目的建立一种稳定的血浆γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyric acid,GABA)的液相色谱-串联质谱(liquid chromotography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)检测方法,并评估基于该法的GABA检测结果用于辅助诊断睡眠障碍的价值。方法使用UPLC ...目的建立一种稳定的血浆γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyric acid,GABA)的液相色谱-串联质谱(liquid chromotography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)检测方法,并评估基于该法的GABA检测结果用于辅助诊断睡眠障碍的价值。方法使用UPLC XevoTQs液质联用仪检测GABA,并进行预验证和性能验证,建立健康人群的参考范围。比较表观健康人群和睡眠障碍患者血浆中GABA含量是否存在差异。结果以氘代化合物作为同位素内标,采用Amide色谱柱进行分离。流动相为0.050%甲酸水溶液和含0.175%甲酸和5 mmol/L乙酸铵的90%乙腈水溶液,梯度洗脱,柱温35℃。LC-MS/MS检测GABA的线性范围为0.05~10.00μmol/L,定量下限为0.02μmol/L,批内变异系数(coefficient of variation,CV)<3.00%,批间CV<4.00%,回收率为101.06%~109.02%。将300例健康人按年龄把GABA参考范围分为3组:18~34岁为0.08~0.15μmol/L,35~49岁为0.10~0.20μmol/L,≥50岁为0.12~0.23μmol/L。以血浆GABA为标志物辅助诊断睡眠障碍,检测221例患者和300例健康人,结果显示18~34岁、35~49岁和≥50岁组的AUC分别为0.510(P=0.850)、0.686(P=0.002)和0.890(P<0.001),GABA的最佳截断值(cut-off)分别为0.09、0.10和0.11μmol/L。结论所建立的LC-MS/MS方法检测GABA的结果可靠,能够灵敏、准确地检测血浆GABA水平,可用于辅助诊断睡眠障碍。展开更多
文摘目的建立一种稳定的血浆γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyric acid,GABA)的液相色谱-串联质谱(liquid chromotography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)检测方法,并评估基于该法的GABA检测结果用于辅助诊断睡眠障碍的价值。方法使用UPLC XevoTQs液质联用仪检测GABA,并进行预验证和性能验证,建立健康人群的参考范围。比较表观健康人群和睡眠障碍患者血浆中GABA含量是否存在差异。结果以氘代化合物作为同位素内标,采用Amide色谱柱进行分离。流动相为0.050%甲酸水溶液和含0.175%甲酸和5 mmol/L乙酸铵的90%乙腈水溶液,梯度洗脱,柱温35℃。LC-MS/MS检测GABA的线性范围为0.05~10.00μmol/L,定量下限为0.02μmol/L,批内变异系数(coefficient of variation,CV)<3.00%,批间CV<4.00%,回收率为101.06%~109.02%。将300例健康人按年龄把GABA参考范围分为3组:18~34岁为0.08~0.15μmol/L,35~49岁为0.10~0.20μmol/L,≥50岁为0.12~0.23μmol/L。以血浆GABA为标志物辅助诊断睡眠障碍,检测221例患者和300例健康人,结果显示18~34岁、35~49岁和≥50岁组的AUC分别为0.510(P=0.850)、0.686(P=0.002)和0.890(P<0.001),GABA的最佳截断值(cut-off)分别为0.09、0.10和0.11μmol/L。结论所建立的LC-MS/MS方法检测GABA的结果可靠,能够灵敏、准确地检测血浆GABA水平,可用于辅助诊断睡眠障碍。
