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题名胰高血糖素受体拮抗剂筛选模型的建立
被引量：1
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作者
柳军
张陆勇
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机构
中国药科大学新药筛选中心
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出处
《中国临床药理学与治疗学》
CAS
CSCD
2006年第10期1129-1132,共4页
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基金
"十五"重大科技专项"863"计划资助项目(№2004AA234011)
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文摘
目的研究胰高血糖素受体(GR)拮抗剂筛选模型的建立。方法用离心法提取大鼠肝脏GR,以125I标记的胰高血糖素(125I-Glucagon)为配体,利用放射性配体结合分析法,检测配体与GR的饱和性结合特征及14个化合物的竞争性结合能力。为进一步研究GR拮抗剂的筛选方法,将含有GR目的基因Pmt5.1cDNA短暂转染在中国仓鼠卵巢细胞(Chinesehamsterovarycell,CHO)上,加入钙离子敏感性荧光染料(Fluo-3),通过检测荧光强度的改变,筛选GR拮抗剂。结果竞争结合实验证明125I-Glu-cagon与GR结合良好,其平衡解离常数kd值为9.38nmol·L-1,受体最大容量Bmax为4.33nmol·L-1;14个化合物中有4个化合物(ZM102849、ZM102850、ZM102854和ZM102855)与GR结合良好。CHO细胞表达GR后,对4个与GR结合良好的化合物进行细胞水平实验,结果表明化合物ZM102850可以引起荧光强度明显降低,具有拮抗GR的作用。结论通过放射性配基结合实验方法和荧光强度检测法可以筛选GR拮抗剂。
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关键词
放射配基结合
胰高血糖素受体
^^125i-胰高血糖素
拮抗剂
中国仓鼠卵巢细胞
转染
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Keywords
radioimmunoassay
glucagon receptor
^^125i-Glucagon
antagonist
CHO cell
transfection
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分类号
R965.1
[医药卫生—药理学]
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