5-氟尿嘧啶半乳糖神经酰胺脂质体的抗耐药作用及部分机制研究 被引量：3

1

作者 金涌 李俊 +3 位作者 李元海 吕雄文 葛金芳 徐叔云 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期954-958,共5页

目的研究5氟尿嘧啶半乳糖神经酰胺脂质体(5FuGCL)体外对耐5FuHepG2细胞株的抑制作用并对其抗耐药机制进行探讨。方法在建立耐5Fu的HepG2细胞株模型的基础上,采用MTT法检测5FuGCL对其的抑制作用。另外,通过高效液相法(HPLC)检测细胞内液... 目的研究5氟尿嘧啶半乳糖神经酰胺脂质体(5FuGCL)体外对耐5FuHepG2细胞株的抑制作用并对其抗耐药机制进行探讨。方法在建立耐5Fu的HepG2细胞株模型的基础上,采用MTT法检测5FuGCL对其的抑制作用。另外,通过高效液相法(HPLC)检测细胞内液的药物含量、免疫组化法检测胸苷酸合酶(TS)的表达、化学法检测NO含量等研究其抗耐药作用机制。结果5FuGCL(75,150,300,600,1200μmol·L-1)对耐5Fu的HepG2细胞株有明显的抑制作用,IC50为158.6μmol·L-1,远小于游离5Fu(400.9μmol·L-1);5FuGCL(300μmol·L-1)对耐5Fu的HepG2细胞的抑制作用随时间的延长而增强,其中(24～48h)的抑制作用明显强于相同浓度的游离5Fu。5FuGCL(300μmol·L-1)与相同浓度的游离5Fu比较,能明显增加药物进入HepG2细胞内液的程度;5FuGCL(75,300,1200μmol·L-1)既可明显降低TS的表达,又可显著增加NO的含量,且5FuGCL(300,1200μmol·L-1)与相同浓度的游离5Fu相比,其作用明显增强。结论5FuGCL有明显的抗5Fu耐药作用,这可能是通过增加细胞内液5Fu的含量,抑制TS的表达和增加NO含量实现的。 展开更多

关键词 5-氟尿嘧啶 半乳糖神经酰胺 脂质体 耐药

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半乳糖凝集素-3、可溶性基质溶素-2检测对心力衰竭诊断的相关性研究 被引量：24

2

作者 徐晓晓 贾如意 +2 位作者 王涛 刘强 甄臻 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2016年第9期866-869,共4页

目的:探讨半乳糖凝集素-3和可溶性基质溶素-2(ST2)与慢性心力衰竭分级、传统心力衰竭指标的相关性。方法:选择2014-02至2015-10间在我院心血管内科就诊的慢性心力衰竭患者(慢性心力衰竭组)142例和健康体检人群(正常对照组)85例。按纽约... 目的:探讨半乳糖凝集素-3和可溶性基质溶素-2(ST2)与慢性心力衰竭分级、传统心力衰竭指标的相关性。方法:选择2014-02至2015-10间在我院心血管内科就诊的慢性心力衰竭患者(慢性心力衰竭组)142例和健康体检人群(正常对照组)85例。按纽约心脏协会(NYHA)心功能分级标准将患者分为Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级。入院后完善N末端B型利钠肽原(NT-pro BNP)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、超声形态学等检查,并采用酶联免疫吸附法检测半乳糖凝集素-3、可溶性ST2的表达水平。结果:心力衰竭NYHA心功能Ⅲ级、Ⅳ级患者半乳糖凝集素-3、可溶性ST2明显升高。半乳糖凝集素-3、可溶性ST2与hs-CRP、NT-pro BNP呈正相关,与左心室射血分数呈负相关;可溶性ST2与左心室舒张末期内径(LVEDD)也呈正相关。Logistic分析显示,半乳糖凝集素-3和可溶性ST2与心力衰竭患者近期死亡存在相关性(P<0.05)。半乳糖凝集素-3、可溶性ST2诊断心力衰竭的受试者工作特征曲线(ROC曲线)下面积分别为0.738和0.771,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:半乳糖凝集素-3、可溶性ST2与传统心力衰竭指标具有相关性,可用于慢性心力衰竭的诊断。 展开更多

关键词 心力衰竭 半乳糖凝集素-3 可溶性基质溶素-2 N末端B型利钠肽原 诊断

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应用4-甲基伞形酮-β-D-半乳糖苷快速检测食品中的大肠菌群 被引量：6

3

作者 李平 甄宏太 +3 位作者 方原民 周洪斌 朱金连 肖震 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第4期285-288,共4页

依据ISO 9308-1:2000有关大肠菌群具有产生β-半乳糖苷酶的特性,研制了4-甲基伞形酮-β-D半乳糖苷,并以此制成4-甲基伞形酮-β-D半乳糖苷肉汤(MUGal肉汤):将MUGal肉汤与SN0169指定的月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤对比检测13种标准菌株,所得... 依据ISO 9308-1:2000有关大肠菌群具有产生β-半乳糖苷酶的特性,研制了4-甲基伞形酮-β-D半乳糖苷,并以此制成4-甲基伞形酮-β-D半乳糖苷肉汤(MUGal肉汤):将MUGal肉汤与SN0169指定的月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤对比检测13种标准菌株,所得结果完全一致;对比检验48份食物样品,本法检出大肠菌群的阳性率高出标准法47%。从上述标准法未检出而本法判定为阳性的样品培养液中,分离可疑菌,经乳糖发酵、氧化酶和硝酸盐还原试验以及API 20E鉴定,证明95．1%为大肠菌群。实验结果表明,用4-甲基伞形酮-β-D半乳糖苷肉汤检验食品中大肠菌群,快速、简便、准确、可靠,可作为一种任选的标准方法加以应用。 展开更多

关键词 4-甲基伞形酮-β-半乳糖苷(MuGal) 乳糖胆盐发酵管 月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST) 大肠菌群

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α-半乳糖苷酶法合成α-半乳糖基-β-环糊精的研究 被引量：5

4

作者 沈汪洋 金征宇 高虹 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第19期4041-4043,共3页

应用发芽咖啡豆α-半乳糖苷酶法合成α-半乳糖基-β-环糊精,研究其合成工艺。通过Box-Behnken设计等方法,得出工艺条件为α-半乳糖苷酶用量73 nkat,时间28 h,pH 6.3,温度40℃,振荡速度75 r/min,反应体系包括2 mL醋酸缓冲液(50 mmol/L),... 应用发芽咖啡豆α-半乳糖苷酶法合成α-半乳糖基-β-环糊精,研究其合成工艺。通过Box-Behnken设计等方法,得出工艺条件为α-半乳糖苷酶用量73 nkat,时间28 h,pH 6.3,温度40℃,振荡速度75 r/min,反应体系包括2 mL醋酸缓冲液(50 mmol/L),β-环糊精0.4 mol/L,蜜二糖0.8 mol/L。在此条件下,α-半乳糖基-β-环糊精绝对产率为28.4%,比优化前提高了41.3%。 展开更多

关键词 α-半乳糖苷酶 酶法合成 α-半乳糖基-β-环糊精

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半乳糖基-β-环糊精的合成与结构研究 被引量：4

5

作者 沈汪洋 金征宇 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第12期57-59,共3页

以β-环糊精和蜜二糖为原料,通过α-半乳糖苷酶酶法合成得到半乳糖基β--环糊精(Gal-β-CD)。酶法合成条件为:蜜二糖中酶用量为20U/g,β-环糊精和蜜二糖的物质的量比为1:2,pH6.5(50mmol/L醋酸缓冲液),反应时间24h,反应温度40℃。经过高... 以β-环糊精和蜜二糖为原料,通过α-半乳糖苷酶酶法合成得到半乳糖基β--环糊精(Gal-β-CD)。酶法合成条件为:蜜二糖中酶用量为20U/g,β-环糊精和蜜二糖的物质的量比为1:2,pH6.5(50mmol/L醋酸缓冲液),反应时间24h,反应温度40℃。经过高效液相色谱分离产物,通过质谱、红外光谱和核磁共振证明该产物为6-O-α-D-半乳糖基-β-环糊精。 展开更多

关键词 半乳糖基-β-环糊精 Β-环糊精 蜜二糖 α-半乳糖苷酶

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人多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶2基因反义RNA表达质粒的构建及其功能的初步研究 被引量：1

6

作者 仇灏 金美芳 +4 位作者 周迎会 孙其昌 刘可人 沈宏杰 吴士良 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期43-48,共6页

反义封闭人多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(pp-GalNAc-T2)的基因表达,对胃癌细胞SGC7901中转化生长因子-β1(TGF-β1)与基质金属蛋白酶2(MMP2)基因表达及细胞增殖有影响.在对几株肿瘤细胞的pp-GalNAc-T2基因表达水平进行分析后,以高表达pp... 反义封闭人多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(pp-GalNAc-T2)的基因表达,对胃癌细胞SGC7901中转化生长因子-β1(TGF-β1)与基质金属蛋白酶2(MMP2)基因表达及细胞增殖有影响.在对几株肿瘤细胞的pp-GalNAc-T2基因表达水平进行分析后,以高表达pp-GalNAc-T2的人胃癌细胞株SGC7901的总RNA为模板,利用RT-PCR方法扩增两段不同长度pp-GalNAc-T2基因片段,构建反义表达载体转染胃癌细胞SGC7901,通过G418筛选,建立一系列旨在封闭胃癌细胞SGC7901ppGalNAc-T2基因表达的亚细胞克隆.通过流式细胞术、荧光显微镜、RT-PCR及Western印迹检测反义封闭pp-GalNAc-T2基因RNA表达后胃癌细胞SGC7901增殖以及TGF-β1、MMP2表达水平的变化.反义封闭pp-GalNAc-T2基因表达后,胃癌细胞SGC7901 pp-GalNAc-T2的表达水平明显降低,细胞分裂增殖减慢,表明反义封闭pp-GalNAc-T2基因表达对胃癌细胞SGC7901的生长增殖有影响.结果还显示,反义封闭pp-GalNAc-T2基因表达可使TGF-β1、MMP2基因在mRNA与蛋白质表达水平均增加,提示pp-GalNAc-T2基因表达可能对胃癌细胞SGC7901浸润转移产生影响.以上结果表明,pp-GalNAc-T2基因在肿瘤细胞中广泛表达,并可能与肿瘤的增殖及浸润转移相关. 展开更多

关键词 多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶 基质金属蛋白酶 转化生长因子-Β1 SGC7901细胞

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代谢标记小分子探针6-炔基-2-乙酰氨基半乳糖的合成 被引量：1

7

作者 韩小见 温银行 +4 位作者 郑路 赵康康 苏峰 马静 王佳佳 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期442-447,共6页

以乙酰氨基半乳糖为起始原料,经过叔丁基二甲基硅基对糖环的6位选择性保护,随后将1,3,4进行甲氧甲基保护,选择性脱除6位保护基,经Dess-Martin氧化、Bestmann′s试剂和酸性条件下去保护后得到目标化合物,并通过单晶衍射确定了中间体7的结... 以乙酰氨基半乳糖为起始原料,经过叔丁基二甲基硅基对糖环的6位选择性保护,随后将1,3,4进行甲氧甲基保护,选择性脱除6位保护基,经Dess-Martin氧化、Bestmann′s试剂和酸性条件下去保护后得到目标化合物,并通过单晶衍射确定了中间体7的结构;本文为6-炔基-2-乙酰氨基半乳糖的合成提供了有效的制备方法,为后续相关生物学研究提供了基础。 展开更多

关键词 探针 标记 合成 2-脱氧-N-乙酰基-6-炔基-半乳糖胺

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反相高效液相色谱-脉冲电化学检测法测定重组人生长激素中异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（英文） 被引量：1

8

作者 王荔 林碧蓉 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期308-313,共6页

采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)-脉冲电化学检测(PED)法测定了重组人生长激素(rhGH)中的诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)。rhGH样品经超滤离心后,用超纯水提取,经C18色谱柱分离,用脉冲电化学器检测。结果表明,样品中添加0.02~0.10... 采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)-脉冲电化学检测(PED)法测定了重组人生长激素(rhGH)中的诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)。rhGH样品经超滤离心后,用超纯水提取,经C18色谱柱分离,用脉冲电化学器检测。结果表明,样品中添加0.02~0.10 mg/L的IPTG,其回收率为100%~102%,相对标准偏差(n=3)小于10%。在优化的条件下,IPTG的检出限可达1μg/L(0.1 pmol,25μL)。该方法简便高效,具有良好的灵敏度、回收率和重复性。 展开更多

关键词 反相高效液相色谱法 脉冲电化学检测 巯基 含硫化学物 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 重组人生长激素

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不同金属离子和表面活性剂对转糖基β-半乳糖苷酶活性的影响

9

作者 闫明奎 潘爱珍 +3 位作者 王超萍 司振军 衣田甜 马玲琪 《中国酿造》 CAS 北大核心 2010年第8期100-104,共5页

在巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)发酵产转糖基β-半乳糖苷酶过程中,以单因素试验为基础研究了不同金属离子和表面活性剂对转糖基β-半乳糖苷酶活性的影响,利用Mintab15软件响应面分析法优化在转糖基β-半乳糖苷酶活性最大时的最佳... 在巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)发酵产转糖基β-半乳糖苷酶过程中,以单因素试验为基础研究了不同金属离子和表面活性剂对转糖基β-半乳糖苷酶活性的影响,利用Mintab15软件响应面分析法优化在转糖基β-半乳糖苷酶活性最大时的最佳金属离子浓度、表面活性剂的添加量及加入时机。结果表明,发酵培养基中镁离子浓度为0.031%,吐温-80添加量为0.24%,钾离子浓度为0.047%时,最有利于提高转糖基β-半乳糖苷酶的活性且酶的活性最大。为保持产酶过程中β-半乳糖苷酶的最大活性,在菌体生长对数期的初期,OD值为1.6时添加0.2%的吐温-80,添加过早或过晚都会影响转糖基β-半乳糖苷酶的活性。 展开更多

关键词 金属离子 表面活性剂 转糖基β-半乳糖苷酶 酶活性

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传统奶酪中产转糖基活性β-半乳糖苷酶乳酸菌的筛选鉴定及其合成低聚半乳糖条件 被引量：8

10

作者 王丽军 牟元珍 +4 位作者 关波 万丽云 张艳 胡有贞 倪永清 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第22期88-95,共8页

分离筛选产转糖基活性β-半乳糖苷酶的乳酸菌新菌株,为酶法高效合成低聚半乳糖(galactooligosaccharides,GOS)提供新的酶源。以乳糖为唯一碳源,碳酸钙溶钙圈和添加5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(X-Gal)的MRS培养基筛选平板进行初筛,... 分离筛选产转糖基活性β-半乳糖苷酶的乳酸菌新菌株,为酶法高效合成低聚半乳糖(galactooligosaccharides,GOS)提供新的酶源。以乳糖为唯一碳源,碳酸钙溶钙圈和添加5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(X-Gal)的MRS培养基筛选平板进行初筛,以产酶菌株粗酶液催化乳糖反应产物的薄层色谱(thin layer chromatography,TLC)分析复筛,从新疆伊犁地区牧民手工制作的奶酪样品中筛选产转糖基活性β-半乳糖苷酶的乳酸菌。结合其形态学、生理生化特征及16S rRNA序列同源性分析对产转糖基活性β-半乳糖苷酶菌株进行鉴定。单因素试验确定产酶条件和转糖基反应条件,TLC结合高效液相色谱分析转糖基反应产物各组分含量。筛选获得产转糖基活性β-半乳糖苷酶的菌株6株,其中Lactobacillus plantarum YLBGNL-S7所产β-半乳糖苷酶的转糖基活性最强。单因素试验结果表明,在温度50℃、pH 6.0、乳糖质量浓度300 mg/mL的条件下反应4 h,GOS得率可达质量分数43.40%,其中转移二糖和转移三糖质量分数分别为18.29%和12.95%。以上结果表明,L.plantarum YLBGNL-S7是一株产转糖基活性β-半乳糖苷酶的新菌株,在益生性GOS的合成领域具有应用前景。 展开更多

关键词 Β-半乳糖苷酶 转糖基活性 低聚半乳糖 植物乳杆菌 奶酪

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一株曲霉(Aspergillus sp.AF)β-半乳糖苷酶的转糖基活性研究 被引量：9

11

作者 袁绍鹏 肖敏 +1 位作者 孙正 钱新民 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期31-34,共4页

确定了 1株曲霉的 β 半乳糖苷酶产酶培养基的氮源为蛋白胨 1%、酵母膏 0 3 %、KNO3 0 2 % ,碳源为葡萄糖 1% ,培养条件为 3 0℃摇床培养 48h。碳源实验证明 ,β 半乳糖苷酶在该菌株中属组成型表达。研究了该菌株的 β 半乳糖苷酶转... 确定了 1株曲霉的 β 半乳糖苷酶产酶培养基的氮源为蛋白胨 1%、酵母膏 0 3 %、KNO3 0 2 % ,碳源为葡萄糖 1% ,培养条件为 3 0℃摇床培养 48h。碳源实验证明 ,β 半乳糖苷酶在该菌株中属组成型表达。研究了该菌株的 β 半乳糖苷酶转糖基反应体系中的pH、乳糖浓度、反应温度、反应时间对转糖基作用的影响 ,并利用薄层层析、高效液相层析技术分析了转糖基反应的产物。 展开更多

关键词 Β-半乳糖苷酶 曲霉 低聚半乳糖 转糖基活性 微生物酶法

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驼乳中产转糖基活性β-半乳糖苷酶乳酸菌的筛选鉴定及其酶学特性分析 被引量：4

12

作者 韩明明 褚宇欣 +3 位作者 关波 胡有贞 李谞 倪永清 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第24期74-83,共10页

分离筛选高产转糖基活性β-半乳糖苷酶的乳源微生物,为高效合成低聚半乳糖(galacto-oligosaccharides,GOS)提供新酶源。以添加5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(X-Gal)的乳糖为碳源的乳酸细菌培养基(MRS)进行初级分离筛选,以产酶菌株粗... 分离筛选高产转糖基活性β-半乳糖苷酶的乳源微生物,为高效合成低聚半乳糖(galacto-oligosaccharides,GOS)提供新酶源。以添加5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(X-Gal)的乳糖为碳源的乳酸细菌培养基(MRS)进行初级分离筛选,以产酶菌株粗酶液催化乳糖转糖基反应产物的薄层层析进行复筛,单因素优化最佳产酶条件和转糖基反应条件,硫酸铵分级沉淀纯化β-半乳糖苷酶并对其酶学特性进行初步分析。筛选获得产转糖基活性β-半乳糖苷酶乳酸菌20株,选择产酶水平较高、转糖基活性最强的产β-半乳糖苷酶菌株L6进行进一步研究。生理生化和分子生物学鉴定确定L6菌株为Lactobacillus kefiri。该菌株在2 g/100 mL乳糖、1 g/100 mL氮源(蛋白胨、牛肉膏和酵母浸粉)及初始pH 5.5的条件下,37℃培养20 h,产酶水平最高可达(3.81±0.02)U/mL。L6菌株所产β-半乳糖苷酶催化反应的温度范围较宽,45~70℃均能保持50%以上相对酶活力。以45 g/100 mL乳糖为底物,该酶在65℃、pH 7.0条件下,反应4 h生成转移二糖的得率为13.51%(m/m,下同),转移三糖为13.85%,转移三糖以上的GOS为4.15%。 展开更多

关键词 Β-半乳糖苷酶 低聚半乳糖 转糖基反应 开菲尔乳杆菌 酶学特性

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半乳糖凝集素-3和基质金属蛋白酶-9与支架内再狭窄的关系 被引量：7

13

作者 牛晓婷 徐阳 +8 位作者 郑阳 刘晓唤 巩红 范雅洁 张春艳 张岩 胡艳超 李永勤 王聪霞 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期483-487,503,共6页

目的探讨半乳糖凝集素-3(Gal-3)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与支架内再狭窄(ISR)的关系。方法连续招募434例植入药物涂层支架的冠心病患者,根据随访期复查冠脉造影结果,分为再狭窄组(ISR,41例)和非再狭窄组(NO-ISR,393例)。分析ISR的独... 目的探讨半乳糖凝集素-3(Gal-3)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与支架内再狭窄(ISR)的关系。方法连续招募434例植入药物涂层支架的冠心病患者,根据随访期复查冠脉造影结果,分为再狭窄组(ISR,41例)和非再狭窄组(NO-ISR,393例)。分析ISR的独立危险因素,按照除Gal-3和MMP-9外的其他危险因素对两组患者进行配对后,比较两组的血清Gal-3和MMP-9水平,并分析其与ISR严重程度的关系。分别根据Gal-3和MMP-9水平不同进行分组,比较各组间主要不良心血管事件(MACEs)的发生率。结果消除其他因素影响后进行统计学分析,ISR组的血清Gal-3和MMP-9水平均显著高于NO-ISR组(P<0.001)。血清Gal-3及MMP-9水平在Ⅲ型和Ⅳ型再狭窄患者中均显著高于Ⅰ型再狭窄患者(P<0.05)。Gal-3及MMP-9较高浓度组MACEs发生率高于低浓度组(P<0.01);ISR组MACEs发生率高于NO-ISR组(P<0.05)。结论 MMP-9和Gal-3与ISR发生及其严重程度密切相关,是ISR的独立预测因子。并随着二者的血清浓度的升高,支架术后长期随访的MACEs发生率升高。 展开更多

关键词 冠状动脉粥样硬化性心脏病 半乳糖凝集素-3(Gal-3) 基质金属蛋白酶-9(MMP-9) 支架内再狭窄 主要不良心血管事件(MACEs)

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新疆回民自制酸泡菜中产转糖基活性β-半乳糖苷酶菌株的筛选和鉴定 被引量：1

14

作者 张宇洁 王丽军 +2 位作者 关波 倪永清 何顺 《安徽农业科学》 CAS 2018年第25期159-161,178,共4页

[目的]通过可培养的方式从泡菜中分离和筛选产转糖基活性β-半乳糖苷酶(β-gal)的菌株。[方法]以乳糖为唯一碳源,Ca CO3溶钙圈和添加X-Gal的MRS筛选平板进行初筛,再通过o NPG法测定菌株β-gal活性进行复筛,最后以粗酶液催化乳糖进行转... [目的]通过可培养的方式从泡菜中分离和筛选产转糖基活性β-半乳糖苷酶(β-gal)的菌株。[方法]以乳糖为唯一碳源,Ca CO3溶钙圈和添加X-Gal的MRS筛选平板进行初筛,再通过o NPG法测定菌株β-gal活性进行复筛,最后以粗酶液催化乳糖进行转糖基反应,通过TLC分析确认转糖基活性。[结果]通过3级筛选,得到具有转糖基活性β-gal的菌株6株。结合其形态学、生理生化特征及16S r DNA序列同源性分析,确定筛选获得产转糖基活性β-gal菌株中,5株为发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum),1株为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。[结论]该研究可为以乳糖为底物高效合成功能性的低聚半乳糖提供新的酶源。 展开更多

关键词 泡菜 Β-半乳糖苷酶 转糖基活性 乳酸杆菌 系统发育

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沙库巴曲/缬沙坦对心肌肥厚兔半乳糖凝集素-3以及基质金属蛋白酶-9表达的影响 被引量：6

15

作者 蒋松辰 高尚远 +1 位作者 谢发江 江凤 《海南医学院学报》 CAS 2019年第8期561-565,共5页

目的:研究沙库巴曲/缬沙坦对压力负荷诱导的心肌肥厚新西兰兔半乳糖凝集素-3(Gal-3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法:24只健康雄性8周龄新西兰兔随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、沙库巴曲/缬沙坦组(Sacu/Vals),每组8... 目的:研究沙库巴曲/缬沙坦对压力负荷诱导的心肌肥厚新西兰兔半乳糖凝集素-3(Gal-3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法:24只健康雄性8周龄新西兰兔随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、沙库巴曲/缬沙坦组(Sacu/Vals),每组8只,后两组行腹主动脉缩窄术构建心肌肥厚模型,8周建模成功后沙库巴曲/缬沙坦组予以药物灌胃,其余两组予以等体积生理盐水。16周末取所有兔心,测左心室质量指数和全心质量指数以及取左心室心肌组织行HE染色评估心肌肥厚水平,western blot检测心肌组织Gal-3、MMP-9的表达。结果:⑴与假手术组相比,模型组、沙库巴曲/缬沙坦组HMI、LVMI增加(P<0.05);与模型组相比,沙库巴曲/缬沙坦组HMI、LVMI降低(P<0.05)。⑵假手术组心肌纤维排列整齐,呈束状排列,形态完整,未见明显纤维组织。模型组心肌纤维排列紊乱,大部分断裂,细胞水肿,心肌间质可见纤维结缔组织。沙库巴曲/缬沙坦组与模型组相比,心肌纤维排列基本整齐,细胞水肿明显减轻。⑶与假手术相比,模型组、沙库巴曲/缬沙坦组Gal-3、MMP-9蛋白表达量增加(P<0.05);与模型组相比,沙库巴曲/缬沙坦组Gal-3、MMP-9蛋白表达量降低(P<0.05)。结论:沙库巴曲/缬沙坦能减轻兔心肌肥厚,其机制可能跟下调Gal-3、 MMP-9蛋白表达相关。 展开更多

关键词 沙库巴曲/缬沙坦 心肌肥厚 半乳糖凝集素-3 基质金属蛋白酶-9 新西兰兔

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α-氟代半乳糖的合成 被引量：3

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作者 赵晗 刘军 +1 位作者 卢丽丽 肖敏 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第7期660-663,共4页

α-氟代半乳糖是一类重要的1-氟代糖,可在化学-酶法催化过程中作为糖基供体合成各类重要的半乳糖苷化合物,但这类氟代糖的大量获得至今没有完整实用的合成方法。作者以D-半乳糖为原料,将其全乙酰化获得五乙酰基-β-半乳糖,用吡啶-氟化... α-氟代半乳糖是一类重要的1-氟代糖,可在化学-酶法催化过程中作为糖基供体合成各类重要的半乳糖苷化合物,但这类氟代糖的大量获得至今没有完整实用的合成方法。作者以D-半乳糖为原料,将其全乙酰化获得五乙酰基-β-半乳糖,用吡啶-氟化氢络合物在-20℃进行氟化反应,得到四乙酰基-α-氟代半乳糖,然后用甲醇钠/甲醇溶液进行脱乙酰反应,TLC及核磁共振氢谱验证所得产物,成功获得α-氟代半乳糖(δ=5.57,J1,2=2.7,J1,F=53.9 Hz)。 展开更多

关键词 D-半乳糖 1-氟代糖 α-氟代半乳糖 糖基供体

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β-半乳糖苷酶选择性催化人参皂苷Rg3水解制备Rh2初探 被引量：4

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作者 万会达 李丹 张珏 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期54-58,共5页

初步研究了来源于Aspergillus sp.的β-半乳糖苷酶催化人参皂苷Rg3水解的反应。首先采用羟丙基-β-环糊精包合法解决Rg3水溶性差的问题,其溶解度提高了74.6倍。根据相溶解度曲线,Rg3的包合类型属于AL型,即形成1∶1的包合物。以Rg3包合... 初步研究了来源于Aspergillus sp.的β-半乳糖苷酶催化人参皂苷Rg3水解的反应。首先采用羟丙基-β-环糊精包合法解决Rg3水溶性差的问题,其溶解度提高了74.6倍。根据相溶解度曲线,Rg3的包合类型属于AL型,即形成1∶1的包合物。以Rg3包合物为底物,来源于Aspergillus sp.的β-半乳糖苷酶能选择性催化水解Rg3分子结构中C3位槐糖基的β-1,2葡萄糖苷键,得到Rh2。当加酶量为500 U/g Rg3,60℃下反应24 h,Rg3的转化率达90.6%,Rh2的产率为88.5%。 展开更多

关键词 Β-半乳糖苷酶 人参皂苷 水解 羟丙基-Β-环糊精

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蚕豆β－半乳糖苷酶活性必需氨基酸残基分析

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作者 龚笑海 孙册 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第2期243-245,共3页

蚕豆β－半乳糖苷酶活性必需氨基酸残基分析龚笑海，孙册（中国科学院上海生物化学研究所，上海２０００３１）化学修饰作为一种研究酶活性基团的方法，对研究糖苷酶的催化机理有其独到的优点，并已有这方面的报道．从蚕豆纯化的β－半... 蚕豆β－半乳糖苷酶活性必需氨基酸残基分析龚笑海，孙册（中国科学院上海生物化学研究所，上海２０００３１）化学修饰作为一种研究酶活性基团的方法，对研究糖苷酶的催化机理有其独到的优点，并已有这方面的报道．从蚕豆纯化的β－半乳糖苷酶，分子量为７０ｋＤ，由两个... 展开更多

关键词 蚕豆 Β-半乳糖苷酶 酶活性 氨基酸残基

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hTERT启动子调控的异种抗原基因α-1,3GT表达载体的构建及其在肺癌细胞中的靶向表达 被引量：1

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作者 朱圣明 郑鸿 +5 位作者 秦凤 王宇 王竹 骆志国 丁珺 王艳萍 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期452-457,共6页

目的:构建人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)启动子调控的异种移植抗原α-1,3半乳糖基转移酶(α-1,3galactosyltransferase,α-1,3GT)基因真核表达载体,研究其调控的α-1,3GT在肿瘤细胞中的靶向表达。方... 目的:构建人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)启动子调控的异种移植抗原α-1,3半乳糖基转移酶(α-1,3galactosyltransferase,α-1,3GT)基因真核表达载体,研究其调控的α-1,3GT在肿瘤细胞中的靶向表达。方法:将前期克隆并测序正确的猪α-1,3GT基因定向克隆到pEGFP-hTERTp质粒中,构建α-1,3GT真核表达载体pEGFP-hTERTp-GT。分别将pEGFP-hTERTp-GT和CMV启动子调控的α-1,3GT真核表达质粒pEGFP-N1-GT转染端粒酶阳性的人肺癌细胞A549及端粒酶阴性的正常人胚肺成纤维细胞MRC-5。RT-PCR检测转染细胞中α-1,3GTmRNA的表达,免疫荧光法和流式细胞仪检测α-gal抗原的表达。结果:成功构建了pEGFP-hTERTp-GT真核表达载体。转染pEGFP-N1-GT的A549和MRC-5中均有α-1,3GTmRNA的表达;转染pEGFP-hTERTp-GT的A549中有α-1,3GTmRNA的表达,而端粒酶阴性的MRC-5细胞中无α-1,3GTmRNA的表达。转染pEGFP-N1-GT的A549和MRC-5中均可表达异种移植抗原α-gal;转染pEGFP-hTER-Tp-GT质粒的A549中有α-gal的表达,而MRC-5细胞中无α-gal的表达(P<0.01)。结论:hTERT启动子调控的α-1,3GT基因能靶向性表达在端粒酶阳性的肺癌细胞中,并合成异种移植抗原α-gal。 展开更多

关键词 人端粒酶逆转录酶 肺肿瘤 α-半乳糖基 α-1 3半乳糖基转移酶 靶向性表达

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有效降低牛乳β-乳球蛋白免疫原性的糖基供体研究 被引量：2

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作者 杨铮 任珊 +3 位作者 徐晋予 张帆 夏薇 许美玉 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期148-151,共4页

用低聚壳聚糖、低聚半乳糖、低聚异麦芽糖、壳聚糖和羧甲基壳聚糖对牛乳β-乳球蛋白进行糖基化处理,通过动物实验及ELISA方法检测各糖基化产物的抗原性和免疫原性,结果显示低聚半乳糖的糖基化处理降低牛乳β-乳球蛋白的抗原性和免疫原... 用低聚壳聚糖、低聚半乳糖、低聚异麦芽糖、壳聚糖和羧甲基壳聚糖对牛乳β-乳球蛋白进行糖基化处理,通过动物实验及ELISA方法检测各糖基化产物的抗原性和免疫原性,结果显示低聚半乳糖的糖基化处理降低牛乳β-乳球蛋白的抗原性和免疫原性效果最佳,分别降低41%和18%。凝胶过滤层析和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析结果显示,低聚半乳糖糖基化产物的相对分子质量为40kDa,保持原有的二聚体结构。该结合物与β-乳球蛋白比较,乳化稳定性、溶解性和分散性无显著性差异,而热稳定性和抗氧化性明显提高。以上结果表明,低聚半乳糖是糖基化法降低牛乳β-乳球蛋白免疫原性的较理想的糖基供体。 展开更多

关键词 牛乳β-乳球蛋白 免疫原性 糖基供体 糖基化 低聚半乳糖

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