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拟南芥Rad23原核重组蛋白构建和活性检测
被引量:
1
1
作者
李秀山
刘斌
+3 位作者
赵李剑
唐东英
赵小英
刘选明
《湖南大学学报(自然科学版)》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011年第11期66-69,共4页
在拟南芥中,Rad23基因通过参与泛素/26S蛋白酶体途径调节植物生长发育和激素应答.为进一步研究该基因编码蛋白的分子作用机制及其生物学功能,构建了pCold-Rad23融合蛋白重组表达载体,将该载体转化到大肠杆菌BL21中诱导表达目的蛋白.SDS...
在拟南芥中,Rad23基因通过参与泛素/26S蛋白酶体途径调节植物生长发育和激素应答.为进一步研究该基因编码蛋白的分子作用机制及其生物学功能,构建了pCold-Rad23融合蛋白重组表达载体,将该载体转化到大肠杆菌BL21中诱导表达目的蛋白.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果表明,分子质量为94ku左右的融合重组蛋白在大肠杆菌中获得高效表达.采用纯化的重组蛋白多次免疫昆明小白鼠的方法,获得了特异性强并且效价高的多克隆抗体,经蛋白印迹检测,在分子质量40ku左右处出现特异的蛋白质条带,证明所制备的抗血清可以与拟南芥Rad23蛋白特异性结合.
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关键词
蛋白
泛素
/26
s
蛋白酶体
原核表达
抗体
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职称材料
题名
拟南芥Rad23原核重组蛋白构建和活性检测
被引量:
1
1
作者
李秀山
刘斌
赵李剑
唐东英
赵小英
刘选明
机构
湖南大学生物学院
出处
《湖南大学学报(自然科学版)》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011年第11期66-69,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30770200)
文摘
在拟南芥中,Rad23基因通过参与泛素/26S蛋白酶体途径调节植物生长发育和激素应答.为进一步研究该基因编码蛋白的分子作用机制及其生物学功能,构建了pCold-Rad23融合蛋白重组表达载体,将该载体转化到大肠杆菌BL21中诱导表达目的蛋白.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果表明,分子质量为94ku左右的融合重组蛋白在大肠杆菌中获得高效表达.采用纯化的重组蛋白多次免疫昆明小白鼠的方法,获得了特异性强并且效价高的多克隆抗体,经蛋白印迹检测,在分子质量40ku左右处出现特异的蛋白质条带,证明所制备的抗血清可以与拟南芥Rad23蛋白特异性结合.
关键词
蛋白
泛素
/26
s
蛋白酶体
原核表达
抗体
Keywords
protein
ubiquitin(ub)/26s proteasome
prokaryotic expre
s
s
ion
antibodie
s
分类号
Q511 [生物学—生物化学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
拟南芥Rad23原核重组蛋白构建和活性检测
李秀山
刘斌
赵李剑
唐东英
赵小英
刘选明
《湖南大学学报(自然科学版)》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011
1
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