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逆转录环介导等温扩增技术检测H3亚型猪流感病毒
被引量：
8
1
作者
刘中勇
朱道中
+4 位作者
李少璃
冀君
毕英佐
谢青梅
曹永长
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2009年第7期1-5,共5页
基于环介导等温扩增技术(RT-LAMP),建立了一种用于快速检测H3亚型猪流感病毒的方法。根据GenBank中收录的H3N2亚型猪流感病毒(SIV)HA基因保守区的序列,设计一组对应HA序列6个区域的4条特异性引物,建立RT-LAMP反应体系;经优化,确定了最佳...
基于环介导等温扩增技术(RT-LAMP),建立了一种用于快速检测H3亚型猪流感病毒的方法。根据GenBank中收录的H3N2亚型猪流感病毒(SIV)HA基因保守区的序列,设计一组对应HA序列6个区域的4条特异性引物,建立RT-LAMP反应体系;经优化,确定了最佳的LAMP反应条件。扩增后产物形成的焦磷酸离子和溶液中的镁离子结合而形成焦磷酸镁沉淀,结果可视。同时用特异性内切酶HhaⅠ对所获得的产物进行酶切鉴定,所得的酶切产物大小与理论值完全符合。用已建立的RT-LAMP技术检测临床样品,检测结果与RT-PCR方法符合率均达到100%。结果表明,本研究建立的RT-LAMP检测猪流感病毒方法,操作简单,灵敏度高,特异性强,是一种适用于现场诊断的检测技术。
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关键词
H3亚型猪流感病毒
血凝素
逆转录环介导等温扩增
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职称材料
题名
逆转录环介导等温扩增技术检测H3亚型猪流感病毒
被引量：
8
1
作者
刘中勇
朱道中
李少璃
冀君
毕英佐
谢青梅
曹永长
机构
广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心
华南农业大学动物科学学院
出处
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2009年第7期1-5,共5页
基金
广东省重大科技专项(2005A20901004
2006A20901003)
文摘
基于环介导等温扩增技术(RT-LAMP),建立了一种用于快速检测H3亚型猪流感病毒的方法。根据GenBank中收录的H3N2亚型猪流感病毒(SIV)HA基因保守区的序列,设计一组对应HA序列6个区域的4条特异性引物,建立RT-LAMP反应体系;经优化,确定了最佳的LAMP反应条件。扩增后产物形成的焦磷酸离子和溶液中的镁离子结合而形成焦磷酸镁沉淀,结果可视。同时用特异性内切酶HhaⅠ对所获得的产物进行酶切鉴定,所得的酶切产物大小与理论值完全符合。用已建立的RT-LAMP技术检测临床样品,检测结果与RT-PCR方法符合率均达到100%。结果表明,本研究建立的RT-LAMP检测猪流感病毒方法,操作简单,灵敏度高,特异性强,是一种适用于现场诊断的检测技术。
关键词
H3亚型猪流感病毒
血凝素
逆转录环介导等温扩增
Keywords
H3 subtype Swine influenza virus
HA
reverse transcription loop-mediated isothermal amplifi cation
分类号
S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
逆转录环介导等温扩增技术检测H3亚型猪流感病毒
刘中勇
朱道中
李少璃
冀君
毕英佐
谢青梅
曹永长
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2009
8
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