紫花苜蓿γ-生育酚甲基转移酶(γ-TMT)基因的克隆与逆境下的表达分析 被引量：8

1

作者 贾会丽 王学敏 +4 位作者 高洪文 董洁 王运琦 刘建宁 石永红 《草业学报》 CSCD 北大核心 2012年第6期198-206,共9页

紫花苜蓿是目前全国乃至世界上种植最多的牧草,在畜牧业生产中发挥着重要的作用。γ-生育酚甲基转移酶(γ-TMT)是维生素E合成途径中一种重要的合成酶,催化γ-生育酚向α-生育酚的转化,改变维生素E组成,利于动物和人体的吸收。本实验通过... 紫花苜蓿是目前全国乃至世界上种植最多的牧草,在畜牧业生产中发挥着重要的作用。γ-生育酚甲基转移酶(γ-TMT)是维生素E合成途径中一种重要的合成酶,催化γ-生育酚向α-生育酚的转化,改变维生素E组成,利于动物和人体的吸收。本实验通过RACE-PCR技术,得到紫花苜蓿γ-TMT基因的全长cDNA序列,命名为MsT-MT。测序和生物信息学分析表明,此序列全长1 306bp,包含1个长为939bp的完整开放阅读框(ORF),编码312个氨基酸。MsTMT属于甲基转移酶家族(AdoMet-MTases),有1个腺苷脱氨基酶信号(SLSTDDP),包含有2个保守的S-腺苷甲硫氨酸结合结构域(XXDXGCGIG,VXXPGGXXIX)。Real-time PCR检测结果表明MsTMT基因在紫花苜蓿各组织中均有表达,叶片中表达量最高。受NaCl、PEG以及黑暗诱导后,该基因表达上调;低温胁迫后该基因表达下降;外源ABA不影响该基因的表达。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 γ-生育酚甲基转移酶 维生素E 抗逆性

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花生γ-生育酚甲基转移酶基因(γ-TMT)的克隆及序列分析 被引量：5

2

作者 李拴柱 万勇善 刘风珍 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1856-1863,共8页

γ-生育酚甲基转移酶（γ-TMT）催化γ-生育酚转变为生物活性最高的α-生育酚,是决定植物中维生素E成分和活性的关键酶。本研究采用电子克隆与PCR相结合的方法获得了花生6个栽培品种（A.hypogaeaL.）和花生区组4个二倍体野生种中γ-TMT... γ-生育酚甲基转移酶（γ-TMT）催化γ-生育酚转变为生物活性最高的α-生育酚,是决定植物中维生素E成分和活性的关键酶。本研究采用电子克隆与PCR相结合的方法获得了花生6个栽培品种（A.hypogaeaL.）和花生区组4个二倍体野生种中γ-TMT的全长DNA序列,定名为AhgTMT;从栽培品种丰花2号中获得γ-TMT的cDNA序列,定名为AhrTMT。同一栽培品种的AhgTMT与AhrTMT的序列完全对应,说明该基因无内含子。AhrTMT编码区长1059bp,编码352个氨基酸残基的AhTMT蛋白。AhTMT分子量为39.09kD,等电点6.72,总平均亲水性–0.12;预测的二级结构中α-螺旋占55.40%,β-折叠占10.51%,无规则卷曲占34.09%;被定位于叶绿体,含有甲基转移酶保守的SAM结构域。AhTMT与已报道植物γ-TMT氨基酸序列的相似性为61.75%~72.80%。栽培品种的AhgTMT与A.ipaensis（BB）、A.batizocoi（BB）、A.duranensis（AA）、A.kuhlmannii（AA）4个野生种的核苷酸序列同源性分别是100%、99.91%、99.74%和95.63%。 展开更多

关键词 花生 维生素E γ-生育酚甲基转移酶 基因克隆 序列分析

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油棕等植物γ-生育酚甲基转移酶的生物信息学分析 被引量：4

3

作者 石鹏 曹红星 +2 位作者 李东霞 王永 雷新涛 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2015年第2期308-315,共8页

油棕果实中含有丰富的维生素E,而提高其中高活性的维生素E组分是改善棕油品质的关键。油棕γ-生育酚甲基转移酶(Gen Bank登录号为AEU17779)能将低活性的γ-生育酚三烯催化生成高活性的α-生育酚和α-生育酚三烯,是控制油棕维生素E组分... 油棕果实中含有丰富的维生素E,而提高其中高活性的维生素E组分是改善棕油品质的关键。油棕γ-生育酚甲基转移酶(Gen Bank登录号为AEU17779)能将低活性的γ-生育酚三烯催化生成高活性的α-生育酚和α-生育酚三烯,是控制油棕维生素E组分和活性的关键酶,其功能在油棕等许多植物中极其保守。本研究利用生物信息学相关软件对以油棕VTE4基因为主要分析对象的一些植物VTE4基因的核酸和相应的氨基酸序列的组成成分、疏水性/亲水性、跨膜结构域以及功能结构域等进行分析。结果表明:VTE4属于不具有信号肽的亲水性蛋白,可能作为转运蛋白在叶绿体中发挥作用,α-螺旋和无规则卷曲大量散布于整个蛋白质二级结构中,具有S-腺苷甲硫氨酸结合位点和PLN02244保守结构域。这一结果可为油棕等植物VTE4的功能和分子机制研究提供更多详细的参考。 展开更多

关键词 油棕 γ-生育酚甲基转移酶 生物信息学 保守结构域

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α-及γ-生育酚对玉米油回色的影响 被引量：5

4

作者 张余权 徐学兵 +2 位作者 姜元荣 金青哲 王兴国 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第1期48-51,59,共5页

为了研究不同生育酚异构体对油脂回色的影响,分别将α-生育酚、γ-生育酚及α-和γ-生育酚添加到中链脂肪酸甘油酯(MCT)和玉米油甘油三酯中,通过105℃烘箱加热10 h来考察回色情况。结果表明,在MCT和玉米油三酰甘油中,虽然α-生育酚损失... 为了研究不同生育酚异构体对油脂回色的影响,分别将α-生育酚、γ-生育酚及α-和γ-生育酚添加到中链脂肪酸甘油酯(MCT)和玉米油甘油三酯中,通过105℃烘箱加热10 h来考察回色情况。结果表明,在MCT和玉米油三酰甘油中,虽然α-生育酚损失量远大于γ-生育酚,但微小的γ-生育酚的变化对油脂回色的影响却更显著。加热之后,玉米油甘油三酯中生育酚的损失量大于MCT中的损失量。尽管α-生育酚单独存在的情况下对玉米油的回色几乎没有影响,但当α-及γ-生育酚共同存在的情况下,α-生育酚对γ-生育酚引起的玉米油的回色起到抑制作用。 展开更多

关键词 玉米油 中链脂肪酸甘油酯 回色 Α-生育酚 γ-生育酚

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日本百脉根γ-生育酚甲基转移酶基因的电子克隆及进化分析 被引量：4

5

作者 孟宪萍 李晓晓 +2 位作者 李雅轩 蔡民华 胡英考 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2006年第24期6457-6459,共3页

根据物种间同源基因相对保守的特点,利用生物信息学方法,以拟南芥-γ生育酚甲基转移酶cDNA序列为信息探针,在GenBank的HTGs数据库中找到与之高度同源的日本百脉根基因组DNA序列——LjT44D21克隆。通过GENSCAN分析及序列拼接得到日本百脉... 根据物种间同源基因相对保守的特点,利用生物信息学方法,以拟南芥-γ生育酚甲基转移酶cDNA序列为信息探针,在GenBank的HTGs数据库中找到与之高度同源的日本百脉根基因组DNA序列——LjT44D21克隆。通过GENSCAN分析及序列拼接得到日本百脉根"γTMT基因的cDNA序列,GenBank的登陆号为DQ013360。用该序列对GenBank中的est-others进行相似性搜索,获得了44条日本百脉根的EST序列,经拼接后发现与基因组预测的基因序列一致,表明该基因是真实存在和表达的。该cDNA序列长为1 077 bp,具有完整的开放阅读框架(1～1 077 bp)。推测编码蛋白为358个氨基酸,该蛋白序列与大豆、水稻、小麦、拟南芥、油菜、苜蓿和衣藻等物种的-γTMT蛋白质序列进行了同源性比较分析,具有很高的同源性。 展开更多

关键词 日本百脉根 γ-生育酚甲基转移酶 电子克隆 EST

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大豆γ-生育酚甲基转移酶基因的克隆与表达分析 被引量：3

6

作者 胡英考 孟宪萍 +1 位作者 李雅轩 蔡民华 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期198-204,共7页

采用电子克隆与实验克隆相结合的方法获得了大豆γ-生育酚甲基转移酶基因的cDNA序列,GenBank登录号为AY960126。序列分析结果表明,该cDNA序列含有1个编码350个氨基酸的完整的开放读码框,5′非翻译区具有2个同框终止密码子,3′端具有2个... 采用电子克隆与实验克隆相结合的方法获得了大豆γ-生育酚甲基转移酶基因的cDNA序列,GenBank登录号为AY960126。序列分析结果表明,该cDNA序列含有1个编码350个氨基酸的完整的开放读码框,5′非翻译区具有2个同框终止密码子,3′端具有2个加尾信号和polyA尾巴。启动子区除含有通用核心元件外,还含有许多与光反应有关的作用元件。编码的蛋白质序列含有1个信号肽和γ-生育酚甲基转移酶的特征基序,该蛋白定位于叶绿体中。氨基酸序列比对和系统发育分析结果显示,不同物种之间γ-生育酚甲基转移酶氨基酸序列同源性较高。电子表达分析和RT-PCR组织表达分析结果表明,该基因的表达量与组织中叶绿体含量具有很高的关联,但强光逆境对该基因的表达无影响。 展开更多

关键词 大豆 γ-生育酚甲基转移酶 基因克隆 电子表达分析

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棉花γ-生育酚甲基转移酶基因全长cDNA的克隆与序列分析 被引量：6

7

作者 邹礼平 高和平 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第3期490-493,共4页

γ-生育酚甲基转移酶（γ-TMT）是植物维生素E生物合成途径中的关键酶。通过RACE—PCR得到了棉花γ-TMT基因的cDNA序列，全长1384bp，包含一个长为1035bp的完整开放读码框，推导的氨基酸序列与番茄、大豆、拟南芥、向日葵、玉米等植物的... γ-生育酚甲基转移酶（γ-TMT）是植物维生素E生物合成途径中的关键酶。通过RACE—PCR得到了棉花γ-TMT基因的cDNA序列，全长1384bp，包含一个长为1035bp的完整开放读码框，推导的氨基酸序列与番茄、大豆、拟南芥、向日葵、玉米等植物的γ-生育酚甲基转移酶基因编码的氨基酸序列的同源性较高，序列的一致率为68％～81％；与莱茵衣藻的序列同源性较低，一致率只有54％。系统进化分析结果表明不同来源的γ-TMT基因聚为3类。 展开更多

关键词 棉花 γ-生育酚甲基转移酶 维生素E 生物合成 基因克隆 序列分析

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玉米γ-生育酚甲基转移酶基因的克隆与分析 被引量：1

8

作者 邹礼平 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第33期20316-20317,20321,共3页

[目的]对玉米γ-生育酚甲基转移酶(γ-TMT)基因进行克隆和分析研究。[方法]通过RT-PCR扩增得到玉米γ-TMT基因的cDNA序列,同时对序列进行同源性分析、氨基酸序列比对和系统进化分析。[结果]玉米γ-TMT基因cDNA全长1 310 bp,包含一个长为... [目的]对玉米γ-生育酚甲基转移酶(γ-TMT)基因进行克隆和分析研究。[方法]通过RT-PCR扩增得到玉米γ-TMT基因的cDNA序列,同时对序列进行同源性分析、氨基酸序列比对和系统进化分析。[结果]玉米γ-TMT基因cDNA全长1 310 bp,包含一个长为1 059bp的完整开放读码框,推导的氨基酸序列与小麦和水稻等高等植物的γ-TMT基因同源性较高,序列一致率为69%～87%;与低等生物褐藻的序列同源性较低,一致率只有56%。系统进化分析表明不同来源的γ-TMT基因可聚为3类。[结论]为进一步研究γ-TMT基因的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 玉米 γ-生育酚甲基转移酶 维生素E 生物合成 基因克隆

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番茄γ-生育酚甲基转移酶基因的克隆与分析 被引量：1

9

作者 邹礼平 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第2期437-439,525,共4页

[目的]为进一步研究γ-生育酚甲基转移酶(TMT)基因的功能奠定基础。[方法]以拟南芥γ-TMT cDNA为信息探针,在GenBankdbEST数据库中搜索与其高度同源的番茄EST序列,通过人工序列拼接得到番茄γ-TMT的cDNA序列。据此拼接序列设计1对特异引... [目的]为进一步研究γ-生育酚甲基转移酶(TMT)基因的功能奠定基础。[方法]以拟南芥γ-TMT cDNA为信息探针,在GenBankdbEST数据库中搜索与其高度同源的番茄EST序列,通过人工序列拼接得到番茄γ-TMT的cDNA序列。据此拼接序列设计1对特异引物,以番茄叶片cDNA第1链产物为模板进行RT-PCR,回收目的片段,转化到大肠杆菌DH5α进行TA克隆。最后对获得的阳性克隆进行测序,分析测序结果与其他物种中该基因之间的同源性,进行氨基酸序列比对及系统进化分析。[结果]经RT-PCR扩增出1300bp左右的片段,成功克隆了番茄γ-TMT基因。克隆片段全长1354bp,包含1个1089bp的完整开放读码框,与拼接序列完全一致。番茄γ-TMT基因编码的氨基酸序列与马铃薯、小麦、玉米和拟南芥的γ-TMT基因的同源性分别达89%、75%、75%和70%。系统进化分析表明,番茄与马铃薯的γ-TMT基因有较近的亲缘关系。[结论]该试验中克隆的番茄γ-TMT基因编码的蛋白质分子量为39.8kD,等电点为8.28。 展开更多

关键词 番茄 γ-生育酚甲基转移酶 维生素E 生物合成 基因克隆

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水稻γ-生育酚甲基转移酶基因全长cDNA的克隆与分析

10

作者 邹礼平 蒋卉 《湖北农业科学》 北大核心 2008年第11期1221-1224,共4页

γ-生育酚甲基转移酶(γ-TMT)是植物维生素E生物合成途径中的关键酶。通过RACE-PCR得到了水稻γ-TMT基因的cDNA序列,该基因的cDNA全长1 432 bp,包含一个长为1 089 bp的完整开放读码框,推导的氨基酸序列与小麦、玉米、向日葵、番茄、大... γ-生育酚甲基转移酶(γ-TMT)是植物维生素E生物合成途径中的关键酶。通过RACE-PCR得到了水稻γ-TMT基因的cDNA序列,该基因的cDNA全长1 432 bp,包含一个长为1 089 bp的完整开放读码框,推导的氨基酸序列与小麦、玉米、向日葵、番茄、大豆、拟南芥的γ-生育酚甲基转移酶基因的同源性分别为90%、87%、76%、75%、74%、70%。 展开更多

关键词 水稻 γ-生育酚甲基转移酶 维生素E 生物合成 基因克隆

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转γ-生育酚甲基转移酶基因大豆的获得 被引量：4

11

作者 康小虎 欧阳青 +5 位作者 吴存祥 张玉满 白羊年 曹孜义 蔡文启 韩天富 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期236-238,共3页

以大豆子叶节为外植体 ,利用γ -生育酚甲基转移酶基因 (γ -TMT )的种子特异性表达载体 p7S -TMTL ,通过农杆菌介导法转化大豆 ,获得 2 6株抗卡那霉素再生植株。PCR检测结果表明其中 4株为阳性 ,初步证明γ -TMT已整合到这 4株大豆的... 以大豆子叶节为外植体 ,利用γ -生育酚甲基转移酶基因 (γ -TMT )的种子特异性表达载体 p7S -TMTL ,通过农杆菌介导法转化大豆 ,获得 2 6株抗卡那霉素再生植株。PCR检测结果表明其中 4株为阳性 ,初步证明γ -TMT已整合到这 4株大豆的基因组中。 展开更多

关键词 生育酚 维生素E 大豆 子叶节 外植体 γ-生育酚甲基转移酶基因 表达载体 农杆菌

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忽地笑γ-生育酚甲基转移酶基因LaTMT的克隆与表达分析 被引量：1

12

作者 蔡黎丽 徐晟 +2 位作者 马蕊 汪仁 夏冰 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期1-8,共8页

采用RACE技术从忽地笑〔Lycoris aurea（L’Hér.）Herb.〕叶片中克隆获得γ-生育酚甲基转移酶（γ-TMT）基因,命名为La TMT。序列分析结果显示：该基因c DNA全长1 458 bp,其中开放阅读框（ORF）长1 017 bp,编码338个氨基酸残基。La... 采用RACE技术从忽地笑〔Lycoris aurea（L’Hér.）Herb.〕叶片中克隆获得γ-生育酚甲基转移酶（γ-TMT）基因,命名为La TMT。序列分析结果显示：该基因c DNA全长1 458 bp,其中开放阅读框（ORF）长1 017 bp,编码338个氨基酸残基。La TMT基因编码蛋白质的理论相对分子质量37 560,理论等电点p I 8.70,为亲水性蛋白,无跨膜结构但具有信号肽结构;并具有S-腺苷甲硫氨酸（SAM）甲基转移酶保守结构域,包含3个SAM结合位点;该蛋白的二级结构中包含44.08%的α-螺旋、32.84%的无规则卷曲、12.72%的延伸链和10.36%的β-转角。序列比对和系统进化树分析结果显示：La TMT蛋白属于S-腺苷甲硫氨酸-依赖性γ-生育酚甲基转移酶家族,与其他植物γ-TMT蛋白的一致性为64%-75%;在NJ系统树上,La TMT蛋白与单子叶植物γ-TMT蛋白聚为同一大类,并与油棕（Elaeis guineensis Jacq.）Eg TMT和美洲油棕〔Elaeis oleifera（Kunth）Cortés〕Eo TMT聚为同一类,亲缘关系最近。基因表达分析结果显示：La TMT基因可在大肠杆菌中成功表达,且表达量随异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导时间的延长而增加;在忽地笑的根、叶片、花苞、子房、雄蕊、花瓣和鳞茎中La TMT基因均可表达,其中在叶片中的相对表达量最高,在子房、雄蕊和鳞茎中的相对表达量相对较低,具有明显的组织特异性。研究结果表明：忽地笑La TMT基因在进化过程中具有很高的保守性;该基因主要定位于叶绿体中,并与忽地笑对非生物逆境胁迫的抗性相关。 展开更多

关键词 忽地笑 γ-生育酚甲基转移酶基因 基因克隆 序列分析 表达分析

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γ-生育三烯酚的生物活性及其作用机理研究进展 被引量：3

13

作者 牛玲玲 徐伟丽 +4 位作者 刘蕾 何胜华 米雅清 刘巧红 鲁兆新 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期374-377,383,共5页

维生素E包括生育酚和生育三烯酚两个亚族,每个亚族有四种单体(α,β,γ和δ)。相较于其他维生素E单体,γ-生育三烯酚(γ-T3)具有更好的抗肿瘤、神经保护、降低胆固醇、抗炎以及抑制脂肪产生的作用。本文旨在综述γ-T3的生物活性及其作... 维生素E包括生育酚和生育三烯酚两个亚族,每个亚族有四种单体(α,β,γ和δ)。相较于其他维生素E单体,γ-生育三烯酚(γ-T3)具有更好的抗肿瘤、神经保护、降低胆固醇、抗炎以及抑制脂肪产生的作用。本文旨在综述γ-T3的生物活性及其作用机理,提出目前γ-T3生物活性研究中存在的问题,并对其研究方向进行展望。 展开更多

关键词 γ-生育三烯酚 生理活性 作用机理

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γ-生育三烯酚对体外培养的人结肠癌HT-29细胞生长的抑制作用 被引量：3

14

作者 徐伟丽 张兰威 +4 位作者 杨鑫 单毓娟 Pushparajah Thavarajah 宋微 戴绍春 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第1期47-51,共5页

为了探讨γ-生育三烯酚对体外培养的人结肠癌HT-29细胞的生长抑制作用,采用MTT、分裂指数、集落形成、形态学观察法测定细胞活力,Hoechst 33258荧光染色法和DNA ladder法检测检测细胞凋亡。结果表明:γ-生育三烯酚能够显著抑制HT-29细... 为了探讨γ-生育三烯酚对体外培养的人结肠癌HT-29细胞的生长抑制作用,采用MTT、分裂指数、集落形成、形态学观察法测定细胞活力,Hoechst 33258荧光染色法和DNA ladder法检测检测细胞凋亡。结果表明:γ-生育三烯酚能够显著抑制HT-29细胞的增殖(P<0.05),且存在剂量-效应关系,其48 h半数抑制浓度(IC 50)为35.45μmol/L;形态学观察和DNA ladder结果显示受试物能够诱导HT-29细胞凋亡。γ-生育三烯酚对人结肠癌HT-29细胞具有生长抑制作用,此作用可能与其凋亡诱导效应有关。 展开更多

关键词 γ-生育三烯酚 人结肠癌细胞 抑制作用

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生育酚及甾醇含量对大豆油氧化稳定性及贮藏稳定性的影响 被引量：16

15

作者 方冰 王瑛瑶 +3 位作者 栾霞 王莹辉 朱宁科 杨宁 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第11期69-73,共5页

植物油是生育酚、甾醇等活性物质的最主要的膳食来源之一,但现有的过度精炼的工艺造成了生育酚和甾醇的大量损失,大大降低了食用植物油的营养价值。随着人们对营养健康的日益关注,加上行业内对植物油适度精炼工艺的号召,需要提高精炼后... 植物油是生育酚、甾醇等活性物质的最主要的膳食来源之一,但现有的过度精炼的工艺造成了生育酚和甾醇的大量损失,大大降低了食用植物油的营养价值。随着人们对营养健康的日益关注,加上行业内对植物油适度精炼工艺的号召,需要提高精炼后植物油中生育酚、甾醇的保留量,但植物油中生育酚和甾醇的最低含量的确定缺乏基础研究依据。因此,本文分别利用Rancimat法和Schaal烘箱法比较了不同生育酚及甾醇含量的大豆油的氧化稳定性和贮藏稳定性的差异,结果表明,生育酚和甾醇能够显著提高大豆油贮藏过程中的稳定性,但并不是剂量越高效果越强。当大豆油中生育酚及甾醇分别保留至0.12%、0.35%时,大豆油的氧化稳定性最强;当大豆油中生育酚及甾醇分别保留至0.12%、1.29%时,大豆油的贮藏稳定性最佳。本研究结果为植物油适度精炼工艺中相应产品标准(草案)的制修定提供基础数据,为探究以营养物质含量高低作为植物油新分级指标之一的可行性提供借鉴。 展开更多

关键词 γ-生育酚 δ-生育酚 甾醇 大豆油 稳定性 适度精炼

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快速皂化-气相色谱-串联质谱法同时测定乳粉中胆固醇和维生素E4种异构体 被引量：7

16

作者 应璐 张书芬 +4 位作者 邢家溧 李杨 王小宝 毕晓丽 周鑫达 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1340-1347,共8页

胆固醇和生育酚都是人体所必需的重要营养元素,是乳粉中的重要质量指标。现行国家食品安全标准对胆固醇和维生素E 4种异构体(α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和δ-生育酚)的检测前处理复杂繁琐、耗时长,且不能同时测定,因此,开发简单... 胆固醇和生育酚都是人体所必需的重要营养元素,是乳粉中的重要质量指标。现行国家食品安全标准对胆固醇和维生素E 4种异构体(α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和δ-生育酚)的检测前处理复杂繁琐、耗时长,且不能同时测定,因此,开发简单、快速且可同时测定胆固醇和4种生育酚的检测方法具有重要的现实意义。该研究采用气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)建立了乳粉中胆固醇和4种生育酚的定性定量测定方法。样品经脂肪酶酶解,采用快速的碳酸钾-乙醇皂化法,同时对酶解时间、皂化温度、萃取溶剂的种类、萃取溶剂的体积、萃取时间等前处理进行优化,从而确定出最优的前处理方法。结果表明,样品在37℃下酶解4 h,然后室温(25℃)下振荡10 min皂化,最后使用5 mL正己烷萃取10 min,4000 r/min离心6 min,取上层正己烷过膜,经TG-5MS Sil色谱柱分离,GC-MS/MS多反应监测离子模式扫描分析,同时获得定性和定量结果。实验结果表明,胆固醇在0.5~50.0 mg/L、4种生育酚在0.25~25.0 mg/L范围内具有较好的线性关系,相关系数(r2)大于0.99,加标回收率为76.6%~93.1%,相对标准偏差为0.9%~3.3%,胆固醇定量限为10.0μg/100 g,4种生育酚的定量限均为5.0μg/100 g。随机抽取市面上出售的20种婴幼儿配方奶粉及4种低脂乳粉,对其胆固醇和4种生育酚含量进行了分析测试,结果显示,婴幼儿配方乳粉中胆固醇、4种生育酚的含量高于低脂乳粉,其中婴幼儿乳粉的4种生育酚中α-生育酚和β-生育酚含量较高。该方法简便、快速、灵敏、准确,可满足乳粉中胆固醇和4种生育酚生育酚的检测要求,为乳粉品质的快速检测奠定了理论基础。 展开更多

关键词 气相色谱-串联质谱 胆固醇 Α-生育酚 β-生育酚 γ-生育酚 δ-生育酚 乳粉

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小麦γ-TMT基因的克隆与表达分析 被引量：1

17

作者 刘媛媛 郭启平 +2 位作者 党仁美 张珊 闻珊珊 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期886-895,共10页

γ-生育酚甲基转移酶(γ-TMT)是维生素E合成途径的关键酶之一。该研究采用RT-PCR方法,从小麦品种‘中国春’中克隆得到小麦γ-TMT基因的3个同源拷贝,其CDs(codingsequence)序列相似性为99.12%;其中Ta-γ-TMT-6A和Ta-γ-TMT-6B编码区长度... γ-生育酚甲基转移酶(γ-TMT)是维生素E合成途径的关键酶之一。该研究采用RT-PCR方法,从小麦品种‘中国春’中克隆得到小麦γ-TMT基因的3个同源拷贝,其CDs(codingsequence)序列相似性为99.12%;其中Ta-γ-TMT-6A和Ta-γ-TMT-6B编码区长度为1101bp,编码366个氨基酸,而Ta-γ-TMT-6D因发生无义突变,编码365个氨基酸。生物信息学分析表明,3个蛋白分子量分别为39.58、39.53和39.50kDa,理论等电点分别为6.67、6.41和7.08,都属于亲水性不稳定非分泌型蛋白。系统进化分析表明,小麦Ta-γ-TMT蛋白与糜子Pm-γ-TMT的亲缘关系相对较近。实时定量PCR分析表明,小麦Ta-γ-TMT基因在根、茎、叶、颖壳、种子中均有表达,在叶片中表达量最高;ABA、NaCl、PEG均能诱导Ta-γ-TMT基因的上调表达。该研究结果为进一步探讨小麦γ-TMT基因的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 小麦 γ-生育酚甲基转移酶 基因克隆 表达分析

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大豆球蛋白G1启动子的克隆及植物表达载体构建 被引量：1

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作者 王永芹 陈德富 +1 位作者 王绘砖 陈喜文 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期254-259,共6页

从大豆冀nf37和冀豆15中克隆了大豆球蛋白G1基因的启动子片段。序列分析表明,两种启动子片段均为688bp,与GenBank现有的3种启动子序列(四川大豆(DQ250808)、南农87-c38(AY649096)和Dare(X15121))间的同源性在96.4%～99.6%之间。其中来自... 从大豆冀nf37和冀豆15中克隆了大豆球蛋白G1基因的启动子片段。序列分析表明,两种启动子片段均为688bp,与GenBank现有的3种启动子序列(四川大豆(DQ250808)、南农87-c38(AY649096)和Dare(X15121))间的同源性在96.4%～99.6%之间。其中来自冀nf37的启动子片段除Legumin盒上有一个碱基差异外,其它元件与DQ250808完全相同,据此推测该启动子片段具有种子特异性启动子活性。将其与已有γ-生育酚甲基转移酶基因连接,构建了种子特异性表达载体pBG1TMT,为通过代谢工程手段调控油料作物种子维生素E组成、提高其营养品质奠定了基础。 展开更多

关键词 大豆 球蛋白G1 启动子 γ-生育酚甲基转移酶(γ-TMT) 种子特异性表达载体

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马泡瓜籽油理化特性、组成分析及氧化稳定性 被引量：16

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作者 纪佳璐 吴莹 +2 位作者 徐斐然 鞠兴荣 王立峰 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第21期15-21,共7页

在民间有利用马泡瓜籽制油的传统,为促进马泡瓜这一野生植物资源的开发利用,本实验对马泡瓜籽油的理化特性和营养组分进行了分析,并通过热分析技术对其氧化稳定性及热特性进行测定。结果表明,马泡瓜籽千粒质量6 g,出油率25%,马泡瓜籽油... 在民间有利用马泡瓜籽制油的传统,为促进马泡瓜这一野生植物资源的开发利用,本实验对马泡瓜籽油的理化特性和营养组分进行了分析,并通过热分析技术对其氧化稳定性及热特性进行测定。结果表明,马泡瓜籽千粒质量6 g,出油率25%,马泡瓜籽油的酸值(0.37 mg/g)、过氧化值(0.17 g/100 g)均符合国家标准,不饱和脂肪酸相对含量达86.27%,其中亚油酸为最主要的脂肪酸,相对含量达67.1%,还含有少量γ-亚麻酸;此外马泡瓜籽油富含β-谷甾醇(186.18 mg/100 g)、生育酚等活性成分,γ-生育酚含量高达1614.21μg/g,具有良好的抗氧化性。通过差示扫描量热仪分析确定了马泡瓜籽油的初始氧化温度为221.6℃,在110、120℃和140℃条件下的氧化诱导时间分别为263.91、133.64 min和26.50 min,其氧化稳定性优于菜籽油,通过热重分析测得其烟点在300~350℃之间,质量开始损失时的温度为300℃,热稳定性良好,具有作为烹饪油的潜质。 展开更多

关键词 马泡瓜籽油 亚油酸 γ-生育酚 差示扫描量热分析 氧化稳定性 热特性

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维生素E在饲草及畜产品中的应用研究 被引量：6

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作者 赵亚民 张丽静 傅华 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1167-1172,共6页

维生素E作为一种具有抗氧化作用、安全无毒的食品添加剂,已被广泛用于各种加工产品中。本研究阐述了维生素E的抗氧化机理,从牧草维生素E含量及其影响因素、饲草维生素E对肉奶脂质氧化稳定性品质的提高、动物油脂保存期延长与维生素抗氧... 维生素E作为一种具有抗氧化作用、安全无毒的食品添加剂,已被广泛用于各种加工产品中。本研究阐述了维生素E的抗氧化机理,从牧草维生素E含量及其影响因素、饲草维生素E对肉奶脂质氧化稳定性品质的提高、动物油脂保存期延长与维生素抗氧化性的关系3个方面综述了维生素E抗氧化的有效性,也从中比较了各生育酚抗氧化能力的大小与环境温度和浓度等因素的相关性,以便于人们更好地了解和利用生育酚。 展开更多

关键词 维生素E Α-生育酚 γ-生育酚 抗氧化

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