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TRPC广谱抑制剂SKF96365协同顺铂对人胃癌HGC-27细胞的作用及相关机制的研究
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作者 冯娜 董升 +4 位作者 史丹丹 黄晓敏 亢鹏举 李文春 贺细菊 《中国临床解剖学杂志》 北大核心 2025年第4期426-435,共10页
目的探讨SKF96365联合顺铂对HGC-27细胞抑制作用及其分子机制的研究。方法采用2.5、5、7.5、10μmol/L SKF96365与顺铂联合作用HGC-27细胞;CCK-8、划痕实验检测细胞活力和迁移;JC-1、MitoROS、Rhod-2/AM荧光探针检测细胞线粒体膜电位、... 目的探讨SKF96365联合顺铂对HGC-27细胞抑制作用及其分子机制的研究。方法采用2.5、5、7.5、10μmol/L SKF96365与顺铂联合作用HGC-27细胞;CCK-8、划痕实验检测细胞活力和迁移;JC-1、MitoROS、Rhod-2/AM荧光探针检测细胞线粒体膜电位、活性氧及钙离子浓度的变化;Hoechst染色和流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blot检测细胞凋亡、自噬蛋白及PI3K/AKT/BAD信号通路相关蛋白的表达。结果与对照组相比,联合用药组能够显著抑制HGC-27细胞的增殖与迁移,诱导细胞线粒体功能受损,促使细胞凋亡率增加(P<0.05)。Western blot结果显示联合用药可促进胃癌细胞凋亡、自噬相关蛋白的表达,且显著抑制了细胞中PI3K/AKT/BAD信号通路磷酸化水平。结论SKF96365联合顺铂通过抑制PI3K/AKT/BAD通路的磷酸化水平诱导胃癌细胞启动线粒体凋亡途径和细胞自噬,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 胃癌 TRPC SKF96365 顺铂 钙超载 凋亡
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瞬时受体电位通道5对间歇性低氧致心肌焦亡的影响
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作者 邱璇 沙热扎提·依沙江 +6 位作者 陈玉岚 王蒙蒙 李瑜 古丽娜孜·吐拉洪 祖柏旦·阿布汉 阿丽亚·阿不力孜 王星晨 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第12期1637-1642,共6页
目的探讨瞬时受体电位通道5(TRPC5)对间歇性低氧致心肌焦亡的影响。方法TRPC5^(-/-)大鼠及SD大鼠各12只,两种大鼠分别随机分为慢性间歇性低氧组(CIH组)和常氧组(Control组),即WT-Control组、WT-CIH组、TRPC5^(-/-)-Control组、TRPC5^(-/... 目的探讨瞬时受体电位通道5(TRPC5)对间歇性低氧致心肌焦亡的影响。方法TRPC5^(-/-)大鼠及SD大鼠各12只,两种大鼠分别随机分为慢性间歇性低氧组(CIH组)和常氧组(Control组),即WT-Control组、WT-CIH组、TRPC5^(-/-)-Control组、TRPC5^(-/-)-CIH组,每组6只。通过Masson染色观察大鼠心肌纤维化情况,ELISA检测血清炎症因子水平,Western blot检测TRPC5及焦亡相关蛋白相对表达水平。结果Masson染色显示,TRPC5^(-/-)-CIH组胶原容积分数高于TRPC5^(-/-)-Control组,低于WT-CIH组。ELISA结果显示,TRPC5^(-/-)-CIH组血清IL-1、IL-6、TGF-β水平高于TRPC5^(-/-)-Control组,低于WT-CIH组。Western Blot结果显示,TRPC5^(-/-)-CIH组焦亡相关蛋白Caspase-1、NLRP3、GSDMD、GSDMD-N相对表达量高于TRPC5^(-/-)-Control组、低于WT-CIH组。结论TRPC5缺乏减轻间歇性低氧导致的心肌焦亡,并改善心肌纤维化。 展开更多
关键词 瞬时受体电位通道5 炎症因子 焦亡 间歇性低氧 OSAHS
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瞬时受体电位通道5对间歇性低氧诱导的心肌损伤的影响
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作者 邱璇 沙热扎提·依沙江 +5 位作者 陈玉岚 王蒙蒙 古丽娜孜·吐拉洪 祖柏旦·阿布汉 阿丽亚·阿不力孜 王星晨 《海南医学院学报》 CAS 北大核心 2024年第23期1761-1768,共8页
目的:本研究旨在探讨瞬时受体电位通道5(TRPC5)对间歇性低氧环境下大鼠心肌损伤的作用及其潜在机制。方法:12只TRPC5^(-/-)大鼠和12只SD大鼠,两种大鼠分别随机分为慢性间歇性低氧组(CIH组)和常氧对照组(Control组)。通过心脏彩超观察大... 目的:本研究旨在探讨瞬时受体电位通道5(TRPC5)对间歇性低氧环境下大鼠心肌损伤的作用及其潜在机制。方法:12只TRPC5^(-/-)大鼠和12只SD大鼠,两种大鼠分别随机分为慢性间歇性低氧组(CIH组)和常氧对照组(Control组)。通过心脏彩超观察大鼠心脏结构和功能变化,用HE染色法观察大鼠心肌组织病理变化,用Masson染色法检测大鼠心肌胶原容分数,用TUNEL染色观察大鼠心肌细胞的凋亡情况,流式细胞仪检测心肌组织ROS和Ca2+浓度,Western blotting检测大鼠心肌组织中TRPC5、Bcl-2、Bax、Caspase-3、CaN、NFAT2、p-NFAT2、NFAT3、p-NFAT3、NFAT4、p-NFAT4蛋白表达。结果:心脏彩超检测结果显示,TRPC5^(-/-)-CIH组左室射血分数及短轴缩短率高于CIH组、低于TRPC5^(-/-)-Control组,左室容积、左室内径低于CIH组、高于TRPC5^(-/-)-Control组(P<0.05)。HE染色显示,TRPC5^(-/-)-CIH组大鼠心肌细胞排列紊乱轻于CIH组。Masson染色显示,TRPC5^(-/-)-CIH组胶原容积分数高于TRPC5^(-/-)-Control组,低于CIH组(P<0.05)。TUNEL染色显示,TRPC5^(-/-)-CIH组大鼠心肌细胞凋亡率高于TRPC5^(-/-)-Control组、低于CIH组(P<0.05)。流式检测结果显示,TRPC5^(-/-)-CIH组心肌组织内ROS及Ca2+浓高于组TRPC5^(-/-)-Control、低于CIH组(P<0.05)。Western Blotting结果显示,TRPC5^(-/-)-CIH组Caspase-3、Bax、CaN相对表达量高于TRPC5^(-/-)-Control组、低于CIH组,Bcl-2、p-NFAT2、p-NFAT3、p-NFAT4相对表达量低于TRPC5^(-/-)-Control组、高于CIH组(P<0.05)。结论:TRPC5基因敲除可减轻间歇性低氧导致的心肌损伤,抑制氧化应激和钙超载,作用机制可能与CaN/NFAT通路相关。 展开更多
关键词 TRPC5 心肌细胞凋亡 心肌损伤 间歇性低氧 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征
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四磨汤通过调节TGR5/TRPA1信号通路对慢传输型便秘大鼠肠道动力的影响
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作者 刘萌 徐青霞 +3 位作者 朱阳阳 唐钰雯 苏漫 唐学贵 《重庆医科大学学报》 CSCD 北大核心 2024年第12期1566-1571,共6页
目的:四磨汤通过调节胆汁酸G蛋白偶联受体5(G-protein coupled-receptor kinase5,TGR5)/瞬时受体电位锚蛋白1(transient receptor potential ankyrin-1,TRPA1)信号通路对慢传输型便秘(slow transit constipation,STC)大鼠肠道动力的影... 目的:四磨汤通过调节胆汁酸G蛋白偶联受体5(G-protein coupled-receptor kinase5,TGR5)/瞬时受体电位锚蛋白1(transient receptor potential ankyrin-1,TRPA1)信号通路对慢传输型便秘(slow transit constipation,STC)大鼠肠道动力的影响。方法:取SD大鼠采用复方地芬诺酯混悬液灌胃法制备STC模型,随机分为模型组、四磨汤低剂量(1.8 g/kg)组、四磨汤高剂量(3.6 g/kg)组、四磨汤高剂量(3.6 g/kg)+SBI-115(TGR5抑制剂,55.4 mg/kg)组,每组10只,另取10只SD大鼠灌胃等剂量生理盐水设为对照组,采用四磨汤与SBI-115分组处理后测量各组大鼠首粒黑便排出时间、6 h内排便粒数及排便重量、小肠炭末推进率、结肠平滑肌收缩力;以苏木精-伊红(hematoxylin eosin,HE)染色检测各组大鼠结肠病理形态;以免疫组织化学染色检测各组大鼠结肠组织受体5-羟色胺受体3(5-hydroxytryptamine receptor 3,5-HT3R)表达;以酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒测量各组大鼠结肠组织5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)与炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β水平;以免疫印迹法检测各组大鼠结肠组织TGR5/TRPA1通路蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组大鼠结肠组织发生明显病理损伤,首粒黑便排出时间、结肠组织IL-6及IL-1β水平明显升高(P<0.05),6 h内排便粒数、排便重量、小肠炭末推进率、结肠平滑肌收缩力、结肠组织5-HT3R阳性表达、5-HT水平及TGR5、TRPA1蛋白表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,四磨汤低剂量组、四磨汤高剂量组大鼠结肠组织病理损伤均减轻,首粒黑便排出时间、结肠组织IL-6及IL-1β水平均降低(P<0.05),6 h内排便粒数、排便重量、小肠炭末推进率、结肠平滑肌收缩力、结肠组织5-HT3R阳性表达、5-HT水平及TGR5、TRPA1蛋白表达均升高(P<0.05),且高剂量四磨汤作用更强;SBI-115可减弱四磨汤对STC大鼠各指标的作用。结论:四磨汤可通过促进TGR5/TRPA1信号活化而抑制STC大鼠结肠炎症,升高大鼠结肠组织5-HT水平及其受体5-HT3R表达,减轻大鼠结肠组织病理损伤,进而增强大鼠结肠平滑肌收缩力及肠道动力,减轻其便秘症状。 展开更多
关键词 四磨汤 TGR5/TRPA1 慢传输型便秘 肠道动力
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直肠内脱垂患者直肠顺应性变化与肠黏膜中TRPV1、5-HT表达的关系 被引量:11
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作者 张鑫 田跃 +5 位作者 童卫东 李凡 王李 赵松 叶景旺 刘宝华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第21期2282-2285,共4页
目的探讨直肠内脱垂(internal rectal prolapse,IRP)患者直肠顺应性改变与TRPV1、5-HT在直肠黏膜层表达的关系。方法选择临床诊断IRP的患者20例及对照组20例先进行肛管直肠测压,然后行结肠镜检查,在齿状线上方4 cm处下段直肠取黏膜活检,... 目的探讨直肠内脱垂(internal rectal prolapse,IRP)患者直肠顺应性改变与TRPV1、5-HT在直肠黏膜层表达的关系。方法选择临床诊断IRP的患者20例及对照组20例先进行肛管直肠测压,然后行结肠镜检查,在齿状线上方4 cm处下段直肠取黏膜活检,行TRPV1和5-HT免疫组化染色,采用图像分析法分析免疫反应阳性情况。结果与对照组比较,IRP组初始感觉容积明显增高(Z=-3.710,P<0.01),最大感觉耐受容积明显降低(Z=-5.181,P<0.01),直肠顺应性明显降低;对照组黏膜层仅有少量TRPV1表达,IRP组直肠黏膜腺体可见大量TRPV1阳性染色,与对照组相比,IRP组直肠黏膜层TRPV1的表达显著增强(Z=-5.085,P<0.01);对照组黏膜层5-HT免疫阳性染色很少,而IRP组黏膜层腺体细胞内5-HT表达量显著升高(Z=-4.734,P<0.01)。结论 IRP患者直肠顺应性明显低于对照组,与直肠黏膜层TRPV1和5-HT免疫反应阳性显著增强导致直肠高敏感有关,可能是IRP患者肛门坠胀、便意频繁等排便功能障碍的机制之一。 展开更多
关键词 肛管直肠测压 TRPV1 5-HT 直肠内脱垂
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电针对糖尿病神经痛大鼠背根神经节TRPV4表达的影响
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作者 江民健 池恒愉 +8 位作者 康玉蓉 蒋永亮 郑崯沐 李斯苡 周姝婷 刘伯宇 邵晓梅 方剑乔 何晓芬 《中国实验动物学报》 北大核心 2025年第2期241-248,共8页
目的 观察电针(electroacupuncture, EA)对糖尿病神经痛(diabetic neuropathic pain, DNP)大鼠体质量、空腹血糖、热痛阈、背根神经节(dorsal root ganglion, DRG)瞬时受体电位香草蛋白4(transient receptor potential vanilloid 4,TRP... 目的 观察电针(electroacupuncture, EA)对糖尿病神经痛(diabetic neuropathic pain, DNP)大鼠体质量、空腹血糖、热痛阈、背根神经节(dorsal root ganglion, DRG)瞬时受体电位香草蛋白4(transient receptor potential vanilloid 4,TRPV4)的影响。方法 采用向腹腔注入链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)构建DNP大鼠模型。第15~21天,在大鼠双侧足三里(ST36)和昆仑(BL60)穴予以每日一次30 min的2 Hz EA治疗。检测各组大鼠体质量、空腹血糖和热痛阈。采用免疫荧光检测大鼠L4~L6 DRG中TRPV4和神经元(neuron, NeuN)共标的表达。检测TRPV4激动剂GSK1016790A对EA干预DNP大鼠体质量、空腹血糖、热痛阈的影响。结果 第7天后,与正常组相比,模型组体质量明显下降(P<0.01),空腹血糖明显上升(P<0.01);第21天,与模型组相比,模型+电针组热痛阈明显提高(P<0.01);大鼠L4~L6 DRG上的TRPV4和NeuN共标免疫荧光结果显示:模型组的阳性细胞表达较正常组均显著升高(P<0.01),模型+电针组大鼠L4~L6 DRG TRPV4和NeuN共标的阳性细胞表达较模型组均显著下降(P<0.01);TRPV4激动剂GSK1016790A可翻转EA对DNP大鼠热痛阈下调作用(P<0.01)。结论 EA能减轻链脲佐菌素诱导的DNP,其作用机制可能与其抑制DRG中TRPV4的表达有关。 展开更多
关键词 糖尿病神经痛 电针 背根神经节 瞬时受体电位香草蛋白4
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电针对背根神经节持续受压模型大鼠机械痛阈及TRPV1、SP、CGRP表达的影响
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作者 魏周园 郑雨 +9 位作者 江民健 池恒愉 康玉蓉 何晓芬 李晓宇 周姝婷 杜俊英 邵晓梅 方剑乔 蒋永亮 《中国疼痛医学杂志》 北大核心 2025年第4期250-258,共9页
目的:观察电针对背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)持续受压(chronic compression of dorsal root ganglion,CCD)模型大鼠机械刺激缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)及DRG瞬时受体电位香草酸亚型1(transient recep... 目的:观察电针对背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)持续受压(chronic compression of dorsal root ganglion,CCD)模型大鼠机械刺激缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)及DRG瞬时受体电位香草酸亚型1(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)、P物质(substance P,SP)、降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)表达的影响。方法:41只雄性SD大鼠使用简单随机抽样方法分为假手术组(11只)、模型组(15只)、电针组(15只),电针组取大鼠患侧“足三里”“昆仑”穴进行治疗,每日1次,共7天。检测各组大鼠不同时间点患侧MWT,采用免疫荧光法检测大鼠患侧DRG中TRPV1、CGRP、SP阳性细胞表达情况,免疫印迹法检测大鼠患侧DRG中TRPV1、CGRP、SP蛋白表达变化。结果:造模后第1天电针治疗前,与假手术组相比,模型组和电针组大鼠MWT显著降低(P<0.01);电针治疗后第1、3、5、7天,电针组大鼠患侧MWT显著高于同期模型组(P<0.01)。与假手术组相比,模型组大鼠患侧DRG中TRPV1、SP、CGRP阳性细胞数表达均升高(P<0.05);TRPV1和SP、TRPV1和CGRP阳性细胞共表达数升高(P<0.05)。与模型组相比,电针组大鼠患侧DRG中TRPV1、SP、CGRP表达均降低(P<0.05);TRPV1和SP、TRPV1和CGRP阳性细胞共表达数降低(P<0.05)。与假手术组相比,模型组大鼠患侧DRG中TRPV1、CGRP、SP蛋白表达升高(P<0.01);与模型组相比,经电针干预后,电针组大鼠患侧DRG中TRPV1、CGRP、SP蛋白表达降低(P<0.01)。结论:电针治疗可促使MWT升高,有效抑制CCD大鼠痛觉敏化,其镇痛机制可能与下调DRG中TRPV1、SP和CGRP的表达有关。 展开更多
关键词 电针 针刺镇痛 瞬时受体电位香草酸亚型1 P物质 降钙素基因相关肽
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氟尿嘧啶联合顺铂对骨肉瘤MG-63细胞的抑制作用及其对TRPV5和TRPV6蛋白表达的影响 被引量:3
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作者 那键 戴维享 +5 位作者 马超 张晓东 邵长青 刘勇 王秀力 刘颖 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1201-1206,I0014,共7页
目的:研究氟尿嘧啶联合顺铂对骨肉瘤细胞株MG-63的生长抑制作用,探讨其对瞬时性受体电位通道5(TRPV5)和瞬时性受体电位通道6(TRPV6)蛋白表达的影响。方法:常规培养MG-63细胞,以5×104 mL-1的细胞密度种植细胞,实验分为对照组、氟尿... 目的:研究氟尿嘧啶联合顺铂对骨肉瘤细胞株MG-63的生长抑制作用,探讨其对瞬时性受体电位通道5(TRPV5)和瞬时性受体电位通道6(TRPV6)蛋白表达的影响。方法:常规培养MG-63细胞,以5×104 mL-1的细胞密度种植细胞,实验分为对照组、氟尿嘧啶组、顺铂组及氟尿嘧啶联合顺铂组4组。CCK-8法检测不同时间MG-63细胞的生长抑制情况;分别于24、48和72h采用细胞凋亡-Hoechst染色试剂盒检测MG-63细胞加入不同药物后的凋亡情况;免疫细胞化学染色法检测MG-63细胞在加药前后TRPV5和TRPV6蛋白的表达情况。结果:氟尿嘧啶和顺铂对MG-63细胞的抑制作用均显著,且随着药物浓度的增加和作用时间的延长,细胞中黑色颗粒增多,胞体回缩,细胞老化或死亡。与两药单独或是联用作用于MG-63细胞24h比较,随着时间的延长,48h和72h两者对细胞的抑制作用明显增强(P<0.05)。与对照组比较,氟尿嘧啶组和顺铂组24、48和72h后凋亡率逐渐增加(P<0.01),随着药物作用时间的延长,细胞凋亡率亦呈升高的趋势。当加入氟尿嘧啶和顺铂72h后,MG-63细胞表达TRPV5和TRPV6含量较加药前明显降低(P<0.05)。结论:氟尿嘧啶与顺铂联用可以提高MG-63细胞增殖抑制及凋亡作用,同时对MG-63细胞TRPV5和TRPV6表达水平具有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 氟尿嘧啶 顺铂 骨肉瘤 骨肉瘤细胞株MG-63 瞬时性受体电位通道
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敲除热敏瞬时受体电位锚蛋白1(BmTRPA1)基因后家蚕蛹脑-咽下神经节复合体的转录组学分析
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作者 白新宇 冯嘉伟 +3 位作者 张明蔚 包玫 邢东旭 杨婉莹 《昆虫学报》 北大核心 2025年第5期585-595,共11页
【目的】二化性家蚕Bombyx mori卵在25℃下催青时,热敏瞬时受体电位锚蛋白1(TRPA1)被激活,随后可能激活一条与滞育激素(diapause hormone, DH)释放相关的未知信号通路。本研究旨在研究家蚕BmTRPA1调控DH分泌的分子机制,以及BmTRPA1与GAB... 【目的】二化性家蚕Bombyx mori卵在25℃下催青时,热敏瞬时受体电位锚蛋白1(TRPA1)被激活,随后可能激活一条与滞育激素(diapause hormone, DH)释放相关的未知信号通路。本研究旨在研究家蚕BmTRPA1调控DH分泌的分子机制,以及BmTRPA1与GABAergic信号通路的关系。【方法】利用CRISPR/Cas9敲除25℃下催青的家蚕BmTRPA1基因,通过转录组测序筛选野生型(WT)和BmTRPA1^(-/-)突变型家蚕在蛹期第3天脑-咽下神经节(brain-suboesophagealganglion, Br-SG)复合体中的差异表达基因;对差异表达基因和特异表达基因分别进行GO分类和KEGG功能富集分析;qRT-PCR检测6个差异表达基因、调控GABAergic信号通路10个关键基因和神经肽基因K5的相对表达量。【结果】WT的Br-SG复合体中有13 039个基因表达,BmTRPA1^(-/-)Br-SG复合体中有12 937个基因表达,其中12 484个基因在WT和BmTRPA1^(-/-)Br-SG复合体中共表达,有555个基因在WT中Br-SG复合体特异表达,453个基因在BmTRPA1^(-/-)Br-SG复合体中特异表达;相比于WT Br-SG复合体,BmTRPA1^(-/-)Br-SG复合体有32个基因表达上调,13个基因表达下调。这些差异表达基因主要富集在正反馈调节过程、代谢、应激和细胞调控等关键生命活动过程,其中富集于蛋白质转运过程与内分泌的差异表达蛋白GAT属于质膜GABA转运蛋白,是调控家蚕DH释放的关键蛋白。qRT-PCR检测结果显示,GAT和K5在BmTRPA1^(-/-)Br-SG复合体中的相对表达量与WT Br-SG复合体中的相比显著下调。【结论】本研究在组学水平上证明,敲除TRPA1将降低GAT的表达,从而调控GABAergic信号通路,减少DH释放。研究结果为后续探索家蚕响应环境温度诱导滞育发生的分子调控机制提供了靶标蛋白和数据参考。 展开更多
关键词 家蚕 滞育 瞬时受体电位锚蛋白 转录组 脑-咽下神经节复合体
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瞬时受体电位M2型通道抑制剂的开发现状
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作者 陈世尧 骆燕萍 +2 位作者 余沛霖 岳晓敏 杨巍 《浙江大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第1期120-130,I0035,I0036,共13页
开发高效且特异的瞬时受体电位M2型(TRPM2)通道抑制剂,不仅有助于深化对相关疾病病理机制的理解,还能为临床治疗提供新的有效靶点和候选药物。根据研发方法不同,TRPM2通道抑制剂的开发主要分为四类,分别有以下特点:同源离子通道调节剂... 开发高效且特异的瞬时受体电位M2型(TRPM2)通道抑制剂,不仅有助于深化对相关疾病病理机制的理解,还能为临床治疗提供新的有效靶点和候选药物。根据研发方法不同,TRPM2通道抑制剂的开发主要分为四类,分别有以下特点:同源离子通道调节剂的再利用及结构改造能够发现多种抑制效果较强的TRPM2通道抑制剂;基于通道开放机制开发所得的TRPM2通道抑制剂通常表现出良好的选择特异性;高通量筛选开发所得的抑制剂往往具备新颖的化学结构,丰富了TRPM2通道抑制剂的设计思路;开发源于天然抗氧化剂的抑制剂则具备较高安全性。近年来,计算机辅助药物设计的应用大大加速了TRPM2通道抑制剂的设计和开发,已经研发了ZA18、A1和D9等多种优选化合物,后续有望发现更多高效且选择特异性强的TRPM2通道抑制剂骨架。本文综述了TRPM2通道抑制剂的开发现状,以期为TRPM2通道抑制剂的进一步转化应用提供参考。 展开更多
关键词 瞬时受体电位M2型 抑制剂 氧化应激 结构改造 高通量筛选 天然抗氧化剂 计算机辅助药物设计 综述
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NOX4/TRPC6在糖尿病肾病足细胞损伤中的作用
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作者 岳汝驰 李惠敏 +1 位作者 胡斌 宋志霞 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第2期250-260,共11页
目的:探讨NADPH氧化酶4(NADPH oxidase 4,NOX4)/瞬时受体电位阳离子通道C亚家族成员6(transient receptor potential channel subfamily C member 6,TRPC6)在糖尿病肾病足细胞损伤中的作用及其机制。方法:(1)将雄性Sprague-Dawley大鼠... 目的:探讨NADPH氧化酶4(NADPH oxidase 4,NOX4)/瞬时受体电位阳离子通道C亚家族成员6(transient receptor potential channel subfamily C member 6,TRPC6)在糖尿病肾病足细胞损伤中的作用及其机制。方法:(1)将雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、糖尿病肾病组、NOX4抑制剂(GKT137831)组、糖尿病肾病+GKTl37831组,每组8~10只。通过一次性腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)(70 mg/kg)构建1型糖尿病模型,模型构建成功后腹腔注射GKT137831(5 mg/kg)。定期监测血糖和24 h尿白蛋白定量,并收集血液及肾脏组织。(2)使用小鼠肾小球足细胞为体外实验研究对象,细胞分为正常对照组、高糖组、GKTl37831组及高糖+GKTl37831组。体外高糖培养足细胞2周。使用NOX4抑制剂及使用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染足细胞。免疫印迹、免疫组化及实时荧光反转录PCR(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-qPCR)等技术检测NOX4和TRPC6表达水平。(3)使用荧光共聚焦显微镜观察高糖条件下足细胞线粒体形态变化,通过免疫印迹法检测足细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1α,PGC1α)、线粒体转录因子A(mitochondrial transcription factor A,TFAM)、细胞色素C氧化酶亚单位I(cytochrome C oxidase subunit I,COX I)和COX IV蛋白表达水平。结果:(1)与正常对照组相比,糖尿病肾病大鼠肾小球显著肥大、基底膜增厚,系膜区增宽,尿白蛋白定量显著增加,免疫印迹及免疫组化结果显示肾组织NOX4蛋白表达水平升高,肾小球足细胞蛋白(nephrin)表达减少,间质细胞标志物如结蛋白(desmin)表达增加,TRPC6表达水平升高(P<0.05);使用GKT137831可降低肾组织desmin表达,保留肾小球nephrin,减少尿白蛋白定量(P<0.05)。(2)在体外足细胞实验中,高糖背景下,足细胞中NOX4和TRPC6表达上调(P<0.05);免疫荧光及免疫印迹检测结果显示GKT137831可减轻足细胞TRPC6和desmin表达,部分恢复nephrin表达(P<0.05);免疫印迹结果显示使用TRPC6 siRNA转染足细胞,可进一步促进GKT137831对足细胞的保护作用(P<0.05)。(3)荧光共聚焦显微镜显示高糖背景下足细胞线粒体形态受损,使用GKT137831及转染TRPC6 siRNA后,线粒体损伤得到部分恢复。免疫印迹结果显示高糖背景下足细胞PGC1α、TFAM、COX I和COX IV蛋白水平降低,使用GKT137831及转染TRPC6 siRNA后PGC1α、TFAM、COX I和COX IV表达水平升高(P<0.05)。结论:在糖尿病肾病的病理过程中,肾脏中NOX4表达增加,在一定程度上通过TRPC6通道介导足细胞的损伤,抑制NOX/TRPC6可改善足细胞线粒体功能障碍。这一发现为糖尿病肾病的临床诊疗提供了新的视角和策略。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 足细胞损伤 NADPH氧化酶4 瞬时受体电位阳离子通道C亚家族成员6
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脂质体转染TRPM7 siRNA对Aβ_(25-35)诱导SH-SY5Y细胞分泌炎症因子的影响 被引量:1
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作者 林珍 周德喜 +5 位作者 解丹 孔令娜 房城伯 詹磊 黄成 李俊 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期796-801,共6页
目的利用小干扰RNA(siRNA)抑制TRPM7基因的表达,研究TRPM7对Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞分泌炎症因子的影响。方法通过Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞构建阿尔采末病体外模型,MTT法测定Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞最佳作用浓度与时间点,将人工合成抑... 目的利用小干扰RNA(siRNA)抑制TRPM7基因的表达,研究TRPM7对Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞分泌炎症因子的影响。方法通过Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞构建阿尔采末病体外模型,MTT法测定Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞最佳作用浓度与时间点,将人工合成抑制TRPM7基因的siR-NA片段,通过脂质体LipofectamineTM2000转染到SH-SY5Y细胞内;RT-PCR检测TRPM7、NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA表达,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒的测定细胞上清乳酸脱氢酶(LDH)的含量;ELISA测定细胞上清中TNF-α、IL-6的含量。结果转染siRNA后SH-SY5Y细胞的TRPM7、NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA表达较模型组明显下降,细胞上清中TNF-α、IL-6、LDH的含量表达较模型组明显下降。结论应用siR-NA干扰靶向抑制TRPM7基因,可以下调TNF-α、IL-6等炎症因子的释放,这一过程可能是通过抑制NF-κB信号转导通路的激活,从而减少炎症因子的释放,进而减轻Aβ对SH-SY5Y细胞的毒性作用。 展开更多
关键词 瞬时受体电位通道7 SIRNA 阿尔采末病 炎症因 AΒ25-35 SH—SY5Y NF-κB
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TRPV1蛋白对自身免疫性脑脊髓炎进展及Th1和Th17细胞分化的影响
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作者 王布飞 陈聪 李建红 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第4期323-327,332,共6页
目的探讨瞬时感受器电位香草酸受体1(TRPV1)蛋白对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)进展的影响及其机制。方法将36只C57BL/6野生型小鼠随机分为对照组、模型组、模型+TRPV1抑制剂组,每组12只。EAE模型构建采用皮下注射髓磷脂少突胶质细胞... 目的探讨瞬时感受器电位香草酸受体1(TRPV1)蛋白对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)进展的影响及其机制。方法将36只C57BL/6野生型小鼠随机分为对照组、模型组、模型+TRPV1抑制剂组,每组12只。EAE模型构建采用皮下注射髓磷脂少突胶质细胞糖蛋白35-55混合结核杆菌乳剂,联合腹腔注射百日咳毒素。模型+TRPV1抑制剂组小鼠每日连续腹腔注射TRPV1抑制剂辣椒平溶液(30 mg/kg)。连续35 d观察并评估小鼠EAE症状。第35天处死小鼠,取脊髓组织,采用劳克坚牢蓝染色评估脊髓髓鞘脱失,采用流式细胞术分析脊髓单核细胞中CD4^(+)T细胞分化情况,采用Western blotting检测TRPV1蛋白和炎症反应信号蛋白表达。结果与对照组相比,模型组小鼠神经功能评分增加,脊髓组织出现明显的髓鞘脱失。流式细胞术结果显示,模型组小鼠CD4^(+)T细胞向Th1和Th17细胞分化比例增加。与模型组相比,模型+TRPV1抑制剂组小鼠神经功能评分降低,脊髓中炎性细胞因子浸润与髓鞘脱失明显减少,CD4^(+)T细胞向Th1和Th17细胞分化比例减少。TRPV1抑制剂明显抑制了TRPV1蛋白表达并降低了p-NF-κB、caspase-1和NLRP3蛋白表达。结论TRPV1蛋白对EAE进展起重要作用,抑制TRPV1蛋白表达能够抑制Th1和Th17细胞分化,减少脊髓组织髓鞘脱失。 展开更多
关键词 瞬时感受器电位香草酸受体1 自身免疫性脑脊髓炎 CD4^(+)T细胞 炎症
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TRPV1通道在小鼠组织纤维化中的作用研究进展
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作者 师雨琛 李小强 《中国实验动物学报》 北大核心 2025年第2期259-266,共8页
纤维化的主要病理特征为纤维结缔组织增多、实质细胞减少,如持续进展可致器官结构破坏和功能减退。近年来研究发现,非选择性阳离子通道-瞬时感受器电位香草酸亚型1(transient receptor potential vanilloid subfamily 1,TRPV1)通道与纤... 纤维化的主要病理特征为纤维结缔组织增多、实质细胞减少,如持续进展可致器官结构破坏和功能减退。近年来研究发现,非选择性阳离子通道-瞬时感受器电位香草酸亚型1(transient receptor potential vanilloid subfamily 1,TRPV1)通道与纤维化密切相关。该通道被激活后可使胞内阳离子浓度升高,引起相应的生理和病理变化,特别是在调控组织纤维化过程中发挥关键作用。为了深入研究TRPV1通道参与组织纤维化的发生机制,动物模型已成为了该类研究的重要工具。本文将综述TRPV1通道在小鼠心脏、肾、胰腺等脏器纤维化中的作用,对TRPV1通道参与调控纤维化的相关信号通路进行总结,以期为纤维化发病机制研究和药物研发提供新的思路。 展开更多
关键词 纤维化 瞬时感受器电位香草酸亚型1通道 小鼠模型 信号通路 药物靶点
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新冠病毒感染相关炎性细胞因子介导TRPV4调控子宫内膜容受性的作用机制
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作者 蔡锡霆 程茜 +1 位作者 李碧颖 陈莉 《医学研究与战创伤救治》 北大核心 2025年第5期455-462,共8页
目的探索新型冠状病毒感染(COVID-19)诱导炎性细胞因子升高调控瞬时感受器电位香草酸受体4(TRPV4)影响子宫内膜容受性的可能机制。方法采集30 d内感染COVID-19的患者及未感染的健康女性血清样本,ELISA检测炎性细胞因子脂多糖、白细胞介... 目的探索新型冠状病毒感染(COVID-19)诱导炎性细胞因子升高调控瞬时感受器电位香草酸受体4(TRPV4)影响子宫内膜容受性的可能机制。方法采集30 d内感染COVID-19的患者及未感染的健康女性血清样本,ELISA检测炎性细胞因子脂多糖、白细胞介素-1β(IL-1β)、干扰素γ(IFN-γ)的水平,并收集分泌中期子宫内膜标本及ICR小鼠合笼见栓后不同时间的子宫样本,免疫组织化学染色确定其中TRPV4的定位与表达变化。Ishikawa细胞分为空白对照组、雌二醇(E2)组、醋酸甲羟孕酮(MPA)组及E2+MPA组,Western blot检测TRPV4表达变化。在细胞中敲减或过表达TRPV4,并统计BeWo细胞黏附率,RT-qPCR验证子宫内膜容受性相关标志物变化。又将Ishikawa细胞分为炎症因子对照组、脂多糖组、干扰素组及白细胞介素组,给予有/无雌孕激素刺激,Western blot与RT-qPCR检测TRPV4的蛋白质、mRNA表达水平。根据细胞的不同处理将其分为空白质粒组、空白质粒激素组、过表达组、过表达激素组。在转染siRNA的实验中,根据不同处理分为转染对照组及siRNA组。结果与健康女性比较,IL-1β、脂多糖和IFN-γ在COVID-19感染30 d内明显上升(P<0.05)。人子宫内膜样本中,TRPV4主要位于腺上皮,且COVID-19组表达较对照组上升(P<0.05)。在见栓后1.5~3.5 d孕鼠中,TRPV4表达随时间降低(P<0.05)。与空白对照组比较,MPA组和E2+MPA组中TRPV4的mRNA表达显著降低(P<0.01);而仅MPA组中TRPV4的蛋白表达显著降低(P<0.01)。与过表达组比较,过表达激素组HOXA10的mRNA表达显著减少(P<0.05);而siRNA组较转染对照组HOXA10的mRNA表达显著提高(P<0.01)。过表达激素组较过表达组BeWo细胞的黏附率显著降低(P<0.01)。Western blot实验提示,与炎症因子对照组比较,脂多糖组、白细胞介素组TRPV4的蛋白表达量在增高(P<0.05);与雌孕激素组比较,雌孕+脂多糖组、雌孕+白细胞介素组TRPV4的蛋白表达量亦增高(P<0.05)。结论COVID-19感染诱导血清炎症因子IFN-γ、IL-1β释放,可能调控子宫内膜上皮组织中TRPV4升高,从而影响胚胎围着床期子宫内膜容受性的建立与胚胎种植。 展开更多
关键词 COVID-19 瞬时感受器电位香草酸受体4 胚胎种植 女性生殖健康
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格列美脲通过抑制SUR1-TRPM4通道减轻蛛网膜下腔出血大鼠脑水肿和凋亡
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作者 郝广志 董雨佳 +1 位作者 郇宇 董玉书 《神经解剖学杂志》 北大核心 2025年第1期67-72,共6页
目的:探讨格列美脲对蛛网膜下腔出血(SAH)脑水肿和细胞凋亡的影响。方法:利用颈内动脉穿刺法制备大鼠SAH模型,腹腔注射法给予格列美脲进行治疗,通过改良神经功能缺损评分(mNSS)方法进行神经功能缺损评分,通过大鼠脑组织的干湿比评估大... 目的:探讨格列美脲对蛛网膜下腔出血(SAH)脑水肿和细胞凋亡的影响。方法:利用颈内动脉穿刺法制备大鼠SAH模型,腹腔注射法给予格列美脲进行治疗,通过改良神经功能缺损评分(mNSS)方法进行神经功能缺损评分,通过大鼠脑组织的干湿比评估大鼠含水量。利用RT-qPCR检测大鼠脑组织中SUR1和TRPM4 mRNA的表达,Western blot检测脑组织中Bcl-2和Bax的表达。结果:SAH大鼠神经功能受损,脑含水量增加,同时SUR1和TRPM4 mRNA表达上调,Bcl-2/Bax比值下降。低剂量的格列美脲不影响大鼠血糖浓度,但是可以显著改善SAH大鼠神经功能,减轻脑水肿;虽然格列美脲对SUR1和TRPM4 mRNA表达没有显著影响,但能够增加Bcl-2/Bax比值。结论:格列美脲通过抑制SUR1-TRPM4通道减轻SAH模型大鼠脑水肿,并抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 磺酰脲类药物受体1(SUR1) 瞬时受体电位4(TRPM4) 脑水肿 早期脑损伤 蛛网膜下腔出血 大鼠
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瞬时受体电位香草酸亚型1激动剂辣椒素对创伤失血休克大鼠的保护作用
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作者 郭玲 彭小勇 +7 位作者 邓蒙生 朱英国 翁昌梅 程祥云 王建民 李涛 刘良明 杨光明 《中国临床药理学与治疗学》 北大核心 2025年第6期721-731,共11页
目的:研究瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)激动剂辣椒素(CAP)对创伤失血休克大鼠的保护作用,并采用网络药理学的方法进一步探讨其可能的作用机制。方法:将45只SD大鼠按照随机数字表法分为5组:正常组、休克组、乳酸林格氏液(LR)组、CAP... 目的:研究瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)激动剂辣椒素(CAP)对创伤失血休克大鼠的保护作用,并采用网络药理学的方法进一步探讨其可能的作用机制。方法:将45只SD大鼠按照随机数字表法分为5组:正常组、休克组、乳酸林格氏液(LR)组、CAP预处理(休克前单次给药)组、CAP预末给药(休克前后两次给药)组,用于检测大鼠存活情况(每组9只);随后根据存活实验结果将32只大鼠随机分为4组:正常组、休克组、LR组与CAP预末给药组,用于观测血压、血流动力学、动脉血气、血管反应性及肝肾血流量指标(每组8只)。同时采用网络药理学方法探讨CAP治疗创伤失血休克的潜在作用机制,并应用数据集对核心基因进行验证及诊断价值分析。结果:动物实验显示,休克未治疗动物在休克模型完成后数小时内陆续死亡,平均存活时间1.25(0.42,6.21)h,LR复苏可一定程度改善大鼠存活情况,CAP预处理组大鼠的存活率与生存时间较LR组有所增加,而CAP预末给药组可明显提高休克大鼠的24 h存活率和存活时间,与LR组相比有统计学差异。进一步研究显示,CAP预末给药组较LR组可显著降低创伤失血休克大鼠的血乳酸水平,明显提高血管的收缩与舒张性反应性,并增加大鼠的肝肾血流量;而CAP对血流动力学与血气指标的改善作用略高于LR组,但无统计学意义。通过网络药理学方法共获得CAP抗创伤失血休克的相关基因37个,经KEGG富集分析发现,Ca2+信号通路、Ras信号通路显著富集。数据集验证表明CXCR4、NF-kB1、GFPA和NTF3核心蛋白在正常组和休克组中表达水平均有统计学差异,且CXCR4对创伤失血性休克具有较高的诊断价值。结论:TRPV1激动剂CAP通过改善创伤失血休克大鼠的血管功能、增加器官血流量并减轻机体酸中毒状态,从而降低创伤失血休克后的死亡率,其机制可能与Ca2+信号通路、Ras信号通路相关,而CXCR4、NF-kB1、GFPA和NTF3可能在其中有着重要作用。 展开更多
关键词 创伤性失血 休克 辣椒素 瞬时受体电位香草酸亚型1 网络药理学分析
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唑来膦酸抑制破骨细胞分化中TRPV5、NFATc1的表达 被引量:8
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作者 林珏杉 董伟 +3 位作者 张鹏 李鹏 孙红 戚孟春 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1254-1258,共5页
目的研究唑来磷酸(ZOL)对破骨细胞分化中瞬时性受体电位通道(TRPV)5和活化T细胞核因子c1(NFATc1)基因表达的影响。方法小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7细胞分为A、B两组:两组均用核因子-κB受体激活因子配体(RANKL)诱导5 d,B组在最后2 d应用... 目的研究唑来磷酸(ZOL)对破骨细胞分化中瞬时性受体电位通道(TRPV)5和活化T细胞核因子c1(NFATc1)基因表达的影响。方法小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7细胞分为A、B两组:两组均用核因子-κB受体激活因子配体(RANKL)诱导5 d,B组在最后2 d应用10-6mol/L ZOL处理。检测破骨细胞生成及TRPV5、NFATc1基因表达情况。结果 B组新生多核破骨细胞数、吸收陷窝数目及面积分别为29.0±2.4、24.8±1.1、2 030.0±165.7μm2,均显著低于A组的56.5±4.5、49.3±0.9、3 946.7±367.5μm2(P<0.01)。B组TRPV5、NFATc1的荧光强度也显著低于A组(P<0.01)。B组TRPV5 mRNA及蛋白水平较A组分别降低了50.4%和37.8%(P<0.01);而NFATc1则分别下降了68.0%和48.4%(P<0.01)。结论 ZOL可显著抑制破骨细胞生成和骨吸收,并下调TRPV5、NFATc1基因表达;ZOL对破骨细胞的抑制可能与其诱发的TRPV5、NFATc1表达抑制有关。 展开更多
关键词 唑来膦酸 破骨细胞 瞬时性受体电位通道5 活化T细胞核因子c1
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14,15-EET通过TRPV4-SK_(Ca)复合物调节气管平滑肌收缩机制研究 被引量:2
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作者 张洁 沈兵 +2 位作者 桑大成 杜鹃 丁圣刚 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第5期565-568,共4页
目的探讨花生四烯酸细胞色素P450(CYP)表氧化酶代谢产物14,15-环氧化二十碳三烯酸(14,15-EET)对小鼠气管平滑肌收缩功能的影响及其机制。方法采用离体气管实验,通过运用特异性钙激活钾通道阻断剂和瞬时受体电位离子通道4(TRPV4)通道阻断... 目的探讨花生四烯酸细胞色素P450(CYP)表氧化酶代谢产物14,15-环氧化二十碳三烯酸(14,15-EET)对小鼠气管平滑肌收缩功能的影响及其机制。方法采用离体气管实验,通过运用特异性钙激活钾通道阻断剂和瞬时受体电位离子通道4(TRPV4)通道阻断剂,观察14,15-EET对卡巴胆碱引起的小鼠气管收缩的影响;采用免疫共沉淀实验检测TRPV4通道蛋白与小电导钙激活钾通道(SKCa)蛋白在小鼠气管平滑肌组织中的相互作用。结果与对照组相比,300 nmol/L 14,15-EET预处理小鼠气管后,卡巴胆碱引起的收缩显著减弱;大、中电导钙激活钾通道阻断剂Ib TX和TRAM34没有显著影响14,15-EET对卡巴胆碱引起的小鼠气管收缩的抑制效应;而SKCa阻断剂Apamin和TRPV4通道阻断剂RN-1734都分别显著阻断了14,15-EET对卡巴胆碱引起的小鼠气管收缩的抑制作用。免疫共沉淀结果显示TRPV4通道蛋白和SKCa通道蛋白可以彼此相互共沉淀。结论在小鼠气管平滑肌中,14,15-EET通过TPRV4-SKCa钙信号复合物调节气管平滑肌的收缩。 展开更多
关键词 钙激活钾通道 瞬时受体电位离子通道4 14 15- EET 气管平滑肌
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瞬时感受器电位通道vanilloid 4在机械牵张人脑微血管内皮细胞中对内皮型一氧化氮合酶的作用 被引量:2
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作者 蒲九君 王志明 +4 位作者 周辉 钟艾凌 阮伦亮 靳凯 杨刚 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期960-966,共7页
目的:筛选人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMEC)中瞬时感受器电位(transient receptor potential,TRP)通道亚型,检测该通道亚型在机械牵张刺激中对内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synt... 目的:筛选人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMEC)中瞬时感受器电位(transient receptor potential,TRP)通道亚型,检测该通道亚型在机械牵张刺激中对内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,e NOS)蛋白表达的影响及探讨相关机制。方法:荧光定量RT-PCR(q RT-PCR)、Western印迹及细胞免疫荧光筛选HBMEC上TRP通道亚型。根据筛选的TRP通道亚型将细胞分组,应用多功能小型生物撞击机给予机械牵张刺激;流式细胞仪检测细胞牵张前后胞内Ca2+荧光强度变化;Western印迹检测e NOS蛋白表达情况。结果:q RT-PCR结果表明:TRPV4及TRPC1的m RNA相对表达量较多;细胞免疫荧光及Western印迹显示TRPV4通道蛋白表达;流式细胞仪检测结果显示,特异性TRPV4通道抑制组较单纯牵张组Ca2+相对浓度低(P<0.001),较未牵张组(P=0.072)、非特异性TRP通道抑制组(P=0.308)无明显差异。Western印迹检测结果显示:TRPV4通道抑制组和内皮型一氧化氮合酶抑制组e NOS蛋白表达水平较单纯牵张组明显降低(P<0.05),较未牵张组无明显差异(P>0.05)。结论:TRPV4在HBMEC上有表达,机械牵张将其激活后,可以引起e NOS蛋白表达增多,其机制可能与胞外Ca2+的内流有关。 展开更多
关键词 TRPV4 机械牵张刺激 内皮型一氧化氮合酶
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