A型γ-氨基丁酸受体α1亚基Cys^(166)-Leu^(296)片段的配体结合和结构性质

1

作者 邓诣群 朱振宇 +1 位作者 马涧泉 薛红 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期367-372,共6页

研究A型γ 氨基丁酸受体 (γ aminobutyricacidtypeA ,GABAAreceptor)α1亚基Cys166 Leu2 96片段的苯并二氮杂 (benzodiazepine ,BZ)结合位点及其结构特性 ,了解该片段结构与功能的关系 .利用PfuDNA多聚酶依赖的点突变技术将该片段的... 研究A型γ 氨基丁酸受体 (γ aminobutyricacidtypeA ,GABAAreceptor)α1亚基Cys166 Leu2 96片段的苯并二氮杂 (benzodiazepine ,BZ)结合位点及其结构特性 ,了解该片段结构与功能的关系 .利用PfuDNA多聚酶依赖的点突变技术将该片段的每一残基用丙氨酸替代 ,通过E .coli体系过表达 ,纯化得到各种突变蛋白 .运用圆二色性 (circulardichroism ,CD)技术测定突变蛋白的二级结构 ,借助荧光各向异性 (fluorescenceanisotropy ,FA)、荧光共振能量转移 (fluorescenceresonanceenergytrans fer,FRET)技术测定其与BZ荧光配基Bodipy FLRo 1986 (BFR)的结合强弱 .通过与野生型的比较 ,确定其残基是否与结构和或结合相关 .结果显示 ,突变体R191A、G2 12A、S2 13A、R2 14A及V2 79A的结合能力减弱 2～ 3倍 ,除V2 79A显著增加α螺旋外均无二级结构的改变 .E193A、S2 78A、V2 79A和P2 80A的α螺旋显著增多 ,N2 75A和R2 76A的α螺旋则显著减少 .推测Cys166 Leu2 96的Arg191,Gly2 12 ,Ser2 13 和Arg2 14 可能位于BZ的结合袋 ,其第 4个环区 (Glu2 10 Asn2 16)与结合密切相关 .Glu193 、Ser2 78和Pro2 80 参与维持β折叠结构 ,而Asn2 75和Arg2 76参与维持α螺旋结构 .Cys166 Leu2 96的第 9个环区 (Asn2 75 Pro2 80 )对其结? 展开更多

关键词 A型γ-氨基丁酸受体α1亚基 Cys^166-Leu^296片段 配体结合 性质 二级结构 苯并二氮杂Zhuo 镇静药

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迷走神经电刺激对脑外伤昏迷大鼠意识及前额叶皮质γ-氨基丁酸b1受体表达的影响 被引量：11

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作者 廖诚诚 冯珍 +1 位作者 黄菲菲 陈琴 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2017年第9期1037-1042,共6页

目的研究迷走神经电刺激(VNS)对脑外伤(TBI)昏迷大鼠的促醒效果及其机制。方法 168只健康Sprague-Dawley大鼠随机分为空白组、TBI组、拮抗剂组和VNS组,每组42只。空白组不做任何处理,TBI组、VNS组、拮抗剂组撞击法复制脑外伤模型,造模... 目的研究迷走神经电刺激(VNS)对脑外伤(TBI)昏迷大鼠的促醒效果及其机制。方法 168只健康Sprague-Dawley大鼠随机分为空白组、TBI组、拮抗剂组和VNS组,每组42只。空白组不做任何处理,TBI组、VNS组、拮抗剂组撞击法复制脑外伤模型,造模后昏迷至少30 min的大鼠入选。VNS组予VNS,拮抗剂组侧脑室注射Orexin A受体1拮抗剂SB334867后加VNS,TBI组予假VNS。分别于干预后6 h、12 h、24 h观察大鼠意识水平,应用免疫组化、Western blotting检测前额叶皮质γ-氨基丁酸b1受体(GABAb1R)表达水平。结果最终空白组42只、TBI组11只、拮抗剂组13只、VNS组28只大鼠觉醒。Western blotting显示,干预后12 h、24 h,GABAb1R蛋白表达TBI组>拮抗剂组>空白组>VNS组(F>60.412,P<0.001)。免疫组化显示,GABAb1R蛋白表达TBI组>拮抗剂组>VNS组>空白组(H=15.121,P=0.002),但不同时间点无显著性差异(H=3.028,P=0.220)。结论 VNS可促TBI昏迷大鼠觉醒,其促醒机制可能与Orexin A介导大鼠前额叶皮质GABAb1R表达水平下调有关。 展开更多

关键词 脑外伤 昏迷 迷走神经电刺激 促醒 γ-氨基丁酸b1受体 大鼠

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α5亚基γ-氨基丁酸A受体在坐骨神经损伤大鼠认知功能中的作用 被引量：3

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作者 蔡雪纯 杨航 +1 位作者 陈彦兆 朱伟 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1194-1199,共6页

目的探讨α5亚基γ-氨基丁酸A受体(α5-GABA_(A)Rs)在坐骨神经损伤(SNI)导致的慢性神经病理性痛大鼠认知功能中的作用。方法选择成年雄性SD大鼠32只,8~10周龄,体重200~230 g。采用随机数字表法将大鼠分为四组:假手术组(N组)、SNI组(S组)... 目的探讨α5亚基γ-氨基丁酸A受体(α5-GABA_(A)Rs)在坐骨神经损伤(SNI)导致的慢性神经病理性痛大鼠认知功能中的作用。方法选择成年雄性SD大鼠32只,8~10周龄,体重200~230 g。采用随机数字表法将大鼠分为四组:假手术组(N组)、SNI组(S组)、SNI+二甲基亚砜(DMSO)组(P组)、SNI+α5-GABA_(A)Rs反向激动剂组(L组),每组8只。N组仅暴露右侧坐骨神经及其三个终末支,不结扎。S组结扎右侧胫神经和腓总神经并剪断。P组和L组结扎右侧胫神经和腓总神经并剪断,于术后第22天新物体识别实验和术后第23天Y迷宫实验前30 min分别腹腔注射10%DMSO 1 ml和L6557081 mg/kg。于术前1 d和术后第3、7、14、21、22和23天测定四组机械缩足阈值(MWT),术后第22天行新物体识别实验,记录大鼠对新物体和旧物体的探索时间并计算辨别指数,第23天行Y迷宫实验计算自发交替百分比。采用Western blot法检测海马组织α5-GABA_(A)Rs和谷氨酸脱羧酶-67(GAD67)蛋白含量,采用免疫荧光法检测海马组织α5-GABA_(A)Rs与小清蛋白(PV)双阳性细胞数,α5-GABA_(A)Rs与生长抑素(SST)双阳性细胞数。结果与N组比较,S组、P组和L组术后第3、7、14、21、22和23天MWT明显降低(P<0.05),海马组织α5-GABA_(A)Rs蛋白含量明显升高(P<0.05),S组海马组织α5-GABA_(A)Rs与PV双阳性细胞数明显增多(P<0.05),α5-GABA_(A)Rs与SST双阳性细胞数明显增多(P<0.05)。与S组比较,L组对新物体的探索时间明显延长(P<0.05),辩别指数、自发交替百分比和海马组织GAD67蛋白含量明显升高(P<0.05)。结论α5-GABA_(A)Rs反向激动剂L655708可以增加坐骨神经损伤大鼠海马组织GAD67蛋白含量,逆转GABA能系统功能破坏,改善认知功能障碍,进一步显示α5-GABA_(A)Rs参与了慢性神经病理性痛导致的认知功能障碍。 展开更多

关键词 慢性神经病理性痛 坐骨神经损伤 α5亚基γ-氨基丁酸a受体 中间神经元 认知功能障碍 大鼠

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大鼠丘脑前核神经元内γ-氨基丁酸及其受体的表达 被引量：1

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作者 何绘敏 岳晓玲 +3 位作者 马晓凯 唐伟 易传安 王滨 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期309-313,共5页

目的:探讨大鼠丘脑前核内γ-氨基丁酸(GABA)及其GABAA受体(GABAARα1和β2subunits)的表达,从形态学角度为系统研究丘脑前核的功能提供依据。方法:分别采用包埋后胶体金免疫电镜技术和原位杂交检测丘脑前核内GABA及GABAARα1和β2mRNA... 目的:探讨大鼠丘脑前核内γ-氨基丁酸(GABA)及其GABAA受体(GABAARα1和β2subunits)的表达,从形态学角度为系统研究丘脑前核的功能提供依据。方法:分别采用包埋后胶体金免疫电镜技术和原位杂交检测丘脑前核内GABA及GABAARα1和β2mRNA的表达。结果:(1)在丘脑前核,GABAARα1和GABAARβ2阳性神经元分布较密集,细胞形态较一致。空白对照切片为阴性,未见GABAARα1和GABAARβ2mRNA表达阳性神经元。(2)GABA胶体金免疫反应切片上,GABA胶体金颗粒浓重标记GrayⅡ型轴突终末,而树突、神经元、胶质细胞及背景标记极少。GABA能阳性轴突终末与中小型树突形成对称性轴-树突触,也与神经元胞体形成对称性轴-体突触。结论:提示在丘脑前核能够合成GABAARα1和GABAARβ2,且GABA能轴突终末与神经元的树突或胞体形成对称性突触。 展开更多

关键词 丘脑前核 γ-氨基丁酸 GABAa受体α1和β2亚单位 包埋后胶体金免疫电镜 原位杂交 大鼠

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大麻素对大鼠三叉神经节神经元γ-氨基丁酸激活电流的抑制作用 被引量：2

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作者 周莹 刘长金 +3 位作者 李爱 胡新武 陈蕾 刘烈炬 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期561-566,共6页

目的探讨人工合成大麻素WIN55,212-2对大鼠三叉神经节神经元γ-氨基丁酸(GABA)激活电流(IGABA)的调制作用。方法采用全细胞膜片钳技术。结果①实验中大部分受检细胞(91.84%,99/108)对胞外给予GABA(10～1000μmol/L)敏感,可记录到具有浓... 目的探讨人工合成大麻素WIN55,212-2对大鼠三叉神经节神经元γ-氨基丁酸(GABA)激活电流(IGABA)的调制作用。方法采用全细胞膜片钳技术。结果①实验中大部分受检细胞(91.84%,99/108)对胞外给予GABA(10～1000μmol/L)敏感,可记录到具有浓度依赖性的内向电流,该电流可被GABAA受体特异性拮抗剂荷包牡丹碱(Bicuculline)阻断。②预加WIN55,212-2(0.03～10μmol/L)对IGABA产生抑制作用,该抑制作用呈可逆性、浓度依赖性和非电压依赖性。WIN55,212-2使IGABA的量效曲线明显下移,而两者的阈值基本不变;最大反应浓度时IGABA幅值减少了(48.83±4.78)%;两条曲线的半数有效浓度(EC50)值比较接近(36.85μmol/Lvs25.76μmol/L)。③WIN55,212-2对IGABA的抑制作用可被大麻素CB1受体选择性拮抗剂AM281阻断,不能被大麻素CB2受体选择性拮抗剂AM630阻断。细胞外灌流蛋白激酶C(PKC)的抑制剂BIM可部分逆转WIN55,212-2对IGABA的抑制作用。结论大麻素WIN55,212-2作用于CB1受体,部分通过激活PKC途径来减少GABAA受体介导的电流,加强突触前抑制作用,这可能是大麻素的外周镇痛机制之一。 展开更多

关键词 WIN55 212-2 γ-氨基丁酸a受体 大麻素CB1受体 三叉神经节神经元 全细胞膜片钳

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γ-氨基丁酸能去抑制对脊髓细胞外信号调节激酶2的激动作用 被引量：2

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作者 时蕾 刘燕妮 +4 位作者 索占伟 曹静 李帅 许英明 胡晓东 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期294-298,共5页

目的探讨脊髓γ-氨基丁酸(GABA)能去抑制对细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)活性的影响及其与痛行为改变的关系。方法正常小鼠鞘内注射(ith)比扣扣灵碱(荷包牡丹碱,bicuculline)50 ng.g-1(5μl)模拟GABA能去抑制,左后足底sc给予弗氏完全... 目的探讨脊髓γ-氨基丁酸(GABA)能去抑制对细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)活性的影响及其与痛行为改变的关系。方法正常小鼠鞘内注射(ith)比扣扣灵碱(荷包牡丹碱,bicuculline)50 ng.g-1(5μl)模拟GABA能去抑制,左后足底sc给予弗氏完全佐剂制备炎性疼痛模型,小鼠ith给予GABAA受体激动剂地西泮0.5μg.g-1(5μl)或ERK1/2抑制剂PD-98059 0.25μg.g-1(5μl)后,测定ERK1/2活性和小鼠缩足阈值。结果与正常对照组的缩足阈值(1.24±0.07)g相比,正常小鼠ith给予比扣扣灵碱50 ng.g-1的缩足阈值显著降低〔(0.42±0.17)g,P<0.05〕,给予PD-98059 0.25μg.g-1后缩足阈值显著升高〔(1.29±0.37)g,P<0.05〕。与炎性疼痛模型组的缩足阈值(0.28±0.06)g相比,炎症小鼠ith给予地西泮0.5μg.g-1的缩足阈值显著升高〔(0.99±0.12)g,P<0.05〕,且给予PD-98059 0.25μg.g-1后缩足阈值也显著升高〔(0.97±0.17)g,P<0.05〕。Western免疫印迹结果显示,与正常对照组相比,比扣扣灵碱显著提高ERK2的磷酸化水平〔(152±24)%,P<0.05〕。并且弗氏完全佐剂也可提高小鼠脊髓ERK2的磷酸化水平〔(163±42)%,P<0.05〕,ith给予地西泮0.5μg.g-1,则显著降低CFA诱发的小鼠脊髓ERK2的磷酸化水平〔(91±34)%,P<0.05〕,同时地西泮和PD-98059有效缓解炎性疼痛症状。结论 GABA能去抑制对脊髓背角ERK2有激活作用,并与炎性疼痛的形成有关。 展开更多

关键词 受体 γ-氨基丁酸 炎性疼痛 细胞外信号调节激酶1/2 脊髓背角

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M1胆碱受体通过AMPA受体GluA1亚基改善β-淀粉样肽导致的学习记忆功能障碍

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作者 赵兰雪 陈牧文 +4 位作者 钱悦 杨前昊 葛艳慧 陈红专 邱瑜 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2019年第6期447-448,共2页

目的碱型乙酰胆碱受体(M受体)亚型M1受体在脑内的分布量最大,并且在大脑皮质和海马中大量表达,发挥着重要的促进学习和记忆的功能。M1受体是治疗以胆碱神经元丢失、淀粉样斑块沉积等为病理特征的神经退行性疾病阿尔茨海默病(AD)的潜在... 目的碱型乙酰胆碱受体(M受体)亚型M1受体在脑内的分布量最大,并且在大脑皮质和海马中大量表达,发挥着重要的促进学习和记忆的功能。M1受体是治疗以胆碱神经元丢失、淀粉样斑块沉积等为病理特征的神经退行性疾病阿尔茨海默病(AD)的潜在治疗靶标。我们前期研究发现,选择性激活M1受体可促进AMPA受体GluA1亚基向神经元表面和突触后膜运输,并且在激动M1受体促进学习记忆中起着重要作用。本研究进一步探讨AMPA受体GluA1亚基在M1受体改善β-淀粉样肽(Aβ)所致学习记忆障碍中的作用。方法选用野生型和AMPA受体GluA1亚基Ser845位点突变小鼠(S845A小鼠),以3次脑室内注射Aβ纤丝以破坏学习记忆功能,通过Morris水迷宫实验研究给予M1受体选择性激动剂77-LH-28-1对野生小鼠和突变小鼠的学习记忆的改善作用。实验结束后收集海马组织进行Western蛋白印迹法和免疫荧光检测,研究77-LH-28-1对海马组织内GluA1亚基表达及其向突触转运的影响。结果 Morris水迷宫实验表明,S845A小鼠的空间学习记忆能力与野生型小鼠相同,表明S845A小鼠学习记忆功能未受损。给予3次脑室内Aβ纤丝注射使野生型和S845A小鼠的空间记忆能力受损,给予M1受体选择性激动剂77-LH-28-1可明显缩短野生型小鼠寻找平台的潜伏期和游泳路程,但对S845A小鼠无明显作用。Morris水迷宫训练期24 h后进行目标象限探索实验,结果表明,77-LH-28-1可使注射Aβ纤丝的野生型小鼠在目标象限的时间和路程百分百显著提高,与正常野生小鼠无区别,而这些作用在注射Aβ纤丝的S845A小鼠都缺失。并且各组小鼠的游泳速度不存在显著性差异,说明M1受体激动通过GluA1亚基显著改善了Aβ所致的空间学习和记忆障碍。Western蛋白印迹法检测表明,77-LH-28-1提高野生型小鼠海马内GluA1亚基的表达及其Ser845位点的磷酸化。免疫荧光检测表明,77-LH-28-1提高野生型小鼠海马内GluA1亚基与突触后蛋白PSD95的共定位,而这些作用在S845A小鼠中缺失。结论选择性激动M1受体显著改善Aβ所致的学习记忆障碍,该作用与其调控对AMPA受体GluA1亚基的调控有关。激动M1受体可使GluA1亚基Ser845位点的磷酸化程度增加,并由此增加GluA1的表达和向突触后的转运。Ser845位点突变可阻断M1受体对GluA1亚基的调控作用从而不能改善Aβ所致的学习记忆障碍。本研究揭示了M1受体改善学习记忆的分子机制。 展开更多

关键词 M1胆碱受体 AMPa受体 GluA1亚基 Β-淀粉样肽 阿尔茨海默病 学习记忆

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荧光标记法研究鱼类GABA受体与Ro7-1986/1和Fipronil的相互作用 被引量：1

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作者 杨姗 张博 +1 位作者 张元 任天瑞 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2015年第3期456-462,共7页

以苯二氮卓类化合物Ro7-1986/1和氟虫腈(Fipronil)分别与异硫氰酸荧光素(FITC)反应合成了2种γ-氨基丁酸(GABA)受体的配体荧光复合物,即FITC-Ro7-1986/1(简称FITC-Ro7)和FITC-Fipronil;利用傅里叶变换红外光谱(FTIR)和核磁共振氢谱(1H N... 以苯二氮卓类化合物Ro7-1986/1和氟虫腈(Fipronil)分别与异硫氰酸荧光素(FITC)反应合成了2种γ-氨基丁酸(GABA)受体的配体荧光复合物,即FITC-Ro7-1986/1(简称FITC-Ro7)和FITC-Fipronil;利用傅里叶变换红外光谱(FTIR)和核磁共振氢谱(1H NMR)等手段对其结构进行了表征.以2种荧光配体为探针,采用荧光标记法研究了Ro7-1986/1和Fipronil与鳙鱼(Hypophthalmichthys nobilis)脑内GABA受体的相互作用,得到了亲和常数Kd和最大结合量[RT].同时考察了GABA对Ro7-1986/1与受体相互作用的影响.研究结果表明,Ro7-1986/1和Fipronil与受体的亲和常数Kd分别为(67±5)nmol/L和(346±6)nmol/L;最大结合量[RT]分别为(13.8±1.8)pmol/mg protein和(40.6±3.5)pmol/mg protein;GABA促进了Ro7-1986/1与受体的结合,进一步的研究结果表明,鱼类与哺乳动物脑中GABA受体结构相似;相对于哺乳动物,苯吡唑类杀虫剂Fipronil对鱼类GABA的亲和力较高. 展开更多

关键词 Ro7-1986/1 氟虫腈 荧光标记法 γ-氨基丁酸(GABA)受体

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突触外GABA_(A)受体在产后抑郁症和经前综合征中的作用研究进展

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作者 刘晓丽 王洪波 +1 位作者 俞纲 苏瑞斌 《中国药理学与毒理学杂志》 北大核心 2025年第6期462-468,共7页

突触外γ-氨基丁酸A型(GABA_(A))受体是一类分布于胞体、树突等非突触结构的抑制性神经递质受体,其五元异聚体结构中通常含有δ亚基。在产后抑郁症和经前综合征模型动物上均可见δ亚基表达发生改变,δ^(-/-)和δ^(-/-)小鼠均表现出产后... 突触外γ-氨基丁酸A型(GABA_(A))受体是一类分布于胞体、树突等非突触结构的抑制性神经递质受体,其五元异聚体结构中通常含有δ亚基。在产后抑郁症和经前综合征模型动物上均可见δ亚基表达发生改变,δ^(-/-)和δ^(-/-)小鼠均表现出产后抑郁症行为表型,表明突触外GABA_(A)受体参与了其发病机制。本文综述突触外GABA_(A)受体与产后抑郁症和经前综合征的相关性以及突触外GABAA受体靶向药物在这2类疾病治疗中的研究进展,强调突触外GABA_(A)受体作为女性情绪障碍治疗靶标的重要价值,为相关药物的研发提供参考。 展开更多

关键词 突触外γ-氨基丁酸A型受体 δ亚基 产后抑郁症 经前综合征

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瑞舒伐他汀对载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化及LOX-1、NF-κBp65表达的影响 被引量：12

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作者 朱中生 王海燕 +1 位作者 王登峰 鲁亚丽 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期946-949,共4页

目的探讨3-羟-3-甲基戊二酰辅酶A(HMG-Co A)还原酶抑制剂瑞舒伐他汀对载脂蛋白E(Apo E)基因缺陷小鼠动脉粥样硬化及主动脉凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)、核因子-κB p65(NF-κB p65)表达的影响。方法 20只6周龄雄性Apo E基... 目的探讨3-羟-3-甲基戊二酰辅酶A(HMG-Co A)还原酶抑制剂瑞舒伐他汀对载脂蛋白E(Apo E)基因缺陷小鼠动脉粥样硬化及主动脉凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)、核因子-κB p65(NF-κB p65)表达的影响。方法 20只6周龄雄性Apo E基因缺陷小鼠随机分为高脂模型组(n=10)、瑞舒伐他汀药物干预组(n=10),高脂饮食喂养13周;10只6周龄C57BL/6J(野生型,W T)雄性小鼠作为正常对照组,正常饮食喂养13周。13周后,摘眼球取血测定血浆总胆固醇(TCH)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)的水平。处死小鼠取主动脉,行HE染色;采用Western blotting和RT-PCR检测定量分析主动脉组织LOX-1、NF-κB p65表达变化。结果与高脂模型组比较,瑞舒伐他汀药物干预组血清中TCH、TG、LDL-C水平明显降低(P<0.05)。HE染色结果显示,与正常对照组相比,高脂模型组主动脉粥样硬化病变程度明显加重,瑞舒伐他汀药物干预组主动脉粥样硬化病变程度减轻。与正常对照组相比,高脂模型组主动脉LOX-1、NF-κB p65蛋白和m RNA的表达均明显增加(P<0.05),瑞舒伐他汀药物干预组LOX-1、NF-κB p65蛋白和m RNA的表达均减少(P<0.05)。结论瑞舒伐他汀可明显降低血脂,减轻Apo E基因缺陷小鼠主动脉组织粥样硬化病变程度,其抗动脉粥样硬化作用可能与下调LOX-1、NF-κB p65的表达有关。 展开更多

关键词 瑞舒伐他汀 小鼠 基因敲除 动脉粥样硬化 凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1 NF-ΚB p65亚基

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异氟醚对老年大鼠认知功能及大脑颞叶GABA受体1和NMDA受体2B表达的影响 被引量：7

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作者 曹高亚 吴倍 +4 位作者 邢珍 焦保良 李福龙 滕金亮 王新生 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期483-487,共5页

目的观察吸入不同浓度异氟醚后老年大鼠空间记忆以及脑右侧颞叶γ-氨基丁酸受体1(GABAR1)和N-甲基-D-天冬氨酸受体2B(NMDAR2B)表达的变化。方法雄性SD老年大鼠90只,9月龄,随机分为对照组(C组,n=10)和实验组(n=80)。C组吸入室温空气,实... 目的观察吸入不同浓度异氟醚后老年大鼠空间记忆以及脑右侧颞叶γ-氨基丁酸受体1(GABAR1)和N-甲基-D-天冬氨酸受体2B(NMDAR2B)表达的变化。方法雄性SD老年大鼠90只,9月龄,随机分为对照组(C组,n=10)和实验组(n=80)。C组吸入室温空气,实验组按照异氟醚浓度和吸入持续时间分为S1组(1.5%-2h)、S2组(2.5%-2h)、S3组(1.5%-4h)和S4组(2.5%-4h)。各组均分为两组分别在麻醉后1、7d进行Morris水迷宫实验,采用RT-PCR技术和免疫荧光技术检测右侧脑颞叶GABAR1和NMDAR2B的mRNA表达和蛋白含量。结果与对照组比较,异氟醚吸入1d后S1、S2、S3、S4组的空间记忆能力伴随着药物浓度升高和吸入持续时间延长出现持续下降,颞叶中GABAR1的mRNA表达和蛋白含量明显升高,NMDAR2B的mRNA表达和蛋白含量明显降低(P<0.01)。异氟醚吸入7d后,S1、S2、S3组大鼠的空间记忆能力与对照组差异无统计学意义,S4组明显低于对照组和其他三组(P<0.01);S1、S2、S3组GABAR1和NMDAR2B的mRNA表达和蛋白含量与对照组差异无统计学意义;与对照组比较,S4组GABAR1的mRNA表达和蛋白含量明显升高,NMDAR2B的mRNA表达和蛋白含量明显降低(P<0.01)。结论持续吸入异氟醚对空间记忆能力的影响显著,而且长时间高浓度的吸入方式造成的影响时间较长。这种影响与脑颞叶中GABAR1和NMDAR2B等神经递质受体的表达相关。 展开更多

关键词 异氟醚 MORRIS水迷宫 γ-氨基丁酸受体1 N-甲基-D-天冬氨酸受体2B 颞叶

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海洛因诱导大鼠伏隔核NMDA受体亚基对GABA表达的影响

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作者 王颖 李莎 +2 位作者 朱再满 李晶 李敏 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 2023年第3期275-280,共6页

目的:研究大鼠伏隔核(NAc)在海洛因诱导条件性位置偏爱(CPP)状态及戒断状态下,NMDA受体亚基NR2B和NR2C对GABA表达的调控,探索GABA能神经元上NR2B和NR2C亚基在海洛因诱导中的作用。方法:将SD大鼠随机分为两组,即对照组和海洛因诱导组。... 目的:研究大鼠伏隔核(NAc)在海洛因诱导条件性位置偏爱(CPP)状态及戒断状态下,NMDA受体亚基NR2B和NR2C对GABA表达的调控,探索GABA能神经元上NR2B和NR2C亚基在海洛因诱导中的作用。方法:将SD大鼠随机分为两组,即对照组和海洛因诱导组。海洛因诱导组又分为海洛因诱导CPP状态和海洛因戒断状态。采用海洛因小剂量递增法皮下连续注射7 d,建立海洛因诱导CPP模型,再自然戒断7 d,免疫组织化学染色检测各组大鼠伏隔核GABA和NR2B、NR2C亚基的位置关系。结果:采用小剂量递增法连续注射7 d海洛因,大鼠形成了稳定的海洛因诱导CPP模型。免疫荧光染色结果可见,各组大鼠伏隔核均有GABA、NR2B和NR2C表达,且GABA与NR2B及NR2C受体均有共表达。免疫组织化学结果显示,海洛因成瘾状态大鼠伏隔核GABA表达量明显高于对照组和戒断状态,具显著性差异(P<0.01)。戒断状态大鼠GABA表达量最低。结论:GABA的表达变化受NMDA受体亚基活性的影响;NR2B亚基对GABA的调控作用可能参与了海洛因依赖的复燃。 展开更多

关键词 海洛因 伏隔核 条件性位置偏爱 γ-氨基丁酸 N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基 N-甲基-D-天冬氨酸受体2C亚基 大鼠

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丙泊酚与氯胺酮对老年大鼠远期记忆和大脑两种受体表达的比较 被引量：5

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作者 乔霖 赵薇 +2 位作者 路园园 王新生 邢珍 《医药导报》 CAS 2016年第4期344-348,共5页

目的通过比较丙泊酚和氯胺酮腹腔注射对老年大鼠远期记忆的影响及脑颞叶和海马CA1区N-甲基-D-天冬氨酸受体2B(NMDAR2B)和γ-氨基丁酸受体1(GABAR1)的表达,初步探讨远期记忆与不同脑区神经递质受体的关系。方法雄性老年大鼠随机分为空白... 目的通过比较丙泊酚和氯胺酮腹腔注射对老年大鼠远期记忆的影响及脑颞叶和海马CA1区N-甲基-D-天冬氨酸受体2B(NMDAR2B)和γ-氨基丁酸受体1(GABAR1)的表达,初步探讨远期记忆与不同脑区神经递质受体的关系。方法雄性老年大鼠随机分为空白对照组、丙泊酚组、氯胺酮组。3组大鼠于实验前进行为期5 d的Morris水迷宫训练,于第6天给药,丙泊酚组腹腔注射50 mg·m L-1丙泊酚,氯胺酮组腹腔注射80 mg·m L-1氯胺酮,空白对照组给予相同剂量的0.9%氯化钠溶液。给药后第7天进行空间探索实验及定位航行实验,测试对大鼠学习记忆能力的影响,测试结束后免疫荧光及FISH技术检测大鼠脑颞叶及海马CA1区GABAR1及NMDAR2B的表达。结果 Morris水迷宫结果:丙泊酚组(9.49±1.24)s与空白对照组(8.82±2.22)s比较,差异无统计学意义。氯胺酮组(12.04±2.67)s与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)且较空白对照组潜伏期时间延长,穿越目标次数明显减少。免疫组化及FISH技术:大鼠脑颞叶及海马CA1区GABAR1表达:丙泊酚组与空白对照组比较,脑颞叶及海马CA1区均差异无统计学意义,而氯胺酮组与空白对照组比较,大鼠脑颞叶与海马CA1区表达均明显上调(P<0.05)。大鼠脑颞叶及海马CA1区NMDAR2B的表达:丙泊酚组与空白对照组比较,脑颞叶及海马CA1区均差异无统计学意义,而氯胺酮组与空白对照组比较,大鼠脑颞叶及海马CA1区表达均明显下降(P<0.05)。结论丙泊酚单独麻醉对长期的学习记忆无影响,而氯胺酮可导致麻醉长期学习记忆损伤,其机制可能不仅与海马CA1区NMDAR2B受体表达的下调和GABAR1表达的上调有关,其与颞叶等非海马区的受体表达也可能有关。 展开更多

关键词 丙泊酚 氯胺酮 学习记忆 γ-氨基丁酸受体1 N-甲基-D-天冬氨酸受体2B 颞叶/海马

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七氟醚对老年大鼠认知功能及大脑额叶GABAR1和NMDAR2B表达的影响 被引量：3

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作者 杨晓楠 李鹏涛 +3 位作者 赵梦 张辉 张晓丽 王新生 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期468-472,共5页

目的观察七氟醚对老年大鼠学习记忆能力的影响以及与脑右侧前额叶γ-氨基丁酸受体1(GABAR1)和N-甲基-D-天冬氨酸受体2B(NMDAR2B)表达变化的关系。方法雄性SD老年大鼠模型50只,随机分为对照组(C组,n=10)和实验组(T组,n=40)。C组吸入室温... 目的观察七氟醚对老年大鼠学习记忆能力的影响以及与脑右侧前额叶γ-氨基丁酸受体1(GABAR1)和N-甲基-D-天冬氨酸受体2B(NMDAR2B)表达变化的关系。方法雄性SD老年大鼠模型50只,随机分为对照组(C组,n=10)和实验组(T组,n=40)。C组吸入室温空气,实验组按3%浓度吸入七氟醚持续时间不同分为T1组(吸入2h)和T2组(吸入4h),C组全部,T1和T2组各取10只大鼠分别在麻醉后1天和7天进行Morris水迷宫实验,检测老年大鼠的空间学习记忆能力,采用定量RT-PCR技术和免疫荧光技术分别检测右侧前额叶GABAR1和NMDAR2B的mRNA转录水平和蛋白含量。结果与C组比较,吸入七氟醚第1天T1和T2组逃避潜伏期明显延长,空间探索穿越次数明显减少,GABAR1的mRNA表达量和蛋白含量明显上调,NMDAR2B的mRNA表达量和蛋白含量明显下调(P<0.05)。与C组比较,吸入七氟醚后第7天T2组逃避潜伏期明显延长,空间探索穿越次数明显减少,T2组GABAR1 mRNA表达量和蛋白含量明显上调,NMDAR2B的mRNA表达量和蛋白含量明显下调,且T2组GABAR1蛋白含量明显高于,NMDAR2B蛋白含量明显低于T1组(P<0.05)结论长时持续吸入七氟醚相较于短时持续吸入对空间学习记忆能力下降的影响较大,且持续影响时间较长。这种影响与脑额叶中GABAR1和NMDAR2B的表达变化相关。 展开更多

关键词 七氟醚 MORRIS水迷宫 γ-氨基丁酸受体1 N-甲基-D天冬氨酸受体2B 额叶

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丙泊酚对大鼠海马CA1区兴奋性突触传递的影响 被引量：2

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作者 谢玉波 刘敬臣 +1 位作者 徐林 曾邦雄 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 2005年第6期399-401,共3页

目的观察500μmol/L丙泊酚对大鼠海马CA1区电刺激诱发的兴奋性突触后电流(EPSC)的影响,分析丙泊酚的可能作用机制。方法断头法分离Wistar大鼠(13~19d)海马半脑,用切片机切出400μm厚度的海马脑片,全细胞膜片钳技术记录CA1区锥体神经元E... 目的观察500μmol/L丙泊酚对大鼠海马CA1区电刺激诱发的兴奋性突触后电流(EPSC)的影响,分析丙泊酚的可能作用机制。方法断头法分离Wistar大鼠(13~19d)海马半脑,用切片机切出400μm厚度的海马脑片,全细胞膜片钳技术记录CA1区锥体神经元EPSC。实验分两组:脂肪乳剂组(n=6)和丙泊酚组(n=10)。先以50μmol/L印防己毒素预孵脑片30min后,记录基础EPSC10min,然后加入450μl脂肪乳剂或丙泊酚(相当于500μmol/L),继续记录EPSC40min;继而以配对刺激代替单刺激,观察EPSC2/EPSC1比率的变化;改变膜钳制电压(-80^+60mV),观察电流-电压(I-V)曲线的变化。结果脂肪乳剂对EPSC无影响,500μmol/L丙泊酚降低大鼠海马CA1区EPSC值,25~30min左右达最大抑制效果,EPSC幅值下降至基础值的67·5%,明显低于脂肪乳剂组(P<0·05);而且500μmol/L丙泊酚明显降低EPSC2/EPSC1比率,也使I-V曲线左移,降低反转电位至-35mV左右。结论500μmol/L丙泊酚对大鼠海马CA1区兴奋性突触传递产生抑制作用,这可能与其增强突触前膜、突触后膜GABAA受体活性有关。 展开更多

关键词 丙泊酚 大鼠 海马CA1区 兴奋性 突触传递 γ-氨基丁酸 受体

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α5GABA_A受体及其变构调节剂对学习记忆功能作用的研究进展

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作者 赵自芳 高腾 尹毅青 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期766-771,共6页

α5亚基γ-氨基丁酸A受体(α5GABAAR)是中枢神经系统的一种抑制性受体,主要分布在海马,通过调控氯离子外向电流对海马神经元产生抑制性效应、大量研究表明,该受体兴奋性的改变会对学习和记忆等认知功能产生影响,从而导致一些病症如术后... α5亚基γ-氨基丁酸A受体(α5GABAAR)是中枢神经系统的一种抑制性受体,主要分布在海马,通过调控氯离子外向电流对海马神经元产生抑制性效应、大量研究表明,该受体兴奋性的改变会对学习和记忆等认知功能产生影响,从而导致一些病症如术后认知功能障碍、疼痛、抑郁症、精神分裂症和唐氏综合征等的发生而其变构调节剂则能治疗或改善这些病症本文对α5GABA_AR的生理功能。 展开更多

关键词 α5亚基γ-氨基丁酸a受体 海马 认知 学习记忆 调节剂

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糖皮质激素受体α基因RNA干扰的生物学效应研究 被引量：1

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作者 王明海 粟永萍 +4 位作者 程天民 王锋超 陆建华 刘晓宏 李洪涛 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第20期1795-1798,共4页

目的　采用RNA干扰 (RNAinterference ,RNAi)技术 ,通过构建人糖皮质激素受体α(glucocorticoidreceptorα ,GRα)基因的特异性siRNA(smallinterfereRNA)真核表达载体 ,体外观察对GRα基因的沉默作用及生物学效应。方法　采用基因克隆技... 目的　采用RNA干扰 (RNAinterference ,RNAi)技术 ,通过构建人糖皮质激素受体α(glucocorticoidreceptorα ,GRα)基因的特异性siRNA(smallinterfereRNA)真核表达载体 ,体外观察对GRα基因的沉默作用及生物学效应。方法　采用基因克隆技术 ,将合成的发卡样特异性GRα干扰寡核苷酸序列插入真核表达载体 (pPUR/U6) ,构建GRαsiRNA的表达载体 ,转染体外ECV 3 0 4细胞 ,48h后观测胞内GRα蛋白水平 (Westernblot)及对LPS刺激后细胞因子产生的影响作用。结果　①成功构建发卡样GRαsiRNA真核表达载体 (pPUR/U6 GRαsiRNA) ;②pPUR/U6 GRαsiRNA转染 (脂质体法 )ECV 3 0 4细胞 ,48h后明显下调胞内GRα蛋白水平 ;③转染pPUR/U6 GRαsiRNA的细胞 ,在LPS刺激后 ,其TNF α、IL 1β的表达释放显著高于空载体对照组。结论　该RNA干扰真核表达载体能明显干扰GRα蛋白的表达、释放 ,结果促进了LPS刺激后炎性细胞因子的表达释放。进一步说明严重创伤所引起的糖皮质激素受体下调是机体应激紊乱的重要原因。 展开更多

关键词 糖皮质激素受体α亚基 RNA干扰 肿瘤坏死因子-α亚型 白细胞介素-1β亚型

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瘦素对睡眠剥夺小鼠下丘脑GABA含量及其受体表达的影响 被引量：8

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作者 陈梦婷 鲁元星 +1 位作者 张力 唐玲 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期709-713,共5页

目的观察瘦素对睡眠剥夺小鼠下丘脑γ-氨基丁酸(GABA)含量及其受体表达的影响,并探讨可能的机制。方法采用随机数字表法将雄性C57BL/6小鼠分为对照组、睡眠剥夺组、瘦素补充组,每组8只。对照组设置水环境不剥夺睡眠;睡眠剥夺组利用改良... 目的观察瘦素对睡眠剥夺小鼠下丘脑γ-氨基丁酸(GABA)含量及其受体表达的影响,并探讨可能的机制。方法采用随机数字表法将雄性C57BL/6小鼠分为对照组、睡眠剥夺组、瘦素补充组,每组8只。对照组设置水环境不剥夺睡眠;睡眠剥夺组利用改良多平台水环境法建立小鼠睡眠剥夺模型;瘦素补充组在剥夺同时予以每天两次瘦素1.3 mg/kg腹腔给药。睡眠剥夺7 d后,观察小鼠一般情况,测量体重并采集下丘脑组织和血浆标本,ELISA法检测各组小鼠血浆瘦素水平,下丘脑GABA、谷氨酸(Glu)含量。Western blotting检测下丘脑组织中GABA关键合成酶谷氨酸脱羧酶67(GAD67)及GABAA受体α1亚型蛋白(GABAARα1)的表达水平。结果与对照组相比,睡眠剥夺组小鼠体重明显减轻[(22.03±0.42)g vs.(17.75±0.75)g,P<0.01],而瘦素补充组小鼠体重[(15.10±0.38)g]较对照组和睡眠剥夺组均明显减轻(P<0.01)。与对照组比较,睡眠剥夺组小鼠皮毛失去光滑,对光线和声音特别敏感,表现为轻微躁狂,攻击性强,血浆瘦素水平明显降低[(483.81±21.72)ng/ml vs.(359.14±16.69)ng/ml,P<0.01],下丘脑GABA水平明显降低[(152.37±8.14)ng/g vs.(111.31±2.96)ng/g,P<0.05]。瘦素补充组小鼠下丘脑GABA水平[(132.19±3.38)ng/g]明显高于睡眠剥夺组[(111.31±2.96)ng/g,P<0.05],但与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。睡眠剥夺组、瘦素补充组小鼠下丘脑Glu水平[分别为(686.56±10.01)ng/g、(668.64±9.93)ng/g]较对照组[(577.11±16.36)ng/g]明显升高(P<0.05),而瘦素补充组与睡眠剥夺组比较差异无统计学意义(P>0.05)。睡眠剥夺组小鼠下丘脑GAD67、GABAARα1蛋白表达[分别为0.68±0.06、0.69±0.07]较对照组(分别为1.09±0.13、0.99±0.07)明显降低(P<0.05),而瘦素补充组(分别为1.39±0.19、1.33±0.14)较睡眠剥夺组及对照组均明显升高(P<0.05)。结论瘦素可上调睡眠剥夺小鼠下丘脑内GABA关键合成酶GAD67的表达,升高下丘脑GABA含量,提高下丘脑GABAARα1蛋白表达,这可能是瘦素影响睡眠的重要机制。 展开更多

关键词 瘦素 睡眠剥夺 γ-氨基丁酸 谷氨酸脱羧酶67 GABAa受体α1亚型蛋白

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快速起效抗抑郁药研发策略:单胺(5-HT)-非单胺(Glu/GABA)长反馈神经环路候选假说的提出 被引量：28

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作者 李云峰 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2019年第3期161-173,共13页

抑郁症已成为全球性严重的公共卫生问题,目前临床一线抗抑郁剂大多是基于经典的“单胺假说(策略)”研发的,这些药物普遍存在起效缓慢、有效率不高、损伤认知和致自杀倾向等缺陷,因此,突破经典单胺策略框架,发展快速起效、兼可增强认知... 抑郁症已成为全球性严重的公共卫生问题,目前临床一线抗抑郁剂大多是基于经典的“单胺假说(策略)”研发的,这些药物普遍存在起效缓慢、有效率不高、损伤认知和致自杀倾向等缺陷,因此,突破经典单胺策略框架,发展快速起效、兼可增强认知和低毒副作用抗抑郁药物是目前全球性重大需求和方向。2019年,S-氯胺酮和别孕烯醇酮(brexanolone)等快速起效抗抑郁药的上市为基于N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)和γ-氨基丁酸A(GABAA)等受体的非单胺策略开辟了全新的前景。目前快速起效抗抑郁药研发总体趋势主要有二:即基于优化多靶标的单胺策略(现代单胺策略)和基于谷氨酸(Glu)-GABA平衡调控的非单胺策略。根据本实验室和国外同行的研究,我们提出单胺-非单胺即“5-羟色胺(5-HT)-Glu/GABA长反馈神经环路”候选假说,认为脑内单胺调控机制(如5-HT神经元,位于中缝核)与非单胺调节机制(Glu/GABA神经元,位于前额皮质等脑区)均是快速起效抗抑郁药机制的一部分,二者共同组成长反馈神经环路,介导前额皮质和海马等效应脑区快速增强的突触可塑性。基于该环路提出5个方面抗抑郁快速起效的候选策略:①通过解除GABA中间神经元对Glu锥体神经元的抑制或直接激活Glu锥体神经元,实现快速兴奋/抑制(E/I)平衡;②借助5-HT1A等受体同时调控5-HT神经元活性和兴奋/抑制平衡(同时增强单胺-非单胺环节);③直接激活哺乳动物西罗莫司(雷帕霉素)靶蛋白复合物1(mTORC1),快速增强脑源性神经营养因子(BDNF)-mTOR通路;④刺激脑内BDNF的快速释放。⑤正向变构调节GABAA受体。希望这些思路和策略为进一步发现快速抗抑郁候选靶标提供有益的借鉴。 展开更多

关键词 抗抑郁药 抑郁症 5-羟色胺 氯胺酮 受体 5-HT1A 羟哌吡酮 18 ku转位蛋白 受体 N-甲基-D-天冬氨酸 受体 γ-氨基丁酸A

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缩宫素对胎鼠脑缺氧损伤的保护作用

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作者 于红 陆廷凤 +2 位作者 沈杨 任慕兰 王少华 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期568-571,共4页

围产期胎儿缺氧、缺血可导致婴儿神经系统异常。用无糖、缺氧人工脑脊液培养胎鼠脑切片造成脑细胞损伤模型,研究缩宫素的保护作用。电镜观察显示,缩宫素可使细胞凋亡明显减少;免疫组化测定结果显示缩宫素可使胎鼠海马CA3区缩宫素受体(O... 围产期胎儿缺氧、缺血可导致婴儿神经系统异常。用无糖、缺氧人工脑脊液培养胎鼠脑切片造成脑细胞损伤模型,研究缩宫素的保护作用。电镜观察显示,缩宫素可使细胞凋亡明显减少;免疫组化测定结果显示缩宫素可使胎鼠海马CA3区缩宫素受体(OTR)和γ-氨基丁酸A受体β1亚基(GABAARβ1)明显增多。实验结果表明缩宫素对胎鼠缺氧、缺血神经元的损伤有保护作用。 展开更多

关键词 缩宫素 海马 γ-氨基丁酸a受体β1亚基 脑缺氧损伤 保护

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