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猪繁殖与呼吸综合征病毒M基因RT-LAMP检测方法的建立
被引量：
14
1
作者
赵彦宗
张显浩
+2 位作者
余小利
苏丹萍
贺东生
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2009年第12期53-56,共4页
本研究根据GenBank中登录的猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)M基因保守序列6个特异性部位设计了2对引物,建立了PRRSV的环介导逆转录等温检测方法。结果表明,该方法灵敏度比RT-PCR高...
本研究根据GenBank中登录的猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)M基因保守序列6个特异性部位设计了2对引物,建立了PRRSV的环介导逆转录等温检测方法。结果表明,该方法灵敏度比RT-PCR高100倍;全部反应可在1 h内完成并可得到其特有的阶梯状条带,而且猪圆环病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒的扩增结果均为阴性;在反应体系中添加SYBR GREENⅠ染料后,可通过肉眼观察有无荧光而直接判定结果。该方法灵敏度高、特异性好,可作为猪繁殖与呼吸综合征病毒的快速诊断方法。
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关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒
M基因
环介导逆转录等温扩增
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职称材料
猪瘟病毒RT-LAMP快速检测方法的建立
被引量：
10
2
作者
刘中勇
曾小娜
+4 位作者
朱道中
房红莹
蒋启荣
吴志强
罗满林
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2010年第6期71-74,共4页
本研究设计了4条针对猪瘟病毒6个位点的特异性引物,建立了一种灵敏、特异、快速的猪瘟病毒体外等温扩增(RT-LAMP)检测方法,所建立的方法能够特异地检测出猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)的存在,检测PRV、PRRSV、PCV-2等病...
本研究设计了4条针对猪瘟病毒6个位点的特异性引物,建立了一种灵敏、特异、快速的猪瘟病毒体外等温扩增(RT-LAMP)检测方法,所建立的方法能够特异地检测出猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)的存在,检测PRV、PRRSV、PCV-2等病毒均为阴性;灵敏度高,所建立的CSFV-RT-LAMP方法灵敏度为10-5,总RNA的检测阈值约为1pg;反应快速,整个扩增反应可在1h内完成;操作简单,不需要PCR仪等复杂的仪器,结果可经肉眼观察及电泳检测。本试验为猪瘟的现场快速检测提供更加简便、快速的方法,可以满足基层检疫的需要。
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关键词
猪瘟病毒
环介导等温扩增技术
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职称材料
反转录-环介导等温扩增技术快速检测志贺氏菌
被引量：
1
3
作者
丁梦璇
刘秀
+4 位作者
刘伯扬
梁玉林
周振森
尹建军
宋全厚
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第4期193-199,共7页
建立了反转录-环介导等温扩增技术的志贺氏菌快速检测方法。针对志贺氏菌特异保守基因ipa H设计多套引物,建立优化了的反应体系,并评价其准确性、特异性、灵敏度。以人工污染脱脂乳样品比较RT-LAMP与RT-PCR的灵敏度。结果表明,在65℃等...
建立了反转录-环介导等温扩增技术的志贺氏菌快速检测方法。针对志贺氏菌特异保守基因ipa H设计多套引物,建立优化了的反应体系,并评价其准确性、特异性、灵敏度。以人工污染脱脂乳样品比较RT-LAMP与RT-PCR的灵敏度。结果表明,在65℃等温条件下,RT-LAMP反应可在30 min内完成。在活菌/损伤菌模型中,该方法表现出比国标法更好的准确性。在23株细菌标准菌株中仅对4株志贺氏菌有特异性检出。志贺氏菌RNA模板的检测灵敏度为7 fg/μL。人工污染脱脂乳样品检测灵敏度达到40 CFU/g,比RT-PCR方法高出2个数量级。表明所建立的志贺氏菌RT-LAMP扩增方法可以准确的检测志贺氏菌,同时具有快速、特异、灵敏的优势,可用于志贺氏菌的快速筛查和现场监控。
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关键词
反转录环介导等温扩增
志贺氏菌
IPAH基因
快速检测
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职称材料
题名
猪繁殖与呼吸综合征病毒M基因RT-LAMP检测方法的建立
被引量：
14
1
作者
赵彦宗
张显浩
余小利
苏丹萍
贺东生
机构
华南农业大学兽医学院广东省人畜共患病重点实验室
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2009年第12期53-56,共4页
基金
教育部"创新团队计划"(2007-68)
番禺科技局(2008-z-60-1)资助
文摘
本研究根据GenBank中登录的猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)M基因保守序列6个特异性部位设计了2对引物,建立了PRRSV的环介导逆转录等温检测方法。结果表明,该方法灵敏度比RT-PCR高100倍;全部反应可在1 h内完成并可得到其特有的阶梯状条带,而且猪圆环病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒的扩增结果均为阴性;在反应体系中添加SYBR GREENⅠ染料后,可通过肉眼观察有无荧光而直接判定结果。该方法灵敏度高、特异性好,可作为猪繁殖与呼吸综合征病毒的快速诊断方法。
关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒
M基因
环介导逆转录等温扩增
Keywords
porcine reproductive and respiratory syndrome virus
M gene
reverse transcriptase loop-mediated isothermal amplification（rt-lamp）
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
猪瘟病毒RT-LAMP快速检测方法的建立
被引量：
10
2
作者
刘中勇
曾小娜
朱道中
房红莹
蒋启荣
吴志强
罗满林
机构
广东出入境检验检疫局
华南农业大学兽医学院
广东省动物防疫监督总所
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2010年第6期71-74,共4页
基金
广东省农业攻关计划项目(2008B020700007)
文摘
本研究设计了4条针对猪瘟病毒6个位点的特异性引物,建立了一种灵敏、特异、快速的猪瘟病毒体外等温扩增(RT-LAMP)检测方法,所建立的方法能够特异地检测出猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)的存在,检测PRV、PRRSV、PCV-2等病毒均为阴性;灵敏度高,所建立的CSFV-RT-LAMP方法灵敏度为10-5,总RNA的检测阈值约为1pg;反应快速,整个扩增反应可在1h内完成;操作简单,不需要PCR仪等复杂的仪器,结果可经肉眼观察及电泳检测。本试验为猪瘟的现场快速检测提供更加简便、快速的方法,可以满足基层检疫的需要。
关键词
猪瘟病毒
环介导等温扩增技术
Keywords
CSFV
reverse transcriptase loop-mediated isothermal amplification（rt-lamp）
分类号
S852.651 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
反转录-环介导等温扩增技术快速检测志贺氏菌
被引量：
1
3
作者
丁梦璇
刘秀
刘伯扬
梁玉林
周振森
尹建军
宋全厚
机构
中国食品发酵工业研究院有限公司
内蒙古蒙牛乳业(集团)股份有限公司质量安全管理系统中心实验室
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第4期193-199,共7页
文摘
建立了反转录-环介导等温扩增技术的志贺氏菌快速检测方法。针对志贺氏菌特异保守基因ipa H设计多套引物,建立优化了的反应体系,并评价其准确性、特异性、灵敏度。以人工污染脱脂乳样品比较RT-LAMP与RT-PCR的灵敏度。结果表明,在65℃等温条件下,RT-LAMP反应可在30 min内完成。在活菌/损伤菌模型中,该方法表现出比国标法更好的准确性。在23株细菌标准菌株中仅对4株志贺氏菌有特异性检出。志贺氏菌RNA模板的检测灵敏度为7 fg/μL。人工污染脱脂乳样品检测灵敏度达到40 CFU/g,比RT-PCR方法高出2个数量级。表明所建立的志贺氏菌RT-LAMP扩增方法可以准确的检测志贺氏菌,同时具有快速、特异、灵敏的优势,可用于志贺氏菌的快速筛查和现场监控。
关键词
反转录环介导等温扩增
志贺氏菌
IPAH基因
快速检测
Keywords
reverse
transcriptase
loop-mediated
isothermal
amplification
Shigella
ipaH
rapid detection
分类号
TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪繁殖与呼吸综合征病毒M基因RT-LAMP检测方法的建立
赵彦宗
张显浩
余小利
苏丹萍
贺东生
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2009
14
在线阅读
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职称材料
2
猪瘟病毒RT-LAMP快速检测方法的建立
刘中勇
曾小娜
朱道中
房红莹
蒋启荣
吴志强
罗满林
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2010
10
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下载PDF
职称材料
3
反转录-环介导等温扩增技术快速检测志贺氏菌
丁梦璇
刘秀
刘伯扬
梁玉林
周振森
尹建军
宋全厚
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2019
1
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职称材料
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