统中起重要调节作用的硫化氢不在心脏横纹肌中代谢生成,主要由外源途径生成。 展开更多

关键词 硫化氢 胱硫醚-γ-裂解酶 心脏横纹肌 免疫组织化学

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哮喘大鼠硫化氢含量与胱硫醚-γ-裂解酶mRNA表达的实验性研究 被引量：2

7

作者 方丽 李昌崇 +2 位作者 童夏生 王华芳 王招定 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2009年第1期20-24,共5页

目的:观察哮喘大鼠硫化氢(H2S)含量与胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)mRNA的表达,探讨H2S和CSE在哮喘发病机制中的作用。方法:采用哮喘大鼠模型,将30只SD大鼠随机分成哮喘组、正常对照组、地塞米松治疗组,分光光度法测定血浆H2S的含量,RT-PCR法... 目的:观察哮喘大鼠硫化氢(H2S)含量与胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)mRNA的表达,探讨H2S和CSE在哮喘发病机制中的作用。方法:采用哮喘大鼠模型,将30只SD大鼠随机分成哮喘组、正常对照组、地塞米松治疗组,分光光度法测定血浆H2S的含量,RT-PCR法测定肺组织CSE mRNA的表达水平。结果:哮喘组血浆H2S的含量显著低于正常对照组[(61±16vs84±15)μmol/L,P<0.01],地塞米松治疗组[(73±16)μmol/L]与哮喘组和正常对照组相比无统计学差异(均P>0.05)。哮喘组肺组织CSE mRNA的表达水平显著低于正常对照组(0.14±0.02vs0.46±0.05,P<0.01),地塞米松治疗组(0.33±0.04)显著性低于正常对照组但高于哮喘组(P均<0.01)。血浆H2S的含量和肺组织CSE mRNA的表达水平呈显著正相关(n=30,r=0.504,P<0.01)。结论:哮喘大鼠血浆H2S含量与肺组织CSE mRNA的表达水平均下降,它们可能参与了哮喘的炎症过程。地塞米松改善哮喘炎症的机制可能部分通过H2S/CSE体系。 展开更多

关键词 哮喘 大鼠 硫化氢 胱硫醚-γ-裂解酶 地塞米松

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胱硫醚-γ-裂解酶产生的H_(2)S在小鼠脑缺血/再灌注损伤中的作用及与RhoA-ROCK_(2)信号通路的关系 被引量：2

8

作者 郭芳芳 陈志武 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1369-1374,共6页

目的探讨胱硫醚-γ-裂解酶产生的H_(2)S在脑缺血/再灌注(cerebral ischemia/reperfusion,I/R)损伤中的作用及与RhoA-ROCK_(2)信号通路的关系。方法采用双侧颈总动脉结扎制备小鼠脑缺血/再灌注损伤模型,激光散斑法检测脑血流量,HE染色法... 目的探讨胱硫醚-γ-裂解酶产生的H_(2)S在脑缺血/再灌注(cerebral ischemia/reperfusion,I/R)损伤中的作用及与RhoA-ROCK_(2)信号通路的关系。方法采用双侧颈总动脉结扎制备小鼠脑缺血/再灌注损伤模型,激光散斑法检测脑血流量,HE染色法观察脑海马组织病理学变化,检测LDH、NSE、RhoA和ROCK_(2)活性及H_(2)S含量和ROCK_(2)蛋白表达。结果H_(2)S合酶CSE底物L-Cys(300 mg·kg^(-1))可明显促进脑I/R小鼠脑血流量的恢复,改善海马组织的病理损伤,抑制血清中LDH活性和脑组织中NSE、RhoA及ROCK_(2)活性的升高,并抑制血清H_(2)S含量的降低和脑组织中ROCK_(2)蛋白表达的增多。但L-Cys上述作用可被CSE合酶抑制剂PPG(50 mg·kg^(-1))明显地减弱;H_(2)S供体NaHS(4.8 mg·kg^(-1))也有与L-Cys相同的上述作用。结论CSE产生的H_(2)S对小鼠脑I/R损伤有保护作用,其作用可能与抑制RhoA-ROCK信号通路及增加脑血流量有关。 展开更多

关键词 硫化氢 胱硫氨酸-γ-裂解酶 脑缺血/再灌注 RhoA-ROCK_(2)信号通路 脑血流量 半胱氨酸

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响应面法优化甲硫氨酸γ-裂解酶发酵培养基 被引量：3

9

作者 甘祥武 胡海艳 +2 位作者 黄魁英 陈舒洁 李学优 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期113-118,共6页

目的:为获得低成本高酶活的工业化培养基,对甲硫氨酸γ-裂解酶(MGL)发酵生产培养基进行优化。方法:通过碳、氮源的筛选确定对酶活具有明显影响的因子,通过Plackett-Burman设计确定主要影响因子:甘油、安琪酵母粉、智龙酵母粉;采用最陡... 目的:为获得低成本高酶活的工业化培养基,对甲硫氨酸γ-裂解酶(MGL)发酵生产培养基进行优化。方法:通过碳、氮源的筛选确定对酶活具有明显影响的因子,通过Plackett-Burman设计确定主要影响因子:甘油、安琪酵母粉、智龙酵母粉;采用最陡爬坡实验及Box-Behnken响应面设计确定了三个主要影响因子的最适条件,当甘油浓度为1.40%,安琪酵母粉为0.80%,智龙酵母粉为0.96%时,甲硫氨酸裂解酶酶活达到最高值为11.30 U/mL。结果:经过发酵验证,MGL酶活为(11.06±0.15)U/mL,较LB培养基1.65 U/mL提高了5.69倍,显示出了良好的优化效果。结论:经优化后最终培养基组成为:甘油1.40%、安琪酵母粉0.80%、智龙酵母粉0.96%、乳糖1.20%、安琪蛋白胨1.80%、NaCl 0.90%、K_2HPO_4 1.80%、MgSO_4 0.20%。 展开更多

关键词 甲硫氨酸γ-裂解酶 PLACKETT-BURMAN设计 BOX-BEHNKEN设计 培养基优化

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嗜热四膜虫胱硫醚γ-裂解酶Cgl1的表达、定位及功能分析

10

作者 韩挺 许静 王伟 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期286-295,共10页

含硫氨基酸在不同的生物体中具有重要调节功能,转硫途径相关酶促进半胱氨酸的生成和硫化氢产生。本研究从嗜热四膜虫中鉴定一种胱硫醚γ-裂解酶(cystathionineγ-lyase 1,CGL1,TTHERM_00052400)基因。CGL1在营养生长期高水平表达,而在... 含硫氨基酸在不同的生物体中具有重要调节功能,转硫途径相关酶促进半胱氨酸的生成和硫化氢产生。本研究从嗜热四膜虫中鉴定一种胱硫醚γ-裂解酶(cystathionineγ-lyase 1,CGL1,TTHERM_00052400)基因。CGL1在营养生长期高水平表达,而在饥饿阶段和有性生殖期,维持在较低的表达水平。通过密码子优化,人工合成CGL1基因,构建重组表达质粒pGEX-CGL1,转化大肠杆菌BL21(DE3)。E.coli/pGEX-CGL1表达重组蛋白质GST-Cgl1,并通过亲和层析获得纯化。GST-Cgl1裂解胱硫醚产生半胱氨酸,也具有裂解半胱氨酸和同型半胱氨酸产生H_2S的活性。进一步构建重组质粒pNEO4-3HA-CGL1和pSMC1hpNEO-CGL1,转化四膜虫细胞,获得带有HA标签和干扰CGL1的突变体细胞株。免疫荧光定位表明,HA-Cgl1生长期定位在亲本大核,饥饿期定位在细胞质,有性生殖前期定位在亲本大核,而在后期定位在胞质中。CGL1干扰的突变体细胞株在有性生殖过程中不能形成合子核,发育中的小核异常降解,产生仅有大核的异常单细胞。结果表明,嗜热四膜虫含有进化中保守的胱硫醚γ-裂解酶Cgl1。Cgl1具有产生和裂解半胱氨酸的活性。Cgl1定位在细胞质和细胞核中,参与了有性生殖过程细胞核的发育。 展开更多

关键词 嗜热四膜虫 胱硫醚γ-裂解酶 活性分析 细胞定位

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硫化氢合成酶CBS和CSE对乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响

11

作者 赵蒙蒙 王雅璐 +7 位作者 许宇翔 杨凯歌 曹玉文 周文虎 费晶 王雯 罗成华 胡建明 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第1期34-43,共10页

目的:探讨胱硫醚-β-合酶(CBS)和胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)的表达及其对乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响,并阐明其作用机制。方法:选择15例乳腺癌患者的乳腺癌组织和癌旁正常组织,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法检测乳... 目的:探讨胱硫醚-β-合酶(CBS)和胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)的表达及其对乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响,并阐明其作用机制。方法:选择15例乳腺癌患者的乳腺癌组织和癌旁正常组织,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法检测乳腺癌组织和癌旁正常组织以及MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞中CBS和CSE的mRNA及蛋白表达水平。将MCF-7细胞分为siNC组(转染siNC)和siCBS组(转染siCBS),MDA-MB-231细胞分为ovNC组(转染CSE过表达空载质粒)和ovCSE组(转染CSE过表达质粒)。CCK-8法检测各组乳腺癌细胞的增殖活性,Transwell小室实验检测各组细胞的迁移和侵袭细胞数,Western blotting法检测各组乳腺癌细胞中E钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达水平。结果:与癌旁正常组织比较,乳腺癌组织中CBS和CSE mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01)。与MDA-MB-231细胞比较,MCF-7细胞中CBS mRNA表达水平升高(P<0.05);与MCF-7细胞比较,MDA-MB-231细胞中CSE蛋白表达水平降低(P<0.05)。与siNC组比较,siCBS组MCF-7细胞增殖活性、迁移和侵袭细胞数、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平明显降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与ovNC组比较,ovCSE组MDA-MB-231细胞增殖活性、迁移和侵袭细胞数、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平明显升高(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:CBS和CSE在乳腺癌组织中表达上调,高水平的CBS和CSE促进乳腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)。 展开更多

关键词 胱硫醚-β-合酶 胱硫醚-γ-裂解酶 硫化氢 乳腺肿瘤 细胞增殖 细胞迁移

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双酶偶联法测定发酵液中L-高丝氨酸的含量 被引量：2

12

作者 赵金花 魏亮 +2 位作者 徐宁 马振平 刘君 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期239-245,共7页

L-高丝氨酸是一种重要的非蛋白质氨基酸,在食品、饲料、医药和化工等领域具有非常广泛的应用。近年来通过环境友好的微生物发酵法生产L-高丝氨酸受到广泛关注。在工业菌种迭代选育过程中存在大量的L-高丝氨酸发酵样品分析检测工作,但目... L-高丝氨酸是一种重要的非蛋白质氨基酸,在食品、饲料、医药和化工等领域具有非常广泛的应用。近年来通过环境友好的微生物发酵法生产L-高丝氨酸受到广泛关注。在工业菌种迭代选育过程中存在大量的L-高丝氨酸发酵样品分析检测工作,但目前关于L-高丝氨酸检测方法的报道仍然较少。该研究将胱硫醚γ-裂解酶和乳酸脱氢酶偶联催化,建立了一种简单快速的L-高丝氨酸检测方法。通过对检测体系中各组分进行系统优化,确定了反应体系中最佳试剂浓度为胱硫醚γ-裂解酶12 U/mL,乳酸脱氢酶50 U/mL,NADH 0.5 mmol/L,磷酸吡哆醛(pyridoxal phosphate,PLP)0.1 mmol/L,检测温度为40℃,pH为7.5。该方法检测灵敏,在L-高丝氨酸质量浓度为0.005~0.1 g/L时具有良好的线性关系,R 2达到0.9982,能够满足发酵液中L-高丝氨酸产量的测定,为L-高丝氨酸高产菌种的选育提供了重要技术支撑。 展开更多

关键词 L-高丝氨酸 发酵 胱硫醚γ-裂解酶 乳酸脱氢酶 NADH 高通量检测方法

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CYS3基因的敲除及其对Saccharomy cescerevisiae3-甲硫基丙醇合成代谢的影响 被引量：2

13

作者 刘丽 张婵 +2 位作者 梁婧如 王成涛 赵吉兴 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第5期139-143,共5页

研究胱硫醚γ-裂解酶基因CYS3敲除对S.cerevisiae 3-甲硫基丙醇合成代谢的影响。将编码胱硫醚-γ-裂解酶的CYS3基因和抗性标记基因Zeocin克隆,构建敲除组件CYS3Δ:Zeocin,醋酸锂法将其转化导入S.cerevisiae S288C表达,构建CYS3基因敲除... 研究胱硫醚γ-裂解酶基因CYS3敲除对S.cerevisiae 3-甲硫基丙醇合成代谢的影响。将编码胱硫醚-γ-裂解酶的CYS3基因和抗性标记基因Zeocin克隆,构建敲除组件CYS3Δ:Zeocin,醋酸锂法将其转化导入S.cerevisiae S288C表达,构建CYS3基因敲除的工程菌。结果表明:摇瓶发酵120 h时,工程菌S.cerevisiae C3和S.cerevisiae S288C的3-甲硫基丙醇生成量分别为0.60 g/L和0.94 g/L,S.cerevisiae C3较野生型S288C的3-甲硫基丙醇生成量降低36.2%。说明CYS3基因敲除对S.cerevisiae的3-甲硫基丙醇有较大影响,并呈现负调节作用。 展开更多

关键词 酿酒酵母 胱硫醚-γ-裂解酶 基因敲除 3-甲硫基丙醇合成 负调节

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大鼠视神经挫伤致视网膜硫化氢合成酶表达变化 被引量：1

14

作者 曾铭伟 王涛 +3 位作者 费成平 邹彩霞 刘夷嫦 谷振勇 《法医学杂志》 CAS CSCD 2018年第6期635-639,共5页

目的探讨大鼠视神经挫伤后视网膜硫化氢合成酶胱硫醚γ-裂解酶(cystathionineγ-lyase,CSE)、胱硫醚β-合成酶(cystathionine β-synthase,CBS)和3-巯基丙酮酸硫基转移酶(3-mercaptopyruvate sulfur-transferase,3-MST)的表达变化。方... 目的探讨大鼠视神经挫伤后视网膜硫化氢合成酶胱硫醚γ-裂解酶(cystathionineγ-lyase,CSE)、胱硫醚β-合成酶(cystathionine β-synthase,CBS)和3-巯基丙酮酸硫基转移酶(3-mercaptopyruvate sulfur-transferase,3-MST)的表达变化。方法建立大鼠视神经挫伤模型。将大鼠分为正常对照组、视神经挫伤组和假手术组。观察大鼠视网膜的组织病理学变化,检测视网膜神经节细胞数量和视网膜内侧部分厚度。用实时荧光定量PCR技术检测CBS、CSE和3-MST的mRNA表达变化。结果正常对照组大鼠视网膜组织结构正常,假手术组仅有轻微变化。与假手术组比较,视神经挫伤后各组大鼠视网膜出现明显损伤,视网膜神经节细胞数量呈时间依赖性减少且视网膜内侧部分厚度呈进行性变薄。正常对照组大鼠视网膜存在CSE、CBS和3-MST mRNA的基础表达。与正常对照组比较,假手术组CSE、CBS和3-MST的mRNA表达无明显变化。与假手术组比较,CBS mRNA表达在视神经挫伤后3 d、7 d和14 d呈时间依赖性上调;CSEmRNA表达在伤后7 d达到峰值,14 d时有所下降;3-MST mRNA表达在视神经挫伤后3 d和7 d有上调的趋势,14 d时有明显上调。结论大鼠视神经挫伤后视网膜硫化氢合成酶CBS、CSE和3-MST表达上调,这可能引起视网膜局部内源性硫化氢生成增多并产生代偿性保护效应。 展开更多

关键词 法医病理学 视神经损伤 视网膜 硫化氢合成酶 胱硫醚γ-裂解酶 胱硫醚Β-合成酶 3-巯基丙酮酸硫基转移酶 大鼠

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运动干预下CSE/H_(2)S调控TLR4/NF-κB信号通路对酒精性肝损伤的改善作用 被引量：2

15

作者 陈锐 邵长凤 +2 位作者 屈红林 陈伊琳 陈嘉勤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期343-355,共13页

胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionineγ-lyase,CSE)是合成内源性H_(2)S的核心酶之一。CSE/H_(2)S体系可介导多种信号转导途径减轻机体炎性损伤。而有氧运动已被证实对机体免疫功能具促进作用,但是否通过CSE/H_(2)S体系介导炎性通路发挥效应... 胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionineγ-lyase,CSE)是合成内源性H_(2)S的核心酶之一。CSE/H_(2)S体系可介导多种信号转导途径减轻机体炎性损伤。而有氧运动已被证实对机体免疫功能具促进作用,但是否通过CSE/H_(2)S体系介导炎性通路发挥效应,其机制有待深入研究。本研究旨在探讨有氧运动通过CSE/H_(2)S体系抑制TLR4/NF-κB信号通路对酒精性肝损伤的改善作用。选取3周龄健康雄性昆明(KM)种小鼠50只,随机分成酒精性脂肪肝病组(AFLD)[模型组(M)、有氧运动组(E)、有氧运动+NaHS组(EN)、有氧运动+PAG组(EP)]、空白组(K),每组10只。干预7周,解剖学观察发现,M组小鼠脂肪系数、脏器系数均高于K组(P<0.01)。ELISA酶联免疫结果显示,相比K组,M组谷草转氨酶、谷丙转氨酶水平增高,CSE活性下降,丙二醛含量上升,蛋白质羰基化程度上升及谷胱甘肽含量下降(P<0.01,P<0.05)。去蛋白质法检测发现,外周血H_(2)S含量升高(P<0.01)。HE染色显示,M组肝组织结构紊乱,呈现大量脂滴空泡样变,且胞核畸形位变。给予有氧运动干预及腹腔注射NaHS,可显著减轻肝质变及肝功能症状,提升血清H_(2)S含量和CSE活性(P<0.01)。而腹腔注射PAG可加剧酒精性肝损伤。免疫组织化学染色显示,相比M组,E、EN组TLR4、NF-κB、IL-1β阳性表达面积下降(P<0.01)。实时荧光定量PCR显示,相比M组,E组、EN组CSE、TLR4、NF-κB、IL-1βmRNA表达显著下降(P<0.01),EP组无显著差异(P>0.05)。Illumina高通量测序筛选肝组织炎症相关因子及关联分析显示,差异表达因子主要富集在NF-κB、TGF-β、TNF、TOLL样受体等信号通路,涉及肝组织细胞信号转导、凋亡抑制和免疫反应等,有氧运动及NaHS可降低炎症和免疫相关信号通路的富集。以上研究结果表明,有氧运动可促进小鼠肝组织中CSE/H_(2)S气体信号体系的表达,从而抑制TLR4/NF-κB通路促炎过程,拮抗小鼠酒精性肝损伤,且有氧运动结合外源性H_(2)S供体对TLR4/NF-κB的干预效果更佳。 展开更多

关键词 有氧运动 酒精性肝损伤 TLR4/NF-κB 胱硫醚-γ-裂解酶 硫化氢 高通量测序

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硫化氢对离体大鼠心脏缺血/再灌注损伤的影响及机制初探 被引量：24

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作者 王晓燕 曾翔俊 +7 位作者 郑少鹏 马立权 邱笑违 芦玲巧 王红霞 张立克 唐朝枢 郝刚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1447-1451,共5页

目的观察内源性CSE/H2S通路的改变以及给予H2S供体对缺血/再灌注心脏的影响,探讨该通路与心脏缺血/再灌注损伤的关系及作用机制。方法采用Langendorff离体灌流装置、通过停灌30min/复灌30min方式造成Wistar大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型... 目的观察内源性CSE/H2S通路的改变以及给予H2S供体对缺血/再灌注心脏的影响,探讨该通路与心脏缺血/再灌注损伤的关系及作用机制。方法采用Langendorff离体灌流装置、通过停灌30min/复灌30min方式造成Wistar大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型;采用外源性NaHS(40μmol.L-1)分别在停灌30min前(SIR)与停灌30min后处理(IRS)对缺血/再灌注心脏的影响。记录心脏收缩期左心室内压上升的最大变化速率(+dp/dtmax)、舒张期左心室内压下降的最大变化速率(-dp/dtmax)及左室内压差(LVP=左室收缩压-左室舒张压)。采用比色法检测灌流液中乳酸脱氢酶(LDH)、心肌MDA及SOD;采用比色法检测心肌胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)活性;采用RT-PCR方法测定心肌组织CSEmRNA表达。结果与缺血/再灌注组(I/R)30min相比,SIR组及IRS组±dp/dtmax、LVP均增高,LDH降低;I/R组MDA水平高于对照组(CON)、SIR组及IRS组(P<0.05,P<0.01);IR组SOD活性低于SIR组及IRS组(P<0.05),但与CON组差别无显著性;I/R组大鼠心肌CSE活性低于CON组(P<0.05);而大鼠心肌CSEmRNA的表达与CON组差异无显著性。结论在缺血前后给予外源性NaHS均可改善因再灌注损伤引起的心肌收缩及舒张功能障碍;其作用机制可能是通过提高心肌SOD活性,增加氧自由基清除而拮抗缺血/再灌注引起的心功能及细胞膜损伤;心肌缺血/再灌注时内源性CSE活性抑制可能与心功能障碍及细胞损伤有关。 展开更多

关键词 硫化氢 缺血/再灌注损伤 大鼠 胱硫醚-γ-裂解酶

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内源性硫化氢参与缺血后处理减轻离体大鼠心脏缺血/再灌注损伤 被引量：30

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作者 徐钢 季永 +1 位作者 汪莉 曾因明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期910-914,共5页

目的探讨内源性硫化氢是否参与缺血后处理减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤。方法Sprague Dawley(SD)大鼠离体心脏Langendorff灌流,平衡20min,全心缺血30min,复氧灌注60min,在复灌即刻给与短暂停灌15s/复灌15 s循环4次造成心肌缺血后处理模... 目的探讨内源性硫化氢是否参与缺血后处理减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤。方法Sprague Dawley(SD)大鼠离体心脏Langendorff灌流,平衡20min,全心缺血30min,复氧灌注60min,在复灌即刻给与短暂停灌15s/复灌15 s循环4次造成心肌缺血后处理模型。预先给予胱硫醚-γ-裂解酶(cystanthionine-γ-lysase,CSE)抑制剂炔丙基甘氨酸(L-propargylglycine,PAG),以及给予PAG后加用外源性硫化氢供体NaHS后处理,观察它们对缺血后处理的影响。记录心率(HR)、左室发展压(LVDP)、冠脉流出量(CF);检测灌流液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、心肌组织CSE活性、硫化氢的含量以及心肌梗死面积。结果缺血/再灌注组LVDP下降、冠脉灌流液中LDH活性明显增加、心肌梗死面积增加(vsControl组,P<0.05)。缺血后处理组LVDP升高、冠脉灌流液中LDH活性下降、心肌梗死面积缩小(vsIR组,P<0.05)。PAG加缺血后处理组心肌CSE活性及H2S生成下降、并且逆转了缺血后处理的作用,而外源性硫化氢供体NaHS后处理组H2S生成回升、LVDP升高、心肌梗死面积缩小(vsIR组,P<0.05)。结论内源性硫化氢参与大鼠心肌缺血后处理减轻缺血/再灌注损伤。 展开更多

关键词 硫化氢 缺血/再灌注损伤 缺血后处理 胱硫醚-γ-裂解酶

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硫化氢对大鼠急性心肌缺血损伤后心功能的影响 被引量：8

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作者 刘芳 张建新 +2 位作者 李兰芳 丁艳艳 张新艳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1334-1338,共5页

目的探讨硫化氢(H2S)/胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)体系在大鼠急性心肌缺血中的变化及对心功能的影响。方法♂SD大鼠48只随机分为假手术组、缺血组、缺血+硫氢化钠(NaHS)低、中、高剂量组和缺血+炔丙基甘氨酸(PPG)组,每组8只。通过结扎大鼠左... 目的探讨硫化氢(H2S)/胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)体系在大鼠急性心肌缺血中的变化及对心功能的影响。方法♂SD大鼠48只随机分为假手术组、缺血组、缺血+硫氢化钠(NaHS)低、中、高剂量组和缺血+炔丙基甘氨酸(PPG)组,每组8只。通过结扎大鼠左冠状动脉前降支建立急性心肌缺血模型。缺血组、缺血+NaHS低、中、高剂量组和缺血+PPG组大鼠分别于缺血3h时腹腔注射生理盐水,低、中、高剂量NaHS及PPG,假手术组只在大鼠左冠状动脉前降支下穿线但不结扎,各组大鼠均于术后6h时处死并取材。取材前Powerlab/8s多导生理仪记录各组大鼠心率(HR)、左室发展压(LVDP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室压力变化速率(±dp/dtmax)等心功能指标;检测血浆中H2S含量、心肌组织CSE活性。结果与假手术组比较,缺血组大鼠心功能指标HR、LVDP、±dp/dtmax明显降低,LVEDP明显升高,血浆中H2S含量和心肌组织CSE活性降低(P<0.01)。与缺血组比较,缺血+NaHS中、高剂量组大鼠心功能指标HR、LVDP、±dp/dtmax明显升高,LVEDP明显降低,心功能改善随NaHS剂量升高有增高趋势;缺血+NaHS低、中、高剂量组大鼠血浆中H2S含量和心肌组织CSE活性升高,且随NaHS剂量升高而增高;缺血+PPG组大鼠心功能指标HR、LVDP、±dp/dtmax明显降低,LVEDP明显升高,血浆中H2S含量和心肌组织CSE活性降低(P<0.05或P<0.01)。结论大鼠急性心肌缺血时H2S/CSE体系可能参与急性心肌缺血的病理生理过程,给予外源性H2S可明显减轻急性缺血所致的心肌损伤,改善心功能,起到心肌保护作用。 展开更多

关键词 硫化氢 气体信号分子 胱硫醚-γ-裂解酶 急性心肌缺血 心功能 大鼠

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硫化氢的治疗性应用研究进展 被引量：18

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作者 蔡文杰 琚立华 朱依纯 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期854-856,共3页

硫化氢是继一氧化氮和一氧化碳后的第3个气体信号分子,具有广泛的生物学效应,在多种疾病状态中显示了极大的治疗性应用前景。该文结合H2S研究的最新进展围绕其治疗性应用作一综述。

关键词 硫化氢 治疗 心血管系统 代谢 胱硫醚-γ-裂解酶 气体递质

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内源性气体信号分子H_2S研究进展 被引量：10

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作者 周辉 高洪 +2 位作者 严玉霖 周铭涛 肖鹏 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第6期94-97,共4页

H2S是继NO和CO之后发现的第3种内源性气体信号分子。在机体内主要由胱硫醚-β-合酶(CBS)和胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)催化产生,广泛分布于机体各个部位。H2S在体内参与舒张血管、抑制平滑肌增殖等各种生理过程。并且在高血压、内毒素性休克... H2S是继NO和CO之后发现的第3种内源性气体信号分子。在机体内主要由胱硫醚-β-合酶(CBS)和胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)催化产生,广泛分布于机体各个部位。H2S在体内参与舒张血管、抑制平滑肌增殖等各种生理过程。并且在高血压、内毒素性休克、手术创伤等各种疾病病理过程中发挥着重要的作用。论文就H2S的生成、代谢、生理作用及其与疾病的关系等方面做了综述。 展开更多

关键词 硫化氢 胱硫醚-β-合酶 胱硫醚-γ-裂解酶 肺动脉高压

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