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α-银环蛇毒素基因的克隆及其非融合型原核表达
被引量:
5
1
作者
胡延春
张乃生
+3 位作者
邓俊良
左之才
廖玉辉
欧阳红生
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第4期463-469,共7页
根据文献报道α-银环蛇毒素的氨基酸序列推导出其DNA序列,设计并人工合成两两互补的14条寡核苷酸片段。经片段延伸、PCR、克隆,成功构建α-银环蛇毒素基因克隆质粒;质粒经XbaⅠ和EcoRⅠ双酶切回收后连接于表达载体pET28a(+)中,分别转化B...
根据文献报道α-银环蛇毒素的氨基酸序列推导出其DNA序列,设计并人工合成两两互补的14条寡核苷酸片段。经片段延伸、PCR、克隆,成功构建α-银环蛇毒素基因克隆质粒;质粒经XbaⅠ和EcoRⅠ双酶切回收后连接于表达载体pET28a(+)中,分别转化BL21(DE3)、BL21(DE3)Codon plus、BL21(DE3)plysS进行诱导表达,表达产物经Tris/tricine系统进行SDS-PAGE分析。结果表明:该基因已在大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌中进行了非融合表达,其表达量占细菌总蛋白的11.98%,主要以包涵体形式存在;同时对表达条件进行了优化,其表达量可达16.28%。经Western blot分析,在大约8 kDa处出现明显的目的带,与预计蛋白分子量大小一致,说明表达产物与天然α-银环蛇毒素具有相似的免疫原性。表达产物纯化、复性后经动物毒性试验表明:表达的α-银环蛇毒素蛋白具有生物学活性,小鼠腹腔注射其LD50约为1.28μg/g。
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关键词
α-银环蛇毒素
基因克隆
非融合原核表达
免疫原性
生物学活性
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职称材料
重组α-银环蛇毒素的纯化及活性分析
被引量:
3
2
作者
段海清
张兆山
+1 位作者
李淑琴
黄翠芬
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1999年第5期747-751,共5页
以表达重组α-银环蛇毒素的高效表达菌株BL21(PDZ04)为材料,研究重组α-银环蛇毒素(α-bungarotoxin,α-BgTx)的分离纯化.采取亲和色谱和离子交换色谱的方法都得到了重组α-银环蛇毒素的纯品.首先从天然的银环蛇毒干粉中分离纯化得到了...
以表达重组α-银环蛇毒素的高效表达菌株BL21(PDZ04)为材料,研究重组α-银环蛇毒素(α-bungarotoxin,α-BgTx)的分离纯化.采取亲和色谱和离子交换色谱的方法都得到了重组α-银环蛇毒素的纯品.首先从天然的银环蛇毒干粉中分离纯化得到了天然α-银环蛇毒素的纯品.然后以天然α-银环蛇毒素为对照来检测重组α-银环蛇毒素的抗原性和毒性.ELISA结果显示其具有与天然α-银环蛇毒素相似的抗原性,以小鼠为动物模型,纯化的重组α-银环蛇毒素与天然α-银环蛇毒素相比,其腹腔注射的LD50也基本一致,约为0.22μg/g.结果表明利用基因工程的方法生产蛇神经毒素是可行的.
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关键词
蛇神经
毒素
重组
α-银环蛇毒素
纯化
生物活性
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职称材料
α-银环蛇毒素对中枢烟碱诱发小鼠惊厥效应的影响
3
作者
刘洁生
杨子江
彭志英
《暨南大学学报(自然科学与医学版)》
CAS
CSCD
1997年第5期78-83,共6页
100μg/kgα-银环蛇毒素(α-Bungarotoxin,α-BGT)对大鼠脑室内注射烟碱50μg/kg引起的惊厥反应的抑制率为40%,d-筒箭毒ED50为12.7μg/kg,六烃季胺ED50为228.2μg/k...
100μg/kgα-银环蛇毒素(α-Bungarotoxin,α-BGT)对大鼠脑室内注射烟碱50μg/kg引起的惊厥反应的抑制率为40%,d-筒箭毒ED50为12.7μg/kg,六烃季胺ED50为228.2μg/kg.在人工呼吸条件下,以烟碱引起的脑皮层电图去同步化为指标,130μg/kgα-BGT对烟碱效应的抑制率可达60%,烟碱引起脑皮层电图低频区域的变化受到α-BGT的明显影响.
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关键词
α-银环蛇毒素
烟碱
惊厥
脑皮层电图
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职称材料
中枢神经系统烟碱受体:性质的多样性,功能的未知性
被引量:
4
4
作者
刘振伟
刘传缋
《生理科学进展》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第2期149-152,共4页
中枢神经系统烟碱受体其药理学和生理学性质表现为多样性特点。位于突触前的烟碱受体具有调节突触传递的作用。中枢由烟碱受体介导的功能性快突触传递 ,长期以来 (自 1966年 )已经明确的只存在于脊髓前角运动神经元与闰绍细胞间 ,只是...
中枢神经系统烟碱受体其药理学和生理学性质表现为多样性特点。位于突触前的烟碱受体具有调节突触传递的作用。中枢由烟碱受体介导的功能性快突触传递 ,长期以来 (自 1966年 )已经明确的只存在于脊髓前角运动神经元与闰绍细胞间 ,只是到最近 ( 1998年 )才在脑中发现。尽管如此 ,中枢神经系统尤其是脑内的烟碱受体 ,其生理功能目前仍然是个谜。
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关键词
烟碱受体
中枢神经系统
α-银环蛇毒素
快突触传递
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职称材料
题名
α-银环蛇毒素基因的克隆及其非融合型原核表达
被引量:
5
1
作者
胡延春
张乃生
邓俊良
左之才
廖玉辉
欧阳红生
机构
四川农业大学动物科技学院
吉林大学畜牧兽医学院
出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第4期463-469,共7页
文摘
根据文献报道α-银环蛇毒素的氨基酸序列推导出其DNA序列,设计并人工合成两两互补的14条寡核苷酸片段。经片段延伸、PCR、克隆,成功构建α-银环蛇毒素基因克隆质粒;质粒经XbaⅠ和EcoRⅠ双酶切回收后连接于表达载体pET28a(+)中,分别转化BL21(DE3)、BL21(DE3)Codon plus、BL21(DE3)plysS进行诱导表达,表达产物经Tris/tricine系统进行SDS-PAGE分析。结果表明:该基因已在大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌中进行了非融合表达,其表达量占细菌总蛋白的11.98%,主要以包涵体形式存在;同时对表达条件进行了优化,其表达量可达16.28%。经Western blot分析,在大约8 kDa处出现明显的目的带,与预计蛋白分子量大小一致,说明表达产物与天然α-银环蛇毒素具有相似的免疫原性。表达产物纯化、复性后经动物毒性试验表明:表达的α-银环蛇毒素蛋白具有生物学活性,小鼠腹腔注射其LD50约为1.28μg/g。
关键词
α-银环蛇毒素
基因克隆
非融合原核表达
免疫原性
生物学活性
Keywords
alpha
-
bungarotoxin
gene cloning
non
-
fusion prokaryotic expressions immunogenicity
biological activity
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
S852 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
重组α-银环蛇毒素的纯化及活性分析
被引量:
3
2
作者
段海清
张兆山
李淑琴
黄翠芬
机构
军事医学科学院生物工程研究所
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1999年第5期747-751,共5页
文摘
以表达重组α-银环蛇毒素的高效表达菌株BL21(PDZ04)为材料,研究重组α-银环蛇毒素(α-bungarotoxin,α-BgTx)的分离纯化.采取亲和色谱和离子交换色谱的方法都得到了重组α-银环蛇毒素的纯品.首先从天然的银环蛇毒干粉中分离纯化得到了天然α-银环蛇毒素的纯品.然后以天然α-银环蛇毒素为对照来检测重组α-银环蛇毒素的抗原性和毒性.ELISA结果显示其具有与天然α-银环蛇毒素相似的抗原性,以小鼠为动物模型,纯化的重组α-银环蛇毒素与天然α-银环蛇毒素相比,其腹腔注射的LD50也基本一致,约为0.22μg/g.结果表明利用基因工程的方法生产蛇神经毒素是可行的.
关键词
蛇神经
毒素
重组
α-银环蛇毒素
纯化
生物活性
Keywords
Snake neurotoxin,Recombinant α bungarotoxin,Purification,Biological activity
分类号
Q784 [生物学—分子生物学]
Q516 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
α-银环蛇毒素对中枢烟碱诱发小鼠惊厥效应的影响
3
作者
刘洁生
杨子江
彭志英
机构
华南理工大学食品工程系
暨南大学生物工程学系
出处
《暨南大学学报(自然科学与医学版)》
CAS
CSCD
1997年第5期78-83,共6页
基金
国家自然科学基金
国务院侨办资助
文摘
100μg/kgα-银环蛇毒素(α-Bungarotoxin,α-BGT)对大鼠脑室内注射烟碱50μg/kg引起的惊厥反应的抑制率为40%,d-筒箭毒ED50为12.7μg/kg,六烃季胺ED50为228.2μg/kg.在人工呼吸条件下,以烟碱引起的脑皮层电图去同步化为指标,130μg/kgα-BGT对烟碱效应的抑制率可达60%,烟碱引起脑皮层电图低频区域的变化受到α-BGT的明显影响.
关键词
α-银环蛇毒素
烟碱
惊厥
脑皮层电图
Keywords
α-
Bungarotoxin
nicotine
convulsion
electrocorticogram
分类号
R991 [医药卫生—毒理学]
R996.3 [医药卫生—毒理学]
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职称材料
题名
中枢神经系统烟碱受体:性质的多样性,功能的未知性
被引量:
4
4
作者
刘振伟
刘传缋
机构
军事医学科学院毒物药物研究所
出处
《生理科学进展》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第2期149-152,共4页
文摘
中枢神经系统烟碱受体其药理学和生理学性质表现为多样性特点。位于突触前的烟碱受体具有调节突触传递的作用。中枢由烟碱受体介导的功能性快突触传递 ,长期以来 (自 1966年 )已经明确的只存在于脊髓前角运动神经元与闰绍细胞间 ,只是到最近 ( 1998年 )才在脑中发现。尽管如此 ,中枢神经系统尤其是脑内的烟碱受体 ,其生理功能目前仍然是个谜。
关键词
烟碱受体
中枢神经系统
α-银环蛇毒素
快突触传递
分类号
R338.2 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
α-银环蛇毒素基因的克隆及其非融合型原核表达
胡延春
张乃生
邓俊良
左之才
廖玉辉
欧阳红生
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2006
5
在线阅读
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职称材料
2
重组α-银环蛇毒素的纯化及活性分析
段海清
张兆山
李淑琴
黄翠芬
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1999
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
α-银环蛇毒素对中枢烟碱诱发小鼠惊厥效应的影响
刘洁生
杨子江
彭志英
《暨南大学学报(自然科学与医学版)》
CAS
CSCD
1997
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
中枢神经系统烟碱受体:性质的多样性,功能的未知性
刘振伟
刘传缋
《生理科学进展》
CAS
CSCD
北大核心
2001
4
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职称材料
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