计算机模拟筛选藻蓝蛋白中γ-氨基丁酸转氨酶抑制肽

1

作者 陈旭可 叶志能 +3 位作者 郭毅晶 邱淑萍 李昊择 张英华 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第21期189-197,共9页

焦虑症在全球范围内流行,极大降低了患者的生活质量。γ-氨基丁酸转氨酶(γ-aminobutyric acid transaminase,GABA-T)作为降解抑制性神经递质γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的限速酶,抑制其活性可有效缓解焦虑。该研究旨在借... 焦虑症在全球范围内流行,极大降低了患者的生活质量。γ-氨基丁酸转氨酶(γ-aminobutyric acid transaminase,GABA-T)作为降解抑制性神经递质γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的限速酶,抑制其活性可有效缓解焦虑。该研究旨在借助计算机模拟技术,从螺旋藻藻蓝蛋白中筛选出具有抗焦虑潜力的GABA-T抑制肽。研究构建了多层级筛选策略。首先,对藻蓝蛋白氨基酸序列进行虚拟酶切,经PeptideRanker模型筛选出高活性多肽,接着选择分子对接结合能较高的多肽进行毒性、致敏性、水溶性预测,及药物代谢动力学分析,最后通过分子对接和分子动力学模拟揭示候选肽的作用模式。结果表明,酶切获得49条高活性肽,经分子对接选择30条进行理化性质和药代动力学分析,最终可获得3条无毒、无致敏、水溶性和成药性良好的多肽序列CLNGLR、GRF、QGRF。对接结果和动力学模拟揭示,3条多肽可以与GABA-T的关键残基结合,构象在动力学模拟过程中稳定。该研究表明螺旋藻源多肽可以通过抑制GABA降解发挥抗焦虑作用,具备开发为天然抗焦虑药物的潜力。 展开更多

关键词 抗焦虑 藻蓝蛋白 γ-氨基丁酸转氨酶抑制肽 生物活性肽

在线阅读 下载PDF 职称材料

以RNA干扰γ-氨基丁酸转氨酶1基因(OsGABA-T1)表达提高稻米γ-氨基丁酸(GABA)含量 被引量：9

2

作者 周露 沈贝贝 +4 位作者 白苏阳 刘喜 江玲 翟虎渠 万建民 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1305-1312,共8页

γ-氨基丁酸(GABA)是一种四碳非蛋白质氨基酸,具有降血压等功能。为提高稻米中GABA含量,利用RNA干扰技术,构建水稻中GABA代谢关键酶GABA转氨酶1基因(Os GABA-T1)的干扰载体,通过农杆菌介导法,将其转化至粳稻品种宁粳1号中。实时荧光定量... γ-氨基丁酸(GABA)是一种四碳非蛋白质氨基酸,具有降血压等功能。为提高稻米中GABA含量,利用RNA干扰技术,构建水稻中GABA代谢关键酶GABA转氨酶1基因(Os GABA-T1)的干扰载体,通过农杆菌介导法,将其转化至粳稻品种宁粳1号中。实时荧光定量PCR检测结果表明导入的RNA干扰结构成功地降低了目的基因Os GABA-T1的表达,且干扰家系中Os GABA-T2基因表达也随之下降。对转基因T3代稻米GABA含量测定发现,糙米中GABA含量相对于对照增加了13倍以上,精米中GABA含量也显著增加,而其他主要氨基酸含量则没有明显变化。测定储藏4个月的转基因稻米发现,GABA含量仍具有较高水平。所以,利用RNA干扰技术可有效提高稻米γ-氨基丁酸(GABA)含量,为培育富含GABA的降血压功能性水稻品种提供基础。 展开更多

关键词 γ-氨基丁酸 RNA干扰 γ-氨基丁酸转氨酶1 转基因水稻

在线阅读 下载PDF 职称材料

γ-氨基丁酸转氨酶的动力学特征及其测定法的改良 被引量：6

3

作者 胡元元 何善述 《同济医科大学学报》 CSCD 1999年第1期7-10,共4页

对γ－氨基丁酸转氨酶（ＧＡＢＡ－Ｔ）的催化反应动力学进行了系统研究。结果显示，ＧＡＢＡ－Ｔ的催化反应属于双底物乒乓机制，最适反应温度和反应时间分别为３０℃和１５ｍｉｎ，ｐＨ值为８．７５，Ｋα－ＫＧｍ和ＫＧＡＢＡｍ分别... 对γ－氨基丁酸转氨酶（ＧＡＢＡ－Ｔ）的催化反应动力学进行了系统研究。结果显示，ＧＡＢＡ－Ｔ的催化反应属于双底物乒乓机制，最适反应温度和反应时间分别为３０℃和１５ｍｉｎ，ｐＨ值为８．７５，Ｋα－ＫＧｍ和ＫＧＡＢＡｍ分别为２．９７和２．４３ｍｍｏｌ／Ｌ。故底物α－酮戊二酸（α－ＫＧ）、γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）浓度分别为４．８和１８ｍｍｏｌ／Ｌ。此改良法建立了测定大鼠脑组织ＧＡＢＡ－Ｔ活性的微量紫外分光比色法，灵敏度比国外同类方法提高１．９倍。 展开更多

关键词 γ-氨基丁酸转氨酶 酶动力学 微量紫外比色法

在线阅读 下载PDF 职称材料

电针对脑卒中肢体痉挛大鼠γ-氨基丁酸代谢酶的影响 被引量：28

4

作者 毛雪莲 秦思 +3 位作者 金荣疆 朱天民 沈小雨 冯丽娟 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期22-28,共7页

目的:探讨电针通过调控γ-氨基丁酸代谢酶改善脑卒中肢体痉挛大鼠肌张力的作用机制。方法:将24只SD大鼠分为正常组、假手术组、模型组和电针组。用大脑中动脉栓塞法建立局灶性脑缺血模型。电针组造模成功后第3天开始取申脉,照海针刺治疗... 目的:探讨电针通过调控γ-氨基丁酸代谢酶改善脑卒中肢体痉挛大鼠肌张力的作用机制。方法:将24只SD大鼠分为正常组、假手术组、模型组和电针组。用大脑中动脉栓塞法建立局灶性脑缺血模型。电针组造模成功后第3天开始取申脉,照海针刺治疗6天,其余组在同等条件下饲养,不做其他处理。采用Bederson评定神经功能,Ashworth分级评定肌张力,Feeney平衡木评分标准评定运动功能,免疫组化染色SP法、实时定量PCR测定各组标本中GABA-T、SSADH的表达。结果:与模型组相比,治疗后电针组神经功能缺损症状改善(P<0.05);肌张力降低(P<0.05);运动功能提高(P<0.05)。免疫组化染色SP法示GABA-T平均光密度值电针组颈膨大(模型组:0.2256±0.0190;电针组:0.2094±0.0083)和腰膨大中(模型组:0.2163±0.0088;电针组:0.1988±0.0054)较模型组明显下降(P<0.05);而脑干中较模型组表达也有下降趋势(模型组:0.2129±0.0086;电针组:0.2072±0.0119)。实时定量PCR测定SSADHm RNA结果与模型组比较显示电针组脑干(模型组:1.67±0.38;电针组:1.22±0.07)、颈膨大(模型组:1.27±0.28;电针组:0.96±0.09)和腰膨大中(模型组:1.07±0.32;电针组:1.08±0.07)表达均降低(P<0.05)。结论:电针阴阳跷脉腧穴通过降低中枢系统中GABA-T和SSADH的释放使GABA的降解速度减慢,从而增加突触间隙的GABA浓度,增强GABA的抑制作用是改善偏瘫肢体痉挛的可能机制之一。 展开更多

关键词 脑卒中 肢体痉挛 电针 γ-氨基丁酸转氨酶 琥珀酸半醛脱氢酶

在线阅读 下载PDF 职称材料

γ-氨基丁酸代谢酶的研究进展 被引量：1

5

作者 何梦秀 陈芳艳 +1 位作者 钟杨生 林健荣 《安徽农业科学》 CAS 2015年第30期47-50,共4页

谷氨酸脱羧酶催化产生的γ-氨基丁酸具有调节血压、促进精神安定和改善脑机能等重要功效。富集高γ-氨基丁酸成为目前研究的热点。该研究对有关γ-氨基丁酸代谢的关键酶的研究概况进行了综述。通过激活或抑制酶活性,促进γ-氨基丁酸的富... 谷氨酸脱羧酶催化产生的γ-氨基丁酸具有调节血压、促进精神安定和改善脑机能等重要功效。富集高γ-氨基丁酸成为目前研究的热点。该研究对有关γ-氨基丁酸代谢的关键酶的研究概况进行了综述。通过激活或抑制酶活性,促进γ-氨基丁酸的富集,为开发新型保健产品提供参考。 展开更多

关键词 γ-氨基丁酸 谷氨酸脱羧酶 γ-氨基丁酸转氨酶 富集技术

在线阅读 下载PDF 职称材料

转氨酶新酶的挖掘、表征及在2-氨基丁酸生物转化中的应用

6

作者 叶妍 吴雨萱 +1 位作者 周哲敏 崔文璟 《生物技术通报》 2025年第11期134-142,共9页

【目的】通过挖掘高性能转氨酶和引入丙酮酸代谢酶形成催化级联体系抑制逆反应活性,提升产物L-2-氨基丁酸转化水平。【方法】利用基因挖掘技术在数据库中对转氨酶进行大规模挖掘,以2-酮丁酸作为底物,筛选高效转氨酶,并对新酶进行生化分... 【目的】通过挖掘高性能转氨酶和引入丙酮酸代谢酶形成催化级联体系抑制逆反应活性,提升产物L-2-氨基丁酸转化水平。【方法】利用基因挖掘技术在数据库中对转氨酶进行大规模挖掘,以2-酮丁酸作为底物,筛选高效转氨酶,并对新酶进行生化分析,表征酶学性质,通过建立全细胞生物转化和催化级联体系调控反应平衡,减缓逆反应水平,提升产物转化率。【结果】从数据库中发现了源自大肠杆菌的Ec4a转氨酶,以2-酮丁酸为底物,Ec4a的最适温度为45℃,最适pH值为9.0,比酶活1.25 U/mg,酶蛋白的熔融温度(T_(m)值)为68.2℃。酶蛋白在55℃和70℃下的酶活半衰期分别为321 min和150 min。在pH 8.5的条件下孵育6 h相对酶活剩余59%。在全细胞催化体系中两种底物最佳的浓度比为1∶1。分别以30 mmol/L的2-酮丁酸和30 mmol/L的L-Ala为底物,在菌体为OD_(600)=10的条件下,2-氨基丁酸的转化率为37.5%。引入枯草芽胞杆菌乙酰乳酸合成酶(Bsalss)可以消耗副产物丙酮酸抑制逆反应,形成体外级联后相同全细胞催化体系下,转化率提高至61.4%。【结论】挖掘到稳定性好的转氨酶Ec4a,建立并优化2-氨基丁酸的全细胞生物转化体系,并通过引入Bsalss构建级联体系提高转化率至61.4%。 展开更多

关键词 转氨酶 L-2-氨基丁酸 酶学性质 生物催化 逆反应消除

在线阅读 下载PDF 职称材料

石菖蒲挥发油纤维素酶辅助提取工艺优化及抑制GABA-T活性成分研究 被引量：1

7

作者 方成维 麻秀萍 +1 位作者 陈亮 李倩 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2024年第5期146-153,共8页

目的:打开制约中药中GABA-T配体快速筛选方法的瓶颈。方法:建立中空纤维配体垂钓方法筛选石菖蒲挥发油中γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T)抑制成分。在响应面法优化石菖蒲挥发油酶辅助提取工艺基础上,将GABA-T溶液注射入中空纤维的管腔中,作... 目的:打开制约中药中GABA-T配体快速筛选方法的瓶颈。方法:建立中空纤维配体垂钓方法筛选石菖蒲挥发油中γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T)抑制成分。在响应面法优化石菖蒲挥发油酶辅助提取工艺基础上,将GABA-T溶液注射入中空纤维的管腔中,作为“诱饵”垂钓出石菖蒲挥发油中的潜在活性成分,并验证其GABA-T抑制活性。结果:石菖蒲挥发油的最佳提取工艺为纤维素酶添加量3165 U/g、酶解时间1.8 h、酶解温度45℃,此时石菖蒲挥发油收率可达到2.56%,最终鉴定出51个化合物,主要包括烯烃、醇类、醚类、酮类、酚类、酸类等。将3 mg/mL的GABA-T溶液注射入U型中空纤维管的空腔,共孵育160 min,封口后置于石菖蒲挥发油中进行60 kHz超声垂钓20 min,联合LCMS-IT-TOF系统进行分析,成功筛选出的α-细辛醚对GABA-T活性有浓度依赖性的抑制作用,IC50为57.9μg/mL。结论:建立的中空纤维配体垂钓方法稳定可行、操作简便。 展开更多

关键词 石菖蒲 中空纤维 配体垂钓 γ-氨基丁酸转氨酶

在线阅读 下载PDF 职称材料

羟基马桑毒素及其衍生物对粘虫体内GAD和GABA-T活性的影响

8

作者 杜薇薇 李孟楼 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2011年第5期149-152,共4页

为了探明羟基马桑毒素及其衍生物(T1、T2、T3、T4)对粘虫神经系统的影响以及快速检测对比分析新合成的药物对试虫神经递质γ-氨基丁酸(GABA)相关酶谷氨酸脱羧酶(GAD)和γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T)活性的影响,通过胃毒和离体2种处理方式... 为了探明羟基马桑毒素及其衍生物(T1、T2、T3、T4)对粘虫神经系统的影响以及快速检测对比分析新合成的药物对试虫神经递质γ-氨基丁酸(GABA)相关酶谷氨酸脱羧酶(GAD)和γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T)活性的影响,通过胃毒和离体2种处理方式提取粗酶液并采用分光光度法对试虫酶活性进行测定。结果表明,经羟基马桑毒素及其衍生物处理后试虫的GAD酶活受到了抑制,而GABA-T活性被提高,这2种酶影响着试虫体内GABA的含量。离体测定的结果与胃毒处理后试虫体内酶活的变化相似,因此可以采用离体处理方法快速检测新药物对试虫的活性。 展开更多

关键词 羟基马桑毒素 粘虫 谷氨酸脱羧酶(GAD) γ-氨基丁酸转氨酶(gaba-t) 活性测定

在线阅读 下载PDF 职称材料

三种GABA-T测定方法的比较

9

作者 李倩 王征泰 +1 位作者 何通川 蒋晓秋 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 1990年第1期70-73,共4页

γ-氨基丁酸(GABA)是体内主要的抑制性神经递质。它在脑内的含量高,分布广。它还与一些疾病如Huntington’s病,癫痫等发病有关。由于GABA转氨酶(GABA-T,EC2.6.1.19)是GABA分解代谢的限速酶。

关键词 gaba-t 测定 转氨酶 氨基丁酸

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于数据挖掘分析ABAT基因在肝细胞癌中的表达及意义 被引量：2

10

作者 张玉鹏 王帆 +4 位作者 陈鹏飞 刘适 刘岚 常莹 赵秋 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2019年第3期553-558,共6页

目的 利用数据库分析基因ABAT在肝细胞癌中的表达以及意义。方法 利用Oncomine数据库及GEPIA分析ABAT在肝细胞癌组织中的表达情况;利用GEPIA做ABATmRNA与肝细胞癌患者生存期以及与病理分期程度的相关性分析;经MethHC数据库分析ABAT基因... 目的 利用数据库分析基因ABAT在肝细胞癌中的表达以及意义。方法 利用Oncomine数据库及GEPIA分析ABAT在肝细胞癌组织中的表达情况;利用GEPIA做ABATmRNA与肝细胞癌患者生存期以及与病理分期程度的相关性分析;经MethHC数据库分析ABAT基因启动子区甲基化水平;String数据库分析与ABAT蛋白相互作用的蛋白网络;通过TheHumanProteinAtlas分析ABAT蛋白在肝细胞癌组织中的表达情况以及ABAT在蛋白水平上对患者预后的影响。结果 mRNA水平上,ABAT在肝细胞癌组织中较正常肝组织显著低表达,其mRNA水平低者预后较差(log-rank,P=0.0021),ABATmRNA水平越低者病理分期恶性程度越高(P=0.00234)。ABAT蛋白在肝细胞癌组织中也较正常肝组织表达降低,蛋白表达水平低的患者预后较差(log-rank,P=2.14×10-3)。肝细胞癌中ABAT基因启动子区甲基化水平较正常肝组织显著升高(P<0.005)。与ABAT相互作用的蛋白有ALDH1A3、ALDH9A1、ALDH3A2、GAD1、GAD2等,可能参与细胞凋亡、氧化还原及神经递质分泌等细胞功能。结论 通过肿瘤基因数据库信息挖掘发现,无论在mRNA水平或是蛋白水平上,ABAT在肝细胞癌组织中呈低表达,且与患者生存期有关。目前采用数据库挖掘分析数据可为临床上肝细胞癌的诊断以及预后评估提供参考,将为后续的肿瘤研究提供重要的理论依据。 展开更多

关键词 癌 肝细胞 4-氨基丁酸转氨酶 数据库 遗传学 基因

在线阅读 下载PDF 职称材料

ABAT基因在人类疾病中的研究进展 被引量：2

11

作者 赵光杰 王小钦 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期357-361,367,共6页

ABAT基因是γ-氨基丁酸(γ-amino butyric acid,GABA)分解过程中关键酶γ-氨基丁酸转氨酶(γ-amino butyric acid transaminase,GABAT)的编码基因,不仅参与神经递质的代谢,而且对其他组织中的物质合成、细胞功能的发挥也起着不可或缺的... ABAT基因是γ-氨基丁酸(γ-amino butyric acid,GABA)分解过程中关键酶γ-氨基丁酸转氨酶(γ-amino butyric acid transaminase,GABAT)的编码基因,不仅参与神经递质的代谢,而且对其他组织中的物质合成、细胞功能的发挥也起着不可或缺的作用。ABAT基因还参与许多疾病的发生和发展,包括精神系统、消化系统以及肿瘤性疾病。本文主要对ABAT基因在人类疾病中的研究进展作一综述。 展开更多

关键词 ABAT基因 γ-氨基丁酸 γ-氨基丁酸转氨酶

在线阅读 下载PDF 职称材料