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‘无籽’瓯柑CsLTP和CsLOX基因的克隆与表达分析 被引量:2
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作者 张敏 刘志辉 +4 位作者 宋雪恩 朱咪咪 党婉誉 颜福花 张迟 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期823-830,共8页
采用同源序列法,结合cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术,克隆获得‘无籽’瓯柑Citrus suavissima‘Seedless’脂转移酶基因CsLTP和脂氧合酶基因CsLOX的全长cDNA序列;CsLTP cDNA全长667 bp,1个开放阅读框,编... 采用同源序列法,结合cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术,克隆获得‘无籽’瓯柑Citrus suavissima‘Seedless’脂转移酶基因CsLTP和脂氧合酶基因CsLOX的全长cDNA序列;CsLTP cDNA全长667 bp,1个开放阅读框,编码215个氨基酸,与脐橙C.sinensis,粗柠檬C.jambhiri的脂转移蛋白的相似性分别为95%和60%;CsLOX cDNA全长2 915 bp,1个开放阅读框,编码895个氨基酸,与粗柠檬、美洲黑杨Populus deltoids的相似性分别为99%和51%。荧光定量聚合酶链式反应(PCR)表明:CsLTP和CsLOX的表达量均在‘无籽’瓯柑花粉粒形成期开始显著下降,并显著低于普通瓯柑Citrus suavissima。‘无籽’瓯柑花粉发育过程中油脂的转运及氧化的异常,可能成为‘无籽’瓯柑花粉败育的原因之一。 展开更多
关键词 园艺学 '无籽’瓯柑 花粉败育 CsLTP CsLOX 荧光定量PCR
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无籽瓯柑无核原因的研究 被引量:10
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作者 曾燕如 张炼炳 +1 位作者 斯金平 徐象华 《浙江林学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期359-362,共4页
无籽瓯柑Citrus suavissima‘Seedless’是浙江省新选育的柑橘良种。从花粉的角度对无籽瓯柑、普通瓯柑Citrus suavissima,处红柚Citrus grandis‘Chuhong’和翡翠柚的Citrus grandis的花粉进行了花粉形态观测、花粉量测定、花粉生活力... 无籽瓯柑Citrus suavissima‘Seedless’是浙江省新选育的柑橘良种。从花粉的角度对无籽瓯柑、普通瓯柑Citrus suavissima,处红柚Citrus grandis‘Chuhong’和翡翠柚的Citrus grandis的花粉进行了花粉形态观测、花粉量测定、花粉生活力测定及花粉发芽试验等比较研究,试图探索无籽瓯柑无籽的原因。结果表明,4个品种的花药数相近,但无籽瓯柑的花药上罕见自然散发的花粉;无籽瓯柑和普通瓯柑的花粉量接近,两者无明显差异;翡翠柚的花粉量是4个品种中数量最多的,大约是瓯柑的4倍和处红柚的2倍;普通瓯柑花粉的生活力与翡翠柚和处红柚的花粉生活力相当,无籽瓯柑花粉的生活力略低;无籽瓯柑在培养基上不发芽,而普通瓯柑、处红柚和翡翠柚的花粉发芽率在蔗糖质量分数为100 g.kg-1和150 g.kg-1的培养基上接近。无籽瓯柑无籽是因为其花药上罕有自然散发的花粉以及花粉难发芽造成的。 展开更多
关键词 园艺学 无籽瓯柑 花粉生活力 花粉发芽率
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‘无籽’瓯柑小孢子母细胞减数分裂特性基因RAD51和MS1的表达差异分析 被引量:1
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作者 朱咪咪 张迟 +5 位作者 常爱玲 党婉誉 周彩红 俞狄虎 吴莹莹 张敏 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期921-927,共7页
‘无籽’瓯柑Citrus suavissima‘Seedless’是野生型瓯柑Citrus suavissima的芽变,其花粉完全败育,败育起始于小孢子母细胞减数分裂形成四分体时期。研究‘无籽’瓯柑小孢子母细胞减数分裂异常的分子机制,有利于深入认识果树芽变的发... ‘无籽’瓯柑Citrus suavissima‘Seedless’是野生型瓯柑Citrus suavissima的芽变,其花粉完全败育,败育起始于小孢子母细胞减数分裂形成四分体时期。研究‘无籽’瓯柑小孢子母细胞减数分裂异常的分子机制,有利于深入认识果树芽变的发生机制。随机选择"无籽"瓯柑和瓯柑各3株,根据花蕾直径采集花粉母细胞时期(Ⅰ),四分体时期(Ⅱ),单核花粉粒时期(Ⅲ),双核花粉粒时期(Ⅳ)及花粉粒成熟期(Ⅴ)共5个时期的花蕾并分离花药,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)分析减数分裂特性基因RAD51和MS1的相对表达量,3次重复。通过SPSS 16.0的最小显著差法(LSD)在0.01水平上进行各样品间的相对表达量差异分析。结果表明:RAD51和MS1基因的表达高峰均集中在第Ⅰ时期和第Ⅱ时期,且此时花药中的相对表达量均极显著(P<0.01)高于花蕾。第Ⅰ时期花药中,‘无籽’瓯柑RAD51的相对表达量为瓯柑的3.7倍,MS1可达300倍;但同时期花蕾中,RAD51的相对表达量仅1.1倍,MS1为140.0倍。‘无籽’瓯柑RAD51基因在第Ⅰ时期和第Ⅱ时期的相对表达量极显著(P<0.01)高于瓯柑,说明‘无籽’瓯柑小孢子母细胞和四分体时期的细胞内均存在DNA受损现象;‘无籽’瓯柑MS1基因在第Ⅰ时期的相对表达量极显著(P<0.01)高于瓯柑,但第Ⅱ时期极显著(P<0.01)低于瓯柑,推测‘无籽’瓯柑败育花粉的形成与MS1基因表达紊乱引起油脂分泌、转运异常密切相关。 展开更多
关键词 园艺学 '无籽’瓯柑 减数分裂 花蕾 花药 67851 MS1 实时荧光定量聚合酶链式反应
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