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题名利用重组大肠杆菌生产双乙酰
被引量:3
- 1
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作者
赵宏峰
边英男
黄伟达
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机构
复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第1期165-169,共5页
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文摘
大肠杆菌自身代谢特征具有发酵生产双乙酰的天然优势。利用PCR技术,以广泛用于双乙酰生产的Lactococcus lactis基因组DNA为模板,克隆得到α-乙酰乳酸合成酶基因α-als,将其构建在表达载体pET-30 a上。与能够高效表达3种大肠杆菌来源HSP 70家族分子伴侣的pKJE 7质粒共同转化E.coli BL21(DE3)。利用目的蛋白质分子伴侣共表达的方法,首次获得了能够高效表达具有酶活力的α-乙酰乳酸合成酶的重组大肠杆菌。在静置培养条件下,能够在该菌株的培养基中检测到双乙酰的生成。融合蛋白酶在温度为30-40℃和pH在6-7之间时具有较高的酶活,以丙酮酸为底物,该酶最适pH为6.8,最适温度为39℃。
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关键词
双乙酰
乳酸乳球菌
α-乙酰乳酸合成酶
分子伴侣
共表达
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Keywords
Diacetyl Lactococus lactis α-Acetolactate synthase Chaperone Co-expression
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
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题名利用代谢工程构建高产乙偶姻枯草芽孢杆菌
被引量:3
- 2
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作者
张显
赵晓静
李欣
饶志明
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机构
江南大学生物工程学院
江南大学食品科学与技术国家重点实验室
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出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第12期18-25,共8页
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基金
国家自然科学基金(31500065,21276110,31400082)
江苏省青年自然科学基金(BK20150142)
中央高校基本科研业务费专项资金(JUSRP11544)
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文摘
乙偶姻是枯草芽孢杆菌的主要胞外产物,在代谢工程育种中,阻断目标产物的降解途径或加强目标产物前体物的代谢通量是有效提高目的产物积累量的重要手段。该研究克隆了来自枯草芽孢杆菌JNA 3-10的α-乙酰乳酸合成酶(ALS)和α-乙酰乳酸脱羧酶(ALDC)基因als S和als D。在大肠杆菌BL21中分别对ALS和ALDC进行表达、纯化和初步的酶学性质研究,随后将ALS、ALDC、ALS+ALDC分别在乙偶姻还原酶敲除菌株(BM)中进行过量表达,发现3株重组菌株的乙偶姻产量与BM菌株相比分别提高了5.2%、4.1%和10.8%,最终乙偶姻产量达到53.5 g/L,生产效率为0.50 g/(L·h)。
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关键词
乙偶姻
枯草芽孢杆菌
代谢工程
α-乙酰乳酸合成酶
α-乙酰乳酸脱羧酶
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Keywords
acetoin
Bacillus subtilis
metabolic engineering
α-acetolactate synthetase
α-acetolacetate decearboxylase
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分类号
TS264.3
[轻工技术与工程—发酵工程]
TQ929
[轻工技术与工程—发酵工程]
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题名细菌3-羟基丁酮及氧化还原产物代谢的研究进展
被引量:3
- 3
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作者
包永明
王天琪
姬芳玲
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机构
大连理工大学生命科学与技术学院
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出处
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2014年第4期1-6,共6页
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基金
国家973项目(2009CB724700)
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文摘
3-羟基丁酮及氧化还原产物是重要的4碳平台化合物,以糖质原料为底物的生物法制备是当今研究与生产的主流。介绍了3-羟基丁酮及氧化还原产物2,3-丁二醇、丁二酮产生的主要细菌,这些细菌积累3-羟基丁酮及氧化还原产物的代谢途径,主要的代谢及调控方式,代谢关键酶:乙酰乳酸合成酶、α-乙酰乳酸脱羧酶、2,3-丁二醇脱氢酶的结构与功能等国内外研究进展;并对3-羟基丁酮及氧化还原产物细菌代谢、发酵制备的未来研究提出了展望。
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关键词
3-羟基丁酮
2
3-丁二醇
丁二酮
α-乙酰乳酸合成酶
α-乙酰乳酸脱羧酶
2
3-丁二醇脱氢酶
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Keywords
Acetoin
2,3-butanediol
diacetyl
α-acetoactate synthase
α-acetoactate decarboxylase
2,3-butane-diol dehydrogenase
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分类号
Q93
[生物学—微生物学]
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题名后熟期短的酿酒酵母工程菌构建
被引量:4
- 4
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作者
刘增然
张光一
鞠国泉
冉会来
蔡亚男
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机构
河北经贸大学生物科学与工程学院
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出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2006年第8期83-86,共4页
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基金
河北省科技厅研究课题(18505215503)
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文摘
借助质粒pBluescriptM13-,以淀粉酶基因(AMY)为筛选标记构建乙酰乳酸合成酶基因(ILV2)的重组整合质粒pMGI。用重组质粒pMGI所含ilv2∷AMY嵌合基因片段转化工业酿酒酵母菌Sc11,获得转化子(Sc11-ilv)。Sc-11-ilv不含细菌载体序列和酵母抗药性标记,所表达的乙酰乳酸合成酶活性降低30%;模拟发酵实验表明Sc11-ilv发酵液的双乙酰含量降低70%,Sc11-ilv发酵性能保持不变,遗传稳定性为100%,可以比较安全地用于啤酒生产。
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关键词
工业酿酒酵母菌
α-乙酰乳酸合成酶基因(ILV2)
基因破坏
双乙酰
发酵
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Keywords
industrial strain of S.cerevisiae: acetolactate synthase gene (ILV2)
gene disruption
diacetyl
fermentation
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分类号
Q539
[生物学—生物化学]
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