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基因工程中的液相色谱 被引量:17
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作者 刘彤 耿信笃 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期30-34,共5页
对液相色谱用于基因工程生产蛋白质分子构象、变性蛋白的复性、蛋白折叠中间体等方面的研究进展,以及液相色谱在基因工程样品的质量检验、制备方面的新进展分别加以评述。全文引用了42篇文献。
关键词 基因工程 液相色谱 质量检验 蛋白药物 分离纯化
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硫酸氢氯吡格雷异构体的手性拆分及其限量检查 被引量:3
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作者 丁锐 纪宏 +5 位作者 吕雯 周长明 李志刚 张首国 彭涛 王林 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期241-246,共6页
采用卵类黏蛋白手性固定相键合硅胶(Ultron ES-OVM)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),建立手性固定相HPLC直接拆分硫酸氢氯吡格雷对映异构体和位置异构体的方法,并通过对溶质计量置换保留模型、热力学参数、熵焓驱动过程及影响色谱行为... 采用卵类黏蛋白手性固定相键合硅胶(Ultron ES-OVM)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),建立手性固定相HPLC直接拆分硫酸氢氯吡格雷对映异构体和位置异构体的方法,并通过对溶质计量置换保留模型、热力学参数、熵焓驱动过程及影响色谱行为的因素等内容进行研究,对手性拆分过程进行探讨。经优化,确定色谱条件为:流动相0.02 mol/L磷酸二氢钾-乙腈(80∶20),流速0.8 mL/min,检测波长220 nm,柱温30℃。硫酸氢氯吡格雷的对映异构体和位置异构体之间的分离度均大于1.6;S-硫酸氢氯吡格雷、R-硫酸氢氯吡格雷及其各自位置异构体的定量限分别为0.115,0.102,0.118,0.106 mg/L,在0.33~20.68,0.63~40.20,0.32~20.20,0.31~19.28 mg/L浓度范围内线性关系良好;按外标法计算,加样回收率在98.2%~101.7%之间;RSD小于2.0%。经方法学验证,该方法可用于硫酸氢氯吡格雷异构体杂质含量测定。 展开更多
关键词 硫酸氢氯吡格雷 对映异构体 位置异构体 手性拆分 溶质计量置换保留模型 热力学参数
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反相液相色谱中同系物体系实验点与预测方程参数间的匹配研究 被引量:4
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作者 王彦 张静 耿信笃 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期326-331,共6页
以波相色谱中溶质计量置换统一保留模型(SDM-R)的二参数、三参数和四参数方程为基础,研究了在预测同系物保留值时实验点与预测方程参数间的匹配关系。用两个实验点,分别以二、三和四参数方程对反相色谱中同系物保留值进行预测,发... 以波相色谱中溶质计量置换统一保留模型(SDM-R)的二参数、三参数和四参数方程为基础,研究了在预测同系物保留值时实验点与预测方程参数间的匹配关系。用两个实验点,分别以二、三和四参数方程对反相色谱中同系物保留值进行预测,发现预测值与实验值基本相符,但以二参数方程预测结果为最佳。又与其它保留方程的预测结果进行了比较,证实了上述结论。当实验点数增加到4~5个时,多参数方程预测同系物的准确度增加,且明显高于二参数方程。同时还讨论了方程中各参数与同系物碳数间的线性关系,发现二参数方程中的参数遵循同系物变化规律。然而无论实验点取多少,多参数方程均不服从这一规律。 展开更多
关键词 反相液相色谱 LC 预测 保留值 参数 同系物
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用于蛋白同时复性及纯化的制备型装置中流动相用量的优化研究 被引量:3
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作者 张养军 李翔 耿信笃 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期423-426,共4页
在生物大分子的高效液相色谱分离中 ,由计量置换保留模型可得出生物大分子在色谱柱上的保留行为取决于流动相中置换剂的浓度的结论。据此提出了用于蛋白同时复性及纯化的制备型装置 (USRPP)中最小流动相用量的估算公式 ,并进一步得出在... 在生物大分子的高效液相色谱分离中 ,由计量置换保留模型可得出生物大分子在色谱柱上的保留行为取决于流动相中置换剂的浓度的结论。据此提出了用于蛋白同时复性及纯化的制备型装置 (USRPP)中最小流动相用量的估算公式 ,并进一步得出在保持最小流动相用量不变的条件下 ,改变流动相流速和线性梯度时间几乎不影响制备型USRPP分离蛋白的分离度和复性效率的结论。该结论与实验结果一致。 展开更多
关键词 制备型高效液相色谱 计量置换保留模型 流动相 优化 生物大分子 分离 纯化 蛋白质
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反相液相色谱中溶剂强度规律的研究 被引量:2
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作者 张维平 郭鸿 +1 位作者 高娟 耿信笃 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期475-479,共5页
以溶质计量置换保留模型 (SDM R)为依据 ,通过研究 3种正链醇同系物溶剂置换剂对 14种正链醇同系物溶质色谱保留行为的影响 ,发现计量置换参数Z(对应 1mol溶质被吸附时从溶质与固定相接触处释放出的溶剂的总摩尔数 )、lgI(与 1mol溶质... 以溶质计量置换保留模型 (SDM R)为依据 ,通过研究 3种正链醇同系物溶剂置换剂对 14种正链醇同系物溶质色谱保留行为的影响 ,发现计量置换参数Z(对应 1mol溶质被吸附时从溶质与固定相接触处释放出的溶剂的总摩尔数 )、lgI(与 1mol溶质对固定相亲和势有关的常数 )和 j(与 1mol溶剂对固定相亲和势有关的常数 )均随着同系物置换剂相对分子质量的增大而减小 ,并呈现出线性变化 ,表明溶剂强度与溶剂分子的大小有关 ,分子愈大 ,溶剂洗脱能力愈强 ,并遵循同系物规律。此外 ,还得出了 j作为溶剂强度参数最为可靠及准确的结论 ,从一个新的角度揭示了液相色谱中同系物规律。与Snyder经验公式中对应的 3个参数比较 ,发现那 展开更多
关键词 反相高效液相色谱 sdm-r 溶剂强度 变化规律
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反相液相色谱中同系物结构参数收敛的热力学表征 被引量:3
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作者 张静 王彦 耿信笃 《分析科学学报》 CAS CSCD 2000年第1期5-9,共5页
以液相色谱中的溶质计量置换保留模型为理论基础 ,从热力学角度对反相液相色谱中同系物四种分子结构参数的收敛性进行了研究 ,推导出计算收敛点的坐标方程 ,并从热力学角度阐述了收敛点坐标的物理意义。这些参数收敛点纵坐标的自由能变... 以液相色谱中的溶质计量置换保留模型为理论基础 ,从热力学角度对反相液相色谱中同系物四种分子结构参数的收敛性进行了研究 ,推导出计算收敛点的坐标方程 ,并从热力学角度阐述了收敛点坐标的物理意义。这些参数收敛点纵坐标的自由能变均为 0。基于任何常数值与 2 .3 0 3 RT之乘积均带有能量量纲 ,故横坐标为分别用 Z和这些参数表征自由能时两者之间的补偿自由能。并进一步讨论了同系物收敛性存在的实质是在收敛点时 ,溶质的总保留自由能变为 0。用实验数据和文献数据对理论进行了验证 ,两者符合甚佳。 展开更多
关键词 反相液相色谱 热力学 同系物 分子结构参数
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反相液相色谱中溶质保留参数间的定量关系研究
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作者 郭鸿 张养军 +1 位作者 高娟 耿信笃 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期1-4,共4页
比较了Snyder经验公式中的K0w 与S和溶质计量置换保留模型 (SDM R)中溶质保留参数Z(1mol溶剂化溶质被溶剂化固定相吸附时 ,在其接触表面处释放出溶剂或置换剂的总摩尔数 )与lgI(与 1mol溶质对固定相的亲和势有关的常数 )之间的定量关系... 比较了Snyder经验公式中的K0w 与S和溶质计量置换保留模型 (SDM R)中溶质保留参数Z(1mol溶剂化溶质被溶剂化固定相吸附时 ,在其接触表面处释放出溶剂或置换剂的总摩尔数 )与lgI(与 1mol溶质对固定相的亲和势有关的常数 )之间的定量关系。SDM R中的两个参数间不仅对同系物溶质可以有很好的线性关系 ,而且对非同系物溶质也有很好的线性关系。其线性关系的好坏主要取决于这两个参数数值范围的大小 ,与文献中报告的线性关系取决于是否单因素影响溶质的保留和完全由统计学规律决定的结论不同。与Snyder经验公式中相对应的参数进行了比较 ,SDM R保留参数的线性范围比Snyder公式中参数的线性范围宽。 展开更多
关键词 反相高效液相色谱 溶质保留参数 溶质计量 置换保留模型 同系物 非同系物 定量关系 线性关系
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