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茶树△12-脂肪酸去饱和酶基因FAD2和FAD6的克隆与表达分析 被引量:11
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作者 陈丹 俞滢 +4 位作者 岳川 王鹏杰 陈静 陈桂信 叶乃兴 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期541-550,共10页
本研究在茶树转录组测序的基础上,以铁观音茶树的芽叶为材料,采用RT-PCR技术,克隆了茶树不饱和脂肪酸合成途径中的关键限速酶—△12-FAD(12-脂肪酸去饱和酶)基因的包含完整ORF的cDNA序列(CsFAD2和CsFAD6)。生物信息学分析结果表明,CsFAD... 本研究在茶树转录组测序的基础上,以铁观音茶树的芽叶为材料,采用RT-PCR技术,克隆了茶树不饱和脂肪酸合成途径中的关键限速酶—△12-FAD(12-脂肪酸去饱和酶)基因的包含完整ORF的cDNA序列(CsFAD2和CsFAD6)。生物信息学分析结果表明,CsFAD2的全长为1 184 bp,其开放阅读框(ORF)长度1 149 bp,编码382个氨基酸,定位于内质网上,其氨基酸序列与油茶FAD2的同源性最高达97%;CsFAD6的全长为1 425 bp,其ORF长度为1 311 bp,编码436个氨基酸,定位于叶绿体上,其氨基酸序列与葡萄FAD6同源性达81%。荧光定量PCR结果表明,铁观音茶树幼苗在4℃低温胁迫处理72 h过程中,这两个基因的表达均受低温的诱导,其表达量随着处理时间的延长而升高,在处理48 h时,表达量水平最高;在100 g·L-1的PEG胁迫处理12 h过程中,这两个基因的表达均受PEG胁迫处理的诱导;在ABA(100μmol·L-1)胁迫处理72 h过程中,在处理6~24 h期间,CsFAD2的表达量显著升高,而CsFAD6的表达不受ABA处理的影响,CsFAD6的表达量在处理72 h时显著降低;在Na Cl(250 mmol·L-1)胁迫72 h过程中,CsFAD2的表达量全程降低,而CsFAD6在处理24~72 h期间表达量显著升高。 展开更多
关键词 茶树 △12-脂肪酸去饱和 非生物胁迫 基因表达
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酶法纯化ω-6和ω-3多不饱和脂肪酸研究进展 被引量:1
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作者 臧佳辰 薛文通 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第21期365-368,373,共5页
多不饱和脂肪酸(PUFAs)具有重要的生理学活性,尤其是ω-6和ω-3系列与人体健康密切相关。因此,如何提取PUFAs非常重要,也是油脂领域的研究热点。利用酶法分离纯化PUFAs是一种环保、高效、具有广泛应用前景的方法。本文综述了酶法纯化ω-... 多不饱和脂肪酸(PUFAs)具有重要的生理学活性,尤其是ω-6和ω-3系列与人体健康密切相关。因此,如何提取PUFAs非常重要,也是油脂领域的研究热点。利用酶法分离纯化PUFAs是一种环保、高效、具有广泛应用前景的方法。本文综述了酶法纯化ω-6和ω-3PUFAs的最新研究进展,并着重阐述了酶法催化水解、酶法选择性富集以及其它几种能和酶法有效结合、共同分离纯化PUFAs的物理化学方法,同时通过论述亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸等PUFAs的纯化进展证明了酶法在该领域内具有很大发展前景。 展开更多
关键词 ω-6多不饱和脂肪酸 Ω-3多不饱和脂肪酸 法催化水解 法选择性富集
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建鲤两种Δ6脂肪酸去饱和酶基因克隆与表达 被引量:4
3
作者 任洪涛 俞菊华 +3 位作者 徐跑 唐永凯 李红霞 李建林 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期677-684,共8页
利用逆转录PCR和RACE技术获得建鲤2种Δ6脂肪酸去饱和酶(FADs6-a,FADs6-b)的全长cDNA序列.FADs6-a基因的cDNA总长为1 966 bp,开放阅读框为1 335 bp,编码444个氨基酸;FADs6-b基因的cDNA总长为1 931 bp,开放阅读框为1 335 bp,编码444个氨... 利用逆转录PCR和RACE技术获得建鲤2种Δ6脂肪酸去饱和酶(FADs6-a,FADs6-b)的全长cDNA序列.FADs6-a基因的cDNA总长为1 966 bp,开放阅读框为1 335 bp,编码444个氨基酸;FADs6-b基因的cDNA总长为1 931 bp,开放阅读框为1 335 bp,编码444个氨基酸.FADs6-a和FADs6-b基因都包括N端细胞色素b5结构域、3个富含组氨酸的结构域和2个推测的跨膜区,具有典型的Δ6脂肪酸去饱和酶结构特点.氨基酸同源性分析显示,建鲤FADs6-a和FADs6-b与斑马鱼的相似性较高,而与海水鱼类的相似性较低,与人类FADs6的相似性高于与FADs5的相似性.通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测该基因在建鲤幼鱼不同组织中的表达量,发现2种Δ6脂肪酸去饱和酶基因在建鲤肝脏的表达量最高,其次是肠、脑、肌肉、心和肾,而前肠高于后肠,FADs6-a的表达量高于FADs6-b.得到的结论是,建鲤具有2种类型的合成高度不饱和脂肪酸(HUFA)的关键酶—Δ6脂肪酸去饱和酶,在肝脏和肠道中的含量较多,且FADs6-a和FADs6-b在结构和组织的表达方面都存在差异,这为进一步研究建鲤HUFA的合成途径及调控机理奠定了基础. 展开更多
关键词 建鲤 δ6-脂肪酸去饱和酶 基因克隆 基因表达
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沙棘ω-6脂肪酸去饱和酶基因的分子进化
4
作者 马丽 李洪梅 +4 位作者 张秀君 韩晓伟 尚帅 刘宗现 何文兴 《济南大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2013年第4期394-399,共6页
运用生物信息学分析手段和在线数据库,对沙棘ω-6脂肪酸去饱和酶基因进行综合分析。结果显示:该基因全长为1 562 bp,开放读码框为1 152 bp;编码383个氨基酸,分子量为44 010.5道尔顿;等电点为8.63,带正电荷侧链的氨基酸与带负电荷侧链的... 运用生物信息学分析手段和在线数据库,对沙棘ω-6脂肪酸去饱和酶基因进行综合分析。结果显示:该基因全长为1 562 bp,开放读码框为1 152 bp;编码383个氨基酸,分子量为44 010.5道尔顿;等电点为8.63,带正电荷侧链的氨基酸与带负电荷侧链的氨基酸比例为29∶34;氨基酸组成中亮氨酸占10.7%,缬氨酸占7.8%,丙氨酸占6.8%;不稳定指数为36.73,脂肪指数为89.58,总平均疏水指数为-0.016,为亲水蛋白;其二级结构以无规则卷曲与折叠为主,属膜蛋白,有3个酪氨酸激酶II磷酸化位点、2个N-肉豆蔻酰化位点、4个蛋白激酶C磷酸化位点、3个N-糖基化位点、1个酪氨酸激酶磷酸化位点和1个微体C-端定位信号;该蛋白为质膜-脂肪酸去饱和酶域超家族蛋白(Membrane-FADS-like superfamily)。功能预测分析结果显示与其他物种的该去饱和酶特性相一致。 展开更多
关键词 沙棘 ω-6脂肪酸去饱和基因 FADS家族 生物信息学
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沙棘ω-6脂肪酸去饱和酶基因的克隆
5
作者 马丽 姚海燕 +1 位作者 李洪梅 何文兴 《济南大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2014年第5期326-330,共5页
利用同源基因克隆技术克隆沙棘ω-6脂肪酸去饱和酶基因,聚合酶链式反应(PCR)扩增获得的目的基因序列,序列长度541 bp。经局部序列排比检索基本工具(BLAST)检索核酸同源序列,验证分析发现,该序列与大豆、菜豆、苜蓿ω-6脂肪酸去饱和酶基... 利用同源基因克隆技术克隆沙棘ω-6脂肪酸去饱和酶基因,聚合酶链式反应(PCR)扩增获得的目的基因序列,序列长度541 bp。经局部序列排比检索基本工具(BLAST)检索核酸同源序列,验证分析发现,该序列与大豆、菜豆、苜蓿ω-6脂肪酸去饱和酶基因同源性分别达到76%、75%和74%,说明其确为沙棘ω-6脂肪酸去饱和酶基因的部分片段。 展开更多
关键词 沙棘 ω-6脂肪酸去饱和基因 同源基因克隆
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卷枝毛霉△6-脂肪酸脱饱和酶基因的敲除及功能研究
6
作者 何文胜 陈清霞 +2 位作者 邹丽梅 曹晓 祁峰 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期617-624,共8页
γ-亚麻酸(γ-Linolenic acid,GLA)是人体所必需且具有多种生理功能的一种重要多不饱和脂肪酸。研究表明,卷枝毛霉等GLA生产菌株中△6-脂肪酸脱饱和酶(△6-Fatty acid desaturase,FAD6)是合成γ-亚麻酸的关键和限速酶,然而GLA是否惟一... γ-亚麻酸(γ-Linolenic acid,GLA)是人体所必需且具有多种生理功能的一种重要多不饱和脂肪酸。研究表明,卷枝毛霉等GLA生产菌株中△6-脂肪酸脱饱和酶(△6-Fatty acid desaturase,FAD6)是合成γ-亚麻酸的关键和限速酶,然而GLA是否惟一通过△6-脂肪酸脱饱和酶途径合成则目前还没有报道。作者以卷枝毛霉Mucor circinelloides EIM10 sp.为研究对象,以其FAD6基因的5'端启动子和3'端终止子为同源臂,潮霉素B抗性基因为筛选标记,构建了M.circinelloides EIM10 sp.△6-脂肪酸脱饱和酶FAD6的敲除载体p UMCD6-Hm B,转化进入制备好的原生质体中成功地敲除了FAD6基因,发现FAD6基因缺陷菌株GLA质量浓度比野生型对照菌株降低了50%以上,但GLA并没有完全消失,说明卷枝毛霉生物体内还有其他代谢途径可以将碳源转化为GLA。 展开更多
关键词 Γ-亚麻酸 卷枝毛霉 6-脂肪酸饱和 基因敲除
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姬松茸ω-6多不饱和脂肪酸对高血脂鼠的降血脂作用 被引量:28
7
作者 张艳荣 单玉玲 李玉 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期960-963,共4页
目的:观察姬松茸ω-6多不饱和脂肪酸(-ω6APFA)对高血脂鼠的降血脂作用。方法:大鼠60只,随机分为空白对照组、模型组、天然大豆磷脂胶囊(NSPC)0.70 g.kg-1剂量组和-ω6APFA 0.28、0.14、0.07 g.kg-13个剂量组(n=10)。除空白对照组外均... 目的:观察姬松茸ω-6多不饱和脂肪酸(-ω6APFA)对高血脂鼠的降血脂作用。方法:大鼠60只,随机分为空白对照组、模型组、天然大豆磷脂胶囊(NSPC)0.70 g.kg-1剂量组和-ω6APFA 0.28、0.14、0.07 g.kg-13个剂量组(n=10)。除空白对照组外均连续给予高脂饲料14 d,于第14天起开始连续灌胃给药14 d,对照组和模型组给予等容积蒸馏水10 mL.kg-1。实验结束后麻醉大鼠,腹主动脉取血测血清总胆固醇(T-CHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)。同时测肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性、肝脏丙二醛(MDA)含量及腹腔脂肪蓄积系数。雄性小鼠72只,随机分为空白对照组、模型组、NSPC 1.0 g.kg-1剂量组、-ω6APFA 0.4、0.2、0.1 g.kg-13个剂量组(n=12),连续给药7 d,末次给药前16 h除空白对照组,均腹腔注射75%蛋黄生理盐水液0.5 mL,并开始饥饿,末次给药后1 h,于眼球采血,测血清T-CHO及TG含量。结果:与模型组比较,NSPC 0.70 g.kg-1和-ω6APFA 0.28 g.kg-1剂量组大鼠血清T-CHO、TG均明显降低,血清HDL-C升高(P<0.001);NSPC 0.70 g.kg-1和-ω6APFA 0.28、0.14 g.kg-1剂量组大鼠肝组织SOD活性升高(P<0.05、P<0.001及P<0.05),MDA降低(P<0.01、P<0.001及P<0.01),大鼠腹腔脂肪系数均降低(P<0.01)。与模型组比较,NSPC 1.0 g.kg-1、-ω6APFA0.4、0.2 g.kg-1组急性高血脂小鼠T-CHO和TG明显降低(P<0.05、P<0.01及P<0.05)。结论:ω-6APFA对高血脂鼠有明显的降血脂作用。 展开更多
关键词 姬松茸 ω-6多不饱和脂肪酸 降血脂 实验 动物
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花生Δ^(12)-脂肪酸去饱和酶基因RNAi表达载体的构建 被引量:14
8
作者 陈占宽 张新友 +3 位作者 苗利娟 黄冰艳 汤丰收 张忠信 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2006年第4期9-12,共4页
利用RNAi原理构建花生Δ12-脂肪酸去饱和酶基因的hpRNA表达载体,以抑制该基因的表达,获得高油酸/亚油酸比值的花生种质。根据花生Δ12-脂肪酸去饱和酶基因序列(GenBank:AF248739)设计引物,以豫花4号花生品种DNA为模板,克隆了该基因的启... 利用RNAi原理构建花生Δ12-脂肪酸去饱和酶基因的hpRNA表达载体,以抑制该基因的表达,获得高油酸/亚油酸比值的花生种质。根据花生Δ12-脂肪酸去饱和酶基因序列(GenBank:AF248739)设计引物,以豫花4号花生品种DNA为模板,克隆了该基因的启动子及长度约500 bp的外显子片段,在此基础上构建完成由自身启动子引导的花生Δ12-脂肪酸去饱和酶基因的反向重复片段RNAi载体pCAMBIA1301-Afad12Ri。 展开更多
关键词 花生 △^12-脂肪酸去饱和 RNA干扰 发夹RNA 载体构建
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Δ~6-脂肪酸脱氢酶研究进展 被引量:4
9
作者 白义春 康相涛 +2 位作者 孙桂荣 田亚东 黄艳群 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2008年第2期9-12,共4页
关键词 △^6-脂肪酸脱氢 长链多不饱和脂肪酸 单不饱和脂肪酸 机体组织 Α-亚麻酸 花生四烯酸 组成成分 大脑发育
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刀鲚Δ6脂肪酸去饱和酶cDNA的克隆与组织表达检测 被引量:3
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作者 魏广莲 徐钢春 +2 位作者 顾若波 杜富宽 徐跑 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期138-144,共7页
利用RT-PCR和RACE技术获得刀鲚(Coilia nasus)Δ6脂肪酸去饱和酶(Δ6 fatty acyl desaturase,FAD6)的全长cDNA序列2 032 bp,开放阅读框(ORF)为1 338 bp,编码445个氨基酸。其具有3个保守的组氨酸簇(HDXGH、HXXHH和QXXHH)、2个跨... 利用RT-PCR和RACE技术获得刀鲚(Coilia nasus)Δ6脂肪酸去饱和酶(Δ6 fatty acyl desaturase,FAD6)的全长cDNA序列2 032 bp,开放阅读框(ORF)为1 338 bp,编码445个氨基酸。其具有3个保守的组氨酸簇(HDXGH、HXXHH和QXXHH)、2个跨膜区和含亚铁血红素结合基序(HPGG)的细胞色素b5结构域等典型的Δ6脂肪酸去饱和酶结构特点。氨基酸同源性分析显示,刀鲚FAD6与海鳗(Muraenesox cinereus)和军曹鱼(Rachycentron canadum)等海水鱼类的相似性达75%~79%,而与淡水鱼类的相似性较低。系统进化分析也显示,其与海水鱼类的亲缘关系较近。荧光定量PCR检测发现该基因在刀鲚脑和肠中高表达,肌肉和肝脏相对高表达,心脏、肾脏和鳃低表达。 展开更多
关键词 刀鲚 δ6脂肪酸去饱和 基因克隆 基因表达
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禽蛋ω-3系列、ω-6系列多不饱和脂肪酸含量研究 被引量:11
11
作者 黄菲菲 陈军 +2 位作者 何亚斌 王建军 刘瑛 《粮食与油脂》 北大核心 2009年第12期21-22,共2页
通过气相色谱法测定不同种类鲜禽蛋、蛋制品中ω-3、ω-6脂肪酸组成和含量,并得ω-6/ω-3比值;结果表明,强化ω—3脂肪酸鸡蛋中ω-3脂肪酸含量为450-800mg/100g,相对于其它鲜禽蛋、蛋制品类含量更高,ω-6/ω-3比值为1.5~2.4。
关键词 Ω-3多不饱和脂肪酸 ω-6多不饱和脂肪酸 鲜禽蛋
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转基因烟草表达高山被孢霉Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因的研究 被引量:4
12
作者 李明春 刘莉 +2 位作者 胡国武 财音青格乐 邢来君 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期618-621,共4页
将高山被孢霉ATCC16 2 6 6Δ6 脂肪酸脱氢酶 (D6D)基因亚克隆到植物表达载体pBI12 1中 ,构建了CaMV35S启动子驱动的植物表达载体pBMACL6。经根癌农杆菌LBA4 4 0 4的介导 ,采用叶盘法转化烟草Xanthi,得到一批转基因烟草植株。转基因植株... 将高山被孢霉ATCC16 2 6 6Δ6 脂肪酸脱氢酶 (D6D)基因亚克隆到植物表达载体pBI12 1中 ,构建了CaMV35S启动子驱动的植物表达载体pBMACL6。经根癌农杆菌LBA4 4 0 4的介导 ,采用叶盘法转化烟草Xanthi,得到一批转基因烟草植株。转基因植株的PCR和Southernblot分析表明 ,D6D基因已经整合到烟草基因组中。脂肪酸GC分析表明 ,与未转基因的烟草苗对照相比 ,转基因植株有D6D基因目标产物γ 亚麻酸的产生 ,说明高山被孢霉的D6D基因在烟草中得到了表达。 展开更多
关键词 高山被孢霉△^6-脂肪酸脱氢基因 转基因烟草 Γ-亚麻酸 品质改良 油料作物
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ω-3多不饱和脂肪酸对去卵巢大鼠骨钙素和白细胞介素-6的影响 被引量:4
13
作者 许萍 马戎 +4 位作者 常小霞 吴洁 翟青新 沈小志 刘宝瑞 《肠外与肠内营养》 CAS 北大核心 2010年第6期367-369,共3页
目的:探讨ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3 PUFA)治疗对去卵巢大鼠血清骨钙素(BGP)和白细胞介素-6(IL-6)的影响。方法:将60只雌性大鼠随机分为去卵巢(OVX)组、雌二醇(E2)组、小剂量ω-3 PUFA组、中剂量ω-3 PUFA组、大剂量ω-3 PUFA组和假手术(... 目的:探讨ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3 PUFA)治疗对去卵巢大鼠血清骨钙素(BGP)和白细胞介素-6(IL-6)的影响。方法:将60只雌性大鼠随机分为去卵巢(OVX)组、雌二醇(E2)组、小剂量ω-3 PUFA组、中剂量ω-3 PUFA组、大剂量ω-3 PUFA组和假手术(Sham)组。用药90 d后,采血测定血清BGP和IL-6。结果:OVX组大鼠血清BGP有升高趋势,IL-6显著升高。E2组和ω-3 PUFA小、中、大剂量组BGP均有显著下降,IL-6均有下降趋势。结论:ω-3 PUFA能降低去卵巢大鼠血清BGP水平,从而改善骨质的高转换状态,减少绝经后的骨质丢失。 展开更多
关键词 Ω-3多不饱和脂肪酸 去卵巢大鼠 骨钙素 白细胞介素-6 骨质疏松症
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农杆菌介导法将深黄被孢霉△~6-脂肪酸脱氢酶基因(D6D)导入油菜的研究 被引量:4
14
作者 李劲峰 郑树松 +3 位作者 张崎 蒋海玉 邢来君 张美华 《西南农业学报》 CSCD 2006年第1期29-31,共3页
△6-脂肪酸脱氢酶基因可将亚油酸转化为γ-亚麻酸。我们将克隆的深黄被孢霉△6-脂肪酸脱氢酶基因(D6D)插入植物表达载体pBI121,构建了重组质粒pBI121-D6DMI。通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导途径,将深黄被孢霉△6-脂肪酸脱... △6-脂肪酸脱氢酶基因可将亚油酸转化为γ-亚麻酸。我们将克隆的深黄被孢霉△6-脂肪酸脱氢酶基因(D6D)插入植物表达载体pBI121,构建了重组质粒pBI121-D6DMI。通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导途径,将深黄被孢霉△6-脂肪酸脱氢酶基因导入了甘蓝型油菜恢复系,经过诱导分化获得抗卡那霉素的再生植株。PCR检测及Souther杂交结果表明,外源基因△6-脂肪酸脱氢酶基因已整合到油菜再生植株的基因组中。 展开更多
关键词 △^6-脂肪酸脱氢基因 Γ-亚麻酸 甘蓝型油菜 深黄被孢霉
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向大豆导入琉璃苣Δ6-脂肪酸脱氢酶基因的初步研究 被引量:4
15
作者 宋丽雅 盖燕 何聪芬 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期173-177,共5页
采用RT-PCR法扩增出中国境内生长的琉璃苣Δ6-脂肪酸脱氢酶基因,序列分析表明,该基因全长为1 359个核苷酸,与美国德克萨斯州的琉璃苣Δ6-脂肪酸脱氢酶基因同源性可达到99%。将克隆到的基因连接pRTL2质粒的35S启动子,构建重组载体pPTN-D... 采用RT-PCR法扩增出中国境内生长的琉璃苣Δ6-脂肪酸脱氢酶基因,序列分析表明,该基因全长为1 359个核苷酸,与美国德克萨斯州的琉璃苣Δ6-脂肪酸脱氢酶基因同源性可达到99%。将克隆到的基因连接pRTL2质粒的35S启动子,构建重组载体pPTN-D6D,并通过农杆菌介导的子叶节转化系统,将该基因导入到垦农18和小粒豆2个大豆品种中。经PCR检测分析,初步证明琉璃苣Δ6-脂肪酸脱氢酶基因已导入并整合到大豆基因组中。 展开更多
关键词 Γ-亚麻酸 大豆 δ6-脂肪酸脱氢基因 农杆菌介导
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Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因克隆及其共转化表达载体的构建 被引量:4
16
作者 张秀春 林俊芳 郭丽琼 《热带作物学报》 CSCD 2004年第4期63-67,共5页
采用RT-PCR的方法从海南玻璃苣中克隆了Δ6-脂肪酸脱氢酶基因(Δ6-dsa)。DNA序列测定结果表明,Δ6-dsa全长1347bp编码448个氨基酸。Δ6-dsa序列在genbank中采用BLAST程序进行同源序列分析,结果表明,Δ6-dsa核苷酸序列与克隆自美国德克... 采用RT-PCR的方法从海南玻璃苣中克隆了Δ6-脂肪酸脱氢酶基因(Δ6-dsa)。DNA序列测定结果表明,Δ6-dsa全长1347bp编码448个氨基酸。Δ6-dsa序列在genbank中采用BLAST程序进行同源序列分析,结果表明,Δ6-dsa核苷酸序列与克隆自美国德克萨斯州的玻璃苣Δ6-脂肪酸脱氢酶基因的核苷酸序列完全相同。Δ6-dsa克隆进T-easyVector后形成质粒pGΔ6-DSA。把质粒pGΔ6-DSA上的Δ6-脂肪酸脱氢酶基因片段克隆进含有T-DNA和35S启动子的质粒pGIN22中,形成含有目的基因的表达载体pGIN23。把表达载体pGIN23与另一个含有T-DNA、启动子、筛选标记基因的表达载体pLPN28进行亚克隆,使得筛选标记基因和Δ6-dsa分别插入到同一质粒的2个相互独立的T-DNA内,构建成共转化表达载体pLIN61。 展开更多
关键词 △^6-脂肪酸脱氢 表达载体 克隆 共转化 筛选标记基因 基因 DNA DSA 质粒 玻璃苣
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番茄内质网ω-3脂肪酸去饱和酶基因表达载体的构建与转化 被引量:2
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作者 于超 王华森 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期90-94,共5页
内质网型ω-3脂肪酸去饱和酶(FAD3)是不饱和脂肪酸合成途径中催化十八碳二烯酸[18∶2(9,12)]转化为十八碳三烯酸[18∶3(9,12,15)]的关键酶。通过RT-PCR的方法从番茄叶片克隆到LeFAD3的全长cDNA,基因全长为1 184bp,开放阅读框(ORF)为1 13... 内质网型ω-3脂肪酸去饱和酶(FAD3)是不饱和脂肪酸合成途径中催化十八碳二烯酸[18∶2(9,12)]转化为十八碳三烯酸[18∶3(9,12,15)]的关键酶。通过RT-PCR的方法从番茄叶片克隆到LeFAD3的全长cDNA,基因全长为1 184bp,开放阅读框(ORF)为1 134bp,注册号为EU251190。将该基因正反向序列分别插入带有35S-CaMV启动子pBI121表达载体下游,获得正、反义表达载体,转化农杆菌LBA4404,利用农杆菌介导法转化番茄,获得转基因番茄植株。 展开更多
关键词 番茄 内质网型ω-3脂肪酸去饱和 三烯脂肪酸 表达载体
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过表达ω-3多不饱和脂肪酸脱氢酶基因fat-1保护小鼠胚胎成纤维细胞避免凋亡 被引量:1
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作者 李芳芳 葛银林 +3 位作者 薛美兰 张金玉 李泉 单虎 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期755-760,共6页
由于膳食原因,人体摄入ω-6PUFAs/ω-3PUFAs比例过高,脂类代谢严重失衡.鉴于ω-3PUFAs获取困难而且人体无催化ω-6PUFAs向ω-3PUFAs转化的ω-3多不饱和脂肪酸脱氢酶,本研究体外扩增来源于秀丽线虫(Caenorhabditis elegans)的ω-3多不饱... 由于膳食原因,人体摄入ω-6PUFAs/ω-3PUFAs比例过高,脂类代谢严重失衡.鉴于ω-3PUFAs获取困难而且人体无催化ω-6PUFAs向ω-3PUFAs转化的ω-3多不饱和脂肪酸脱氢酶,本研究体外扩增来源于秀丽线虫(Caenorhabditis elegans)的ω-3多不饱和脂肪酸脱氢酶基因(fat-l)cDNA,构建了真核表达载体pEGFPC1-fat-1,将该基因转染入小鼠胚胎成纤维细胞;激发荧光与RT-PCR方法检测转染pEGFPC1-fat-1细胞表达该基因,气相色谱分析显示该转染细胞中ω-6PUFAs/ω-3PUFAs的比例降低;细胞抑制率实验显示转染细胞的MTT吸光值升高(P<0.05);双染法流式细胞仪分析转染细胞凋亡降低,结果表明fat-1基因即使在高浓度ω-6PUFAs的细胞毒作用下,依然能够发挥将ω-6PUFAs脱氢转化为与ω-3PUFAs的生理功能,抑制3T3细胞凋亡,促进细胞生长增殖,实现了较强的细胞保护功能. 展开更多
关键词 ω-3多聚不饱和脂肪酸脱氢 基因表达 胚胎成纤维细胞 细胞凋亡
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日粮中添加植物油对鸡肉中ω-6多不饱和脂肪酸含量的影响 被引量:4
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作者 吴华 张辉 +1 位作者 丁保安 雷云 《饲料博览》 2004年第9期43-44,共2页
100只52周龄蛋鸡分为5组,对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中分别添加3%的胡麻油,3%的菜籽油,3%的大豆油和3%的花生油,研究日粮中添加植物油对鸡肉中ω-6多不饱和脂肪酸的影响。结果表明:日粮中添加3%植物油可明显提高生产性能,试... 100只52周龄蛋鸡分为5组,对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中分别添加3%的胡麻油,3%的菜籽油,3%的大豆油和3%的花生油,研究日粮中添加植物油对鸡肉中ω-6多不饱和脂肪酸的影响。结果表明:日粮中添加3%植物油可明显提高生产性能,试验组鸡肉和肝脏中亚油酸(C18:2)的含量都明显高于对照组(P<0.05)。鸡肉和肝脏中试验3组亚油酸(C18:2)的含量分别比对照组提高27.2%和41.5%。 展开更多
关键词 植物油 鸡肉 ω-6多不饱和脂肪酸 含量 饲料添加剂
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日粮中添加植物油对鸡蛋中ω-6和ω-3多不饱和脂肪酸比例影响的研究 被引量:3
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作者 张辉 丁保安 +1 位作者 吴华 雷云 《甘肃畜牧兽医》 2004年第4期20-22,共3页
60只 5 2周龄蛋鸡分为五组 ,对照组饲喂基础日粮 ,试验组分别饲喂 3%的胡麻油 ,3%的菜籽油 ,3%的大豆油和 3%的花生油日粮 ,研究日粮中添加植物油对鸡蛋中ω 6和ω 3多不饱和脂肪酸比例的影响。结果表明 ,日粮中添加 3%植物油可明显提... 60只 5 2周龄蛋鸡分为五组 ,对照组饲喂基础日粮 ,试验组分别饲喂 3%的胡麻油 ,3%的菜籽油 ,3%的大豆油和 3%的花生油日粮 ,研究日粮中添加植物油对鸡蛋中ω 6和ω 3多不饱和脂肪酸比例的影响。结果表明 ,日粮中添加 3%植物油可明显提高生产性能 ,试验组鸡蛋中ω 6和ω 3多不饱和脂肪酸的比例都比对照组明显下降 ,试验 1组降低幅度最大 ,分别比对照组降低 88 73%、94 4 4%和 94 14 %。试验 1、2组 (2 0d、30d和 4 0d)两者之间的比例在适宜范围内。 展开更多
关键词 日粮 植物油 鸡蛋 ω-6 ω-3 多不饱和脂肪酸
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