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海洋细菌假交替单胞菌DL-6来源β-N-乙酰己糖胺酶异源表达及酶学表征被引量：1: 1; 作者刘向歌赵子琪 +3 位作者吴家葳于爽迟乃玉王晓辉《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第16期68-76,共9页; 从海洋细菌假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.)DL-6中克隆β-N-乙酰己糖胺酶基因(PsHex),扩增至pET-28a(+),并成功在大肠杆菌BL21(DE3)中异源表达,经镍-次氮基三乙酸亲和层析纯化得到纯蛋白。结果表明:PsHex编码876个氨基酸,分子质量... 展开更多; 关键词 β-n-乙酰己糖胺酶假交替单胞菌表达与纯化酶学性质; 在线阅读下载PDF 职称材料

朱砂叶螨β-N-乙酰己糖胺酶基因TecHEX3的克隆及在蜕皮发育中的作用: 2; 作者刘铭格茸楚姆卜春亚《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期634-642,共9页; 【目的】本研究旨在探明朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus几丁质降解通路中的关键酶β-N-乙酰己糖胺酶基因(TecHEX3)在螨蜕皮发育中的功能,为开发新型安全的防治害螨生物农药奠定基础。【方法】利用PCR克隆朱砂叶螨TecHEX3,并进行生物... 展开更多; 关键词朱砂叶螨 β-n-乙酰己糖胺酶 20-羟基蜕皮酮差异表达基因 RANi; 在线阅读下载PDF 职称材料

通过RNA干扰研究亚洲玉米螟乙酰己糖胺酶的潜在靶标性被引量：5: 3; 作者刘凤翊杨青《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期145-152,共8页; 溶酶体β-N-乙酰己糖胺酶(EC 3.2.1.52)催化水解糖复合物,释放单分子乙酰己糖胺,在昆虫生长发育过程中发挥重要作用。OfHEX2基因(GenBank登陆号为EF469203)是已从亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis(Guenée)5龄幼虫体内获得的基因,其... 展开更多; 关键词 β-n-乙酰己糖胺酶农药靶标 RNA干扰亚洲玉米螟; 在线阅读下载PDF 职称材料

双酶协同降解胶体几丁质及其作用机制被引量：1: 4; 作者吴昊刘嘉荔 +2 位作者杨静文胡雪芹张洪斌《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第6期74-80,共7页; 建立一种几丁质酶(chitinase,ChiA)和β-N-乙酰基己糖胺酶HJ5N协同催化体系,可实现一步反应降解胶体几丁质制备N-乙酰氨基葡萄糖(N-acetylglucosamine,GlcNAc),探讨不同因素对双酶协同催化体系的影响和双酶协同作用机制。结果表明,双酶... 展开更多; 关键词几丁质酶 β-n-乙酰基己糖胺酶 N-乙酰氨基葡萄糖双酶协同催化胶体几丁质; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名海洋细菌假交替单胞菌DL-6来源β-N-乙酰己糖胺酶异源表达及酶学表征被引量：1: 1; 作者刘向歌赵子琪吴家葳于爽迟乃玉王晓辉; 机构大连大学生命健康学院辽宁省海洋微生物工程技术研究中心大连大学医学院北京百奥赛图基因生物技术有限公司; 出处《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第16期68-76,共9页; 基金中央引导地方科技发展资金项目(110013) 国家自然科学基金青年科学基金项目(31500039) 大连市青年科技之星项目(2017RQ155)。; 文摘从海洋细菌假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.)DL-6中克隆β-N-乙酰己糖胺酶基因(PsHex),扩增至pET-28a(+),并成功在大肠杆菌BL21(DE3)中异源表达,经镍-次氮基三乙酸亲和层析纯化得到纯蛋白。结果表明:PsHex编码876个氨基酸,分子质量约99.46 kDa,理论等电点5.65,序列对比分析表明,Ps Hex属于糖苷水解酶GH20家族;Ps Hex蛋白最适温度30℃,最适pH 8.5,比活力11.30 U/mg,且在20℃、pH 7.5时稳定性最高;重组蛋白可降解琼脂、葡聚糖、可溶性淀粉、卡拉胶等多种底物;Na^(+)、Mg^(2+)、Fe^(3+)、K^(+)、Ca^(2+)、二硫苏糖醇、吐温-80、乙二胺四乙酸、β-巯基乙醇对酶有激活作用;Ps Hex以对硝基苯基-β-D-乙酰氨基葡萄糖苷为底物的米氏常数(K_(m))为2.523 mol/L、转化效率(K_(cat))为79.035 min^(-1)、最大反应速率(v_(max))为2.081 U/mg、K_(cat)/K_(m)=31.326。该研究为酶法降解几丁质产生N-乙酰葡萄糖胺的生产应用提供了理论参考。; 关键词 β-n-乙酰己糖胺酶假交替单胞菌表达与纯化酶学性质; Keywords β-n-acetylhexosaminidase Pseudoalteromonas purification and expression enzymatic properties; 分类号 TS201.3 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名朱砂叶螨β-N-乙酰己糖胺酶基因TecHEX3的克隆及在蜕皮发育中的作用: 2; 作者刘铭格茸楚姆卜春亚; 机构北京农学院生物与资源环境学院; 出处《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期634-642,共9页; 基金北京市自然科学基金项目(6212004) 国家自然科学基金项目(31670648) 北京农学院学位与研究生教育改革与发展项目:北京农学院大学生科研训练项目。; 文摘【目的】本研究旨在探明朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus几丁质降解通路中的关键酶β-N-乙酰己糖胺酶基因(TecHEX3)在螨蜕皮发育中的功能,为开发新型安全的防治害螨生物农药奠定基础。【方法】利用PCR克隆朱砂叶螨TecHEX3,并进行生物信息学分析。利用RT-qPCR检测TecHEX3在朱砂叶螨不同发育阶段(卵、幼螨、若螨和成螨)以及饲喂蜕皮激素20-羟基蜕皮酮(20-hydroxyecdysone,20E)的若螨中的表达量。通过饲喂法进行朱砂叶螨雌成螨和若螨TecHEX3的RNAi,分析沉默效率,统计并观察朱砂叶螨若螨的死亡率和致死表型。【结果】成功克隆了朱砂叶螨TecHEX3(GenBank登录号:OR413561),其编码蛋白具有典型的20糖苷水解酶家族结构特征;系统发育树表明TecHEX3与二斑叶螨T.urticae TuHEX3的亲缘性最高且均属于β-N-乙酰己糖胺酶Ⅳ型。TecHEX3在朱砂叶螨不同发育阶段都有表达,在成螨期表达量最高;饲喂500 ng/μL的20E对TecHEX3的表达有最好的诱导效果。RNAi结果表明饲喂ds TecHEX3时朱砂叶螨若螨TecHEX3表达量较对照组(饲喂ds EGFP)显著下调81%;沉默TecHEX3导致朱砂叶螨蜕皮困难或蜕皮后形态异常,致死率达40.58%。【结论】TecHEX3参与朱砂叶螨几丁质降解过程,并在朱砂叶螨的蜕皮发育过程中发挥重要作用。; 关键词朱砂叶螨 β-n-乙酰己糖胺酶 20-羟基蜕皮酮差异表达基因 RANi; Keywords Tetranychus cinnabarinus beta-n-acetylhexosaminase 20-hydroxyecdysone differentially expressed gene RNAi; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学] S433.7 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名通过RNA干扰研究亚洲玉米螟乙酰己糖胺酶的潜在靶标性被引量：5: 3; 作者刘凤翊杨青; 机构大连理工大学生命科学与技术学院; 出处《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期145-152,共8页; 基金国家重大基础研究计划("973"计划)项目(2010CB126100); 文摘溶酶体β-N-乙酰己糖胺酶(EC 3.2.1.52)催化水解糖复合物,释放单分子乙酰己糖胺,在昆虫生长发育过程中发挥重要作用。OfHEX2基因(GenBank登陆号为EF469203)是已从亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis(Guenée)5龄幼虫体内获得的基因,其编码产物是β-N-乙酰己糖胺酶OfHex2。为考察OfHex2能否成为农药设计的分子靶标,研究了RNA干扰沉默OfHEX2基因对亚洲玉米螟生长发育的影响,同时探索了小分子抑制剂2-乙酰氨基-1,2-二脱氧野尻霉素(2-acetamido-1,2-dideoxynojirimycin,2-ADN)和咪唑对OfHex2的体外抑制效果。结果表明:向5龄第1天的亚洲玉米螟幼虫注射dsOfHEX2,能够显著干扰OfHEX2基因在幼虫期的正常表达,但不能干扰其在蛹期的表达;RNA干扰导致OfHEX2基因在亚洲玉米螟5龄第3天幼虫中的表达水平仅为对照组的7.1%,并导致预蛹的腹部无法正常收缩,蛹和成虫的附件发育畸形,其中15%畸形蛹因发育不正常而死亡。研究结果表明,OfHex2在昆虫发育中具有重要的生理意义,其功能缺失具有致畸和间接致死效果,因此可能成为新型农药设计的潜在靶标。抑制作用研究结果表明,小分子2-ADN是OfHex2的竞争性抑制剂,酶活力抑制常数Ki值为0.94±0.035μmol/L。; 关键词 β-n-乙酰己糖胺酶农药靶标 RNA干扰亚洲玉米螟; Keywords β-n-acetyl-D-hexosaminidase insecticide target RNA interference Ostrinia furnacalis; 分类号 Q52 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名双酶协同降解胶体几丁质及其作用机制被引量：1: 4; 作者吴昊刘嘉荔杨静文胡雪芹张洪斌; 机构合肥工业大学食品与生物工程学院; 出处《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第6期74-80,共7页; 基金国家自然科学基金面上项目(81573399) 2019年度合肥工业大学智能制造技术研究院科技成果转化及产业化重点项目(IMICZ2019004) 安徽省自然科学基金项目(1908085QC130)。; 文摘建立一种几丁质酶(chitinase,ChiA)和β-N-乙酰基己糖胺酶HJ5N协同催化体系,可实现一步反应降解胶体几丁质制备N-乙酰氨基葡萄糖(N-acetylglucosamine,GlcNAc),探讨不同因素对双酶协同催化体系的影响和双酶协同作用机制。结果表明,双酶协同催化体系的最适反应温度为30℃,最适反应pH值为6,ChiA与HJ5N添加比(加酶量(U)计)为2∶1。在最优反应条件下以90 g/L虾壳几丁质(胶体几丁质30.3 g/L)为底物时,GlcNAc产量为17.55 mg/mL,收率达到58%。ChiA与HJ5N的协同作用机制主要表现在HJ5N可保证中间产物几丁二糖(GlcNAc)_(2)快速被转化为GlcNAc,有效解除(GlcNAc)_(2)对ChiA的抑制作用,从而实现双酶协同高效催化降解胶体几丁质制备GlcNAc。这为酶法降解胶体几丁质制备GlcNAc的工业应用提供了一种有效策略。; 关键词几丁质酶 β-n-乙酰基己糖胺酶 N-乙酰氨基葡萄糖双酶协同催化胶体几丁质; Keywords chitinase β-n-acetylhexosaminase N-acetylglucosamine synergistic enzymatic catalysis colloidal chitin; 分类号 Q814 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	海洋细菌假交替单胞菌DL-6来源β-N-乙酰己糖胺酶异源表达及酶学表征	刘向歌赵子琪吴家葳于爽迟乃玉王晓辉	《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2024	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	朱砂叶螨β-N-乙酰己糖胺酶基因TecHEX3的克隆及在蜕皮发育中的作用	刘铭格茸楚姆卜春亚	《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心	2024	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	通过RNA干扰研究亚洲玉米螟乙酰己糖胺酶的潜在靶标性	刘凤翊杨青	《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	5	在线阅读下载PDF 职称材料
4	双酶协同降解胶体几丁质及其作用机制	吴昊刘嘉荔杨静文胡雪芹张洪斌	《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2022	1	在线阅读下载PDF 职称材料