oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物促进人脐静脉内皮细胞黏附分子表达的机制 被引量：7

1

作者 张贵婷 周红 +4 位作者 何超 陈芋丹 欧阳航 张鹏 王韧 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1472-1478,共7页

目的探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体)复合物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达黏附分子的影响,以及Toll样受体4(TLR4)信号通路在其中发挥的作用。方法用单纯培养基、oxLDL、oxLDL/β2GPI... 目的探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体)复合物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达黏附分子的影响,以及Toll样受体4(TLR4)信号通路在其中发挥的作用。方法用单纯培养基、oxLDL、oxLDL/β2GPI复合物、oxLDL/抗β2GPI抗体复合物、oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物、LPS分组刺激HUVEC,收集总RNA和蛋白,利用实时定量PCR和Western blot法检测细胞间黏附分子1(ICAM-1)、血管黏附分子1(VCAM-1)和冯·维勒布兰德因子(v WF)的mRNA和蛋白水平;采用TLR4阻断剂TAK-242(5μmol/L)或p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)阻断剂SB203580(10μmol/L)预处理的方式,探索阻断TLR4通路后,oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物对HUVEC黏附分子表达的影响,通过THP-1细胞黏附实验检测oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物对HUVEC黏附能力的影响。结果与培养基对照组相比,oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物能够显著提高HUVEC的ICAM-1、VCAM-1和v WF表达,并且能够增强HUVEC对THP-1细胞的黏附,TAK-242或SB203580处理能够抑制该过程。结论 oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物能够增强HUVEC的黏附分子表达和对THP-1细胞的黏附,TLR4和p38MAPK与该过程密切相关。 展开更多

关键词 oxLDL/β2gpi/抗β2gpi抗体复合物 Toll样受体4(TLR4) 人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 黏附分子

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oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物促进脐静脉内皮细胞迁移及炎症因子表达 被引量：7

2

作者 蔡谦谦 周红 +4 位作者 张贵婷 何超 朱晓洁 王晓燕 欧阳航 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期865-869,共5页

目的探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/β2GPI antibody)复合物促进人脐静脉内皮细胞(HUVEC)迁移和炎症因子的表达以及与Toll样受体4(TLR4)的关系。方法 oxLDL、oxLDL/β2GPI复合物、oxLDL/抗β2GPI抗... 目的探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/β2GPI antibody)复合物促进人脐静脉内皮细胞(HUVEC)迁移和炎症因子的表达以及与Toll样受体4(TLR4)的关系。方法 oxLDL、oxLDL/β2GPI复合物、oxLDL/抗β2GPI抗体复合物、oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物、脂多糖(LPS)等刺激物处理HUVEC,采用划痕实验观察HUVEC的迁移能力;根据实验分组,收集HUVEC的总蛋白和总RNA,实时荧光定量PCR和Western blot法检测TLR4的mRNA和蛋白表达。利用上述刺激物分别刺激经TLR4抑制剂TAK-242预处理和未经处理的HUVEC,实时定量PCR检测单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6的mRNA水平,ELISA检测细胞上清液中MCP-1、IL-1β、IL-6的蛋白水平。结果 oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物加速HUVEC迁移和诱导TLR4表达,oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物促进MCP-1、IL-1β、IL-6三种因子的mRNA和蛋白表达,TAK-242能够显著抑制该现象。结论 oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物促进HUVEC迁移和相关炎症因子的表达,该过程与TLR4密切相关。 展开更多

关键词 oxLDL/β2gpi/抗β2gpi抗体复合物 Toll样受体4(TLR4) 内皮细胞 细胞因子

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β2GPI/抗β2GPI抗体复合物对人绒毛膜细胞株JEG-3表达黏附分子及趋化因子的影响 被引量：2

3

作者 王韧 周红 +6 位作者 王婷 李娜 何超 王婷 张贵婷 陈芋丹 张鹏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第19期2310-2314,共5页

目的:探讨β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(β2GPI/抗β2GPI抗体)复合物对人绒毛膜细胞株JEG-3表达黏附分子及趋化因子的影响,分析TLR4-MyD88信号通路在其中的作用。方法:将JEG-3细胞分组刺激:抗β2GPI抗体(100μg/ml)组,β2GPI(100μg/ml)... 目的:探讨β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(β2GPI/抗β2GPI抗体)复合物对人绒毛膜细胞株JEG-3表达黏附分子及趋化因子的影响,分析TLR4-MyD88信号通路在其中的作用。方法:将JEG-3细胞分组刺激:抗β2GPI抗体(100μg/ml)组,β2GPI(100μg/ml)/抗β2GPI抗体(100μg/ml)复合物组,同行对照抗体(RIgG,100μg/ml)组,无血清培养基(Media)组,β2GPI(100μg/ml)组,牛血清白蛋白组(BSA,100μg/ml)。应用RT-qPCR和Western blot及ELISA检测刺激后细胞间黏附分子VCAM-1和ICAM-1以及趋化因子IL-8在mRNA和蛋白水平上的表达;RT-qPCR和Western blot检测TLR4和MyD88在mRNA和蛋白水平上的表达;应用TLR4阻断剂TAK-242预处理的方式,进一步探讨TLR4在β2GPI/抗β2GPI抗体复合物对JEG-3黏附分子及趋化因子表达的影响。结果:β2GPI(100μg/ml)/抗β2GPI抗体(100μg/ml)复合物组相对于Media组能够显著提高JEG-3的VCAM-1、ICAM-1和IL-8表达,同时诱导TLR4-MyD88的表达,两组之间差异有统计学意义(P<0.01);TAK-242(5μmol/L)能够明显抑制该过程;抗β2GPI抗体(100μg/ml)单独组也能诱导TLR4-MyD88的表达。结论:β2GPI/抗β2GPI抗体复合物能够增强人绒毛膜细胞株JEG-3的黏附分子及趋化因子表达,TLR4/MyD88信号通路在其中发挥重要作用。 展开更多

关键词 β2gpi/抗β2gpi抗体复合物 JEG-3 TLR4/MyD88信号通路

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oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物促进A7r5细胞钙化及炎症因子表达 被引量：2

4

作者 姚雨叶 蔡谦谦 +6 位作者 周红 何超 张鹏 吴倩倩 张贵婷 匡铭 陈芋丹 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1069-1075,共7页

目的探讨氧化低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体)复合物对大鼠血管平滑肌A7r5细胞钙化、炎症因子表达的影响以及Toll样受体4(TLR4)在其中的作用。方法分别用oxLDL、oxLDL/β2GPI复合物、β2GPI/抗β2... 目的探讨氧化低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体)复合物对大鼠血管平滑肌A7r5细胞钙化、炎症因子表达的影响以及Toll样受体4(TLR4)在其中的作用。方法分别用oxLDL、oxLDL/β2GPI复合物、β2GPI/抗β2GPI抗体复合物、oxLDL/抗β2GPI抗体复合物、oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物干预刺激大鼠A7r5细胞系不同时间,采用或不采用TLR4抑制剂TAK-242处理。茜素红染色观察细胞钙化结节,实时荧光定量PCR和Western blot法检测平滑肌蛋白22α(SM22α)和RUNX家族转录因子2(RUNX2)的mRNA和蛋白水平,ELISA检测细胞培养上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;A7r5细胞给予TNF-α刺激后,进一步检测SM22α和RUNX2 mRNA和蛋白水平的变化。结果oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物能够促进A7r5细胞钙化结节增多,SM22α表达减少而RUNX2明显上升,促进炎症因子TNF-α的表达,TLR4抑制剂能够缓解这一现象;外加不同浓度的TNF-α能够使A7r5细胞SM22α表达下降,RUNX2表达增加。结论oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物促使A7r5细胞表达炎症因子TNF-α增加,并由此促进细胞发生钙化,同时使细胞由收缩表型向成骨表型发生转变,TLR4参与这一过程。 展开更多

关键词 oxLDL/β2gpi/抗β2gpi抗体复合物 血管平滑肌细胞 肿瘤坏死因子(TNF-α) 血管钙化

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oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物通过激活AKT通路抑制小鼠RAW264.7细胞自噬 被引量：3

5

作者 吴倩倩 周红 +5 位作者 何超 张贵婷 姚雨叶 陈芋丹 张鹏 匡铭 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1057-1063,共7页

目的探讨氧化低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体)复合物对RAW264.7小鼠巨噬细胞自噬的影响及机制。方法分别用培养基、oxLDL、oxLDL/β2GPI复合物、oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物、oxLDL/抗β2GP... 目的探讨氧化低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体)复合物对RAW264.7小鼠巨噬细胞自噬的影响及机制。方法分别用培养基、oxLDL、oxLDL/β2GPI复合物、oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物、oxLDL/抗β2GPI抗体复合物和β2GPI/抗β2GPI抗体复合物处理RAW264.7细胞。采用Western blot法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、P62的蛋白水平,采用携带双荧光蛋白和LC3基因的腺病毒(mRFP-GFP-LC3)感染巨噬细胞检测自噬体形成以及自噬流情况,采用蛋白激酶B(AKT)通路抑制剂LY294002(50μmol/L)预处理,观察AKT通路在oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物介导的RAW264.7细胞自噬中的作用。结果oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物能够降低LC3Ⅱ蛋白水平,减少自噬体数量,增加P62蛋白水平,阻断自噬流;LY294002预处理可部分恢复细胞自噬水平,改善自噬流阻断情况。结论oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物可以通过激活AKT通路抑制RAW264.7细胞的自噬。 展开更多

关键词 氧化低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2gpi/抗β2gpi抗体)复合物 RAW264.7细胞 自噬 AKT

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oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物促进A7r5细胞趋化和迁移及脂质累积 被引量：4

6

作者 欧阳航 周红 +5 位作者 何超 张贵婷 陈芋丹 王婷 王晓燕 张鹏 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1622-1627,共6页

目的探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/β2GPI-Ab)复合物对A7r5大鼠胸主动脉平滑肌细胞迁移、趋化和脂质累积的影响,以及Toll样受体4(TLR4)在其中的作用。方法体外传代细胞株,分别以oxLDL、oxLDL/β2GP... 目的探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/β2GPI-Ab)复合物对A7r5大鼠胸主动脉平滑肌细胞迁移、趋化和脂质累积的影响,以及Toll样受体4(TLR4)在其中的作用。方法体外传代细胞株,分别以oxLDL、oxLDL/β2GPI复合物、β2GPI、抗β2GPI抗体、β2GPI/β2GPI-Ab复合物、oxLDL/β2GPI/β2GPI-Ab复合物刺激经TLR4阻断剂TAK-242预处理和未经预处理的A7r5细胞。提取细胞总RNA,实时荧光定量PCR检测单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、乙酰辅酶A乙酰基转移酶1(ACAT1)的mRNA水平;收集培养上清,ELISA检测细胞上清液中MCP-1、MMP-9的蛋白水平;划痕实验观察A7r5细胞的迁移。以oxLDL、oxLDL/β2GPI/β2GPI-Ab复合物刺激经TAK-242预处理和未经处理的A7r5细胞,用胆固醇试剂盒检测细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)含量并计算胆固醇酯(CE)的含量。结果oxLDL/β2GPI/β2GPI-Ab复合物促进A7r5细胞的迁移,加速胞内胆固醇的累积,促进MCP-1、MMP-9、ACAT1的表达,而TLR4阻断剂TAK-242能够抑制上述现象。结论 oxLDL/β2GPI/β2GPI-Ab复合物能经TLR4依赖的方式促进A7r5细胞趋化、迁移和脂质累积,参与动脉粥样硬化进程。 展开更多

关键词 oxLDL/β2gpi/抗β2gpi抗体(oxLDL/β2gpi/β2gpi-Ab)复合物 Toll样受体4(TLR4) 平滑肌细胞 细胞因子

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β_2GPI/抗β_2GPI抗体复合物激活THP-1细胞内TRIF途径 被引量：5

7

作者 解鸿翔 周红 +5 位作者 王海波 陈东东 王婷 张先梅 夏龙飞 穆原 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1280-1283,1287,共5页

目的:观察β2GPI/抗β2GPI抗体复合物能否激活单核细胞株THP-1的TRIF途径,以探讨TRIF依赖途径在抗磷脂综合征(APS)发病机制中的作用。方法:采用一定剂量β2GPI/抗β2GPI抗体复合物刺激THP-1细胞一定时间,收集细胞总RNA及总蛋白,荧光定量... 目的:观察β2GPI/抗β2GPI抗体复合物能否激活单核细胞株THP-1的TRIF途径,以探讨TRIF依赖途径在抗磷脂综合征(APS)发病机制中的作用。方法:采用一定剂量β2GPI/抗β2GPI抗体复合物刺激THP-1细胞一定时间,收集细胞总RNA及总蛋白,荧光定量PCR(RT-PCR)检测细胞TRIF mRNA水平,Western blot检测细胞TRIF蛋白表达情况;进一步观察TLR4途径抑制剂-TAK-242是否干预β2GPI/抗β2GPI抗体复合物对TRIF的诱导表达以及相关细胞因子IL-6、IL-8、TNF-α的表达。结果:β2GPI/抗β2GPI抗体复合物(100 mg/L)能够诱导THP-1细胞表达TRIF(mRNA及蛋白),并显示时间效应,分别于刺激1 h和2 h时TRIF mRNA及蛋白表达至高峰。TAK-242(5μmol/L)能够明显抑制β2GPI/抗β2GPI抗体复合物对THP-1细胞TRIF的诱导表达,同时抑制IL-6、IL-8、TNF-α等炎症因子的表达。结论:TRIF依赖的TLR4途径参与了β2GPI/抗β2GPI抗体复合物对THP-1细胞的激活,提示其在抗磷脂综合征的病理机制中发挥一定作用。 展开更多

关键词 抗磷脂综合征 β2gpi/抗β2gpi抗体 TLR4 TRIF 炎症因子

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TRAF6在抗β_2GPI/β_2GPI复合物诱导THP-1细胞表达组织因子时的活化 被引量：3

8

作者 许国莹 周红 +4 位作者 文海平 郭东琳 周芳 陈东东 解鸿翔 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期487-490,共4页

目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)在抗β2GPI/β2GPI复合物诱导单核细胞株THP-1表达组织因子(TF)中的作用。方法:采用一定剂量抗β2GPI/β2GPI复合物刺激THP-1细胞一定时间,收集细胞总RNA及总蛋白,实时定量PCR检测细胞TF mRN... 目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)在抗β2GPI/β2GPI复合物诱导单核细胞株THP-1表达组织因子(TF)中的作用。方法:采用一定剂量抗β2GPI/β2GPI复合物刺激THP-1细胞一定时间,收集细胞总RNA及总蛋白,实时定量PCR检测细胞TF mRNA水平,发色底物法检测细胞TF活性;RT-qPCR及Western blot分别检测细胞TRAF6mRNA和蛋白表达情况;进一步采用蛋白酶体抑制剂MG-132,观察是否能够干预抗β2GPI/β2GPI复合物对细胞的刺激效应。结果:抗β2GPI/β2GPI复合物(100 mg/L)能够刺激THP-1细胞表达TF mRNA及活性,与对照相比差异显著(P<0.05);使细胞TRAF6 mRNA和蛋白表达均增加,并显示时间相关性,分别在刺激15 min和30 min时表达至高峰;MG-132(5μmol/L)明显抑制抗β2GPI/β2GPI复合物(100 mg/L)对THP-1细胞TRAF6 mRNA和蛋白的刺激效应及TF的诱导表达。结论:抗β2GPI/β2GPI复合物诱导THP-1细胞表达TF过程中,TRAF6被激活并发挥重要作用。 展开更多

关键词 抗磷脂综合征 抗β2gpi/β2gpi tumor NECROSIS factor receptor-associated factor6 组织因子

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抗β_2GPI抗体与抗磷脂抗体综合征的相关性研究 被引量：7

9

作者 曹文华 杨翰仪 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期233-234,共2页

目的：探讨αβ２ＧＰＩ在抗磷脂抗体综合征中诱导抗体产生的机制。方法：随机抽取活动期ＳＬＥ患者６０例，采用ＥＬＩＳＡ法测定血清中αβ２ＧＰＩ。结果：发现与正常对照组相比ＳＬＥ组αβ２ＧＰＩ水平明显升高（Ｐ＜０００１）... 目的：探讨αβ２ＧＰＩ在抗磷脂抗体综合征中诱导抗体产生的机制。方法：随机抽取活动期ＳＬＥ患者６０例，采用ＥＬＩＳＡ法测定血清中αβ２ＧＰＩ。结果：发现与正常对照组相比ＳＬＥ组αβ２ＧＰＩ水平明显升高（Ｐ＜０００１）。以ｘ＋３ｓ为正常值上限，阳性率高达９５％，显示αβ２ＧＰＩ与ＳＬＥ有显著相关性。结论：αβ２ＧＰＩ是抗磷脂肮体综合征的重要标志。 展开更多

关键词 β2糖尿白-I 抗磷脂抗体 综合征 APS dβ2gpi

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自身抗体的辅助因子β_2GPI分离纯化、鉴定及抗体的制备 被引量：1

10

作者 邓宇斌 陈顺乐 +2 位作者 鲍春德 王元 江尧湖 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第5期303-306,共4页

人们新近研究发现─种血浆糖蛋白β_２ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎＩ（β_２ＧＰＩ）参与抗磷脂抗体（ＡＣＬ）与心磷脂（ＣＬ）的结合反应，要深入研究β_２ＧＰＩ与ＡＣＬ、ＣＬ三者的关系和ＡＣＬ在血栓形成发病机理中的作用，首先需... 人们新近研究发现─种血浆糖蛋白β_２ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎＩ（β_２ＧＰＩ）参与抗磷脂抗体（ＡＣＬ）与心磷脂（ＣＬ）的结合反应，要深入研究β_２ＧＰＩ与ＡＣＬ、ＣＬ三者的关系和ＡＣＬ在血栓形成发病机理中的作用，首先需将其进行分离、纯化、鉴定。用高氯酸沉淀正常人血清弃杂蛋白，再经过ＤＥＡＥ纤维素离子交换，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５凝胶过滤和ＰｒｏｔｅｉｎＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ，Ｈｅｐａｒｉｎ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ二步亲和层析分离纯化了β_２ＧＰＩ，用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳鉴定其分子量为５０ｋＤ，凝胶扫描其纯度为９３．４４％，等电点６．１～６．５，氨基酸组成比例分析纯化样品与标准品β_２ＧＰＩ相符。进─步将纯化鉴定的样品β_２ＧＰＩ与佐剂混匀，免疫新西兰兔，成功地制备了抗β_２ＧＰＩ抗体，用对流免疫电泳鉴定制备的抗体可与纯化的样品、β_２ＧＰＩ标准品形成反应沉淀线，制备的抗体效价大于１∶３２。研究意义在于探讨用免疫生化的方法分离心磷脂，纯化了β_２ＧＰＩ，成功地制备了抗β_２ＧＰＩ抗体，为深入研究β_２ＧＰＩ、ＡＣＬ在血栓形成发病机理中的作用创造了良好的工作基础。 展开更多

关键词 抗磷脂抗体 β2gpi 分离 纯化 鉴定 制备

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PDTC和姜黄素对抗β_2GPI抗体诱导小鼠表达组织因子的影响 被引量：1

11

作者 夏龙飞 巨红妹 +1 位作者 周红 王婷 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期823-827,共5页

目的:本研究拟探讨PDTC和姜黄素对抗β_2GPI抗体诱导小鼠组织因子(Tissue factor,TF)表达的影响。方法:BALB/c小鼠先用PDTC[100 mg/(kg·d)]或/和姜黄素[50 mg/(kg·d)]预处理2 h,再进行腹腔注射anti-β_2GPI(500μg/只),取小... 目的:本研究拟探讨PDTC和姜黄素对抗β_2GPI抗体诱导小鼠组织因子(Tissue factor,TF)表达的影响。方法:BALB/c小鼠先用PDTC[100 mg/(kg·d)]或/和姜黄素[50 mg/(kg·d)]预处理2 h,再进行腹腔注射anti-β_2GPI(500μg/只),取小鼠腹腔巨噬细胞、双侧颈动脉和胸主动脉,超声裂解,收集细胞总RNA和蛋白,实时定量PCR(Real-time q PCR)检测细胞TF mRNA水平,TF活性试剂盒检测TF活性,Western blot方法检测NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65、c-Jun和磷酸化pc-Jun的表达情况。结果:抗β_2GPI抗体能够诱导小鼠腹腔巨噬细胞TF的表达及NF-κB p65和c-Jun/AP-1的磷酸化,与对照相比差异有统计学意义(P<0.05 vs NR-Ig G);PDTC和姜黄素均能抑制抗β_2GPI抗体诱导小鼠TF的表达以及NF-κB p65和cJun/AP-1的磷酸化效应(P<0.05 vs anti-β_2GPI),但是二者没有协同作用。结论:PDTC和姜黄素均能影响抗β_2GPI抗体诱导小鼠TF的表达,表明其具有防治血栓形成的潜力。 展开更多

关键词 抗磷脂综合征 抗β2gpi抗体 PDTC 姜黄素 组织因子

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抗β_2GPI抗体对系统性红斑狼疮患者血栓形成的影响 被引量：1

12

作者 李刚 刘彦虹 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期522-525,共4页

目的:探讨抗β2GPI抗体对系统性红斑狼疮患者血栓形成的作用及对疾病诊断的临床意义。方法:选取系统性红斑狼疮(SLE)并发血栓患者20例,单纯SLE患者30例,正常对照23例,采用AggRAM-四通道血小板聚集仪检测血小板聚集率,用酶联免疫吸附试验... 目的:探讨抗β2GPI抗体对系统性红斑狼疮患者血栓形成的作用及对疾病诊断的临床意义。方法:选取系统性红斑狼疮(SLE)并发血栓患者20例,单纯SLE患者30例,正常对照23例,采用AggRAM-四通道血小板聚集仪检测血小板聚集率,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗β2GPI抗体。结果:SLE血栓组患者和SLE非血栓组患者抗β2GPI抗体滴度和抗体阳性率都显著高于正常对照组(P<0.05),并且SLE血栓组患者抗β2GPI抗体滴度和抗体阳性率高于SLE非血栓组患者;SLE血栓组患者血小板聚集率比SLE非血栓组和正常对照组显著升高(P<0.05),SLE非血栓组患者血小板聚集率和正常对照组没有统计学差异;所有SLE患者中抗β2GPI抗体阳性组比抗体阴性组血小板聚集率升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:抗β2GPI抗体和血小板聚集率升高可为SLE患者继发血栓性疾病提供辅助诊断;抗β2GPI抗体促进SLE患者血小板聚集率上升,加速SLE患者血栓形成。 展开更多

关键词 抗β2gpi抗体 系统性红斑狼疮 血小板聚集 血栓形成

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抗β2GPI抗体促进载脂蛋白E缺陷小鼠血管炎症及血栓相关分子的表达 被引量：10

13

作者 朱晓洁 周红 +5 位作者 王晓燕 蔡谦谦 何超 夏龙飞 张贵婷 欧阳航 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期295-299,共5页

目的探讨抗β2糖蛋白I(β2GPI)抗体在载脂蛋白E缺陷(ApoE^(-/-))小鼠表达动脉粥样硬化相关炎症因子和血栓相关分子过程中的作用。方法将ApoE^(-/-)小鼠实施颈动脉套环手术后,随机分为生理盐水组、100μg抗β2GPI抗体组、100μg同源对照... 目的探讨抗β2糖蛋白I(β2GPI)抗体在载脂蛋白E缺陷(ApoE^(-/-))小鼠表达动脉粥样硬化相关炎症因子和血栓相关分子过程中的作用。方法将ApoE^(-/-)小鼠实施颈动脉套环手术后,随机分为生理盐水组、100μg抗β2GPI抗体组、100μg同源对照抗体(兔IgG)组以及100μgβ2GPI/抗β2GPI抗体复合物组。各组均给以高脂饮食,且每7 d腹腔注射1次相应刺激剂,6周后处死小鼠。采用HE染色观察套环侧颈动脉阻塞情况,并以免疫组织化学染色检测套环侧颈动脉TLR4、组织因子(TF)和冯·维勒布兰德因子(vWF)的表达。采用实时荧光定量PCR检测主动脉的白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA水平。结果 HE染色结果显示抗体组阻塞最为明显,免疫组织化学染色结果显示抗体组套环侧颈动脉TLR4、TF和vWF表达上调,抗体组主动脉IL-1β和TNF-α的mRNA水平明显高于其他3组。结论抗β2GPI抗体通过上调小鼠动脉血管表达炎症因子IL-1β和TNF-α,血栓相关分子TF和vWF以及TLR4的表达,促进动脉粥样斑块形成。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 抗β2gpi抗体 炎症 组织因子 冯·维勒布兰德因子

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MAPKs在anti-β_2 GPI/β_2 GPI刺激THP-1细胞表达TF过程中的作用探讨 被引量：2

14

作者 陈东东 周红 +4 位作者 解鸿翔 张先梅 夏龙飞 王婷 王海波 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期99-103,共5页

目的:探讨丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinases,MAPKs)在anti-β2 GPI/β2 GPI复合物诱导单核细胞株THP-1表达组织因子(TF)中的活化及其作用。方法:利用荧光定量PCR(Real-time PCR)、TF活性试剂盒等分别检测anti-β2 ... 目的:探讨丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinases,MAPKs)在anti-β2 GPI/β2 GPI复合物诱导单核细胞株THP-1表达组织因子(TF)中的活化及其作用。方法:利用荧光定量PCR(Real-time PCR)、TF活性试剂盒等分别检测anti-β2 GPI/β2 GPI复合物诱导THP-1细胞表达TF mRNA及TF活性,Western blot检测细胞表达p38、磷酸化-p38(p-p38)、ERK1/2、磷酸化-ERK1/2(p-ERK1/2)、JNK、磷酸化-JNK(p-JNK)的情况。进一步采用p38、ERK1/2、JNK抑制剂(SB203580、U0126、SP600125)观察是否能阻断anti-β2 GPI/β2 GPI复合物诱导THP-1细胞表达TF。结果:Anti-β2 GPI/β2 GPI复合物(100μg/ml)能够显著增强THP-1细胞表达TF,并使p-p38、p-ERK1/2、p-JNK水平显著升高(P<0.05 vs control);其引发的MAPKs磷酸化具有时间效应性,均在刺激30分钟时达到高峰;对应的特异抑制剂SB203580(10μmol/L)、U0126(5μmol/L)、SP600125(90 nmol/L)单独或合并处理THP-1细胞后,anti-β2 GPI/β2 GPI复合物诱导细胞TF mRNA表达及TF活性的效应明显被阻断(P<0.01 vs control)。结论:Anti-β2 GPI/β2 GPI复合物诱导THP-1细胞表达TF过程中,MAPKs被激活进而发挥重要作用。 展开更多

关键词 抗磷脂综合征 Anti-β2 gpi/β2 gpi 丝裂原活化蛋白激酶 组织因子

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信号分子IRAK1/4在antiβ-2GPI/β2GPI复合物诱导THP-1细胞表达TF中的作用探讨 被引量：1

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作者 文海平 周红 +4 位作者 许国莹 郭东琳 周芳 陈东东 解鸿翔 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期295-299,共5页

目的:探讨IRAK1和IRAK4在antiβ-2GPI/β2GPI复合物诱导单核细胞株THP-1表达组织因子(TF)中的作用。方法:利用荧光定量PCR(Real-time PCR)、TF活性试剂盒分别检测THP-1细胞表达TF mRNA及TF活性;Western blot检测anti-β2GPI/β2GPI复合... 目的:探讨IRAK1和IRAK4在antiβ-2GPI/β2GPI复合物诱导单核细胞株THP-1表达组织因子(TF)中的作用。方法:利用荧光定量PCR(Real-time PCR)、TF活性试剂盒分别检测THP-1细胞表达TF mRNA及TF活性;Western blot检测anti-β2GPI/β2GPI复合物诱导THP-1细胞表达IRAK1、磷酸化-IRAK1(p-IRAK1)、IRAK4情况;观察IRAK1/4抑制物是否干预anti-β2GPI/β2GPI复合物诱导THP-1表达TF。结果:Antiβ-2GPI/β2GPI复合物(100μg/ml)诱导THP-1细胞表达TF显著增加(P<0.05 vs control);Antiβ-2GPI/β2GPI复合物(100μg/ml)刺激THP-1细胞表达IRAK1、p-IRAK1、IRAK4(蛋白)显著升高(P<0.05 vscontrol);IRAK1/4抑制物(50μmol/L)能够阻断antiβ-2GPI/β2GPI复合物(100μg/ml)诱导THP-1表达TF及IRAK1磷酸化的效应。结论:antiβ-2GPI/β2GPI复合物诱导THP-1细胞表达TF过程中,信号分子IRAK1/4被激活进而发挥重要作用。 展开更多

关键词 抗磷脂综合征 antiβ-2gpi/β2gpi IRAK1 IRAK4 组织因子

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氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体复合物促进人脐静脉内皮细胞活性氧生成并诱导其凋亡 被引量：3

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作者 陈芋丹 周红 +6 位作者 何超 王婷 张贵婷 张鹏 王韧 吴倩倩 姚雨叶 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期223-229,共7页

目的探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/aβ2GPI)复合物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的影响以及ROS活性氧(ROS)在其中的作用。方法分别用β2GPI、 aβ2GPI、β2GPI/aβ2GPI复合物、 oxLDL、 oxLDL/β2... 目的探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/aβ2GPI)复合物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的影响以及ROS活性氧(ROS)在其中的作用。方法分别用β2GPI、 aβ2GPI、β2GPI/aβ2GPI复合物、 oxLDL、 oxLDL/β2GPI复合物、 oxLDL/β2GPI/兔IgG(R-IgG)复合物、 oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物刺激HUVEC,利用Western blot法检测凋亡相关蛋白BAX、 Bcl2和裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)的蛋白水平;异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡率、二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)标记结合流式细胞术检测细胞ROS水平; CCK-8法检测各处理组对HUVEC活力的影响;采用抗氧化剂罗布麻宁(apocynin)或二苯基碘氯化物(DPI)预处理后观察ROS水平的改变以及对oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物诱导的HUVEC凋亡的影响。结果 oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物能显著降低HUVEC的活力,增加细胞BAX、 c-caspase-3蛋白水平,降低Bcl2蛋白水平,促进HUVEC凋亡; oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物引起细胞ROS水平升高,抗氧化剂处理后,细胞内ROS水平降低,细胞凋亡减少。结论 oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物可以通过提高ROS来诱导HUVEC凋亡。 展开更多

关键词 氧化型低密度脂蛋白β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2gpi/aβ2gpi)复合物 活性氧(ROS) 人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 凋亡

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β2-糖蛋白Ⅰ及其抗体复合物在APS发生发展及临床诊断治疗中的作用 被引量：5

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作者 赵伟 刘庆平 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期923-930,共8页

抗磷脂综合征(antiphospholipid syndrome,APS)的临床特征为动静脉血栓形成或习惯性流产。血清学特征为抗磷脂抗体(antiphospholipid antibody,aPL Ab)持续阳性等。目前,对APS治疗的主要方法为针对血小板的抗凝血治疗。然而,治疗过程中... 抗磷脂综合征(antiphospholipid syndrome,APS)的临床特征为动静脉血栓形成或习惯性流产。血清学特征为抗磷脂抗体(antiphospholipid antibody,aPL Ab)持续阳性等。目前,对APS治疗的主要方法为针对血小板的抗凝血治疗。然而,治疗过程中抗凝强度和持续时间难以把握,且对中风等重度患者疗效甚微。β2糖蛋白Ⅰ(β2glycoprotein I,β2-GPI)是一种可与阴性磷脂结合的血浆糖蛋白,由5个结构域组成。第5结构域在与氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,oxLDL)等阴性磷脂结合后,改变自身构象并暴露位于第1结构域的抗原位点,随后被自身抗体特异性识别形成三元抗体复合物,激活血栓形成相关信号通路,促进APS的发生发展。因此,深入研究β2-GPI的分子结构及其在APS发生发展中的作用具有重要意义。本文对β2-GPI的结构,β2-GPI抗体复合物的形成过程,及其在APS发生发展和治疗诊断中的作用进行了阐述。最后,以β2-GPI为基础对APS的诊断和治疗方向进行了展望,旨在为β2-GPI作为APS精准治疗靶点药物的研发提供一定的参考。 展开更多

关键词 β2糖蛋白Ⅰ 抗体复合物 抗磷脂综合征 信号通路

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ox-LDL/β2GPI/aβ2GPI复合物促进小鼠RAW264.7细胞凋亡和炎症因子表达 被引量：2

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作者 匡铭 周红 +3 位作者 张贵婷 何超 吴倩倩 姚雨叶 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期1-8,共8页

目的 探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(ox-LDL/β2GPI/aβ2GPI)复合物对小鼠RAW264.7细胞凋亡和炎症因子表达的影响及机制。方法 分别用培养基、ox-LDL、β2GPI/抗β2GPI抗体复合物、ox-LDL/β2GPI复合物、ox-LDL/... 目的 探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(ox-LDL/β2GPI/aβ2GPI)复合物对小鼠RAW264.7细胞凋亡和炎症因子表达的影响及机制。方法 分别用培养基、ox-LDL、β2GPI/抗β2GPI抗体复合物、ox-LDL/β2GPI复合物、ox-LDL/抗β2GPI抗体复合物和ox-LDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物处理细胞。用TAK-242阻断Toll样受体4(TLR4)、雷帕霉素(rapamycin)阻断哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)探究相关通路的作用。最后,用不同浓度的TNF-α刺激细胞。用凋亡试剂盒检测细胞的凋亡,实时定量PCR检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)的mRNA表达,Western blot法检测TNF-α、IL-1β、裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)的蛋白水平。结果 ox-LDL/β2GPI/aβ2GPI复合物能够诱导细胞凋亡、Bcl2表达降低、c-caspase-3表达增加,还可促进TNF-α和IL-1β表达,通路抑制剂可部分减轻凋亡水平和炎症因子表达;一定浓度的TNF-α可促进细胞凋亡。结论 ox-LDL/β2GPI/aβ2GPI复合物通过TLR4、mTOR通路诱导RAW264.7细胞表达炎症因子,促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(ox-LDL/β2gpi/aβ2gpi)复合物 RAW264.7细胞 细胞凋亡 炎症因子 Toll样受体4(TLR4) 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)

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β2GPI/aβ2GPI通过激活TLR4抑制THP-1巨噬细胞对氧化型低密度脂蛋白的摄取 被引量：1

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作者 何超 周红 +6 位作者 张贵婷 陈芋丹 张鹏 王韧 吴倩倩 姚雨叶 匡铭 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1063-1069,共7页

目的探讨β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体复合物(β2GPI/aβ2GPI)对巨噬细胞脂质摄取功能和B型清道夫受体CD36表达的影响,以及Toll样受体4(TLR4)在该过程中的作用。方法用100 ng/mL佛波酯(PMA)将THP-1人单核细胞诱导为THP-1巨噬细胞,通过... 目的探讨β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体复合物(β2GPI/aβ2GPI)对巨噬细胞脂质摄取功能和B型清道夫受体CD36表达的影响,以及Toll样受体4(TLR4)在该过程中的作用。方法用100 ng/mL佛波酯(PMA)将THP-1人单核细胞诱导为THP-1巨噬细胞,通过形态学变化和1,1'-二十八烷基-3,3,3',3'-四甲基吲哚碳花菁高氯酸盐标记的氧化低密度脂蛋白(DiI-oxLDL)吞噬试验加以鉴定。用RPMI1640培养液、β2GPI、抗β2糖蛋白I抗体(aβ2GPI)和β2GPI/aβ2GPI处理THP-1巨噬细胞,实时荧光定量PCR和Western blot法检测TLR4 mRNA和蛋白水平。用RPMI1640培养液、氧化低密度脂蛋白(oxLDL)、oxLDL联合β2GPI/aβ2GPI和oxLDL联合LPS处理THP-1巨噬细胞,油红O染色观察胞内脂质积累,免疫荧光细胞化学染色法检测CD36的表达,实时荧光定量PCR检测CD36 mRNA水平,Western blot法检测CD36蛋白水平。利用TLR4阻断剂TAK-242(1μg/mL)预处理THP-1巨噬细胞,观察抑制TLR4对上述刺激下THP-1巨噬细胞脂质积累和CD36表达的影响。结果PMA处理后,THP-1细胞呈现巨噬细胞形态并具备脂质吞噬能力;与RPMI1640相比,β2GPI/aβ2GPI处理可显著增加THP-1巨噬细胞TLR4表达;与单独oxLDL处理相比,oxLDL联合β2GPI/aβ2GPI能够抑制THP-1巨噬细胞的脂质积累和CD36表达,阻断TLR4可以部分逆转这一现象。结论β2GPI/aβ2GPI能激活TLR4抑制巨噬细胞对oxLDL的摄取和CD36表达。 展开更多

关键词 β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体复合物(β2gpi/aβ2gpi) 氧化型低密度脂蛋白(oxLDL) Toll样受体4(TLR4) CD36 THP-1巨噬细胞

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提取人血浆中β2GPI的一种简便高效方法及其在自身免疫病诊断中的应用研究 被引量：3

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作者 李治寰 胡绍良 +1 位作者 卜春亚 蔡国平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期834-836,共3页

目的:利用聚乙二醇(PEG)4000沉淀配合亲和层析和离子交换层析的方法从人血浆中提取β2GPI蛋白,并研究相关的临床意义。方法:用180 g/L的PEG4000从人血浆沉淀含β2GPI的组分,所得组分重溶后进行Heparin-Sepha-rose CL-6B亲和柱层析和Sour... 目的:利用聚乙二醇(PEG)4000沉淀配合亲和层析和离子交换层析的方法从人血浆中提取β2GPI蛋白,并研究相关的临床意义。方法:用180 g/L的PEG4000从人血浆沉淀含β2GPI的组分,所得组分重溶后进行Heparin-Sepha-rose CL-6B亲和柱层析和Source 15 S离子交换柱层析,用分离纯化的β2GPI和购买的纤溶酶原(Plasminogen,PLG)建立反复妊娠丢失患者血清抗体抗β2GPI和抗PLG抗性的ELISA检测方法。结果:经SDS-PAGE和Western blot检测,本方法分离提取得到的蛋白为纯度大于95%的β2GPI。抗β2GPI和抗PLG抗性的检测结果呈正相关关系(r=0.750),且两者检出的阳性率无统计学意义(P>0.05)。结论:结合了PEG沉淀和两步层析方法可以有效地从人血浆中提取得到β2GPI蛋白用于相关检测和研究。 展开更多

关键词 β2gpi蛋白 纯化 抗磷脂综合征 诊断

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