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源于奶酪的产β-半乳糖苷酶乳酸片球菌的筛选及其合成低聚半乳糖特性
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作者 李欣 张秋涵 +4 位作者 马子尧 关波 胡有贞 李谞 倪永清 《食品工业科技》 北大核心 2025年第6期170-178,共9页
为了给益生性低聚半乳糖(GOS)的合成提供新的乳酸菌酶源,本研究从新疆传统奶酪中筛选具有高转糖苷活性的β-半乳糖苷酶产酶菌株。在以乳糖为单一碳源的MRS固体培养基中加入显色剂5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(X-gal),以菌落生长颜色... 为了给益生性低聚半乳糖(GOS)的合成提供新的乳酸菌酶源,本研究从新疆传统奶酪中筛选具有高转糖苷活性的β-半乳糖苷酶产酶菌株。在以乳糖为单一碳源的MRS固体培养基中加入显色剂5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(X-gal),以菌落生长颜色进行初筛,以粗酶液酶活性以及转糖苷反应混合物的薄层色谱(TLC)进行复筛,结合其形态学、生理生化特征及16S rRNA序列同源性分析对产转糖苷活性的β-半乳糖苷酶菌株进行鉴定。单因素实验确定菌株的产酶条件和粗酶液的转糖苷反应条件,高效液相色谱分析转糖苷反应产物的组分及含量。筛选获得产转糖苷活性β-半乳糖苷酶的菌株6株,其中Pediococcus acidilactici Y1的产酶水平和转糖苷活性最高。单因素实验结果表明,P.acidilactici Y1在20 mg/mL乳糖,37℃培养18 h时,产酶水平最高可达(15.52±0.34)U/g。在初始乳糖浓度300 mg/mL,加酶量4.24 U/mL,50℃反应28 h时,GOS得率最高为38.4%±0.56%(w/w),乳糖残留量为30.9%±0.44%(w/w)。其中转移二糖、转移三糖以及转移四糖的质量分数分别为15.6%±0.21%(w/w)、18.3%±0.15%(w/w)和4.5%±0.01%(w/w)。以上结果表明,P.acidilactici Y1是一株产转糖苷活性β-半乳糖苷酶的新菌株,在益生性GOS的合成领域具有应用前景。 展开更多
关键词 Β-乳糖 转糖活性 低聚乳糖 乳酸片球菌 奶酪
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Bifidobacterium bifidum ATCC 29521 β-半乳糖苷酶的生物信息学分析、异源表达及其酶学性质
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作者 符长春 杨瑞金 仝艳军 《食品科学》 北大核心 2025年第6期98-107,共10页
本研究旨在为低聚半乳糖(galactooligosaccharide,GOS)的合成提供新的双歧杆菌酶源,对Bifidobacterium bifidum ATCC 29521的β-半乳糖苷酶(β-gal^(^(ATCC29521)))进行生物信息学分析,并在Escherichia coli BL21(DE3)中实现异源表达。... 本研究旨在为低聚半乳糖(galactooligosaccharide,GOS)的合成提供新的双歧杆菌酶源,对Bifidobacterium bifidum ATCC 29521的β-半乳糖苷酶(β-gal^(^(ATCC29521)))进行生物信息学分析,并在Escherichia coli BL21(DE3)中实现异源表达。研究β-gal^(ATCC29521)的异源表达条件和发酵优化条件、酶学性质及其在乳清体系合成GOS的应用。生物信息学分析表明β-gal^(ATCC29521)属于糖苷水解酶家族2,不存在信号肽和跨膜区。发酵优化实验结果表明,E.coli BL21(DE3)-pET28a-β-gal^(ATCC29521)重组菌在含有10 g/L蔗糖、12 g/L胰蛋白胨、24 g/L酵母粉的培养基中,且0.05 mmol/L的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷在27℃诱导培养16 h后,酶活力可达318.03 U/mL。粗酶液经过镍柱亲和层析得到电泳纯蛋白,其最适pH值和最适温度分别为7.5和40℃。β-gal^(ATCC29521)纯化酶在温度10~30℃和pH 6.5~9.0范围内表现出良好的稳定性。Mn^(2+)和Mg^(2+)可显著提高酶活性,Cu^(2+)和Fe^(3+)则显著抑制酶活性。以乳清为底物合成GOS时,该酶的产率为29.83%。研究结果表明β-gal^(ATCC29521)在GOS的制备领域中具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 低聚乳糖 Β-乳糖 Bifidobacterium bifidum ATCC 29521 发酵优化 学性质
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β-半乳糖苷酶的筛选及低聚半乳糖制备工艺优化研究
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作者 刘思琪 郭玉娟 +1 位作者 刘彤 那治国 《中国乳品工业》 北大核心 2025年第2期51-58,共8页
β-半乳糖苷酶催化乳糖水解得到的低聚半乳糖(Galactooligosaccharides,GOS),具有维持肠道菌群稳定、免疫调节和抗炎等生物功能。文章通过酶活力以及转糖苷活力的测定,确定乳酸克鲁维酵母来源的β-半乳糖苷酶制备GOS。通过单因素试验得... β-半乳糖苷酶催化乳糖水解得到的低聚半乳糖(Galactooligosaccharides,GOS),具有维持肠道菌群稳定、免疫调节和抗炎等生物功能。文章通过酶活力以及转糖苷活力的测定,确定乳酸克鲁维酵母来源的β-半乳糖苷酶制备GOS。通过单因素试验得到不同的加酶量、反应时间、反应温度和反应pH对GOS产率有显著性影响,而不同的底物浓度影响不大。利用响应面试验优化GOS产率,获得该酶水解乳糖转化合成GOS的最佳工艺条件。结果表明:底物浓度200 mg/mL、加酶量0.030%、反应温度36.9℃、反应时间2.5 h、反应pH值6.7为最优条件。GOS产率可达(12.61±0.17)%。优化后的工艺参数可为GOS的定向合成提供理论依据。 展开更多
关键词 低聚乳糖 Β-乳糖 响应面 GOS产率
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α-半乳糖苷酶对断奶仔猪生长性能、血清生化指标及养分利用率的影响
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作者 丁孟松 《中国饲料》 北大核心 2025年第2期33-36,共4页
文章旨在研究日粮中添加不同剂量的α-半乳糖苷酶对断奶仔猪的生长性能、血清免疫指标和养分利用率的影响。试验选取健康状况和体重一致的(38±1)日龄断奶仔猪140头,随机分为4组,每组5个重复,每个重复7头仔猪,预试期7 d和正试期40 ... 文章旨在研究日粮中添加不同剂量的α-半乳糖苷酶对断奶仔猪的生长性能、血清免疫指标和养分利用率的影响。试验选取健康状况和体重一致的(38±1)日龄断奶仔猪140头,随机分为4组,每组5个重复,每个重复7头仔猪,预试期7 d和正试期40 d。日粮中α-半乳糖苷酶的添加量分别是0、100、200和300 U/kg。结果发现,与对照组相比,处理组对断奶仔猪的末重、平均日增重以及料重比均有提升,其中添加200 U/kgα-半乳糖苷酶对提高断奶仔猪的生长性能效果最显著(P <0.05),断奶仔猪平均日增重比对照组提高8.51%,料重比比对照组降低8.79%;其次,处理组对断奶仔猪血清中的IgA、IgG、IgM等生化指标均有提高,其中添加200 U/kgα-半乳糖苷酶的处理组免疫指标与对照组相比差异最显著(P <0.05),IgA、IgG、IgM分别提高12.21%、21.97%和24.39%。最后,处理组对断奶仔猪的养分利用率也有提升,其中添加200 U/kgα-半乳糖苷酶的处理组养分利用率与对照组相比差异最显著(P <0.05),粗纤维利用率和粗蛋白质利用率分别比对照组提高7.54%和9.48%。结果表明,在日粮中添加200 U/kg的α-半乳糖苷酶,对断奶仔猪的生长性能、血清生化指标及养分利用率的效率最佳。 展开更多
关键词 Α-乳糖 仔猪 生长性能 血清生化指标 养分利用率
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β-半乳糖苷酶的固定化及其合成低聚半乳糖研究
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作者 李智慧 赖田甜 +4 位作者 张敏 郝瑞敏 姚梦珂 赵华 杨贞耐 《食品科学技术学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第6期102-112,共11页
选用壳聚糖、海藻酸钠、海藻酸钠/明胶、海藻酸钠/羧甲基纤维素为固定化载体材料,探究β-半乳糖苷酶的固定化方法,并将获得的适宜固定化酶应用于合成低聚半乳糖(galacto-oligosaccharide,GOS)。结果表明,较优固定化载体为壳聚糖,β-半... 选用壳聚糖、海藻酸钠、海藻酸钠/明胶、海藻酸钠/羧甲基纤维素为固定化载体材料,探究β-半乳糖苷酶的固定化方法,并将获得的适宜固定化酶应用于合成低聚半乳糖(galacto-oligosaccharide,GOS)。结果表明,较优固定化载体为壳聚糖,β-半乳糖苷酶的优化固定化条件为壳聚糖质量浓度0.03 g/mL,静置时间2 h,戊二醛体积分数2%,交联时间3 h,吸附时间12 h,固定化温度60℃,加酶量0.4 mg/g(以壳聚糖微球质量计)。与游离酶相比,固定化酶的耐酸、碱、热的稳定性显著提升。进一步利用壳聚糖固定化β-半乳糖苷酶合成GOS,确定了优化反应条件:加酶量为2 U/mL,pH值为6.0,反应温度为50℃,初始乳糖质量浓度为500 g/L,反应时间为14 h。此条件下GOS产率可达到52.61%,高于已报道的GOS产率(25.1%~46.0%),且产物中聚合度大于等于3的GOS含量为37.07%。固定化酶重复使用5次后,产GOS活性仍保留了97.21%,研究获得的壳聚糖固定化β-半乳糖苷酶在GOS合成领域具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 Β-乳糖 低聚乳糖合成 固定化方法 壳聚糖 交联
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影响kluyveromyces fragilisβ-D-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的因素 被引量:2
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作者 刘建福 王璋 许时婴 《南昌大学学报(工科版)》 CAS 2004年第1期76-80,100,共6页
研究了酶反应的温度、pH值、底物浓度和反应时间等对kluyveromycesfragilisβ-D-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的影响.结果显示,以乳糖为底物,kluyveromycesfragilisβ-D-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的最适温度为60℃,最适pH值为6.0.... 研究了酶反应的温度、pH值、底物浓度和反应时间等对kluyveromycesfragilisβ-D-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的影响.结果显示,以乳糖为底物,kluyveromycesfragilisβ-D-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的最适温度为60℃,最适pH值为6.0.酶法合成低聚半乳糖的产率随着底物浓度增加而增加.kluyveromycesfragilisβ-D-半乳糖苷酶催化低聚半乳糖合成的初速度较快,随着反应时间延长,反应速率降低,反应20h酶反应达到平衡.以660mg/mL乳糖为底物,在最适酶反应条件下,酶法合成低聚半乳糖的产率为207.12mg/mL. 展开更多
关键词 KLUYVEROMYCES fragilis β-d-乳糖 合成 低聚乳糖
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Kluyveromyces fragilis LFS-8611 β-D-半乳糖苷酶的摇瓶培养条件 被引量:5
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作者 刘建福 王璋 许时婴 《无锡轻工大学学报(食品与生物技术)》 CSCD 北大核心 2004年第4期82-85,93,共5页
脆壁克鲁维酵母(Kluyveromycesfragilis)LFS 8611合成的β D 半乳糖苷酶具有较高的催化半乳糖基转移反应活力.脆壁克鲁维酵母(K.fragilis)LFS 8611细胞生长和β D 半乳糖苷酶的合成同步.该菌株生长和产酶的最适碳源为半乳糖,乳糖次之;... 脆壁克鲁维酵母(Kluyveromycesfragilis)LFS 8611合成的β D 半乳糖苷酶具有较高的催化半乳糖基转移反应活力.脆壁克鲁维酵母(K.fragilis)LFS 8611细胞生长和β D 半乳糖苷酶的合成同步.该菌株生长和产酶的最适碳源为半乳糖,乳糖次之;最适氮源为蛋白胨F403;最适培养条件为:发酵培养基的初始pH值为7.0,摇床的转速为200r/min.培养基中碳源和氮源质量浓度对菌体生物量和β D 半乳糖苷酶活力有重要影响,以12mg/mL乳糖为碳源,16mg/mL蛋白胨(F403)为氮源,在最适培养条件下培养32h后,菌体生物量和β D 半乳糖苷酶活力分别为7.56g/L和18.83U/mL. 展开更多
关键词 脆壁克鲁维酵母(Kluyveromyces fragilis) β-d-半乳糖苷酶合成 培养条件
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米曲霉β-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖 被引量:9
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作者 归莉琼 魏东芝 +1 位作者 崔玉敏 俞俊棠 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期422-426,共5页
研究了温度、pH、酶量和起始乳糖浓度对低聚半乳糖合成的影响,发现乳糖水解为单糖和合成低聚糖所需的最佳条件并不相同;利用有机溶剂作反应介质有利于低聚糖合成。在疏水性环己烷/水(95/5,V/V)反应体系中得到的低聚糖浓... 研究了温度、pH、酶量和起始乳糖浓度对低聚半乳糖合成的影响,发现乳糖水解为单糖和合成低聚糖所需的最佳条件并不相同;利用有机溶剂作反应介质有利于低聚糖合成。在疏水性环己烷/水(95/5,V/V)反应体系中得到的低聚糖浓度为52.6g/L,占总产物的39.19%;在亲水性乙酸乙酯/水(80/20,V/V)体系中得到低聚糖的浓度为40.04g/L,占总产物的39.62%。另外,疏水性有机溶剂抑制低聚糖水解的能力强于亲水性溶剂。 展开更多
关键词 Β-乳糖 低聚乳糖 合成 米曲霉 乳糖
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产β-D-半乳糖苷酶马克斯克鲁维酵母的分离鉴定及其产酶特性 被引量:6
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作者 郑义 张健 +4 位作者 曹永强 赵笑 余志坚 陈超 杨贞耐 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第2期158-165,共8页
从藏灵菇中分离筛选到的一株高产β-D-半乳糖苷酶菌株ZX-5,经ITS DNA序列分析,鉴定为马克斯克鲁维酵母。对产酶培养基的最佳碳源和氮源优化结果为半乳糖2.0%,胰蛋白胨1.0%;产酶优化条件:温度30℃,培养基初始pH 6.5,装液量30%,转速100 r/... 从藏灵菇中分离筛选到的一株高产β-D-半乳糖苷酶菌株ZX-5,经ITS DNA序列分析,鉴定为马克斯克鲁维酵母。对产酶培养基的最佳碳源和氮源优化结果为半乳糖2.0%,胰蛋白胨1.0%;产酶优化条件:温度30℃,培养基初始pH 6.5,装液量30%,转速100 r/min,接种量2.0%,发酵36 h。粗酶液酶活力为2.60 U/mL;经硫酸铵分级沉淀和DEAE离子交换层析,获得纯化酶的比活力为157.35 U/mg。酶最适反应温度35℃,最适pH 6.0,在20~40℃和pH 5.0~7.0的范围内酶的稳定性较好;Mn2+对酶的活性有促进作用。利用菌株ZX-5β-D-半乳糖苷酶分解乳糖并合成低聚半乳糖(galacto-oligosaccharide,GOS),在35℃、乳糖质量浓度60 g/100 mL、酶浓度1.0 U/mL条件下,乳糖水解率达68.34%(50 h),GOS产率达34.70%(40 h),具有潜在的应用前景。 展开更多
关键词 藏灵菇 β-d-乳糖 发酵条件 分离纯化 学性质 低聚乳糖
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米曲霉β-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的工艺研究 被引量:10
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作者 许牡丹 杨伟东 +2 位作者 柯蕾 檀志芬 崔丽娜 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期183-185,189,共4页
研究了反应时间、乳糖浓度、温度、加酶量、pH对低聚半乳糖合成的影响,结果表明,加酶量、乳糖浓度、反应温度的影响较大。通过正交实验确定的米曲霉β-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的最佳工艺条件为:pH6.0、温度55℃、乳糖浓度40%、加... 研究了反应时间、乳糖浓度、温度、加酶量、pH对低聚半乳糖合成的影响,结果表明,加酶量、乳糖浓度、反应温度的影响较大。通过正交实验确定的米曲霉β-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的最佳工艺条件为:pH6.0、温度55℃、乳糖浓度40%、加酶量40U/g、反应时间32h。在最佳工艺条件下,低聚半乳糖的合成率为32.4%。 展开更多
关键词 米曲霉 低聚乳糖 Β-乳糖
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茶叶中β-D-半乳糖苷酶活性分析条件的优化及其在不同季节、嫩度和品种间的差异分析 被引量:5
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作者 余志 黄海波 +1 位作者 张芸 倪德江 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第10期384-388,共5页
采用单因素和正交试验设计对茶叶中β-D-半乳糖苷酶的比活力测定条件进行优化。结果表明,茶叶中β-D-半乳糖苷酶1比活力测定条件为:以pH4.0的柠檬酸-磷酸氢二钠为缓冲液,在60℃下反应7min。对不同茶叶品种、生长季节以及不同嫩度叶片中... 采用单因素和正交试验设计对茶叶中β-D-半乳糖苷酶的比活力测定条件进行优化。结果表明,茶叶中β-D-半乳糖苷酶1比活力测定条件为:以pH4.0的柠檬酸-磷酸氢二钠为缓冲液,在60℃下反应7min。对不同茶叶品种、生长季节以及不同嫩度叶片中的β-D-半乳糖苷酶比活力进行分析。结果表明,乌龙茶与绿茶品种中β-D-半乳糖苷酶比活力差异明显,不同季节与不同嫩度茶叶叶片之间也存在较大变化。 展开更多
关键词 茶叶 β-d-乳糖 比活力 品种 季节 嫩度
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K.fragilis β-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的组成分析 被引量:6
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作者 刘建福 陈庆森 王璋 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期109-111,共3页
采用SephadexG-15与DTF-02树脂对K.fragilisβ-半乳糖苷酶催化生产低聚半乳糖的反应液中的糖类物质进行了分离纯化。分别应用高效液相色谱测定了分离的低聚半乳糖的纯度,气相色谱分析了该糖的化学组成。酶反应液经过SephadexG-15色谱... 采用SephadexG-15与DTF-02树脂对K.fragilisβ-半乳糖苷酶催化生产低聚半乳糖的反应液中的糖类物质进行了分离纯化。分别应用高效液相色谱测定了分离的低聚半乳糖的纯度,气相色谱分析了该糖的化学组成。酶反应液经过SephadexG-15色谱柱分成低聚半乳糖、乳糖和单糖(葡萄糖、半乳糖)3个组分。由SephadexG-15色谱柱收集的低聚半乳糖组分上DTF树脂柱出现2个洗脱峰,分别为低聚半乳糖和乳糖。经过上述2步纯化的低聚半乳糖组分在高效液相色谱(HPLC)上为一个单峰,其保留时间为10.481min。该低聚半乳糖是由1分子葡萄糖和2分子半乳糖组成的三糖。 展开更多
关键词 低聚乳糖 纯化 组成分析 催化合成 K.fragilis Β-乳糖
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中压液相色谱快速分离纯化Kluyveromyces fragilis β-D-半乳糖苷酶 被引量:4
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作者 刘建福 李素芬 +2 位作者 陈占洲 陈庆森 王璋 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期116-119,共4页
应用AKTA explorer 100型中压液相色谱快速纯化工艺,系统分离纯化了脆壁克鲁维酵母(Kluyveromyces fragilis)β-D-半乳糖苷酶。K.fragilis发酵生产的菌体细胞经过破碎、离心后的上清液中含有K.fragilis β-D-半乳糖苷酶。粗酶经过AKTA e... 应用AKTA explorer 100型中压液相色谱快速纯化工艺,系统分离纯化了脆壁克鲁维酵母(Kluyveromyces fragilis)β-D-半乳糖苷酶。K.fragilis发酵生产的菌体细胞经过破碎、离心后的上清液中含有K.fragilis β-D-半乳糖苷酶。粗酶经过AKTA explorer 100中压液相色谱的HiprepR16/10 Source 30Q强阴离子交换柱和Hioad26/60 Superdex凝胶过滤色谱连续两步纯化,酶的回收率为27%,纯化倍数为42。纯化的K.fragilis β-D-半乳糖苷酶在垂直板十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)上,呈现一条染色谱带,表明纯化的酶具有较高的纯度。K.fragilisLFS-8611 β-D-半乳糖苷酶相对分子质量约为60000。 展开更多
关键词 中压液相色谱 脆壁克鲁维酵母 β-d-乳糖 分离纯化
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β-半乳糖苷酶催化乳糖合成低聚半乳糖 被引量:10
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作者 李美玲 江波 张涛 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期234-239,共6页
通过对环状芽孢杆菌B.circulans SK28.003的发酵获得β-半乳糖苷酶酶液,经过浓缩、盐析沉淀和低温冷冻干燥,制备酶粉。利用β-半乳糖苷酶的转糖苷功能催化乳糖合成低聚半乳糖(Galactooligosaccharides,GOS),采用单因素和正交试验优化,... 通过对环状芽孢杆菌B.circulans SK28.003的发酵获得β-半乳糖苷酶酶液,经过浓缩、盐析沉淀和低温冷冻干燥,制备酶粉。利用β-半乳糖苷酶的转糖苷功能催化乳糖合成低聚半乳糖(Galactooligosaccharides,GOS),采用单因素和正交试验优化,通过高效液相色谱法检测,以GOS产率为评价指标,确定最佳合成条件为:乳糖起始质量浓度为50 g/d L,加酶量为6 U/g,反应温度为60℃,p H 7.5。在此条件下反应12 h,GOS产率可达45.5%。 展开更多
关键词 Β-乳糖 低聚乳糖 转糖功能 条件优化 正交试验
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园艺作物果实β-半乳糖苷酶研究进展
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作者 俞沁佩 孙鹂 +3 位作者 张淑文 俞浙萍 郑锡良 戚行江 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第9期2184-2192,共9页
β-半乳糖苷酶属于糖苷水解酶GH35家族,参与了植物不同生长阶段细胞壁的合成与修饰,尤其对肉质水果发育和成熟过程中多糖的裂解具有重要作用。文章概述了β-半乳糖苷酶的蛋白功能、不同亚型、亚细胞定位和活性规律,重点阐述了该基因家... β-半乳糖苷酶属于糖苷水解酶GH35家族,参与了植物不同生长阶段细胞壁的合成与修饰,尤其对肉质水果发育和成熟过程中多糖的裂解具有重要作用。文章概述了β-半乳糖苷酶的蛋白功能、不同亚型、亚细胞定位和活性规律,重点阐述了该基因家族在园艺作物果实质地变化中的作用及相关研究进展。 展开更多
关键词 Β-乳糖 园艺作物 果实软化 基因功能
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K.fragilis LFS-8611 β-D-半乳糖苷酶的分离纯化 被引量:3
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作者 刘建福 陈庆森 王璋 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第7期46-49,共4页
分别采用柱色谱技术对K.fragilisLFS-8611β-D-半乳糖苷酶进行了纯化,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定了该酶的纯度。粗酶先后经过(NH4)2SO4分级沉淀、CM-SepharoseCL-6B、DEAE-SepharoseCL-6B、SephacrylS-200柱色谱... 分别采用柱色谱技术对K.fragilisLFS-8611β-D-半乳糖苷酶进行了纯化,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定了该酶的纯度。粗酶先后经过(NH4)2SO4分级沉淀、CM-SepharoseCL-6B、DEAE-SepharoseCL-6B、SephacrylS-200柱色谱四步分离纯化,酶的最终回收率为16%,纯化倍数为45.8。纯化的酶在SDS-PAGE上为一条染色谱带,相对分子质量约为60000。 展开更多
关键词 β-d-乳糖 纯化
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适冷β-半乳糖苷酶及其在食品工业中的应用
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作者 周玲 龚金炎 +3 位作者 何光华 肖功年 许韩山 李玲 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期314-320,共7页
β-半乳糖苷酶,又称乳糖酶,广泛存在于细菌、真菌、酵母菌等微生物中,主要功能是乳糖水解和合成低聚半乳糖。利用β-半乳糖苷酶生产低乳糖牛奶等乳制品成为解决乳糖不耐受问题最有效的途径,然而常用的商业化β-半乳糖苷酶的最适反应温... β-半乳糖苷酶,又称乳糖酶,广泛存在于细菌、真菌、酵母菌等微生物中,主要功能是乳糖水解和合成低聚半乳糖。利用β-半乳糖苷酶生产低乳糖牛奶等乳制品成为解决乳糖不耐受问题最有效的途径,然而常用的商业化β-半乳糖苷酶的最适反应温度大多较高,对pH的要求比较严格,存在生产成本较高、消耗能量高等问题。适冷β-半乳糖苷酶在低温下也具有较高的酶活性,广泛应用于食品行业中,尤其在乳品工业。在低温下水解乳糖,生产低乳糖或无乳糖乳制品,供乳糖不耐受者食用,可降低成本、节约能源,具有重要意义。该文综述了β-半乳糖苷酶的微生物来源、特性、催化特性的研究现状,对适冷β-半乳糖苷酶的来源、特性、耐冷机制及工业化应用进行了系统阐述,并对其前景进行了展望。 展开更多
关键词 Β-乳糖 适冷β-乳糖 耐冷机制
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α-D-半乳糖苷酶源的选择及其性质的探讨 被引量:3
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作者 曹志军 宋世廉 李玉振 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 1990年第2期10-17,共8页
本文就植物种子中α-D-半乳糖苷酶源的选择及其性质做了较详细的探讨。作者认为在相同条件下,苦杏仁、小豆和芸豆比较,小豆中的α—D—半乳糖苷酶活力最强。小豆中含有两种α—D—半乳糖苷酶(酶Ⅰ和酶Ⅱ)。本文以对—硝基苯,α—D半乳糖... 本文就植物种子中α-D-半乳糖苷酶源的选择及其性质做了较详细的探讨。作者认为在相同条件下,苦杏仁、小豆和芸豆比较,小豆中的α—D—半乳糖苷酶活力最强。小豆中含有两种α—D—半乳糖苷酶(酶Ⅰ和酶Ⅱ)。本文以对—硝基苯,α—D半乳糖酶(PNPG)为底物时其最适温度和pH分别为45~50℃5.2;45℃、5.2。酶Ⅰ的V_(m a x)和Km分别为8.33μg/ml。mln和1.25×10^(-3)M,还测得元素对α—D—半乳糖苷酶有强烈的激活作用。半乳糖是酶Ⅰ的强烈竞争性抑制剂。 展开更多
关键词 食品 乳糖 性质 选择
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固定化半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的研究 被引量:5
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作者 刘鑫龙 王立晖 +3 位作者 汤卫华 潘志恒 程秀玮 孙勇民 《食品工程》 2016年第1期20-22,39,共4页
随着社会对功能性食品、保健食品要求的不断提高,低聚半乳糖的重要性也逐渐得到更多人的重视。研究了以壳聚糖吸附与戊二醛交联固定化的半乳糖苷酶为催化剂合成低聚半乳糖的过程,并对反应条件进行了单因素优化。试验结果表明,最佳反应... 随着社会对功能性食品、保健食品要求的不断提高,低聚半乳糖的重要性也逐渐得到更多人的重视。研究了以壳聚糖吸附与戊二醛交联固定化的半乳糖苷酶为催化剂合成低聚半乳糖的过程,并对反应条件进行了单因素优化。试验结果表明,最佳反应条件为:质量浓度50%的乳糖为底物,溶液p H值6.5,反应温度40℃,体系中加入2 mmol/L的Mg^(2+),640 g/L的酶用量,反应4 h后,低聚半乳糖的产率为71.5%。在重复使用7次后,催化得到的GOS产率仍为64.9%,展现了良好的稳定性。 展开更多
关键词 Β-乳糖 壳聚糖 交联法 低聚乳糖
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β-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的研究现状 被引量:2
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作者 刘鑫龙 王立晖 +2 位作者 汤卫华 殷海松 孙勇民 《食品安全导刊》 2015年第9X期162-163,共2页
β-半乳糖苷酶及低聚半乳糖对人体生理功能具有重要作用,本文对两者性质、作用机理及应用进行了概述,并着重介绍目前β-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖应用较多的生产方法。
关键词 低聚乳糖 Β-乳糖 生产方法
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