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结球甘蓝小孢子胚胎发生的细胞学研究 被引量:4
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作者 曾爱松 高兵 +5 位作者 宋立晓 张云霞 李健绮 李英 侯喜林 严继勇 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期47-54,共8页
游离小孢子培养即小孢子在外界胁迫诱导的条件下,从其配子体发育途径转向孢子体发育途径,诱导小孢子胚胎发生的过程。本研究通过对结球甘蓝小孢子胚胎发生的细胞学观察,为甘蓝游离小孢子培养中的可调控性及相关胚胎发育研究提供理论依... 游离小孢子培养即小孢子在外界胁迫诱导的条件下,从其配子体发育途径转向孢子体发育途径,诱导小孢子胚胎发生的过程。本研究通过对结球甘蓝小孢子胚胎发生的细胞学观察,为甘蓝游离小孢子培养中的可调控性及相关胚胎发育研究提供理论依据。选用3个在游离小孢子培养中胚胎发生响应有差异的甘蓝杂交种,分别采用醋酸洋红、4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)及荧光素双醋酸酯(FDA)3种染色方法,对甘蓝小孢子体内配子体发育、游离小孢子培养中的胚胎发生过程及细胞死亡现象进行了观察。结果表明:小孢子正常发育方向是单核小孢子经历2次不对称核分裂后发育成三核花粉,而单核靠边期小孢子在体外经32.5℃热激胁迫1 d后,小孢子绝大部分死亡,培养3 d后小孢子死亡率达到90%左右。结球甘蓝游离小孢子培养胚胎发生途径以B途径为主:第1次分裂为对称分裂,其后2个核进行反复分裂形成多细胞团,依次经历球型胚、心型胚、鱼雷胚,直至子叶胚的形成。除了以上典型B途径外,培养过程中还同时存在多种发育途径:第1次不对称分裂后,生殖核继续分裂即为A-G途径;营养核和生殖核两者同时继续分裂的A-VG途径。结论:甘蓝小孢子在体外经32.5℃热激胁迫1 d后,B途径为其主要孢子体发育途径;热激胁迫迅速诱导了小孢子的死亡。 展开更多
关键词 胚胎发生 细胞程序性死亡 发育途径 结球甘蓝
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StP5CS基因转化结球甘蓝的研究 被引量:4
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作者 王肖红 曾爱松 +2 位作者 高兵 宋立晓 严继勇 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期885-891,共7页
为研究StP5CS基因在结球甘蓝中的耐盐作用,以结球甘蓝下胚轴为外植体,采用农杆菌介导法将耐盐基因StP5CS和抗除草剂Bar基因导入结球甘蓝基因组中,在双丙氨膦的筛选下扩繁、生根,共获得了36株抗性植株。PCR扩增和Southern印迹杂交检测表... 为研究StP5CS基因在结球甘蓝中的耐盐作用,以结球甘蓝下胚轴为外植体,采用农杆菌介导法将耐盐基因StP5CS和抗除草剂Bar基因导入结球甘蓝基因组中,在双丙氨膦的筛选下扩繁、生根,共获得了36株抗性植株。PCR扩增和Southern印迹杂交检测表明:目的基因StP5CS和Bar基因已经成功导入结球甘蓝基因组中。RT-PCR检测表明:StP5CS基因在转录水平也有表达。转基因植株耐盐试验结果显示:高浓度盐处理(400mmol/L NaCl)下,对照植株整株枯死,而转基因植株仍能正常生长;转基因植株的SOD活性、脯氨酸含量和相对膜透性均随盐浓度的升高呈上升趋势,均在400mmol/L NaCl处理下达到最大。结果表明转基因植株对高盐环境有一定的耐受性。 展开更多
关键词 结球甘蓝 StP5CS基因 遗传转化 耐盐性
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结球甘蓝不定芽诱导及遗传转化的影响因子 被引量:3
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作者 王肖红 曾爱松 +2 位作者 高兵 宋立晓 严继勇 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第4期918-920,共3页
结球甘蓝(Brassica oleracea L.var.capitata L.)作为中国的主要蔬菜之一,营养价值丰富,富含多种维生素和矿物质,并含有天然防癌和抗癌物质。通过农杆菌介导法将抗除草剂基因bar和耐盐基因StP5CS转入甘蓝植株中,获得抗除草剂... 结球甘蓝(Brassica oleracea L.var.capitata L.)作为中国的主要蔬菜之一,营养价值丰富,富含多种维生素和矿物质,并含有天然防癌和抗癌物质。通过农杆菌介导法将抗除草剂基因bar和耐盐基因StP5CS转入甘蓝植株中,获得抗除草剂及耐盐植株,具有重要的意义。 展开更多
关键词 结球甘蓝 离体培养 不定芽 遗传转化 农杆菌
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结球甘蓝SSR检测体系的建立及优化 被引量:2
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作者 司军 李成琼 +3 位作者 宋洪元 任雪松 宋明 王小佳 《中国蔬菜》 北大核心 2009年第12期19-23,共5页
以结球甘蓝自交系15R(南宝)和14S(北黑大平头)为试材,建立了甘蓝SSR-PCR反应体系,并从PCR反应组成、扩增程序等环节对SSR-PCR反应体系进行了优化。即10.00μL反应体系组成为:1×Buffer(含20.00mmol.L-1MgCl2)、50.00μmol.L-1dNTPs... 以结球甘蓝自交系15R(南宝)和14S(北黑大平头)为试材,建立了甘蓝SSR-PCR反应体系,并从PCR反应组成、扩增程序等环节对SSR-PCR反应体系进行了优化。即10.00μL反应体系组成为:1×Buffer(含20.00mmol.L-1MgCl2)、50.00μmol.L-1dNTPs、0.40UTaqDNA聚合酶、0.40μmol.L-1SSR引物、1.00μLDNA(60.00ng.μL-1),加ddH2O至终体积10.00μL;对基本扩增程序作了改进,适宜的扩增程序为:94℃预变性5min后进行20个迫降循环,94℃变性45s,60℃退火45s,72℃延伸1min,每个循环降低0.5℃;再进行15个循环,94℃变性45s,55℃退火45s,72℃延伸1min;72℃延伸10min,16℃保存。对PCR产物的电泳检测采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(银染法)。 展开更多
关键词 甘蓝 SSR 检测体系 建立 优化
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结球甘蓝体细胞无性系变异的RAPD分析 被引量:1
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作者 李贵 陶鹏 +3 位作者 李必元 王五宏 岳智臣 钟新民 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第4期753-758,共6页
以结球甘蓝强力50原生质体再生植株和无菌苗下胚轴再生植株为材料,利用RAPD分子标记技术对结球甘蓝再生过程中产生的体细胞无性系变异进行了分析检测。结果表明:从50条随机引物中筛选出条带清晰、多态性丰富、表现稳定的引物14条,在此... 以结球甘蓝强力50原生质体再生植株和无菌苗下胚轴再生植株为材料,利用RAPD分子标记技术对结球甘蓝再生过程中产生的体细胞无性系变异进行了分析检测。结果表明:从50条随机引物中筛选出条带清晰、多态性丰富、表现稳定的引物14条,在此基础上共扩增出DNA片段253条,其中具多态性的73条,表现为新增加带和缺失带,多态率为28.85%,每对引物平均扩增的多态位点为5.21个。各植株间遗传相似系数的计算使用聚类分析软件NTSYS2.10e完成,采用非加权类平均法(UPMGA)对统计数据进行聚类分析,结果表明:各再生植株与母本间平均遗传相似系数为0.9304,植株之间存在遗传变异。 展开更多
关键词 结球甘蓝 再生植株 RAPD 体细胞无性系变异
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甘蓝细胞质雄性不育类型的分子鉴定 被引量:1
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作者 陈烨丽 陈学好 +2 位作者 陈锦秀 缪体云 薄天岳 《上海农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第3期19-22,共4页
为鉴定几种来源不同的甘蓝细胞质雄性不育材料的类型,获得与其不育性状相关的特异序列,基于同源序列的候选基因法,通过检索NCBI核苷酸及蛋白质数据库获得orf138和orf224开放阅读框序列,依据其保守序列设计2对引物,对甘蓝的5个不育系及... 为鉴定几种来源不同的甘蓝细胞质雄性不育材料的类型,获得与其不育性状相关的特异序列,基于同源序列的候选基因法,通过检索NCBI核苷酸及蛋白质数据库获得orf138和orf224开放阅读框序列,依据其保守序列设计2对引物,对甘蓝的5个不育系及其保持系进行PCR扩增。orf138引物在5个甘蓝雄性不育系中均扩增出749 bp的片段,同源性比对发现这5个不育材料的特异片段与萝卜Ogu CMS所具有的Oguorf138基因同源度达100%,表明这几个来源不同的甘蓝细胞质不育材料同属萝卜细胞质不育类型。 展开更多
关键词 甘蓝 细胞质雄性不育 ORF138 orf224
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越冬甘蓝新品种苏甘91的选育
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作者 蒋红云 王神云 +3 位作者 吴强 王红 于利 李建斌 《中国瓜菜》 CAS 2013年第2期21-23,共3页
苏甘91是以自交不亲和系MS583-2-1-2为母本,以自交不亲和系M14-4-2-3为父本配制而成的越冬甘蓝一代杂种。叶色深绿,蜡粉中等,生育期165d左右,叶球圆形,紧实度中等,肉质脆嫩,单球质量1.14kg左右,667m2产量5012.9kg。抗逆性强,田间调查表... 苏甘91是以自交不亲和系MS583-2-1-2为母本,以自交不亲和系M14-4-2-3为父本配制而成的越冬甘蓝一代杂种。叶色深绿,蜡粉中等,生育期165d左右,叶球圆形,紧实度中等,肉质脆嫩,单球质量1.14kg左右,667m2产量5012.9kg。抗逆性强,田间调查表明对菌核病和软腐病抗性强于对照比久1038,耐裂球,耐贮性好,品质优良,适合我国长江流域及其以南地区作越冬栽培。 展开更多
关键词 甘蓝 新品种 苏甘91 一代杂种 越冬栽培
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