α1,2-岩藻糖基转移酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 被引量：2

1

作者 贾红红 李玉 +3 位作者 刘逸寒 王尧 梁晓梅 路福平 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期185-190,共6页

利用PCR方法从幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,HP)基因组DNA中获得α1,2-岩藻糖基转移酶(α1,2-fuco-syltransferase,α1,2-fuct)基因,得到大小为906 bp的目的基因,将其定向插入到原核表达载体pET-22b(+)中,得到重组表达载体pET-fuc... 利用PCR方法从幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,HP)基因组DNA中获得α1,2-岩藻糖基转移酶(α1,2-fuco-syltransferase,α1,2-fuct)基因,得到大小为906 bp的目的基因,将其定向插入到原核表达载体pET-22b(+)中,得到重组表达载体pET-fuct。将重组表达载体转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,25℃,0.1 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达4 h,并用SDS-PAGE分析目的蛋白的表达情况。结果表明,可表达出相对分子质量为33 kD的蛋白,与预期分子量一致,说明α1,2-岩藻糖基转移酶在大肠杆菌BL21中实现表达,应用HPLC法进行酶活检验,酶活达到了13.21 pmol/(mgPr.h)。 展开更多

关键词 α12-岩藻糖基转移酶 基因克隆 原核表达 大肠杆菌

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α-1,6岩藻糖基转移酶与肿瘤 被引量：2

2

作者 季君 高春芳 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期209-212,共4页

由α-1,6岩藻糖基转移酶(α1,6-fucosyltransferase,Fut8)催化的核心岩藻糖基化是糖蛋白重要的翻译后修饰和功能调控方式,直接影响细胞一系列生物学特性,而这种糖基化的异常改变往往是疾病状态的特点。本文就Fut8的表达调控特征、生物... 由α-1,6岩藻糖基转移酶(α1,6-fucosyltransferase,Fut8)催化的核心岩藻糖基化是糖蛋白重要的翻译后修饰和功能调控方式,直接影响细胞一系列生物学特性,而这种糖基化的异常改变往往是疾病状态的特点。本文就Fut8的表达调控特征、生物学功能及其与各种肿瘤的关系研究进展作一综述。 展开更多

关键词 α-1 6岩藻糖基转移酶 基因 肿瘤

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α-1,2岩藻糖基转移酶基因35C>T和682A>G突变点体外表达的研究 被引量：1

3

作者 和艳敏 洪小珍 +5 位作者 马开荣 蓝小飞 许先国 朱发明 吕杭军 严力行 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第6期1613-1616,共4页

本研究探讨35C>T和682A>G突变点对α-1,2岩藻糖基转移酶(FUT1)表达活性的影响。PCR扩增FUT1全长编码序列DNA片段,通过TOPOTA技术连接至表达载体pcDNA3.1/V5-His,获取目的重组质粒。采用脂质体转染方法将重组质粒转染COS-7细胞,经G... 本研究探讨35C>T和682A>G突变点对α-1,2岩藻糖基转移酶(FUT1)表达活性的影响。PCR扩增FUT1全长编码序列DNA片段,通过TOPOTA技术连接至表达载体pcDNA3.1/V5-His,获取目的重组质粒。采用脂质体转染方法将重组质粒转染COS-7细胞,经G418筛选培养后,利用流式细胞术分析细胞表面H抗原,实时荧光PCR检测fut1 mRNA表达情况。结果表明:成功获取了35T、682G+35T和682A+35C重组质粒。转染2天后H抗原在COS-7细胞膜上表达,第4天达最高峰。与野生型(682A+35C)转染的细胞相比,第4天重组质粒(682G+35T)转染细胞H抗原的表达量仅为野生型的13.3%,而重组质粒35T转染细胞为野生型的52.7%。转染后fut1mRNA水平随着时间延长而逐渐递减,在第1天重组质粒(682G+35T)转染细胞fut1 mRNA水平仅为野生型(682A+35C)的14%。结论:682A>G突变明显降低α-1,2岩藻糖基转移酶活性,而35C>T引起H抗原的表达部分下降。 展开更多

关键词 H抗原 类孟买型 α-1 2岩藻糖基转移酶

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奶牛α-1,3-岩藻糖基转移酶基因的克隆表达

4

作者 姚晶 张阳旸 +1 位作者 吴正钧 任婧 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期261-267,共7页

唾液酸化路易斯-X(sialyl lewis x,Slex)是选择素家族的一个共同糖配体,通过与选择素竞争性地结合炎性细胞,可以抑制炎症反应。克隆表达Slex合成过程中的关键酶,就可以在体外进行Slex的生物合成,从而进行相关生物制剂的开发。α-1,3-岩... 唾液酸化路易斯-X(sialyl lewis x,Slex)是选择素家族的一个共同糖配体,通过与选择素竞争性地结合炎性细胞,可以抑制炎症反应。克隆表达Slex合成过程中的关键酶,就可以在体外进行Slex的生物合成,从而进行相关生物制剂的开发。α-1,3-岩藻糖基转移酶(alpha-(1,3)-fucosyltransferase,FT)就是参与Slex生物合成过程的关键酶之一。利用相关软件对牛的FT基因进行了生物信息学的分析,了解了FT的相关理化性质。通过PCR的方法获得了FT基因,构建了重组质粒pMD19-FT,并亚克隆至表达载体pPIC9K。通过电转化将线性化的表达质粒pPIC9K-FT整合到宿主菌Pichia pastoris GS115基因组上,构建了重组酵母GS115-FT。经诱导表达后,SDS-PAGE检测到了目的蛋白质条带,证明了此基因在P.pastoris GS115中能够可溶性表达。 展开更多

关键词 唾液酸化路易斯-X 牛 α-1 3-岩藻糖基转移酶 克隆 表达

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过表达α1,3-岩藻糖基转移酶Ⅶ通过增强p38MAPK信号通路抑制UVC照射诱导的人肝癌SMMC-7721细胞的凋亡 被引量：1

5

作者 王琼 王浩 +2 位作者 胡敏 申宗侯 张英 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期543-547,共5页

目的初步探讨α1,3-岩藻糖基转移酶Ⅶ(简称FUT7)在UVC照射诱导的人肝癌SMMC-7721(简称7721)细胞凋亡过程中的作用及机制。方法用RT-PCR检测转染pcDNA3-FUT7质粒的7721细胞及转染空质粒pcDNA3的7721细胞中FUT7基因的转录水平;用流式细胞... 目的初步探讨α1,3-岩藻糖基转移酶Ⅶ(简称FUT7)在UVC照射诱导的人肝癌SMMC-7721(简称7721)细胞凋亡过程中的作用及机制。方法用RT-PCR检测转染pcDNA3-FUT7质粒的7721细胞及转染空质粒pcDNA3的7721细胞中FUT7基因的转录水平;用流式细胞仪检测细胞表面FUT7产物SLex的表达水平;利用DAPI染核计算UVC照射后细胞的凋亡比率;用结晶紫染色法测定细胞的存活率;利用Western blot检测Caspase3的剪切情况及p38MAPK、JNK1/2和ERK1/2的磷酸化水平。结果过表达FUT7能抑制UVC照射诱导的7721细胞凋亡,同时还增强了细胞中p38MAPK信号通路的活性,而用p38MAPK的特异性抑制剂处理则可削弱FUT7的抗凋亡作用。结论在UVC照射诱导的7721细胞凋亡过程中FUT7具有抗凋亡的作用,这种作用可能部分通过增强p38MAPK信号通路活性而实现。 展开更多

关键词 凋亡 UVC照射 α1 3-岩藻糖基转移酶Ⅶ SLEX p38MAPK

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肝细胞癌癌组织α-1,3岩藻糖基转移酶各亚型mRNA的半定量研究 被引量：1

6

作者 张春东 刘银坤 +2 位作者 贺斌 叶胜龙 汤钊猷 《上海医科大学学报》 CSCD 2000年第2期79-82,共4页

目的　探讨肝癌组织α 1,3岩藻糖基转移酶 (α 1,3 fucosyltransferase,FucT)的各亚型Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ的mRNA表达及其与肝癌转移的关系。方法　应用异硫氰酸胍一步法获得无DNA污染的RNA ,经RT PCR扩增后对各亚型FucTPCR产物测序鉴定... 目的　探讨肝癌组织α 1,3岩藻糖基转移酶 (α 1,3 fucosyltransferase,FucT)的各亚型Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ的mRNA表达及其与肝癌转移的关系。方法　应用异硫氰酸胍一步法获得无DNA污染的RNA ,经RT PCR扩增后对各亚型FucTPCR产物测序鉴定并扫描定量。结果　肝癌组织未发现FucT Ⅲ、ⅤmRNA的表达 ,FucT Ⅶ在癌和癌周组织的表达都很低 ,且两者无显著性差异。肝癌组织FucT Ⅳ、Ⅵ的表达明显高于癌旁肝组织与正常肝组织 ,转移性肝癌FucT Ⅳ、Ⅵ的表达显著高于非转移性肝癌者。结论　FucT Ⅳ、Ⅵ与肝癌的转移有关。 展开更多

关键词 肝细胞癌 α-1 3岩藻糖基转移酶亚型 转移

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α-1,6-岩藻糖基转移酶的生物信息学分析 被引量：2

7

作者 王子豪 钱荣凯 +2 位作者 苏林杰 贾宁 孙钦儒 《科学技术与工程》 北大核心 2021年第30期12832-12837,共6页

核心岩藻糖糖基化作为一种较常见N-糖基化,是重要的翻译后修饰机制,可以快速改变蛋白质的生物学性质,在哺乳动物细胞识别、增殖以及代谢活动中具有重要的作用。在人类,α-1,6-岩藻糖基转移酶(FUT8)是此修饰过程的唯一蛋白。利用生物信... 核心岩藻糖糖基化作为一种较常见N-糖基化,是重要的翻译后修饰机制,可以快速改变蛋白质的生物学性质,在哺乳动物细胞识别、增殖以及代谢活动中具有重要的作用。在人类,α-1,6-岩藻糖基转移酶(FUT8)是此修饰过程的唯一蛋白。利用生物信息学分析FUT8蛋白的编码基因结构、蛋白质的氨基酸序列特征和三维结构的信息,解析其生物学功能。利用NCBI网站生物信息数据库及在线工具分析fut8基因的结构及表达调控特点;分析FUT8蛋白的理化性质、跨膜结构域、立体结构、蛋白相互作用网络及通路,明确其生物功能及其在相关疾病中的作用。编码FUT8的人类fut8基因位于14q23.3,转录产物最长3895 bp,共编码氨基酸575个,产物FUT8为弱碱亲水性,存在由内向外的跨膜区段,二级结构元件以α螺旋为主,可分为4个结构域,与多种蛋白质及受体存在相互作用,催化蛋白质核心岩藻糖基化的形成,序列比对表明FUT8存在多个保守域并在物种进化中高度保守。利用生物信息数据库及工具成功获取人FUT8蛋白的理化性质、跨膜域信息、立体结构,以及其与多种蛋白的相互作用网络,为未来进一步研究FUT8在肥胖及相关疾病、肿瘤转移炎症及免疫和造血异常中的作用提供理论依据。 展开更多

关键词 α-1 6-岩藻糖基转移酶 糖基化 生物信息学分析

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α1,2-岩藻糖转移酶基因转染增加卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ Lewis y抗原的表达 被引量：9

8

作者 林蓓 郝莹莹 +4 位作者 王冬冬 朱连成 张淑兰 齐藤真木子 岩森正男 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期284-289,共6页

目的将人α1,2-岩藻糖基转移酶(α1,2-FT)基因转染卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ并探讨细胞表面Lewisy及其他相关糖脂抗原的变化。方法采用PCR方法克隆人α1,2-FT基因编码区HFUT-H,构建表达载体pcDNA3.1(-)-HFUT-H,利用磷酸钙法将其转染入卵巢癌... 目的将人α1,2-岩藻糖基转移酶(α1,2-FT)基因转染卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ并探讨细胞表面Lewisy及其他相关糖脂抗原的变化。方法采用PCR方法克隆人α1,2-FT基因编码区HFUT-H,构建表达载体pcDNA3.1(-)-HFUT-H,利用磷酸钙法将其转染入卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ,建立α1,2-FT基因稳定高表达细胞株RMG-Ⅰ-H。通过酶活性测定证明转染前后细胞系α1,2-FT活性的改变,采用薄层层析、薄层层析免疫染色方法测定转染前后细胞脂质及糖脂,特别是Ⅱ型寡糖的变化。结果基因转染后细胞RMG-Ⅰ-H中H-1抗原及Lewisy抗原显著增加,特别是Lewisy抗原为转染前的20倍;而Ⅰ型糖链Lewisb显著减少。转染前后细胞膜上的主要脂质成分胆固醇和磷脂质的含量没有变化,且中性糖脂质也没有明显变化。结论α1,2-FT基因转染增加α1,2-FT活性的同时,增加卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ Lewisy抗原的表达;RMG-Ⅰ Lewisy高表达细胞系的建立为研究Lewisy抗原与卵巢癌生物学行为提供了细胞模型。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 α1 2-岩藻糖基转移酶 基因 转染 Lewis抗原

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PARP1通过调控N-糖基转移酶FUT8影响胃癌AGS细胞的增殖与5-FU耐药 被引量：4

9

作者 王晶 王宏浩 +2 位作者 向田 任文镇 刘杲 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期410-418,共9页

目的:探讨聚二磷酸腺苷核糖聚合酶1(PARP1)对胃癌AGS细胞的增殖和5-FU耐药性的影响及其可能的机制。方法:收集2018年5月至2019年12月于恩施土家族苗族自治州中心医院就诊的72例胃癌患者的肿瘤组织和癌旁组织,采用qPCR和免疫组化法检测... 目的:探讨聚二磷酸腺苷核糖聚合酶1(PARP1)对胃癌AGS细胞的增殖和5-FU耐药性的影响及其可能的机制。方法:收集2018年5月至2019年12月于恩施土家族苗族自治州中心医院就诊的72例胃癌患者的肿瘤组织和癌旁组织,采用qPCR和免疫组化法检测胃癌和癌旁组织中PARP1的表达状况。CCK-8法、流式细胞术和集落形成实验分别检测PARP1抑制剂AG14361对胃癌AGS细胞增殖、凋亡和集落形成的影响,MTT法检测AG14361对胃癌细胞5-FU敏感性的影响。mRNA测序分析AG14361处理AGS细胞后差异基因整体分布情况,KEGG富集分析相关信号通路。向AGS细胞转染siFUT8以敲减FUT8基因的表达,qPCR和WB法检测AGS细胞内α-1,6-岩藻糖基转移酶(FUT8)的表达状况和敲减FUT8效果,CCK-8法、流式细胞术和集落形成实验分别检测AG14361处理对敲减FUT8表达的AGS细胞增殖、凋亡和集落形成的影响。结果:与癌旁组织相比,胃癌组织中PARP1呈高表达(P<0.001)。AG14361处理可显著抑制AGS细胞的增殖和细胞集落形成,促进AGS细胞凋亡(均P<0.01)。AG14361处理可降低5-FU杀伤胃癌细胞的IC_(50),且在AGS细胞中尤为明显,IC50下降超过60%。m RNA测序结果显示,N-糖基化修饰中FUT8是AG14361抑制AGS细胞增殖的关键糖基转移酶(P<0.05)。与siNC组相比,IC_(50)浓度的AG14361可显著逆转干扰FUT8对AGS细胞增殖的增加,促进细胞凋亡和BAX蛋白表达、抑制Bcl2蛋白表达,抑制FUT8干扰所致AGS细胞集落的增加(均P<0.01)。结论:PARP1可通过调控N-糖基转移酶FUT8促进胃癌细胞恶性转化,其抑制剂AG14361可增强胃癌细胞对5-FU的敏感性,PARP1可能成为胃癌治疗的一个潜在靶标。 展开更多

关键词 胃癌 AGS细胞 多ADP核糖聚合酶1 α-1 6-岩藻糖基转移酶8 增殖 5-FU 耐药

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功能性低聚糖合成中糖基转移酶研究进展 被引量：9

10

作者 李玉 路福平 王正祥 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第9期358-363,共6页

低聚异麦芽糖、低聚果糖、岩藻糖基化寡糖和唾液酸化寡糖等功能性低聚糖因具有显著促双歧杆菌增殖的作用,已被广泛应用于婴幼儿乳粉及食品中,目前合成这些功能糖的主要途径是利用微生物所产的α-葡萄糖基转移酶、果糖基转移酶、岩藻糖... 低聚异麦芽糖、低聚果糖、岩藻糖基化寡糖和唾液酸化寡糖等功能性低聚糖因具有显著促双歧杆菌增殖的作用,已被广泛应用于婴幼儿乳粉及食品中,目前合成这些功能糖的主要途径是利用微生物所产的α-葡萄糖基转移酶、果糖基转移酶、岩藻糖基转移酶或唾液酸转移酶等糖基转移酶,以葡萄糖、蔗糖或乳糖等作为底物进行合成。本文针对这几类微生物糖基转移酶的来源、性质、活性、表达和在功能性低聚糖合成中的应用以及相关研究进行简要的概括和总结,为高活力糖基转移酶的研究与开发以及改善其在功能低聚糖生产中的应用性能提供一定的参考。 展开更多

关键词 α-葡萄糖基转移酶 果糖基转移酶 岩藻糖基转移酶 唾液酸转移酶

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末端岩藻糖基化抑制剂对环孢素诱导的肾脏上皮-间充质转化的影响及其机制 被引量：1

11

作者 毛凯锋 罗嘉亮 +2 位作者 林芬望 左大明 叶俊生 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期626-633,共8页

目的 探讨末端岩藻糖基化抑制剂2-脱氧-D-半乳糖(2-D-gal)对环孢素(CsA)诱导的肾脏上皮-间充质转化(EMT)的影响及其机制。方法 将15只8~10周的雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(Ctrl组)、CsA组和CsA+2-D-gal组,每组各5只。通过蛋白质印迹... 目的 探讨末端岩藻糖基化抑制剂2-脱氧-D-半乳糖(2-D-gal)对环孢素(CsA)诱导的肾脏上皮-间充质转化(EMT)的影响及其机制。方法 将15只8~10周的雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(Ctrl组)、CsA组和CsA+2-D-gal组,每组各5只。通过蛋白质印迹法检测Ctrl组和CsA组小鼠肾脏组织岩藻糖基转移酶1(FUT1)和EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,免疫荧光法检测Ctrl组和CsA组小鼠肾脏组织末端岩藻糖的表达,Masson染色检测各组小鼠肾脏组织纤维化情况,并检测各组小鼠血尿素氮和血清肌酐水平。体外建立CsA诱导肾小管上皮HK2细胞EMT模型,分别用0、2.5、5.0和10.0μmol/L的CsA刺激HK2细胞24 h,另将HK2细胞分为Ctrl组、2-D-gal组、CsA组和CsA+2-D-gal组,观察不同浓度CsA刺激后及各组HK2细胞形态,通过蛋白质印迹法检测不同浓度CsA刺激后及各组HK2细胞FUT1、E-cadherin、Vimentin和α-SMA的表达,免疫荧光法检测Ctrl组和CsA组HK2细胞末端岩藻糖的表达。结果 与Ctrl组比较,CsA组小鼠肾脏组织E-cadherin的蛋白相对表达量下降,FUT1、Vimentin和α-SMA蛋白相对表达量均升高(均为P<0.05),小鼠肾脏组织末端岩藻糖表达增多。与Ctrl组比较,CsA组和CsA+2-Dgal组小鼠的血尿素氮和血清肌酐水平均升高,与CsA组比较,CsA+2-D-gal组小鼠的血尿素氮和血清肌酐水平均降低(均为P<0.05)。与Ctrl组比较,CsA组和CsA+2-D-gal组小鼠肾脏组织胶原纤维沉积均增多,α-SMA蛋白相对表达量均升高;与CsA组比较,CsA+2-D-gal组小鼠肾脏组织胶原纤维沉积减少,α-SMA蛋白相对表达量下降(均为P<0.05)。随着CsA的浓度增加,HK2细胞的形态由正常的鹅卵石样逐渐变长变细,HK2细胞FUT1、Vimentin和α-SMA蛋白相对表达量升高,E-cadherin蛋白相对表达量下降,呈浓度依赖性。与Ctrl组比较,CsA组HK2细胞末端岩藻糖表达增多。CsA处理的基础上联合2-D-gal干预后,CsA+2-D-gal组的HK2细胞形态恢复到与正常HK2细胞形态相似。与CsA组比较,CsA+2-D-gal组的HK2细胞E-cadherin蛋白相对表达量升高,Vimentin和α-SMA蛋白相对表达量均下降(均为P<0.05)。结论 CsA在体内和体外均可诱导EMT发生,并且伴有末端岩藻糖基化水平增加。2-D-gal可以通过抑制末端岩藻糖基化来抑制CsA诱导的EMT。 展开更多

关键词 2-脱氧-D-半乳糖 环孢素 肾毒性 上皮-间充质转化(EMT) 肾脏纤维化 岩藻糖基转移酶1(FUT1) 末端岩藻糖 α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)

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低氧诱导的HIF-1α对结肠癌细胞生长代谢的影响及其调控机制 被引量：5

12

作者 何伟玲 李清海 +1 位作者 严时佳 万国辉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第8期1035-1040,共6页

目的低氧环境下肿瘤细胞生长代谢异常,探讨低氧诱导因子(hypoxia inducible factor 1,HIF)对岩藻糖基转移酶Ⅳ(fucosyltransferase4,FUT4)的负性调控机制及病理生理意义。方法前期从基因表达数据库中筛选到符合研究条件的芯片GSE77606,... 目的低氧环境下肿瘤细胞生长代谢异常,探讨低氧诱导因子(hypoxia inducible factor 1,HIF)对岩藻糖基转移酶Ⅳ(fucosyltransferase4,FUT4)的负性调控机制及病理生理意义。方法前期从基因表达数据库中筛选到符合研究条件的芯片GSE77606,结合京都基因与基因组百科全书通路富集分析,发现低氧环境下结肠癌(colon cancer)细胞生长代谢异常,FUT4表达明显下降;随后通过TargetScan数据库筛选出与FUT4信使RNA序列互补的微小RNA(miRNA),并结合定量RT-PCR(QRT-PCR)、荧光素酶报告基因实验及突变实验、短发夹RNA干扰实验和miRNA沉默和过表达实验等探索其具体的调控机制。结果QRT-PCR证实低氧培养HCT-116细胞明显低表达FUT4(P <0.001);TargetScan数据库筛选结合荧光素酶报告基因实验和突变实验证实hsa-miRNA-23a-3p可靶向FUT4信使RNA并下调其表达(P <0.05),同时QRT-PCR显示低氧环境可诱导hsa-miRNA-23a-3p的表达(P <0.05);短发夹RNA干扰实验证实hsa-miRNA-23a-3p的表达受到HIF-1α的正性调控(P <0.01);最后hsa-miRNA-23a-3p沉默或过表达实验进一步证实了hsa-miRNA-23a-3p可正反调控FUT4的表达水平(P <0.001)。结论结肠癌细胞在低氧环境中通过HIF-1α诱导has-miRNA-23a-3p下调FUT4的表达,影响代谢调控,降低细胞侵袭性。 展开更多

关键词 岩藻糖基转移酶Ⅳ hsa-miRNA-23a-3p 低氧诱导因子-1Α 结肠癌

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过表达外源FUT8增加乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力 被引量：1

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作者 郑立红 张英博 +4 位作者 王晓丽 卢长方 樊丽 丛欢 岳丽玲 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期741-747,共7页

核心岩藻糖的修饰被认为是对糖蛋白进行转录后加工和功能调控的一种重要方式,与肿瘤的发生发展密切相关,但其在乳腺癌恶性转化过程中所发挥的生物学功能尚不明确.本文构建了α1,6-岩藻糖基移转酶(FUT8)基因真核表达载体,将其转染人乳腺... 核心岩藻糖的修饰被认为是对糖蛋白进行转录后加工和功能调控的一种重要方式,与肿瘤的发生发展密切相关,但其在乳腺癌恶性转化过程中所发挥的生物学功能尚不明确.本文构建了α1,6-岩藻糖基移转酶(FUT8)基因真核表达载体,将其转染人乳腺癌细胞Bcap-37,实时PCR及Western印迹检测FUT8 mRNA和蛋白质表达,通过细胞划痕实验和Transwell小室观察FUT8过表达对细胞体外迁移、侵袭能力的影响,免疫共沉淀和Western印迹检测肿瘤细胞整合素、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)家族相关蛋白质表达水平变化.结果显示,外源FUT8基因在mRNA水平和蛋白质水平的表达均显著增加,FUT8过表达组细胞迁移和侵袭能力明显增强;上调FUT8基因表达可使Bcap-37细胞中核心岩藻糖基化的整合素-α3β1、MMP-2和MMP-9在蛋白质水平呈不同程度升高.上述研究表明,FUT8可通过核心岩藻糖化修饰正性调控整合素-α3β1的功能,诱导MMP-2、MMP-9的表达,促进乳腺癌细胞的迁移和侵袭. 展开更多

关键词 乳腺癌 α1 6-岩藻糖基转移酶 过表达 侵袭 迁移

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