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林蛙源嗜水气单胞菌β-溶血素基因序列分析 被引量:2
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作者 叶明 李艳茹 +2 位作者 李太元 许广波 常巧呈 《中国动物检疫》 CAS 2009年第8期29-30,共2页
对林蛙源嗜水气单胞菌β-溶血素基因与AHL316HEM进行序列和结构分析表明,目的基因读码框架全长为1482bp,编码长度为493个氨基酸的蛋白,分子量为54.2kD,从起始位点至第23个氨基酸残基形成明显疏水区,可能构成信号肽。同源性分析表明,AHL3... 对林蛙源嗜水气单胞菌β-溶血素基因与AHL316HEM进行序列和结构分析表明,目的基因读码框架全长为1482bp,编码长度为493个氨基酸的蛋白,分子量为54.2kD,从起始位点至第23个氨基酸残基形成明显疏水区,可能构成信号肽。同源性分析表明,AHL316HEM基因编码的氨基酸序列与林蛙源嗜水气单胞菌溶血素基因的同源率为99.7%,表明俩者可能有共同的起源。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 β-溶血素基因 序列分析
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金黄色葡萄球菌β-溶血素基因的克隆及原核表达载体的构建
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作者 李冬野 崔玉东 +2 位作者 侯喜林 朱占波 朴范泽 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2008年第2期16-18,共3页
根据GenBank中的金黄色葡萄球菌β-溶血素(hlb)基因序列,设计合成1对引物,采用PCR方法扩增出与预期设计大小相符的hlb基因特异性条带,将扩增出的DNA片段克隆到pMD18-T载体中,转化感受态细胞,经平板筛选,酶切鉴定,获得阳性重组质粒,对重... 根据GenBank中的金黄色葡萄球菌β-溶血素(hlb)基因序列,设计合成1对引物,采用PCR方法扩增出与预期设计大小相符的hlb基因特异性条带,将扩增出的DNA片段克隆到pMD18-T载体中,转化感受态细胞,经平板筛选,酶切鉴定,获得阳性重组质粒,对重组质粒进行序列测定,结果表明:金黄色葡萄球菌β-溶血素基因全长982bp,不含终止密码子的目的基因,插入的位点、大小与读码框均正确。将hlb基因插入到原核表达pET-32a中,转化到BL-21感受态细胞中,获得了表达hlb基因的阳性重组质粒。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 β-血素(hlb)基因 克隆 原核表达
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金黄色葡萄球菌β-溶血素的原核表达及其溶血活性检测 被引量:10
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作者 李冬野 崔玉东 +2 位作者 侯喜林 朱战波 朴范泽 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期136-139,共4页
目的为进一步研究金黄色葡萄球菌β-溶血素的致病性及免疫保护作用,对金黄色葡萄球菌β-溶血素进行了表达。方法应用聚合酶链式反应(PCR)技术,从金黄色葡萄球菌中扩增出β-溶血素基因,将该基因克隆到原核表达载体PET-32a中,获得重组质粒... 目的为进一步研究金黄色葡萄球菌β-溶血素的致病性及免疫保护作用,对金黄色葡萄球菌β-溶血素进行了表达。方法应用聚合酶链式反应(PCR)技术,从金黄色葡萄球菌中扩增出β-溶血素基因,将该基因克隆到原核表达载体PET-32a中,获得重组质粒PET-32aβ-,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达。对表达产物进行SDS-PAGE电泳和Westernblot检测分析,并对纯化后表达产物进行平板溶血试验,检测其溶血活性。结果PCR扩增的β-溶血素基因片段全长为982bp;表达的β-溶血素重组蛋白大小为57kD;纯化的重组蛋白可使绵羊红细胞发生明显溶血。结论结果表明所克隆的β-溶血素基因在大肠杆菌中得到了良好的表达,并保持良好的溶血活性。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 β-血素(hlb)基因 原核表达 WESTERN BLOT
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