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Lentivirus Mediated Gene Manipulation in Trophectoderm of Porcine Embryos 被引量:1
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作者 Yin Zhi Guo Jia +3 位作者 Bou Gerelchimeg Liu Shi-chao Mu Yan-shuang Liu Zhong-hua 《Journal of Northeast Agricultural University(English Edition)》 CAS 2014年第3期39-45,F0003,共8页
Development of tools that can manipulate gene expression specifically and efficiently in the trophectoderm(TE) lineage would greatly aid understanding the roles of different genetic pathways in TE versus embryonic l... Development of tools that can manipulate gene expression specifically and efficiently in the trophectoderm(TE) lineage would greatly aid understanding the roles of different genetic pathways in TE versus embryonic lineages. Here, we showed first time that short-term lentivirus infection of porcine blastocysts could lead to rapid expression of transgene specifically in TE cells. Efficient TE-specific gene knockdown could also be achieved by lentivirus-mediated pol III-driven short hairpin RNA(shRNA) and TE-specific gene expression could be temporal controlled efficiently by combining this system with Tet-On system. This lentivirus lineage-specific infection system would facilitate gene function studies in porcine pre-implatation embryos by specifically knockdown or overexpression of these genes in TE. 展开更多
关键词 PIG trophectoderm LENTIVIRUS gene manipulation
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体外生产绵羊早期胚胎发育异常分析
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作者 李丽俐 程潇 +1 位作者 徐尚荣 贾功雪 《黑龙江动物繁殖》 2025年第4期17-22,共6页
家畜早期胚胎发育异常意味着生产中的经济损失。为了深入探究绵羊体外生产胚胎早期发育异常,试验分别采集绵羊与小鼠未成熟卵母细胞进行体外成熟、体外受精,并在胚胎体外培养期间对绵羊与小鼠胚胎发育进程进行追踪,统计不同阶段的胚胎... 家畜早期胚胎发育异常意味着生产中的经济损失。为了深入探究绵羊体外生产胚胎早期发育异常,试验分别采集绵羊与小鼠未成熟卵母细胞进行体外成熟、体外受精,并在胚胎体外培养期间对绵羊与小鼠胚胎发育进程进行追踪,统计不同阶段的胚胎发育率及不同时间处于不同发育阶段的胚胎比例。随后,利用免疫荧光染色技术对绵羊体外囊胚细胞增殖分化能力进行检测。结果表明:绵羊体外胚胎的囊胚率和囊胚孵化率均显著低于小鼠体外胚胎与绵羊体内胚胎(P<0.05),分别有11.27%和53.90%的绵羊体外胚胎阻滞在2~4细胞期和8~16细胞期,部分绵羊体外胚胎在囊胚发育期间出现明显的发育延迟。此外,尽管绵羊体外囊胚的滋养层细胞数更多,但其滋养层细胞所占比例与增殖活性均低于小鼠体外囊胚。综上所述,体外生产绵羊胚胎表现出较强的发育异常,主要表现为8~16细胞期阻滞和囊胚发育延迟。 展开更多
关键词 绵羊 体外胚胎生产 发育不同步 滋养层 细胞增殖
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复苏周期单囊胚移植的影响因素分析 被引量:15
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作者 任新玲 章汉旺 +3 位作者 刘群 陈雯 李豫峰 朱桂金 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期742-745,共4页
目的研究玻璃化复苏囊胚移植后的妊娠结局与冷冻前囊胚质量、发育速度的相关性,探讨单囊胚移植的可能性。方法回顾分析105例复苏周期单囊胚移植患者的临床资料,观察发育速度、囊胚质量、内细胞团(ICM)/滋养外胚层(TE)评分对妊娠结局的... 目的研究玻璃化复苏囊胚移植后的妊娠结局与冷冻前囊胚质量、发育速度的相关性,探讨单囊胚移植的可能性。方法回顾分析105例复苏周期单囊胚移植患者的临床资料,观察发育速度、囊胚质量、内细胞团(ICM)/滋养外胚层(TE)评分对妊娠结局的影响。结果第5、6天囊胚间复苏后存活率、移植后妊娠率的差异均无统计学意义(98.0%,54.5%vs 97.0%,52.5%)。优质囊胚移植后妊娠率(44/70,62.9%)显著高于非优质囊胚(12/35,34.3%)。ICM评分为A、B级的囊胚移植后妊娠率差异无统计学意义(70.6%vs 58.0%),但均显著高于C级胚胎(21.1%)。TE评分越低,妊娠率有下降趋势但差异无统计学意义。结论复苏周期单囊胚移植妊娠率与囊胚质量有关,与囊胚发育速度无关。ICM评分而非TE评分与妊娠结果显著相关。复苏周期单个优质囊胚移植后妊娠率高,提示单囊胚移植可行。 展开更多
关键词 单囊胚移植 囊胚质量 内细胞团 滋养外胚层 玻璃化冷冻
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哺乳动物早期胚胎滋养外胚层发育的研究进展 被引量:3
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作者 张艳艳 彭辉 肖天放 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期2080-2085,共6页
囊胚形成过程中,胚胎卵裂球分化为滋养外胚层和内细胞团细胞。囊胚孵出后,滋养外胚层又分化为极滋养层和壁滋养层。滋养外胚层的分化对哺乳动物早期胚胎发育至关重要。研究表明,影响滋养外胚层发育的关键基因主要为Tead4、Cdx2和Eomes,... 囊胚形成过程中,胚胎卵裂球分化为滋养外胚层和内细胞团细胞。囊胚孵出后,滋养外胚层又分化为极滋养层和壁滋养层。滋养外胚层的分化对哺乳动物早期胚胎发育至关重要。研究表明,影响滋养外胚层发育的关键基因主要为Tead4、Cdx2和Eomes,敲除或突变这些基因将导致滋养外胚层细胞分化错误,而滋养外胚层的完整性、渗透性和液体转运功能受损也将导致囊胚形成失败。本文主要综述了哺乳动物滋养外胚层的发育、滋养外胚层发育需要的关键基因、调控滋养外胚层完整性和功能相关的蛋白,以及这些蛋白与滋养外胚层发育关键基因之间可能存在的关系,为进一步研究哺乳动物早期胚胎滋养外胚层的调控机制提供参考。 展开更多
关键词 滋养外胚层 完整性 功能 早期胚胎发育 哺乳动物
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无创胚胎植入前非整倍体筛查的诊断有效性分析 被引量:1
5
作者 贾磊 陈静波 +5 位作者 郭映纯 何姝婧 张志强 苏文龙 宫晓 方丛 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期73-80,共8页
【目的】探讨无创胚胎植入前非整倍体筛查(niPGT-A)的诊断有效性。【方法】收集并再次分析了2018年7月到2019年7月期间,在中山大学附属第六医院生殖医学中心因染色体相互易位,或罗氏易位经首次滋养层细胞(TE)活检(TE1)行植入前,遗传学... 【目的】探讨无创胚胎植入前非整倍体筛查(niPGT-A)的诊断有效性。【方法】收集并再次分析了2018年7月到2019年7月期间,在中山大学附属第六医院生殖医学中心因染色体相互易位,或罗氏易位经首次滋养层细胞(TE)活检(TE1)行植入前,遗传学检测被诊断为非整倍体或嵌合的患者捐献胚胎24枚。解冻捐赠胚胎行滋养层细胞活检(TE2)、内细胞团活检(ICM)并收集囊胚培养液/囊胚腔液(BCM/BF)通过高通量测序技术获得遗传信息。以ICM的结果为胚胎真实染色体结果,比较TE1、TE2及BCM/BF的核型一致性。【结果】TE1、TE2及BCM/BF与相应的ICM的核型一致性分别为66.7%,87.5%和79.2%(P>0.05),任意两组之间的差异没有统计学意义(P>0.05)。【结论】利用囊胚培养液/囊胚腔液中的游离DNA行无创胚胎植入前非整倍体筛查可以获得与同期活检的TE2和ICM相似的诊断有效性。 展开更多
关键词 无创胚胎植入前非整倍体筛查 囊胚培养液/囊胚腔液 滋养层细胞活检
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植入前囊胚滋养外胚层基因空间表达 被引量:6
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作者 赵亮 孙丽芳 +3 位作者 郑秀丽 刘静芳 郑蓉 张晗 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期965-973,共9页
目的:研究人胚胎植入前囊胚滋养外胚层细胞基因的空间表达。方法:辅助生殖来源人受精后第6天Gardner评分5AA的囊胚,显微镜下微吸管机械分离滋养外胚层细胞,对囊胚滋养外胚层极滋养层细胞和壁滋养层细胞采用单细胞测序检测,选取经t检验... 目的:研究人胚胎植入前囊胚滋养外胚层细胞基因的空间表达。方法:辅助生殖来源人受精后第6天Gardner评分5AA的囊胚,显微镜下微吸管机械分离滋养外胚层细胞,对囊胚滋养外胚层极滋养层细胞和壁滋养层细胞采用单细胞测序检测,选取经t检验计算所得P<0.05且基因表达差异≥2倍的差异表达基因,采用生物信息学软件对筛选的差异基因进行无监督层次聚类分析和基因本体(gene ontology,GO)功能分类分析,对差异表达基因进行注释和生物功能富集,并用全基因组对差异基因功能进一步注释。结果:对2枚受精后第6天的5AA囊胚滋养外胚层8个极滋养层细胞和8个壁滋养层细胞测序,发现极滋养层细胞306个基因上调,壁滋养层细胞75个基因上调。无监督聚类分析结果显示外胚层细胞分成极滋养层细胞和壁滋养层细胞两群,属于两种不同类型和生物功能的细胞群。差异基因功能注释显示,极滋养层细胞上调基因GO生物学功能主要是转录、能量代谢、蛋白合成、转运、氧化应激、离子转运、蛋白合成及运输、细胞周期调节、肌动蛋白增长等,主要参与泛素介导的蛋白水解、氧化磷酸化、Wnt信号通路、雌雄激素代谢等信号通路;壁滋养层细胞上调基因GO生物学功能主要是蛋白分解代谢、细胞周期停滞、细胞凋亡、激活丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路、碳水化合物运输、突触负调节、细胞生长、钙通道激活、正向B细胞分化、T细胞凋亡等,主要参与B细胞受体、T细胞受体、白细胞跨内皮移植、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达、间隙连接、促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)分泌、细胞凋亡等信号通路。结论:从空间维度揭示囊胚极/壁滋养层细胞的基因表达,显示胚胎植入前囊胚极/壁滋养外胚层相互协调,精细调节囊胚孵化和胚胎植入过程,进一步数据分析有望寻找到调控胚胎植入的内源性特异分子。 展开更多
关键词 囊胚 极滋养层细胞 壁滋养层细胞 基因 单细胞测序
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昆明小鼠内细胞团和滋胚层细胞注入去核2-细胞胚的核移植研究
7
作者 彭礼繁 赵焕 《广东畜牧兽医科技》 2010年第1期40-42,48,共4页
采用核移植技术将单个细胞注入去核2-细胞卵裂球中,比较来自于囊胚的内细胞团(ICM)和滋胚层细胞(TE)产生孕体或嵌合体的发育潜力。用TE和ICM重构胚胎的发育潜力,主要取决于注射hCG后从输卵管收集到的2-细胞胚胎的时间。在注射hCG后38~4... 采用核移植技术将单个细胞注入去核2-细胞卵裂球中,比较来自于囊胚的内细胞团(ICM)和滋胚层细胞(TE)产生孕体或嵌合体的发育潜力。用TE和ICM重构胚胎的发育潜力,主要取决于注射hCG后从输卵管收集到的2-细胞胚胎的时间。在注射hCG后38~42 h和43~46 h收集得到的2-细胞胚胎,其重构胚胎仅仅能够发育到4-细胞期。注射hCG后48~51 h收集得到的2-细胞胚胎,重构后发生卵裂的胚胎比率显著提高,有少部分会发育到囊胚期。用诺考达唑(Nocodazole)处理这些重构胚,发生卵裂的胚胎比率会显著提高,并且有部分重构胚发育到囊胚阶段。将这些囊胚移植到受体鼠中,在其妊娠中期未检测到供体核的出现。用ICM和TE进行重构得到的嵌合2-细胞胚胎,其体外发育潜力有限,本试验中也未得到嵌合孕体。 展开更多
关键词 嵌合体 核移植 内细胞团 滋胚层细胞
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细胞因子在猪胚胎附植期的作用及机制 被引量:2
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作者 潘旭静 常俊磊 +1 位作者 吴德 徐盛玉 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期1387-1395,共9页
猪胚胎的附植是通过广泛的细胞运动和重塑发生。胚胎的成功附植主要取决于胚胎延伸和滋养外胚层与子宫内膜上皮紧密连接的成功,这种紧密连接保证了孕体摄取其存活所必需的子宫腺上皮分泌物质。这些过程需要子宫和胚胎来源的细胞因子完... 猪胚胎的附植是通过广泛的细胞运动和重塑发生。胚胎的成功附植主要取决于胚胎延伸和滋养外胚层与子宫内膜上皮紧密连接的成功,这种紧密连接保证了孕体摄取其存活所必需的子宫腺上皮分泌物质。这些过程需要子宫和胚胎来源的细胞因子完成子宫内膜和滋养外胚层之间的细胞重塑,营造胚胎附植时的促炎微环境,维持附植阶段免疫系统的平衡,协调子宫和胚胎之间的相互作用等。本文主要综述了猪胚胎附植时期,由子宫和胚胎来源的细胞因子包括白细胞介素-1β(IL-1β)、干扰素(IFN)、成纤维细胞生长因子(FGF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)发挥的作用及其作用机理,以期为胚胎附植及发育调控相关研究提供参考。 展开更多
关键词 胚胎附植 子宫内膜 滋养外胚层 细胞因子
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拮抗剂方案新鲜单囊胚移植患者妊娠失败的独立危险因素分析 被引量:1
9
作者 周文 刘瑜亮 +3 位作者 李涛 邢卫杰 张曦亚 欧建平 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期596-602,共7页
【目的】探索本中心使用促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRH-ant)方案促排后新鲜单囊胚移植患者妊娠失败的独立危险因素。【方法】回顾性分析2017年1月至2020年4月在中山大学附属第三医院生殖医学中心行助孕治疗的325个治疗周期的资料。根... 【目的】探索本中心使用促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRH-ant)方案促排后新鲜单囊胚移植患者妊娠失败的独立危险因素。【方法】回顾性分析2017年1月至2020年4月在中山大学附属第三医院生殖医学中心行助孕治疗的325个治疗周期的资料。根据妊娠结局分为临床妊娠组(172例)和未妊娠组(153例),比较两组患者间的基础资料,临床促排卵情况,胚胎发育情况,移植囊胚的分期、内细胞团(ICM)和滋养外胚层(TE)评分,将P<0.1的变量纳入回归方程进行多因素Logistic回归分析,找出临床妊娠失败的独立危险因素。【结果】两组患者间的基础资料差异无统计学意义,促性腺激素(Gn)使用天数(8.9±1.3 vs.8.6±1.2)、人绒毛膜促性腺激素(HCG)注射日的卵泡刺激素(FSH)水平(12.1±3.7 vs.13.0±4.0)U/L、受精方式及移植囊胚的ICM和TE评分在临床妊娠组和未妊娠组的差异有统计学意义。将P<0.1的变量即不孕类型、受精方式、Gn使用天数、HCG注射日FSH水平、HCG注射日黄体生成素(LH)水平和移植囊胚的ICM和TE评分纳入回归模型,采用逐步法分析后发现临床妊娠失败的独立危险因素是移植囊胚的TE评分[P=0.001,OR=2.173,95%CI:(1.359,3.476)]、Gn使用时间[P=0.015,OR=0.794,95%CI:(0.659,0.955)]和受精方式[P=0.024,OR=2.065,95%CI:(1.098,3.882)]。【结论】本中心的数据提示≤40岁预后良好的患者使用拮抗剂促排并行新鲜单囊胚移植时,较差的滋养外胚层评分,较短的Gn使用时间和使用ICSI受精方式是临床妊娠失败的独立危险因素。 展开更多
关键词 单囊胚移植 促性腺激素释放激素拮抗剂 体外受精-胚胎移植 滋养外胚层 卵胞浆内单精子注射
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哺乳动物着床前胚胎中细胞系的分化及调控机制 被引量:1
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作者 王涵 赵盼盼 张坤 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期125-130,共6页
哺乳动物着床前发育是指精卵结合后胚胎在子宫着床之前的发育。这一阶段的发育时间短(小鼠为4.5 d),但是发生了一系列形态学和发育生物学上的变化。形态上,小鼠在着床前胚胎经历了3个重要变化:8细胞阶段的致密化和极性化、内细胞团和滋... 哺乳动物着床前发育是指精卵结合后胚胎在子宫着床之前的发育。这一阶段的发育时间短(小鼠为4.5 d),但是发生了一系列形态学和发育生物学上的变化。形态上,小鼠在着床前胚胎经历了3个重要变化:8细胞阶段的致密化和极性化、内细胞团和滋养层的分化及原始内胚层和外胚层的分离;在发育生物学方面,受精后会发生染色质重编程、母源因子降解、胚胎基因组激活等事件。本文以小鼠着床前胚胎为例,重点介绍了影响胚胎形态变化的调控机制及参与早期胚胎细胞分化的信号通路。对这些调控机制的理解有助于开发相关技术,从而提高动物繁殖效率或哺乳动物辅助生殖效率。 展开更多
关键词 胚胎着床前发育 细胞系分化 信号通路 胚胎 内细胞团 滋养层
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牛和小鼠早期胚胎发育过程中细胞谱系发育调控的比较 被引量:1
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作者 吴潇彤 史延 +2 位作者 李爽 王少华 张坤 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期765-775,共11页
高产奶牛繁殖效率低是世界性难题,其中早期胚胎死亡率高是主要原因之一。当前对牛早期胚胎发育的研究有限,而对于小鼠这种模式动物的早期胚胎发育研究已相当深入。因此,本文从胚胎形态、转录因子以及信号通路3方面对牛和小鼠早期胚胎发... 高产奶牛繁殖效率低是世界性难题,其中早期胚胎死亡率高是主要原因之一。当前对牛早期胚胎发育的研究有限,而对于小鼠这种模式动物的早期胚胎发育研究已相当深入。因此,本文从胚胎形态、转录因子以及信号通路3方面对牛和小鼠早期胚胎发育过程进行比较,以加深对牛早期胚胎发育的认识。经比较发现,受精后,牛和小鼠早期胚胎在不同时期发生母源因子降解、合子基因组激活、细胞极性建立和不对称分裂,最终使得胚胎形态发生变化,形成具有3个胚层(滋养外胚层、上胚层和原始内胚层)的囊胚。此外,牛和小鼠早期胚胎发育过程中,多个转录因子及信号通路形成复杂网络调控细胞谱系分化。综上所述,在牛和小鼠早期胚胎发育过程中,相似的生物学事件陆续发生,但是细胞谱系分化的调控呈现差异性,提示我们将小鼠早期胚胎作为研究模型的局限性,该领域的研究对提高奶牛繁殖效率以及促进牛遗传改良工作具有重要意义。 展开更多
关键词 小鼠 着床前 早期胚胎 谱系分化 滋养外胚层 内细胞团
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