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β-伴大豆球蛋白的提取纯化及多克隆抗体制备
1
作者 钱周泽 李妍 +4 位作者 夏琳枝 梁子仪 安晓敏 郭云霞 郝庆红 《食品科学》 北大核心 2025年第14期49-55,共7页
本研究通过碱溶酸沉法、切向流过滤(tangentialflowfiltration,TFF)系统对β-伴大豆球蛋白(β-conglycinin,β-CG)进行分离纯化,并制备兔抗β-CG多克隆抗体,通过间接酶联免疫吸附和免疫印迹检测抗体效价及其特异性。采用棋盘滴定法明确... 本研究通过碱溶酸沉法、切向流过滤(tangentialflowfiltration,TFF)系统对β-伴大豆球蛋白(β-conglycinin,β-CG)进行分离纯化,并制备兔抗β-CG多克隆抗体,通过间接酶联免疫吸附和免疫印迹检测抗体效价及其特异性。采用棋盘滴定法明确最佳抗原包被浓度和抗体稀释度。结果显示,经TFF纯化后,β-CG(α’、α和β亚基)占比96.70%,酸性亚基占比3.30%,2S白蛋白和抑制蛋白被去除。自制兔抗β-CG多克隆抗体可有效结合纯化后的β-CG,抗体特异性良好。最终确定的最佳抗原包被质量浓度为1μg/mL,最佳抗体稀释度为1∶9000(V/V)。综上,本研究不仅可为β-CG的提取与纯化提供新的思路,同时也可为今后研究低致敏性β-CG的作用机制、开发低致敏性大豆蛋白产品奠定基础。 展开更多
关键词 β-伴大豆球蛋白 提取纯化 多克隆抗体 酶联免疫吸附试验
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β-伴大豆球蛋白纳米抗体的筛选及鉴定
2
作者 常家树 孙华博 +7 位作者 王玉婷 王潇惠 杨博 刘鸿瑞 李玥昕 孙源钊 古少鹏 何金鑫 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第5期764-770,共7页
大豆是一种重要的植物蛋白质来源,在幼儿和幼小动物具有较高的过敏性,尤其是其中的β-伴大豆球蛋白(β-conglycinin),约占大豆总蛋白质的30%,是主要的过敏原。传统的ELISA检测方法依赖于多克隆抗体或单克隆抗体,这些抗体分子量大,难以... 大豆是一种重要的植物蛋白质来源,在幼儿和幼小动物具有较高的过敏性,尤其是其中的β-伴大豆球蛋白(β-conglycinin),约占大豆总蛋白质的30%,是主要的过敏原。传统的ELISA检测方法依赖于多克隆抗体或单克隆抗体,这些抗体分子量大,难以接触核心区域,且对酸碱敏感,限制了快速检测的应用。纳米抗体(nanobodies,Nbs)源自驼科动物的重链抗体可变区,具有体积小、结构稳定、特异性强和亲和力高等优点。本研究旨在研制β-伴大豆球蛋白的纳米抗体,使用β-伴大豆球蛋白对羊驼进行5次免疫,ELISA检测显示,其重链抗体效价为1∶16000;随后分离外周血淋巴细胞并提取总RNA,通过PCR扩增重链抗体的可变区,构建重组质粒并转化至ER2738感受态,获取Nbs噬菌体展示文库。该文库的库容约为3.5×10^(8) CFU/mL,经辅助噬菌体拯救后达到1.15×10^(12) PFU/mL,Nbs基因插入率为100%。通过4轮固相筛选,其纳米抗体噬菌体输出明显富集,富集率为155.9;Phage-ELISA结果显示,筛选出35株阳性克隆,测序结果显示,均为同一氨基酸序列。将该Nbs进行原核表达,通过Western印迹和ELISA验证其对β-伴大豆球蛋白具有良好的结合能力。这一研究为开发Nbs的β-伴大豆球蛋白快速检测方法奠定基础。 展开更多
关键词 大豆过敏原 β-伴大豆球蛋白 噬菌体展示文库 纳米抗体
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异黄酮与β-伴大豆球蛋白的相互作用及其对蛋白结构和潜在致敏性的影响 被引量：1
3
作者 邓雯 廖雅如 +2 位作者 黄丽衡 杨安树 陈红兵 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1-9,共9页
探究异黄酮和β-伴大豆球蛋白(β-conglycinin,BCG)的相互作用机理及其对复合物结构和潜在致敏性的影响。利用荧光光谱、圆二色光谱分析2种大豆异黄酮(染料木素(genistein,Gen)、大豆苷元(daidzein,Dai))与BCG相互作用的猝灭类型、结合... 探究异黄酮和β-伴大豆球蛋白(β-conglycinin,BCG)的相互作用机理及其对复合物结构和潜在致敏性的影响。利用荧光光谱、圆二色光谱分析2种大豆异黄酮(染料木素(genistein,Gen)、大豆苷元(daidzein,Dai))与BCG相互作用的猝灭类型、结合位点数、作用力类型和蛋白二级结构含量的变化,表征不同条件下制备的异黄酮-BCG复合物的结构,并利用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)与消化产物免疫印迹检测其潜在致敏性。结果表明:活性异黄酮(Gen/Dai)对BCG的猝灭为静态猝灭,且相互作用力以疏水相互作用为主,结合位点数均接近1;并且与异黄酮相互作用诱导了BCG氨基酸微环境的极性增加,使蛋白肽链伸展,结构更为松散;ELISA与消化产物免疫印迹结果显示,与异黄酮结合后蛋白的潜在致敏性增强。本研究有助于科学认识异黄酮在食品复杂基质体系中对过敏蛋白致敏性影响机制,对其抗过敏的深度开发利用具有重要意义。 展开更多
关键词 大豆异黄酮 β-伴大豆球蛋白 荧光光谱 相互作用 致敏性
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β-伴大豆球蛋白β亚基的纯化及免疫活性鉴定 被引量：6
4
作者 郑树贵 曹松屹 +1 位作者 孙泽威 秦贵信 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期301-304,309,共5页
等电点沉淀法和凝胶过滤层析提纯的β-伴大豆球蛋白经6mol·L-1脲变性后解聚为游离亚基,利用DEAE琼脂糖凝胶FF离子交换层析分离纯化β-伴大豆球蛋白亚基,并对纯化亚基进行透析复性。同时将β-伴大豆球蛋白免疫家兔制备抗血清,利用... 等电点沉淀法和凝胶过滤层析提纯的β-伴大豆球蛋白经6mol·L-1脲变性后解聚为游离亚基,利用DEAE琼脂糖凝胶FF离子交换层析分离纯化β-伴大豆球蛋白亚基,并对纯化亚基进行透析复性。同时将β-伴大豆球蛋白免疫家兔制备抗血清,利用免疫印迹方法检测纯化的亚基与β-伴大豆球蛋白抗血清是否发生免疫反应。结果表明:利用DEAE琼脂糖凝胶FF阴离子交换层析可以纯化出高纯度的β-伴大豆球蛋白β亚基,纯化的β亚基可以与抗β-伴大豆球蛋白抗体结合,具有免疫活性。 展开更多
关键词 β-伴大豆球蛋白 Β亚基 纯化 免疫活性
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β-伴大豆球蛋白α′-亚基的基因克隆及原核表达 被引量：3
5
作者 许妍妍 董宇 +5 位作者 王新 彭飞 孙晓静 余少璟 辰巳英三 栾广忠 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期304-310,共7页
为制备N-连接糖基缺失的重组β-伴大豆球蛋白α′-亚基,以‘鲁96150’大豆种子为原料提取总RNA,经RT-PCR一步法获得‘鲁96150’大豆的全长cDNA,采用自行设计的引物F1/F2扩增得到目的基因α′,与pGEM-T easy载体相连构建重组克隆载体pGEM... 为制备N-连接糖基缺失的重组β-伴大豆球蛋白α′-亚基,以‘鲁96150’大豆种子为原料提取总RNA,经RT-PCR一步法获得‘鲁96150’大豆的全长cDNA,采用自行设计的引物F1/F2扩增得到目的基因α′,与pGEM-T easy载体相连构建重组克隆载体pGEM-α′,经XhoⅠ/EcoRⅠ双酶切得到目的基因与载体pET-28a连接构建重组原核表达载体pET-28a-α′,将经菌落PCR、双酶切及测序鉴定正确的表达载体转入感受态细胞E.coli BL21(DE3),经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白α′-亚基。对重组α′-亚基的诱导表达条件进行筛选,发现在菌液OD600值为0.8、诱导温度30℃、IPTG浓度为0.2mmol/L的诱导条件下诱导9h后α′-亚基的表达量较高,重组α′-亚基的分子质量大小约为70ku;工程菌pET-28a-α′-BL21经超声破碎、离心后发现重组α′-亚基部分存在于上清液中,部分形成包涵体蛋白。重组α′-亚基的克隆及表达为β-伴大豆球蛋白结构及功能特性的研究奠定基础。 展开更多
关键词 β-伴大豆球蛋白 亚基 重组蛋白 克隆 基因表达
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β-伴大豆球蛋白诱导杂交黄颡鱼肠道上皮细胞内质网应激模型的建立
6
作者 张子豪 郭朝辉 +8 位作者 张美娜 洪佳乐 于光晴 董鹏生 黄小城 杨振江 王延晖 李明 刘变枝 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1894-1904,共11页
实验旨在利用β-伴大豆球蛋白构建黄颡鱼上皮细胞内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)模型。利用酶消化法分离得到黄颡鱼肠道上皮细胞,通过细胞形态、角蛋白18(Cytokeratin-18,CK-18)免疫荧光染色和碱性磷酸酶染色法鉴定。利... 实验旨在利用β-伴大豆球蛋白构建黄颡鱼上皮细胞内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)模型。利用酶消化法分离得到黄颡鱼肠道上皮细胞,通过细胞形态、角蛋白18(Cytokeratin-18,CK-18)免疫荧光染色和碱性磷酸酶染色法鉴定。利用不同浓度β-伴大豆球蛋白刺激24h后,RT-qPCR检测相关基因转录表达水平,筛选最合适刺激浓度。在此浓度下分别刺激黄颡鱼肠道上皮细胞0、12h、24h和36h,使用RTqPCR、CCK8、透射电镜和免疫荧光染色等方法检测相关指标,筛选最适刺激时间。结果表明:(1)成功分离培养黄颡鱼肠道上皮细胞,细胞呈铺路石状,CK-18和碱性磷酸酶染色呈阳性;(2)成功筛选到4 mg/mLβ-伴大豆球蛋白为最佳刺激浓度。在该浓度下,除grp78、jnk、il-10、atf6外,内质网应激、自噬、凋亡、炎症等相关基因表达水平均显著最高(P<0.05);成功筛选24h为最适刺激时间。4 mg/mL β-伴大豆球蛋白刺激细胞24h显著降低细胞活力,同时引起内质网显著肿胀,GRP78、LC3、Caspase3蛋白表达和Tunel信号显著升高(P<0.01),perk、atf6、beclin1、lc3a、bcl2、caspase3、caspase9和il-12 mRNA表达水平显著最高(P<0.05)。综上,实验成功分离得到黄颡鱼肠道上皮细胞,构建了黄颡鱼肠道上皮细胞内质网应激模型。实验为进一步研究未折叠反应信号通路在黄颡鱼豆粕诱导肠炎发生发展中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 β-伴大豆球蛋白 肠道上皮细胞 内质网应激 黄颡鱼
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β-伴大豆球蛋白天然活性亚基的分离纯化 被引量：1
7
作者 郑树贵 秦贵信 +1 位作者 曹松屹 孙泽威 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第8期137-141,共5页
本研究将离子交换层析和金属螯合亲和层析方法相结合,建立了系统的分离纯化β-伴大豆球蛋白天然状态亚基的方法,通过梯度脲透析复性,使纯化亚基恢复天然构象。利用β-伴大豆球蛋白免疫动物制备抗血清对纯化亚基的免疫活性进行检测。结... 本研究将离子交换层析和金属螯合亲和层析方法相结合,建立了系统的分离纯化β-伴大豆球蛋白天然状态亚基的方法,通过梯度脲透析复性,使纯化亚基恢复天然构象。利用β-伴大豆球蛋白免疫动物制备抗血清对纯化亚基的免疫活性进行检测。结果表明:离子交换层析结合金属螯合亲和层析方法可以有效地纯化β-伴大豆球蛋白的α、α'和β亚基,该方法产率高,制备的亚基纯度好,而且能与抗β伴大豆球蛋白血清特异性结合,表明提纯的亚基具有免疫活性。 展开更多
关键词 β-大豆球蛋白 纯化 亚基 免疫活性
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β-伴大豆球蛋白中α、α′亚基对大豆分离蛋白薄膜微观结构和功能特性的影响 被引量：4
8
作者 杨晓晴 李佳芯 +4 位作者 吕博 付洪玲 于寒松 宋波 刘珊珊 《食品科学技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期53-64,共12页
为了研究β-伴大豆球蛋白中不同亚基组成对大豆分离蛋白薄膜微观结构和功能特性的影响,采用东农47(Wild对照)、α亚基缺失型(α-lack)、α′亚基缺失型(α′-lack)以及α、α′双亚基缺失型[(α+α′)-lack]的大豆为原料提取大豆分离蛋... 为了研究β-伴大豆球蛋白中不同亚基组成对大豆分离蛋白薄膜微观结构和功能特性的影响,采用东农47(Wild对照)、α亚基缺失型(α-lack)、α′亚基缺失型(α′-lack)以及α、α′双亚基缺失型[(α+α′)-lack]的大豆为原料提取大豆分离蛋白。通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析4种大豆分离蛋白的亚基组成,采用溶液流延法制备不同亚基组成的大豆分离蛋白薄膜,探究不同亚基组成对薄膜流变行为、微观结构、机械强度、耐水性、屏障特性、热稳定性及光学性能的影响。结果表明,不同亚基组成对大豆分离蛋白膜的微观结构和功能特性均有不同影响,与α亚基缺失和α、α′双亚基缺失相比,α′亚基缺失对薄膜结构和功能特性影响最为明显。红外光谱分析结果显示,相较于Wild薄膜,α′亚基缺失加强了蛋白质分子间氢键的相互作用,α′-lack薄膜β折叠含量减少到27.84%,α螺旋和无规则卷曲含量增加到16.83%和13.84%。扫描电镜分析结果显示,α-lack和(α+α′)-lack薄膜纹理形貌较散乱疏松,而α′-lack薄膜无明显气泡且具有平整致密的网络结构。流变特性分析结果发现,α亚基缺失会降低成膜强度,而α′亚基缺失会明显提高膜液的G′,使α′-lack具有更好的潜在成膜能力。与其他3种薄膜相比,α′-lack薄膜具有最大的抗拉伸强度2.31 MPa,最小的水分含量(9.54%)和水溶性(30.81%),最低的水蒸气透过系数[21.89 g·mm/(d·m^(2)·kPa)],表现出优异的热稳定性和可见光阻隔特性。α′亚基的缺失能显著改善大豆分离蛋白薄膜微观结构和功能特性,研究结果旨在为生产高成膜性大豆蛋白系列产品提供理论参考。 展开更多
关键词 β-伴大豆球蛋白 α-亚基 α′亚基 大豆分离蛋白薄膜 微观结构 机械性能 阻隔特性
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大豆主要过敏原β-伴大豆球蛋白β亚基的抗原表位分析及分段克隆 被引量：2
9
作者 皮江一 席俊 +1 位作者 贺梦雪 李爽 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第18期90-93,共4页
利用生物信息学软件SWISS-MODEL对大豆主要过敏原β-伴大豆球蛋白β亚基建立出三级结构模型,并根据Disco Tope 2.0服务器预测出该模型的构象表位相关区段,采用分段克隆方式扩增目的基因的3个片段区域,利用PCR技术扩增目的基因全长及3个... 利用生物信息学软件SWISS-MODEL对大豆主要过敏原β-伴大豆球蛋白β亚基建立出三级结构模型,并根据Disco Tope 2.0服务器预测出该模型的构象表位相关区段,采用分段克隆方式扩增目的基因的3个片段区域,利用PCR技术扩增目的基因全长及3个互相重叠的片段(A、B、C)将其连接至p MD18-T载体,并转化到大肠杆菌感受态JM109。经蓝白斑筛选,以及对重组质粒进行PCR和双酶切验证,测序结果与设计的基因序列一致,成功得到了目的基因片段的阳性克隆子,为β-伴大豆球蛋白β亚基分段表达及抗原区域位置的筛选与鉴定提供参考。 展开更多
关键词 β-伴大豆球蛋白 Β亚基 生物信息学 抗原位点 克隆
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β-伴大豆球蛋白α-亚基核心区的基因克隆、表达及纯化 被引量：2
10
作者 李垚熹 袁艳秋 +4 位作者 巨倩 高梦楠 周树义 胡亚云 栾广忠 《食品与机械》 北大核心 2020年第5期15-19,38,共6页
利用RT-PCR技术获得了齐黄34大豆种子的全长cDNA,采用自行设计的引物对目的基因αc进行扩增,并将目的基因与载体连接,构建了重组克隆载体pGEM-αc。重组克隆载体经XhoⅠ/EcoRⅠ双限制酶酶切鉴定后,与载体pET-28a连接构建重组质粒pET-28a... 利用RT-PCR技术获得了齐黄34大豆种子的全长cDNA,采用自行设计的引物对目的基因αc进行扩增,并将目的基因与载体连接,构建了重组克隆载体pGEM-αc。重组克隆载体经XhoⅠ/EcoRⅠ双限制酶酶切鉴定后,与载体pET-28a连接构建重组质粒pET-28a-αc,经菌落PCR、双限制酶酶切及测序判定准确后,将其转入到感受态细胞E.coli BL21(DE3)中,当诱导温度为37℃、菌液OD 600 nm值为0.8、诱导剂(IPTG)浓度为0.2 mmol/L,诱导时间为9 h时,重组α-亚基核心区蛋白分子质量为50 kU;工程菌pET-28a-αc-BL21经超声破裂、低温离心后,上清液利用镍离子亲和层析色谱柱经AKTA蛋白纯化系统纯化可以获得较高纯度的目的蛋白。 展开更多
关键词 β-伴大豆球蛋白 α-亚基 重组蛋白 克隆 分离纯化
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基于适配体传感器快速检测发酵豆粕中的β-伴大豆球蛋白β亚基 被引量：1
11
作者 卫亚峰 毛银 +1 位作者 李国辉 邓禹 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2021年第17期228-233,共6页
菌酶协同发酵因可显著改善豆粕的抗原性,得到广泛关注。利用适配体生物传感器快速、稳定且精确度高的特点,对发酵豆粕中的β-伴大豆球蛋白β亚基含量进行检测,可用于评估豆粕抗原性水平。基于高特异性的β-伴大豆球蛋白β亚基适配体生... 菌酶协同发酵因可显著改善豆粕的抗原性,得到广泛关注。利用适配体生物传感器快速、稳定且精确度高的特点,对发酵豆粕中的β-伴大豆球蛋白β亚基含量进行检测,可用于评估豆粕抗原性水平。基于高特异性的β-伴大豆球蛋白β亚基适配体生物传感器,利用碱性蛋白酶酶解模拟豆粕发酵,验证该传感器对实际样品检测的操作可行性,在此基础上对关键影响因素进行分析,最终用于菌酶协同发酵豆粕样品的评价。结果显示,适配体传感器对发酵豆粕样品中β-伴大豆球蛋白β亚基检测的最佳稀释倍数为10~50倍,菌酶协同发酵24 h后,豆粕中β-伴大豆球蛋白β亚基降解率为87.81%,较单独以碱性蛋白酶处理时提高了6.91%。以上结果表明,适配体传感器可用于发酵豆粕中β-伴大豆球蛋白β亚基的检测。 展开更多
关键词 β-伴大豆球蛋白 纳米金-适配体传感器 特异性 协同发酵 干扰成分
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大豆7S球蛋白β-伴大豆球蛋白的研究现状 被引量：13
12
作者 刘珊珊 武小霞 +1 位作者 姜振峰 李文滨 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期417-422,共6页
大豆β-伴大豆球蛋白约占大豆籽粒总蛋白含量的25%,是7S球蛋白的组分之一,是影响大豆籽粒蛋白营养品质及加工品质的重要组分。本文对大豆7S球蛋白β-伴大豆球蛋白的基本属性,亚基积累规律,遗传变异体的种类及其分子遗传学水平的研究现... 大豆β-伴大豆球蛋白约占大豆籽粒总蛋白含量的25%,是7S球蛋白的组分之一,是影响大豆籽粒蛋白营养品质及加工品质的重要组分。本文对大豆7S球蛋白β-伴大豆球蛋白的基本属性,亚基积累规律,遗传变异体的种类及其分子遗传学水平的研究现状等进行了综述。 展开更多
关键词 大豆 7S球蛋白 β-伴大豆球蛋白 亚基表现 分子基础
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大豆7S球蛋白α-亚基缺失型种质创新 被引量：14
13
作者 刘珊珊 滕卫丽 +7 位作者 姜自芹 张彬彬 葛玉君 刁桂珠 郑天慧 曾蕊 吴帅 李文滨 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1409-1413,共5页
采用常规杂交育种方法,人工去雄、授粉,以10份综合农艺性状优良的黑龙江省主栽品种(或优良品系)为母本、亚基组成为(α'+α+11S酸性亚基)-缺失型育种材料日B为父本进行有性杂交。将F1杂交种南繁,单粒点播、单株收获得到F2代分离群... 采用常规杂交育种方法,人工去雄、授粉,以10份综合农艺性状优良的黑龙江省主栽品种(或优良品系)为母本、亚基组成为(α'+α+11S酸性亚基)-缺失型育种材料日B为父本进行有性杂交。将F1杂交种南繁,单粒点播、单株收获得到F2代分离群体。聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法分析表明,F1代杂交种子7S球蛋白α'-与α-亚基的表现型全部为正常型。在杂交F2代种子中获得了具有中国大豆遗传背景的α-缺失、(α+A1aA1bA2)-缺失、A3-缺失、(α'+A4)-缺失和(α'+α)-缺失的贮藏蛋白亚基组成新类型种质,为我国大豆蛋白组分育种选择提供了重要的中间材料。 展开更多
关键词 大豆 7S球蛋白 α-亚基缺失型 种质创新
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SSR标记辅助回交转育大豆7S球蛋白α-亚基致敏蛋白缺失新品系 被引量：8
14
作者 拓云 霍彩琴 +6 位作者 田福东 宋波 申丽威 魏晓双 国博闻 李文滨 刘珊珊 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期1-9,共9页
为快速培育7S球蛋白致敏蛋白α-亚基缺失的优质大豆新品系,以(α'+α)-亚基双缺失型材料日B为供体亲本,东农47为受体亲本,以杂交-回交转育方法为基础,结合SSR标记辅助遗传背景选择与主要农艺性状鉴定及品质分析,在BC2F4选育到7S球... 为快速培育7S球蛋白致敏蛋白α-亚基缺失的优质大豆新品系,以(α'+α)-亚基双缺失型材料日B为供体亲本,东农47为受体亲本,以杂交-回交转育方法为基础,结合SSR标记辅助遗传背景选择与主要农艺性状鉴定及品质分析,在BC2F4选育到7S球蛋白α-亚基缺失新品系Cb80。Cb80综合农艺性状优良,遗传背景回复率大于90%,其蛋白质及氨基酸总量为44.1%、41.95%,分别比轮回亲本东农47提高3.5和3.76个百分点。 展开更多
关键词 大豆 7S球蛋白 α-亚基缺失 SSR标记辅助背景选择 回交育种
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分离β-伴大豆球蛋白和大豆球蛋白工艺研究 被引量：5
15
作者 姜剑 迟玉杰 +2 位作者 孙艳梅 范淼 王喜波 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第6期11-15,共5页
采用大容量(250×4mL)低速(5300×g)离心机分离β-伴大豆球蛋白和大豆球蛋白,进行碱溶条件、酸沉条件等条件的研究。结果表明:提取蛋白的碱性溶液(pH8.5的Tris-HCl溶液)离心效果较佳,沉淀大豆球蛋白pH6.4为佳,沉淀β-伴大豆球蛋... 采用大容量(250×4mL)低速(5300×g)离心机分离β-伴大豆球蛋白和大豆球蛋白,进行碱溶条件、酸沉条件等条件的研究。结果表明:提取蛋白的碱性溶液(pH8.5的Tris-HCl溶液)离心效果较佳,沉淀大豆球蛋白pH6.4为佳,沉淀β-伴大豆球蛋白pH4.8为佳,用pH5.0沉淀杂蛋白离心分离效果较好;每一个待离心的浊液,在离心之前4℃冷藏2h以上,对离心效果的提高十分有效;采用最佳条件,从300g脱脂豆片分离大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白,收率分别为6.8%和2.2%,用SDS-PAGE电泳实验方法测定大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白样品纯度分别为89.1%和78.9%。因此该低速离心法较适合数十克级别的β-伴大豆球蛋白和大豆球蛋白的分离。 展开更多
关键词 β-伴大豆球蛋白 大豆球蛋白 分离
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大豆皮中大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白和凝集素免疫活性的检测 被引量：3
16
作者 王涛 秦贵信 +7 位作者 赵元 孙泽威 王利民 鲍男 张兵 朱丹 孙玲 王合峰 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期158-161,共4页
由于大豆皮具有多种有益的功能,因而被添加于多种动物的饲料中。国内外学者对大豆皮的研究主要集中在大豆皮的可消化性和能量价值,而对大豆皮中抗营养因子组成及含量的研究报告非常的少。本文用竞争ELISA法对大豆皮中具有免疫活性大豆... 由于大豆皮具有多种有益的功能,因而被添加于多种动物的饲料中。国内外学者对大豆皮的研究主要集中在大豆皮的可消化性和能量价值,而对大豆皮中抗营养因子组成及含量的研究报告非常的少。本文用竞争ELISA法对大豆皮中具有免疫活性大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白和凝集素的含量进行了测定,结果显示生大豆皮中具有免疫活性的大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白和凝集素的含量分别为25.3、41.4和12.2mgg-1,说明大豆皮中含有相当高水平的抗营养因子。因此,大豆皮添加到动物饲料中之前,必须经过适当的加工处理,以在最大程度上灭活其中具有免疫活性的抗营养因子,且应该注意添加量等问题。 展开更多
关键词 大豆皮 大豆球蛋白 β-伴大豆球蛋白 凝集素 竞争ELISA法
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β-伴大豆球蛋白糖基化改性对其乳化性影响的研究 被引量：9
17
作者 张波 迟玉杰 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第23期85-89,共5页
以低温脱脂豆粕为原材料分离纯化得到β-伴大豆球蛋白(7S)。以黄原胶为糖基供体对7S进行湿法糖基化改性,用Box-Behnken模型对反应条件进行优化,并测定分析改性产物在不同环境下的乳化性。结果表明最佳反应条件为:反应温度90℃,反应时间... 以低温脱脂豆粕为原材料分离纯化得到β-伴大豆球蛋白(7S)。以黄原胶为糖基供体对7S进行湿法糖基化改性,用Box-Behnken模型对反应条件进行优化,并测定分析改性产物在不同环境下的乳化性。结果表明最佳反应条件为:反应温度90℃,反应时间2h,糖添加量7%,乳化活性(EAI)为1.132,乳化稳定性(ESI)为27.16min,分别是未改性7S球蛋白的2.15倍和2.26倍。研究结果证明,糖基化改性是改善7S乳化性的有效途径。 展开更多
关键词 β-伴大豆球蛋白 糖基化 黄原胶 乳化性 Box-Behnken模型
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β-伴大豆球蛋白来源生物活性肽的研究进展 被引量：4
18
作者 杨柏崇 郭顺堂 包小兰 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第9期552-554,共3页
β-伴大豆球蛋白是大豆中的主要贮藏蛋白质,结构分析表明它是一种糖蛋白。本文阐述了以β-伴大豆球蛋白为基质酶解得到的具有免疫调节功能的糖肽和SOYMETIDE,以及具有抗氧化、降低胆固醇、调节胃肠道功能的活性肽研究状况,并对其今后研... β-伴大豆球蛋白是大豆中的主要贮藏蛋白质,结构分析表明它是一种糖蛋白。本文阐述了以β-伴大豆球蛋白为基质酶解得到的具有免疫调节功能的糖肽和SOYMETIDE,以及具有抗氧化、降低胆固醇、调节胃肠道功能的活性肽研究状况,并对其今后研究发展方向作了展望。 展开更多
关键词 β-伴大豆球蛋白 生物活性肽
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β-伴大豆球蛋白间接竞争ELISA检测方法建立 被引量：5
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作者 朱婷伟 布冠好 +2 位作者 陈复生 张楠 刘昆仑 《粮食与油脂》 北大核心 2014年第9期63-66,共4页
β-伴大豆球蛋白是引起过敏现象发生的主要大豆蛋白过敏原之一，建立β-伴大豆球蛋白过敏原的检测为研究大豆中过敏原降低程度奠定了良好的基础。采用自制的兔抗β-伴大豆球蛋白多克隆抗体，并以标准β-伴大豆球蛋白为抗原、辣根过氧化... β-伴大豆球蛋白是引起过敏现象发生的主要大豆蛋白过敏原之一，建立β-伴大豆球蛋白过敏原的检测为研究大豆中过敏原降低程度奠定了良好的基础。采用自制的兔抗β-伴大豆球蛋白多克隆抗体，并以标准β-伴大豆球蛋白为抗原、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG为酶标二抗，建立了定量检测β-伴大豆球蛋白的间接竞争ELISA方法。并对该方法进行了条件优化及精密度的测定。结果为：抗原包被浓度为0.3μg/mL，一抗最佳稀释度为1∶3200，酶标二抗稀释度为1∶10000；板内误差2.19%，板间误差9.61%。回归直线方程为y=-2.4392x-1.8718，相关系数R2=0.9957，其检测的线性范围为0.1~2μg/mL。表明所建方法具有一定的重复性和灵敏度，可用于大豆制品过敏原的检测。 展开更多
关键词 β-伴大豆球蛋白 过敏原 多克隆抗体
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大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白的富集分离研究 被引量：2
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作者 王昱婷 王笑宇 许晶 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第8期24-29,共6页
以低温脱脂豆粕为原料,采用优化Nagano法分离大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白。本文系统考察提取过程中多个单因素对分离大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白的蛋白质含量和提取率的影响。并根据单因素试验结果设计响应面试验,对浸提温度、浸提pH... 以低温脱脂豆粕为原料,采用优化Nagano法分离大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白。本文系统考察提取过程中多个单因素对分离大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白的蛋白质含量和提取率的影响。并根据单因素试验结果设计响应面试验,对浸提温度、浸提pH、沉淀剂用量进行优化,分别确定高提取率大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白的分离条件。试验结果表明:大豆球蛋白的最佳提取条件为浸提温度44.4℃,浸提pH 8.5,CaCl220 mmol/L,提取率64.14%,纯度83.6%;β-伴大豆球蛋白的最佳提取条件为浸提温度49.5℃,浸提pH 8.6,CaCl_2 0.00 mmol/L,提取率40.15%,纯度82.9%。 展开更多
关键词 大豆球蛋白 β-伴大豆球蛋白 富集 分离
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