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基因工程人干扰素α2b和α2a亚型抗病毒效应的实验研究 被引量：10
1
作者 盛伟华 杨吉成 张云 《生物学杂志》 CAS CSCD 1998年第3期19-21,共3页
本文采用鸡胚接种法和微量细胞病变抑制法研究了不同亚型α干扰素（α２ａＩＦＮ和α２ｂＩＦＮ）抗流感病毒、脊髓灰质炎病毒以及麻疹病毒的作用。结果表明：两种亚型α干扰素均显示明显的抗病毒效应，其中（１）α２ｂＩＦＮ抗... 本文采用鸡胚接种法和微量细胞病变抑制法研究了不同亚型α干扰素（α２ａＩＦＮ和α２ｂＩＦＮ）抗流感病毒、脊髓灰质炎病毒以及麻疹病毒的作用。结果表明：两种亚型α干扰素均显示明显的抗病毒效应，其中（１）α２ｂＩＦＮ抗流感病毒作用略强于α２ａＩＦＮ，（２）两亚型α干扰素抗脊髓灰质炎和麻疹病毒作用相似。 展开更多
关键词 α2B α2a 抗病毒效应 干扰素
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siRNA沉默SOCS1表达增强IFN-α2a-NGR的抗肿瘤效应 被引量：5
2
作者 黄启超 雷小英 +4 位作者 刘艳 隋文君 李慎 张英起 颜真 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期412-415,共4页
目的:研究肿瘤血管导向性干扰素IFN-α2a-NGR抗肿瘤效应的分子机制,发现影响干扰素敏感性的关键信号分子,提高耐药肿瘤细胞敏感性。方法:培养IFNAR高表达细胞株A549、IFNAR低表达细胞株MKN-45,通过MTT检测IFN-α2a-NGR的抗细胞增殖活性... 目的:研究肿瘤血管导向性干扰素IFN-α2a-NGR抗肿瘤效应的分子机制,发现影响干扰素敏感性的关键信号分子,提高耐药肿瘤细胞敏感性。方法:培养IFNAR高表达细胞株A549、IFNAR低表达细胞株MKN-45,通过MTT检测IFN-α2a-NGR的抗细胞增殖活性,流式细胞术(FCM)、Western blot检测IFN-α2a-NGR处理前后STAT1、p-STAT1、p53、OAS与SOCS1的表达变化,合成siRNA靶向干涉SOCS1。结果:IFN-α2a-NGR刺激后,A549中,p-STAT1、p53、OAS与SOCS1表达上调;MKN-45中P53、OAS无显著变化,SOCS1显著上调。靶向干涉SOCS1后,MKN-45对IFN-α2a-NGR的敏感性增加[抑制率从(14.69±1.05)%提高到(36.97±2.05)%]。结论:IFN-α2a-NGR与IFN-α2a在细胞和分子水平的效应基本一致,p-STAT1、p53与SOCS1可影响细胞对干扰素的敏感性,通过siRNA沉默技术可提高耐药细胞株敏感性,为IFN-α2a-NGR的进一步研发奠定了基础。 展开更多
关键词 干扰素 IFN-α2a-NGR 肿瘤 信号转导
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用单克隆抗体3F1亲和层析纯化rHuIFN-α2a的研究 被引量：4
3
作者 朱勇 金伯泉 +3 位作者 赵宁 刘雪松 孙凯 张英起 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第2期117-119,共3页
采用淋巴细胞杂交瘤技术，制备了针对ｒＨｕＩＦＮα２ａ的单克隆抗体（ｍＡｂ）杂交瘤细胞系３Ｆ１，对ｍＡｂ３Ｆ１识别ｒＨｕＩＦＮα２ａ表位、中和活性等特点进行了研究，并与ＣｅｌＴｅｃｈ公司的ｍＡｂＮＫ２做了平行比较。... 采用淋巴细胞杂交瘤技术，制备了针对ｒＨｕＩＦＮα２ａ的单克隆抗体（ｍＡｂ）杂交瘤细胞系３Ｆ１，对ｍＡｂ３Ｆ１识别ｒＨｕＩＦＮα２ａ表位、中和活性等特点进行了研究，并与ＣｅｌＴｅｃｈ公司的ｍＡｂＮＫ２做了平行比较。发现ｍＡｂ３Ｆ１与ｍＡｂＮＫ２均具有中和ｒＨｕＩＦＮα２ａ活性的作用，但二者识别ｒＨｕＩＦＮα２ａ分子的表位不同，表明在ｒＨｕＩＦＮα２ａ分子上至少有２个中和性表位。进一步研究发现，ｍＡｂ３Ｆ１具有良好的用于亲和层析纯化ｒＨｕＩＦＮα２ａ的性能，每毫升湿胶可回收０．８ｍｇ１．０ｍｇｒＨｕＩＦＮα２ａ，纯度达９５％以上，生物学活性达２×１０１１ｕ／ｇ，且ｍＡｂ３Ｆ１有助于ｒＨｕＩＦＮα２ａ的复性。提示ｒＨｕＩＦＮα２ａ分子上的中和性表位，在与ｍＡｂ３Ｆ１的结合和解离过程中。 展开更多
关键词 rHuIFN-α2a 单克隆抗体 亲和层析 纯化
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α2A-肾上腺素受体的同源模建及与Yohimbine的对接研究 被引量：2
4
作者 赵立峰 丁晓琴 +1 位作者 丁俊杰 陈冀胜 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第2期151-155,共5页
通过对比多个与α2A-肾上腺素受体同属G-蛋白偶联受体的视紫红质蛋白序列,选择以相似性最大的牛视紫红质蛋白为模板,同源模建了α2A-肾上腺素受体的跨膜结构,并在结构中找到了体积为0.090nm3,已被报导的活性残基包围的活性位点.运用分... 通过对比多个与α2A-肾上腺素受体同属G-蛋白偶联受体的视紫红质蛋白序列,选择以相似性最大的牛视紫红质蛋白为模板,同源模建了α2A-肾上腺素受体的跨膜结构,并在结构中找到了体积为0.090nm3,已被报导的活性残基包围的活性位点.运用分子力学与动力学方法研究了此结构突变前后与抑制剂Yohimbine的对接情况,得到了与文献报道相吻合的结果.同时对接研究结果发现,在α2A-肾上腺素受体的结合位点周围的一个由色氨酸和两个苯丙氨酸组成的局部疏水区对抑制剂有稳定作用,并且天冬氨酸113作为氢键受体也对稳定抑制剂有重要作用. 展开更多
关键词 跨膜蛋白 α2a-肾上腺素受体 同源模建 对接 YOHIMBINE
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用生物传感器测定重组人α2a-干扰素单克隆抗体的亲和力及抗原识别表位 被引量：7
5
作者 朱勇 金伯泉 刘雪松 《中国免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第6期322-324,328,共4页
目的 :测定抗重组人α2a 干扰素单克隆抗体的抗原识别表位及其亲和常数。方法 :借助于生物传感器技术进行抗原抗体相互作用的动力学分析。结果 :抗体的亲和常数介于 10 -5～ 10 -7之间 ,5株抗体识别干扰素分子上 4种不同的抗原表位。结... 目的 :测定抗重组人α2a 干扰素单克隆抗体的抗原识别表位及其亲和常数。方法 :借助于生物传感器技术进行抗原抗体相互作用的动力学分析。结果 :抗体的亲和常数介于 10 -5～ 10 -7之间 ,5株抗体识别干扰素分子上 4种不同的抗原表位。结论 :生物传感器在研究抗原抗体相互作用中确为一个理想的工具 。 展开更多
关键词 生物传感器 单克隆抗体 重组人α2a-干扰素
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人α2a干扰素酵母工程菌高产培养条件的研究 被引量：2
6
作者 储炬 蔡海波 +3 位作者 胡千德 郭元昕 叶勤 徐伦 《华东理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第3期279-283,共5页
研究了摇瓶培养条件对人α2 a干扰素酵母工程菌生长及表达的影响 ,结果表明 ,当基础料中腺嘌呤含量为 2 0μg/m L,在发酵进行至 1 2 h时再加入 2 0μg/m L腺嘌呤时 ,IFN-α2 a生物活性及比活分别达到了 7.3× 1 0 6IU/m L及 6 .77&#... 研究了摇瓶培养条件对人α2 a干扰素酵母工程菌生长及表达的影响 ,结果表明 ,当基础料中腺嘌呤含量为 2 0μg/m L,在发酵进行至 1 2 h时再加入 2 0μg/m L腺嘌呤时 ,IFN-α2 a生物活性及比活分别达到了 7.3× 1 0 6IU/m L及 6 .77× 1 0 7IU/mg。发酵过程中后期补入适量葡萄糖 ,且维持低糖水平 ,有利表达。维持总碳源含量不变 ,使培养基中葡萄糖与蔗糖比例为 1∶ 0 .1 ,结果 IFN- α2 a生物活性及比活分别比对照增加了一倍以上。在发酵进行至 1 2 h时 ,加入 2 g/L谷氨酸 ,IFN-α2 a生物活性及比活分别比对照提高了 1 .76倍及 1 .94倍 ,而添加 0 .2 5～ 1 .0 g/L赖氨酸也能显著提高表达水平。培养基初始 p H对产物表达有较大影响 ,初始 p H为 6 .5时 ,对表达最有利。利用上述摇瓶培养优化条件 ,在 2 .6 L 生物反应器中进行补料分批培养 ,人 α2 a干扰素生物活性达到了1 .3× 1 0 7IU/m L,为原工艺的 3倍。 展开更多
关键词 α2a型干扰素 发酵 培养条件 酵母工程菌
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重组IFN-α2a与HSV-tk/GCV系统协同作用增强对于卵巢癌细胞系SKOV3杀伤作用的体外研究 被引量：2
7
作者 程月鹃 潘凌亚 张毅 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2001年第1期13-16,共4页
目的 :观察应用重组IFN α2a能否增强单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶基因 (HSV tk) /丙氧鸟苷 (GCV)系统对卵巢癌细胞系SKOV3的杀伤效应。方法 :利用逆转录病毒载体将潮霉素磷酸转移酶和HSV tk的融合基因 (hytk)导入SKOV3细胞 ,测定GCV对... 目的 :观察应用重组IFN α2a能否增强单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶基因 (HSV tk) /丙氧鸟苷 (GCV)系统对卵巢癌细胞系SKOV3的杀伤效应。方法 :利用逆转录病毒载体将潮霉素磷酸转移酶和HSV tk的融合基因 (hytk)导入SKOV3细胞 ,测定GCV对SKOV3/hytk细胞的杀伤作用和旁观者效应。观察IFN α2a与HSV tk/GCV协同作用对旁观者效应的影响 ,并且在联合应用GCV和IFN α2a后 ,进行细胞周期分析。结果 :GCV对SKOV3/hytk细胞有明显的杀伤作用 ,并且可以同时杀伤周围未转基因的细胞 ,联合应用IFN α2a与HSV tk/GCV可以明显增强旁观者效应 (P <0 .0 5 ) ,使处于S期的SKOV3/hytk细胞较对照组和使用单药组明显增多 (P <0 .0 1)。结论 :IFN α2a与HSV tk/GCV联合应用可以产生协同作用 ,增强HSV tk/GCV系统在体外对卵巢癌细胞系SKOV3的杀伤效应 。 展开更多
关键词 卵巢癌 HSV-TK/GCV IFN-α2a
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酿酒酵母重组人α2a干扰素补料分批培养
8
作者 储炬 胡千德 +3 位作者 郭元昕 叶勤 林志伟 徐伦 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期349-352,共4页
在 2 .6L全自动发酵罐中对人 α2 a干扰素重组酵母的补料分批培养过程作了初步研究。结果表明 ,培养过程中待葡萄糖耗尽时流加葡萄糖 ,并维持低糖浓度 ;在培养 1 0 h～ 2 0 h时 ,恒速流加 2 0 mg/L的腺嘌呤 ,能较大幅度提高表达水平 ,... 在 2 .6L全自动发酵罐中对人 α2 a干扰素重组酵母的补料分批培养过程作了初步研究。结果表明 ,培养过程中待葡萄糖耗尽时流加葡萄糖 ,并维持低糖浓度 ;在培养 1 0 h～ 2 0 h时 ,恒速流加 2 0 mg/L的腺嘌呤 ,能较大幅度提高表达水平 ,生物活性从原工艺的 3.1× 1 0 9IU/L提高至1 .3× 1 0 10 IU/L。表达期 p H值对生产水平有很大影响 ,宜控制在 5.0～ 5. 展开更多
关键词 酿酒酵母 基因工程菌 α2a型干扰素 补料分批培养 腺嘌呤 抗病毒药物 抗肿瘤多肽药物
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稳定表达人源α2A-肾上腺素受体细胞系的建立 被引量：3
9
作者 杨怿 李玉蕾 +3 位作者 刘梦 周培岚 苏瑞斌 宫泽辉 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期576-581,共6页
目的建立稳定表达人源α2A-肾上腺素能受体(α2A-AR)的细胞系。方法将带有潮霉素B(Hygro)抗性的α2A-AR(pc DNA3.1/Hygro-HA-α2A-AR)重组质粒通过脂质体介导转染至已表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的蛋白激酶A催化亚基(PKAcat)的中... 目的建立稳定表达人源α2A-肾上腺素能受体(α2A-AR)的细胞系。方法将带有潮霉素B(Hygro)抗性的α2A-AR(pc DNA3.1/Hygro-HA-α2A-AR)重组质粒通过脂质体介导转染至已表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的蛋白激酶A催化亚基(PKAcat)的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞(以Hygro 200 mg·L-1进行压力筛选后,采用PKA重分布实验筛选阳性克隆),然后使用实时定量PCR验证α2A-AR受体在转录水平的表达,最后以时间分辨荧光共振能量转移免疫实验检测c AMP含量以鉴定受体功能。结果 PKA重分布实验结果表明,CHO-PKAcat-α2A-AR 7号克隆反应性良好;与CHO-PKAcat-EGFP细胞相比,该细胞系α2A-AR m RNA表达水平较高(P<0.01),且多次传代能保持稳定;在α2A-AR激动剂作用后,能显著抑制forskolin引起的c AMP水平升高(P<0.01)。结论成功构建稳定表达α2A-AR的CHO-PKAcat-α2A-AR细胞系,可用于药物筛选及机制研究。 展开更多
关键词 中国仓鼠卵巢细胞 受体 肾上腺素α2a 蛋白激酶A c AMP
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激活α2A肾上腺素受体抑制背根神经节卫星胶质细胞活性缓解镜像痛敏 被引量：1
10
作者 杨盼 闫成祥 +7 位作者 朱利香 姜鸣 杨亮 侯仁浩 王江博 曹园园 刘霞 白占涛 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期572-582,共11页
目的:躯体单侧组织损伤引发对侧疼痛反应,称为镜像痛敏。镜像痛敏的病理机制尚不明确,缺乏特异性靶标,影响其治疗。本研究拟阐释背根神经节中α2A肾上腺素受体和神经胶质细胞介导镜像痛敏的发生机制。方法:采用行为药理学、实时荧光定量... 目的:躯体单侧组织损伤引发对侧疼痛反应,称为镜像痛敏。镜像痛敏的病理机制尚不明确,缺乏特异性靶标,影响其治疗。本研究拟阐释背根神经节中α2A肾上腺素受体和神经胶质细胞介导镜像痛敏的发生机制。方法:采用行为药理学、实时荧光定量PCR、免疫荧光和免疫印迹等技术研究背根神经节中α2A肾上腺素受体和神经胶质细胞介导镜像痛敏的机制。结果:背根神经节中α2A肾上腺素受体参与了镜像痛敏的发生发展。激活α2A肾上腺素受体显著缓解镜像痛敏行为。疼痛刺激下,双侧背根神经节中胶质细胞被差异激活,而激活α2A肾上腺素受体进一步活化背根神经节神经胶质细胞。此外,激活α2A肾上腺素受体显著降低卫星胶质细胞中α2A肾上腺素受体的表达,而不影响小胶质细胞中α2A肾上腺素受体的表达。结论:背根神经节卫星胶质细胞中的α2A肾上腺素受体是镜像痛敏的重要分子传感器,激活α2A肾上腺素受体改善镜像痛敏行为。 展开更多
关键词 背根神经节 α2a肾上腺素受体 卫星胶质细胞 镜像痛敏
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肿瘤靶向性RGD-IFN-α2a融合蛋白在原核细胞中的表达与纯化 被引量：1
11
作者 康帅 贾群英 +1 位作者 李祥 吕建新 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期934-937,共4页
RGD肽是一类含有精氨酸．甘氨酸-天冬氨酸（Arg—Gly—Asp）的短肽，作为整合素和其配体相互作用的识别位点，能与肿瘤细胞或肿瘤组织新生血管特异性高表达的某些整合素如αV β3结合，从而将治疗效应分子靶向性地导入肿瘤部位，有效减... RGD肽是一类含有精氨酸．甘氨酸-天冬氨酸（Arg—Gly—Asp）的短肽，作为整合素和其配体相互作用的识别位点，能与肿瘤细胞或肿瘤组织新生血管特异性高表达的某些整合素如αV β3结合，从而将治疗效应分子靶向性地导入肿瘤部位，有效减少肿瘤治疗中对正常组织细胞的损害，提高药物本身疗效。干扰素（interferon，IFN）是一类重要的细胞因子，具有抗病毒、抑制某些细胞生长、免疫调节、抑制和杀伤肿瘤细胞等多种作用，在临床上已被广泛用于恶性肿瘤与病毒疾病的治疗。 展开更多
关键词 RGD肽 IFN-α2a GST融合蛋白 肿瘤
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重组人α2a型干扰素单克隆抗体的研制、特性鉴定及初步应用 被引量：4
12
作者 朱勇 金伯泉 +3 位作者 安献禄 智刚 刘雪松 赵宁 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第4期219-222,共4页
应用常规方法建立了5株稳定分泌抗重组人α2a 型干扰素单克隆抗体的小鼠杂交瘤细胞系1B8、2B6、3F1、4G5和5G10,并对其免疫学特性进行了较系统的鉴定.5株单抗均为 IgG1,特异性强,与重组人α1 型、γ型干扰素以及受体菌菌体蛋白成分无交... 应用常规方法建立了5株稳定分泌抗重组人α2a 型干扰素单克隆抗体的小鼠杂交瘤细胞系1B8、2B6、3F1、4G5和5G10,并对其免疫学特性进行了较系统的鉴定.5株单抗均为 IgG1,特异性强,与重组人α1 型、γ型干扰素以及受体菌菌体蛋白成分无交叉反应.间接 ELISA 测定小鼠腹水单抗效价1:320,000～1:10,240,000,其中3F1和5G10单抗对重组人α2a 型干扰素具中和活性(中和效价均为1:10,000)。竞争结合 ELISA 证实5株单抗针对3种不同表位。用3F1和5G10单抗建立的夹心 ELISA 能检测到60pg/ml的重组人α2a 和α2b 型干扰素。3F1单抗用于制备亲和层析柱纯化重组人α2a 型干扰素结果与进口单抗NK2相当。 展开更多
关键词 干扰素 单克隆抗体 表位特异性
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人LL-37与干扰素α2a密码子的优化及其在毕赤酵母中的融合表达
13
作者 张明杰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期206-213,共8页
通过密码子优化,在毕赤酵母中高效表达人LL-37与IFN-α2a融合蛋白。先按P.pastoris密码子偏好性对LL-37与IFN-α2a的原始密码子进行了改造,并在二者之间加上Gly Gly Gly Gly Ser的柔性连接接头,人工合成设计的新序列,最后通过p PIC9K载... 通过密码子优化,在毕赤酵母中高效表达人LL-37与IFN-α2a融合蛋白。先按P.pastoris密码子偏好性对LL-37与IFN-α2a的原始密码子进行了改造,并在二者之间加上Gly Gly Gly Gly Ser的柔性连接接头,人工合成设计的新序列,最后通过p PIC9K载体将其整合入P.pastoris GS115的基因组,构建出重组菌株GS115LI。利用遗传霉素浓度梯度筛选出两株高拷贝的GS115LI1和GS115LI2菌株。对这两株菌经发酵诱导后的发酵液进行SDS-PAGE检测、抗病毒活性检测和抗菌活性检测,证明重组株既能够成功表达出LL-37与IFN-α2a的融合蛋白,而且该融合蛋白成功保留了抗菌肽与干扰素的功能活性。诱导发酵后,融合蛋白的产量可达到819.1 mg/L,经盐析、疏水层析和离子交换层析分离,可得到纯度达97%的融合蛋白产物,回收率可达到46.2%,纯化后产品的效价可达2.6×108 IU/mg。经过密码子优化后,成功实现在毕赤酵母中高效表达出既有LL-37抗菌活性又具有干扰素α2a活性的融合蛋白。 展开更多
关键词 干扰素α2a LL-37 融合 表达
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重组酵母产人IFN-α2a与LL-37融合蛋白的工艺优化
14
作者 张明杰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期214-218,共5页
通过单因素试验探索重组酵母P.pastoris GS115LI产人LL-37基因与IFN-α2a融合蛋白的最佳条件。结果显示,重组酵母菌产蛋白酶的最佳表达条件是利用BMMY为诱导培养基,以接种量OD600=5.5、温度26℃、p H6.0、诱导剂(甲醇)为每隔24 h添加1.0... 通过单因素试验探索重组酵母P.pastoris GS115LI产人LL-37基因与IFN-α2a融合蛋白的最佳条件。结果显示,重组酵母菌产蛋白酶的最佳表达条件是利用BMMY为诱导培养基,以接种量OD600=5.5、温度26℃、p H6.0、诱导剂(甲醇)为每隔24 h添加1.0%、振荡速度为200 r/min条件下连续诱导144 h。在最佳培养条件下,发酵液中的LL-37最高抗菌活性达27.9 mm。与初始的发酵条件相比,人LL-37基因与IFN-α2a融合蛋白的产量提高了32.29%。 展开更多
关键词 干扰素α2a LL-37工艺
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重组人干扰素α2a滴鼻剂抗病毒药效学研究 被引量：4
15
作者 黄宇 王悦增 +2 位作者 王丽 章春宇 李英 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第3期61-64,共4页
为了检测干扰素滴鼻剂抗病毒药效作用,采用组织细胞培养法及建立流行性感冒动物模型,对不同浓度的干扰素滴鼻剂进行了体内外抗病毒药效学研究。结果显示:在体外有抑制流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒、麻疹病毒、腺病毒、柯萨奇B... 为了检测干扰素滴鼻剂抗病毒药效作用,采用组织细胞培养法及建立流行性感冒动物模型,对不同浓度的干扰素滴鼻剂进行了体内外抗病毒药效学研究。结果显示:在体外有抑制流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒、麻疹病毒、腺病毒、柯萨奇B3病毒的作用,对单纯疱疹病毒有部分抑制作用。在体内可有效抑制流感病毒所致的病毒性肺炎。可见,重组人干扰素α2a滴鼻剂在体内外均有较明显的抗呼吸道病毒的作用。 展开更多
关键词 干扰素滴鼻剂 抗病毒 药效学研究
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重组人干扰素α2_a发酵工艺的研究 被引量：2
16
作者 王树君 高明 李世君 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2000年第4期58-59,共2页
对干扰素工程菌ＰＢＶ３２０／７１１８－α２ａ型发酵工艺，由批式培养改为反馈式流加培养［１］可显著提高工程菌ＰＢＶ３２０／７１１８－α２ａ在４０Ｌ发酵罐中的菌体产量及干扰素的表达水平。
关键词 发酵 反馈式流加培养 重组人干扰素α2a
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CVLM咪唑啉-I和α_2-肾上腺素受体共同参与可乐定的降压效应 被引量：6
17
作者 白洁 王伟忠 +3 位作者 袁文俊 潘燕霞 仲国琴 苏定冯 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期26-29,共4页
目的　探讨大鼠尾端延髓腹外侧区 (CVLM)咪唑啉 I受体 (I1R)和α2 肾上腺素受体 (α2 AR)在介导可乐定中枢降压机制中的作用。方法　在氨基甲酸乙酯麻醉SD大鼠中 ,观察CVLM内局部给予I1R和α2 AR阻断剂后对基础血压(BP)、心率 (HR)... 目的　探讨大鼠尾端延髓腹外侧区 (CVLM)咪唑啉 I受体 (I1R)和α2 肾上腺素受体 (α2 AR)在介导可乐定中枢降压机制中的作用。方法　在氨基甲酸乙酯麻醉SD大鼠中 ,观察CVLM内局部给予I1R和α2 AR阻断剂后对基础血压(BP)、心率 (HR)以及外周给予可乐定导致降压效应的变化。结果　双侧CVLM分别微量注射选择性α2 AR阻断剂育亨宾 (单侧剂量 5 0 0 pmol·L-1,10 0nl,n =8)或I1R和α2 AR混合性阻断剂idazoxan(单侧剂量 2nmol·L-1,10 0nl,n =10 )后不仅明显降低BP和HR(P <0 0 1) ,而且能明显减弱静脉给予可乐定 (5 μg·kg-1)导致的降压效应 (P <0 0 1) ,此外 ,idazoxan对可乐定降压效应的减弱作用高于育亨宾 (P <0 0 1)。结论　CVLM内I1R和α2 展开更多
关键词 降压效应 咪唑啉-1受体 α2肾上腺素能受体 可乐定 尾端延髓腹外侧区 血压 高血压
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锌α_2糖蛋白真核表达载体的构建和体外表达鉴定 被引量：3
18
作者 张韶君 龚凤英 +4 位作者 邓洁英 朱惠娟 潘慧 张殿喜 李乃适 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期283-288,共6页
目的构建小鼠锌α2糖蛋白(mZAG)真核表达载体,在体外培养细胞中鉴定其mRNA和蛋白水平表达。方法提取小鼠肝组织总RNA,采用RT-PCR法扩增mZAG全基因表达序列,酶切法将mZAGcDNA全序列插入表达质粒载体pcDNA3.1(-)中构建pcDNA3.1(-)-mZAG真... 目的构建小鼠锌α2糖蛋白(mZAG)真核表达载体,在体外培养细胞中鉴定其mRNA和蛋白水平表达。方法提取小鼠肝组织总RNA,采用RT-PCR法扩增mZAG全基因表达序列,酶切法将mZAGcDNA全序列插入表达质粒载体pcDNA3.1(-)中构建pcDNA3.1(-)-mZAG真核表达质粒。采用阳离子脂质体转染法将不同浓度mZAG表达质粒(0、0.4、0.8、1.6μg)pcDNA3.1(-)-mZAG和4对mZAG小干扰RNA(siRNA)序列转染到3T3-L1前脂肪细胞中,实时荧光定量RT-PCR测定mZAGmRNA表达水平,Western blot检测mZAG蛋白表达情况。结果测序鉴定证实成功构建mZAG真核表达质粒pcDNA3.1(-)-mZAG。实时荧光定量RT-PCR检测结果显示,0.4、0.8、1.6μg mZAG转染组3T3-L1细胞中的mZAGmRNA表达水平分别是0μg mZAG转染组的2.58(P=0.002)、3.67(P=0.000)、5.19倍(P=0.001);mZAG-siRNA1组和mZAG-siRNA4组小鼠3T3-L1细胞中的mZAGmRNA表达水平显著减少,分别是不转染mZAGsiRNA干扰序列对照组的49%(P=0.002)和41%(P=0.000)。Western blot检测结果显示,0.8μg mZAG质粒转染组的体外mZAG蛋白表达水平是不转染mZAG质粒对照组的2.75倍(P=0.017);mZAG-siRNA1和mZAG-siR-NA4干扰序列转染组的体外mZAG蛋白表达水平仅为对照组的55%(P=0.004)和62%(P=0.025)。结论成功构建mZAG真核表达载体,该载体能够在体外细胞中良好表达。筛选出能够显著抑制mZAG表达的siRNA1和siRNA4,为今后进一步深入研究ZAG提供了有用工具。 展开更多
关键词 锌α2糖蛋白 3T3-L1细胞 小干扰RNA 质粒构建
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中枢α_2肾上腺素受体与镇痛 被引量：10
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作者 陈明辉 黄显奋 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期15-18,共4页
中枢α_２肾上腺素受体与镇痛陈明辉，黄显奋（医学神经生物学国家重点实验室，上海医科大学神经生物学教研室，上海２０００３２）中文图书资料分类法分类号Ｒ９７１．１早在１９０４年，Ｗｅｂｅｒ就发现肾上腺素（ａｄｒｅｎａｌｉ... 中枢α_２肾上腺素受体与镇痛陈明辉，黄显奋（医学神经生物学国家重点实验室，上海医科大学神经生物学教研室，上海２０００３２）中文图书资料分类法分类号Ｒ９７１．１早在１９０４年，Ｗｅｂｅｒ就发现肾上腺素（ａｄｒｅｎａｌｉｎ，Ａ）有中枢镇痛作用，进一步的研?.. 展开更多
关键词 肾上腺素受体 受体 α2-AR 镇痛
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α_2巨球蛋白抑制肿瘤生长的效应 被引量：6
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作者 陈识杰 李永和 +2 位作者 莫素珍 何介薇 金为翘 《上海医科大学学报》 CSCD 1995年第2期85-88,共4页
用蛋白水解酶抑制剂α２巨球蛋白（α２Ｍ）研究它对肿瘤生长的影响。离体实验中证实它能抑制胃腺癌 ＳＧＣ－７９０１的迁移。整体实验中它能抑制 Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞的生长和肺部转移，抑制效应与剂量相关。合并阿霉素（ＡＤＲ）应用... 用蛋白水解酶抑制剂α２巨球蛋白（α２Ｍ）研究它对肿瘤生长的影响。离体实验中证实它能抑制胃腺癌 ＳＧＣ－７９０１的迁移。整体实验中它能抑制 Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞的生长和肺部转移，抑制效应与剂量相关。合并阿霉素（ＡＤＲ）应用，抑制效果更为显著。同时，发现移植Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞的小鼠经α２Ｍ、ＡＤＲ或α２Ｍ合并ＡＤＲ治疗后，其血浆组织蛋白酶Ｄ活性降低，而红细胞中超氧化物歧化酶水平升高。表明α２Ｍ的抑癌效果不单纯是抑制蛋白酶的结果。 展开更多
关键词 α2巨球蛋白 肿瘤生长 肿瘤转移 药物疗法
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