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14株致儿童猩红热A族β溶血性链球菌多位点序列分型 被引量:4
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作者 梁云梅 沈叙庄 +3 位作者 黄国英 俞桑洁 袁林 杨永弘 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期739-742,共4页
目的对A族β溶血性链球菌(beta-haemolytic group A streptococcus isolates,GAS)进行多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)。方法应用多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)对来源于2007年北京和上海两地区分属于不... 目的对A族β溶血性链球菌(beta-haemolytic group A streptococcus isolates,GAS)进行多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)。方法应用多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)对来源于2007年北京和上海两地区分属于不同emm分型及其亚型、且对大环内酯类抗生素高水平耐药的14株致儿童猩红热GAS的7对等位看家基因进行扩增,并将目的基因产物测序,然后将所测得的每对等位看家基因的基因序列提交到MLST网站,获得相应的由7对等位看家基因组成的等位基因谱,最后将等位基因谱再次提交到MLST网站,确定GAS临床分离株MLST序列分型(sequence type,ST)。结果 St5240、emm1.0型及其亚型GAS等位基因图谱为4-3-4-4-4-2-4,属于ST28型;emm4.0型GAS等位基因谱为5-7-8-5-15-2-1,属于ST38型;emm12.0型及其亚型GAS等位基因谱为5-2-2-6-6-2-2,属于ST36型;emm22.0型GAS等位基因谱为9-8-1-1-1-3-4,属于ST46型。结论致2007年北京和上海两地区儿童发生猩红热的14株GAS分属于ST28、ST38、ST36及ST46四个不同的克隆系。 展开更多
关键词 A族β溶血性链球菌 猩红热 多位点序列分型 大环内酯类抗生素
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广州市儿童致咽炎β溶血性链球菌的流行情况及其emm基因分型 被引量:8
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作者 丁月霞 倪琼琼 刘金来 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期411-414,共4页
【目的】了解近期广州市儿童致咽炎β溶血性链球菌(BHS)的流行情况及其emm基因分型。【方法】对我院儿科门急诊1190例急性咽扁桃体炎的患儿进行咽拭子培养。鉴定为BHS者包括A、B、C和G组溶血性链球菌(groupA、B、C、Gstreptococcal,GAS... 【目的】了解近期广州市儿童致咽炎β溶血性链球菌(BHS)的流行情况及其emm基因分型。【方法】对我院儿科门急诊1190例急性咽扁桃体炎的患儿进行咽拭子培养。鉴定为BHS者包括A、B、C和G组溶血性链球菌(groupA、B、C、Gstreptococcal,GAS、GBS、GCS和GGS)进行细菌组DNA的提取;通过PCR扩增emm基因并测序;其结果与NCBI和CDCHome中已知的基因序列进行同源性比对大于95%则认为是同型菌株,藉此确定其分型。【结果】在1190例符合条件的患儿咽拭子标本中[男:678例,(6.96±2.73)岁;女:512例,(6.70±2.60)岁],鉴定为BHS的共有46例(3.87%)。其中GAS、GBS、GCS和GGS分别有4例、20例、2例和20例,分别占BHS约8.7%、43.5%、4.3%和43.5%;而GAS、GBS、GCS和GGS的阳性率分别约为0.37%、1.68%、0.17%和1.68%。男患儿BHS的阳性率约为5.01%,女患儿约为2.34%,两组比较(χ2=26.431,P<0.001)有统计学意义。除了GBS外,其他BHS(GAS、GC/GS)均有emm基因表达(1000~1500bp)。经测序共有15型emm,其中4株GAS分别表达emm1和emm12(7.69%)。【结论】致咽炎GAS阳性率低于0.5%,而GBS、GGS阳性率接近2%。但GBS无emm表达,GAS表达emm1和emm12,而GCS、GGS无明确的emm优势型。 展开更多
关键词 β溶血性链球菌 急性咽扁桃体炎 emm基因
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β溶血性链球菌htra基因的测序鉴定及表达蛋白的免疫反应性分析 被引量:2
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作者 倪琼琼 丁月霞 +1 位作者 刘金来 余步云 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期351-356,共6页
【目的】了解广州市儿童致咽炎β溶血性链球菌(BHS)中htra同源基因的分布并初步探讨其表达蛋白在BHS中的免疫反应性。【方法】运用PCR扩增从患儿分离的44株BHS的htra基因并测序,测序结果与NCBI中已知基因序列进行同源性比对;将测序正确... 【目的】了解广州市儿童致咽炎β溶血性链球菌(BHS)中htra同源基因的分布并初步探讨其表达蛋白在BHS中的免疫反应性。【方法】运用PCR扩增从患儿分离的44株BHS的htra基因并测序,测序结果与NCBI中已知基因序列进行同源性比对;将测序正确的A组链球菌(GAS)htra基因克隆至原核表达质粒pGEX4T-1,并在E.coli BL21中表达,应用Western blot,以抗GST Rabbit mAb鉴定重组融合蛋白表达,以BHS免疫小鼠抗血清检测目的蛋白的免疫反应性。【结果】44株BHS的htra基因与已知GAS htra基因的一致性均达99%;Western blot显示,HtrA融合蛋白可与抗GST Rabbit mAb以及GAS免疫小鼠血清特异性结合,而非A组链球菌及对照组免疫血清则呈阴性结果。【结论】从患儿分离的BHS均携带与GAS相同的htra基因,这与基因库中已知的B组链球菌(GBS)、C组链球菌(GCS)htra序列不符;GAS感染动物后可产生抗HtrA蛋白抗体,可以认为HtrA为GAS的显性免疫原,而尚不能认为非A组链球菌中HtrA为其显性免疫原。 展开更多
关键词 β溶血性链球菌 htra基因 克隆表达 免疫反应性
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A族β溶血性链球菌与猩红热的相关研究 被引量:4
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作者 梁云梅 杨永弘 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第4期89-92,共4页
A族β溶血性链球菌(beta-haemolytic group A Streptococcus isolate,GAS)又称为酿脓链球菌(Strepto-coccus pyogenes),是一种常见的致病性化脓性革兰阳性球菌,猩红热是由GAS引起的儿童常见呼吸道传染病。近年来,随着严重侵袭性GAS感染... A族β溶血性链球菌(beta-haemolytic group A Streptococcus isolate,GAS)又称为酿脓链球菌(Strepto-coccus pyogenes),是一种常见的致病性化脓性革兰阳性球菌,猩红热是由GAS引起的儿童常见呼吸道传染病。近年来,随着严重侵袭性GAS感染在欧美一些国家再次增多,猩红热在一些国家中的发病率也在升高。简要介绍GAS的分型、超抗原及耐药与猩红热之间的关系。 展开更多
关键词 A族β溶血性链球菌 分型 超抗原 耐药 猩红热
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从风湿热患者咽喉中分离出A组β溶血性链球菌1株 被引量:1
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作者 黄建林 余步云 古洁若 《实用医学杂志》 CAS 2006年第9期1058-1058,共1页
关键词 β溶血性链球菌 限制性片段长度多态性 风湿热 血清学分型 基因序列测定 分子生物学技术 脉冲场凝胶电泳 emm基因 离出 咽喉
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儿童A族β溶血性链球菌分离株抗生素耐药模式的研究 被引量:8
6
作者 冯利娟 杨永弘 +3 位作者 俞桑洁 姚开虎 袁林 沈叙庄 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2010年第2期127-130,共4页
目的了解我国儿科临床分离A族β溶血性链球菌对抗生素的耐药特点。方法选取2005—2008年5所不同地区儿童医院临床分离的A族β溶血性链球菌371株,对上述菌株进行药物敏感试验,采用PCR方法检测大环内酯类抗生素及四环素耐药基因。结果药... 目的了解我国儿科临床分离A族β溶血性链球菌对抗生素的耐药特点。方法选取2005—2008年5所不同地区儿童医院临床分离的A族β溶血性链球菌371株,对上述菌株进行药物敏感试验,采用PCR方法检测大环内酯类抗生素及四环素耐药基因。结果药敏试验结果显示,对大环内酯类药物耐药率高达94.0%以上,MIC50与MIC90均大于512mg/L;克林霉素、四环素和氯霉素耐药率分别为96.9%、90.6%和3.5%;对青霉素、左氧氟沙星和头孢他啶的敏感率则为100%。在371株分离菌中观察到6种耐药谱,其中以对大环内酯类抗生素、克林霉素、四环素联合耐药为主,占85.7%(316/378),其次为对大环内酯类抗生素和克林霉素耐药,占6.5%(24/371)。2007—2008年191株红霉素耐药株中,ermB阳性菌株占分离株总数的95.8%(183/191),ermTR4.2%(8/191),无mefA阳性株。tetM阳性株占91.1%(174/191),tetO阳性占0.5%(1/191)。结论我国儿科临床分离的A族β溶血性链球菌以耐大环内酯类抗生素、克林霉素和四环素为主,ermB和tetM耐药基因常同时存在。 展开更多
关键词 A族β溶血性链球菌 耐药谱 药敏试验
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畜禽及其产品供应链β溶血性链球菌的分离鉴定与耐药性分析
7
作者 蔡扩军 赵红琼 《动物医学进展》 北大核心 2023年第5期71-74,共4页
为了解畜禽及其产品供应链β溶血性链球菌的污染状况及药物敏感性,采集580份畜禽及其供应链产品进行β溶血性链球菌的分离培养、鉴定,最后用K-B纸片琼脂扩散法对β溶血性链球菌进行药敏试验。经全自动微生物鉴定仪生化鉴定,共分离鉴定... 为了解畜禽及其产品供应链β溶血性链球菌的污染状况及药物敏感性,采集580份畜禽及其供应链产品进行β溶血性链球菌的分离培养、鉴定,最后用K-B纸片琼脂扩散法对β溶血性链球菌进行药敏试验。经全自动微生物鉴定仪生化鉴定,共分离鉴定出11株β溶血性链球菌,检出率1.89%。药敏试验结果显示,11株β溶血链球菌对青霉素、头孢唑啉、头孢拉丁、卡那霉素耐药率达70%以上,对头孢哌酮钠、氧氟沙星、强力霉素、头孢氨苄敏感率达90%以上,可为畜禽及其产品供应链β溶血性链球菌的防控提供参考。 展开更多
关键词 畜禽 产品 β溶血性链球菌 分离鉴定 药敏试验
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A组链球菌M蛋白重组多肽原核表达载体构建及融合蛋白的表达 被引量:2
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作者 丁月霞 倪琼琼 刘金来 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期29-34,共6页
目的:设计针对A组β溶血性链球菌M1和M12蛋白的复合多肽;构建含M蛋白基因(emm基因)1型和12型特异性抗原决定簇基因及其保守区J14肽基因的GST标签的重组表达载体;并诱导和优化GST融合蛋白的表达。方法:在NCBI Genebank和Oligo 6引物设计... 目的:设计针对A组β溶血性链球菌M1和M12蛋白的复合多肽;构建含M蛋白基因(emm基因)1型和12型特异性抗原决定簇基因及其保守区J14肽基因的GST标签的重组表达载体;并诱导和优化GST融合蛋白的表达。方法:在NCBI Genebank和Oligo 6引物设计软件中选择分别编码M蛋白emm基因1型和12型信号肽后35个氨基酸及其相同的保守区14肽基因序列(全长270 bp),通过重叠PCR(Overlap PCR)合成所需的核苷酸序列,经测序确定序列完全和设计的相匹配后,将该重组片段克隆到pGEX-4T-1表达载体中,阳性克隆经双酶切和测序鉴定正确后建立稳定表达该重组质粒的大肠杆菌BL21株系(pE/B);通过聚丙烯酰胺凝胶的考马斯亮蓝染色和Western blot来检测在不同时间(0、2、6、8、18和24小时)和温度(25℃、30℃和37℃)以及不同浓度(0.01、0.1、1 mmol/L)异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导GST融合蛋白(GST/emm)表达情况,并对诱导表达的GST/emm切胶进行质谱分析鉴定。结果:成功构建含有emm1和emm12抗原决定簇及M蛋白保守区J14肽基因的原核表达载体;并诱导其稳定表达,在1 mol/L IPTG诱导6~8小时达高峰,不同温度下均有过量表达;质谱检测诱导蛋白GST/emm条带结果正确。结论:成功构建A组β溶血性链球菌的emm1型和emm12型原核表达载体,并稳定诱导GST/emm表达,为下一步研究GST/emm的纯化、酶切以及免疫原性的鉴定和疫苗研制打下夯实的基础。 展开更多
关键词 A组β溶血性链球菌 emm基因 M蛋白 GST融合蛋白
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梅花鹿链球菌的分离鉴定与防治
9
作者 王自然 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1063-1064,共2页
关键词 β溶血性链球菌 分离鉴定 梅花鹿 血性败血症 防治 链球菌 人畜共患病 局限性感染
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绵羊链球菌病及防治
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作者 王博善 王翠玲 +2 位作者 刘福元 胡仁山 海拉提江 《新疆畜牧业》 2000年第3期34-34,共1页
从新疆南山某牧场患绵羊链球菌病的羊中分离出1株β溶血性绵羊链球菌细菌,在马丁血清肉汤培养基中,细菌抹片呈革兰氏阳性,排列呈长链状。
关键词 β溶血性绵羊链球菌 绵羊链球菌 诊断 防治
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仔鹿感染绵羊链球菌、肠球菌的分离鉴定
11
作者 王宏图 张金江 +4 位作者 冷婧 赵颖婕 梁蓉蓉 胡建军 敖维平 《现代畜牧兽医》 2023年第2期19-22,共4页
研究旨在掌握新疆南疆某规模鹿场仔鹿发病死亡的细菌性病原,更好地采取防治措施。无菌采集死亡仔鹿的病变组织进行细菌分离培养、生化试验、CAMP试验及16S rRNA的PCR鉴定、药敏试验、动物致病性试验等。结果表明,分离获得两株分离株为... 研究旨在掌握新疆南疆某规模鹿场仔鹿发病死亡的细菌性病原,更好地采取防治措施。无菌采集死亡仔鹿的病变组织进行细菌分离培养、生化试验、CAMP试验及16S rRNA的PCR鉴定、药敏试验、动物致病性试验等。结果表明,分离获得两株分离株为β溶血性绵羊链球菌和肠球菌,经检测筛选出对绵羊链球菌、肠球菌均敏感的药物:哌拉西林、羧苄西林、氨苄西林及亚胺培南。研究表明,试验发病仔鹿存在β溶血性绵羊链球菌和肠球菌的混合感染的情况。 展开更多
关键词 马鹿 细菌分离 β溶血性绵羊链球菌 耐药性
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2000~2004年京沪穗渝5家儿童医院革兰阳性球菌耐药情况分析 被引量:36
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作者 汪玲 陆权 +9 位作者 王传清 邓秋莲 刘岚 甄景慧 张泓 王艺 黄勇 陈沅 杨永弘 沈叙庄 《中国循证儿科杂志》 CSCD 2006年第2期113-121,共9页
目的分析2000~2004年北京、上海、广州和重庆儿科主要革兰阳性球菌耐药的情况。方法对北京、上海、广州和重庆地区的5家儿童专科医院检验科送检标本分离出的4种革兰阳性球菌(共计8215株)进行Kirby-Bauer琼脂扩散法抗生素敏感实验,按照2... 目的分析2000~2004年北京、上海、广州和重庆儿科主要革兰阳性球菌耐药的情况。方法对北京、上海、广州和重庆地区的5家儿童专科医院检验科送检标本分离出的4种革兰阳性球菌(共计8215株)进行Kirby-Bauer琼脂扩散法抗生素敏感实验,按照2000~2004年每年美国临床实验室标准化委员会标准进行判读,并计算出所测细菌抗生素的耐药率(R%+I%)和敏感率(S%)。结果从感染患儿中分离出金黄色葡萄球菌共4004株,耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(NRSA)检出率为7.15%,对红霉素总耐药率为61.96%,未发现耐万古霉素的金黄色葡萄球菌(VRSA)或万古毒素中度敏感金黄色葡萄球菌(VISA);肺炎链球菌共2402株,对青霉素不敏感肺炎链球菌(PNSP)的检出率为63.42%.对红霉素总耐药率为86.22%;β溶血性链球菌共432株,均对青霉素敏感,对红霉素的耐药率为68.47%,且耐药率呈上升趋势。肠球菌共1377株,对氨苄西林的总耐药率为51.91%,对红霉素的总耐药率高达88.10%。结论除β溶血性链球菌之外的革兰阳性球菌对广谱青霉素的耐药率都偏高;对红霉素的耐药率居高不下,并有逐年上升的趋势;革兰阳性球菌对万古霉素和环丙沙星的敏感率较高。MRSA仍在较低水平,在本研究中未发现VRSA和VISA,但是出现了对万古霉素耐药的肠球菌,耐药形势不容乐观,因此仍需加强各地对革兰阳性球菌耐药性和抗生素使用情况的监测,合理使用抗生素。 展开更多
关键词 革兰阳性球菌 金黄色葡萄球菌 肺炎链球菌 β溶血性链球菌 球菌 儿科 耐药
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