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γ-干扰素转基因对过敏原导致的小鼠肺嗜酸性粒细胞浸润的抑制作用 被引量:8
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作者 高占成 康禹 +3 位作者 尚颖 改军 虞有智 何权瀛 《北京医科大学学报》 CSCD 2000年第5期395-398,F002,共5页
目的 :探讨腺病毒介导的小鼠γ 干扰素在小鼠哮喘模型肺上皮细胞内的转基因表达对过敏原所致的嗜酸性粒细胞浸润的作用。方法 :C5 7小鼠经卵蛋白 (ovalbumin ,OVA)腹腔致敏和气道吸入激发建立哮喘模型 ,48h后收获小鼠肺泡灌洗液 (bronch... 目的 :探讨腺病毒介导的小鼠γ 干扰素在小鼠哮喘模型肺上皮细胞内的转基因表达对过敏原所致的嗜酸性粒细胞浸润的作用。方法 :C5 7小鼠经卵蛋白 (ovalbumin ,OVA)腹腔致敏和气道吸入激发建立哮喘模型 ,48h后收获小鼠肺泡灌洗液 (bronchoalveolarlavage ,BAL)和小鼠肺 ;哮喘模型在OVA激发前 48h ,在其气道内给予带有γ 干扰素的复制缺陷腺病毒 (replication deficientadenoviruswithIFN γgene,AdCMVmIFNγ) 5× 10 8空斑形成单位 (pfu) ,同上在OVA激发 48h后收获其肺泡灌洗液和肺。结果 :在卵蛋白所致的哮喘模型中 ,肺组织病理可见支气管周围、血管周围及部分肺泡内明显的嗜酸粒细胞浸润 ,肺泡灌洗液中的嗜酸粒细胞平均占 (75 .13±6 .85 ) % ,而在阴性对照组中则未见嗜酸粒细胞 ;小鼠哮喘模型气道内给予AdCMVmIFNγ后 ,肺内嗜酸粒细胞浸润的程度明显减少 ,肺泡灌洗液中的嗜酸粒细胞占 (9.0 0± 4.5 8) % (P <0 .0 0 1) ,二者均显著低于哮喘模型组。结论 :小鼠的IFN γ经腺病毒介导在小鼠肺上皮细胞内的表达可明显抑制过敏原所致的肺内嗜酸性粒细胞浸润 。 展开更多
关键词 干扰素Γ 肺嗜酸粒细胞增多 药物疗法 哮喘
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大鼠BMP-7重组腺病毒构建及在肾小管上皮细胞中表达
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作者 杨肃文 王伟 +1 位作者 徐再春 朱芸芸 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期71-78,共8页
目的:利用AdEasyTMsystem构建携带大鼠BMP-7基因的重组腺病毒,并鉴定其在原代肾小管上皮细胞中的表达。方法:将BMP-7全长序列分为46个片段分段合成,再采用PCR方法将合成的46个寡核苷酸片段拼接成BMP-7基因,并克隆到测序载体中测序鉴定。... 目的:利用AdEasyTMsystem构建携带大鼠BMP-7基因的重组腺病毒,并鉴定其在原代肾小管上皮细胞中的表达。方法:将BMP-7全长序列分为46个片段分段合成,再采用PCR方法将合成的46个寡核苷酸片段拼接成BMP-7基因,并克隆到测序载体中测序鉴定。经NotI和HindⅢ双酶切后接入pShuttle-CMV穿梭载体,构建重组腺病毒的穿梭质粒pShuttle-BMP-7。EcoRI酶切重组pShuttle-BMP-7,与pAdEasyTMDNA电穿孔共转化BJ5183感受态菌,抽提重组AdBMP-7质粒,PacI酶切线性化重组质粒AdBMP-7后,转染Ad293细胞进行病毒包装和扩增,腺病毒荧光检测试剂盒测定其滴度。用AdBMP-7感染大鼠肾小管上皮细胞,以ELISA法和W estern-blot法检测BMP-7在大鼠肾小管上皮细胞中的表达。RT-PCR方法检测-αSMA mRNA的表达水平,以鉴定重组腺病毒AdBMP-7的生物学活性。结果:构建了BMP-7基因的重组腺病毒载体,并制备出高滴度重组腺病毒保存液。该重组腺病毒在体外能有效转染大鼠肾小管上皮细胞并高表达BMP-7蛋白,所表达的BMP-7蛋白能有效逆转由TGF-β1诱导的α-SMA表达增高。结论:成功地构建了携带大鼠BMP-7基因的重组腺病毒,并初步证实其具有一定的抗肾纤维化功能。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白质类/遗传学 重组 遗传 转染 遗传载体 腺病毒科/遗传学 肾小管/细胞学 上皮细胞/代谢 肾硬化症/治疗
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经鼻给小剂量重组人促红细胞生成素对大鼠癫痫的影响 被引量:3
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作者 赵华伟 陆源 +4 位作者 厉旭云 许正浩 张仲苗 胡薇薇 陈忠 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期565-571,共7页
目的:研究经鼻给小剂量重组人促红细胞生成素(r-HuEPO)对大鼠癫痫发作的影响。方法:大鼠经鼻或腹腔给r-HuEPO后,观察对戊四唑(PTZ)诱导癫痫发作潜伏时间、级别、大发作持续时间、次数的影响。另外,大鼠经鼻给r-HuEPO后,观察对最大电休克... 目的:研究经鼻给小剂量重组人促红细胞生成素(r-HuEPO)对大鼠癫痫发作的影响。方法:大鼠经鼻或腹腔给r-HuEPO后,观察对戊四唑(PTZ)诱导癫痫发作潜伏时间、级别、大发作持续时间、次数的影响。另外,大鼠经鼻给r-HuEPO后,观察对最大电休克(MES)诱导的惊厥发作级别,前肢或后肢强直性伸展时间的影响;对杏仁核电点燃后阈刺激诱导的行为等级,大发作持续时间及后放电的影响。结果:经鼻给予小剂量r-HuEPO,可明显延长PTZ诱导的癫痫发作潜伏时间,降低癫痫发作级别、大发作持续时间和发作次数,其中2.4 IU剂量组作用最为明显。而腹腔给r-HuEPO(3000、4000 IU/kg),仅可减少大发作次数和缩短大发作持续时间。经鼻给2.4 IU的r-HuEPO,可显著降低MES诱导的大鼠惊厥发作级别,缩短前肢和后肢强直性伸展时间。另外,经鼻给2.4 IU r-HuEPO,明显降低杏仁核电点燃后阈刺激诱导的癫痫发作级别,缩短大发作时间和后放电时间。结论:经鼻给小剂量的r-HuEPO有明显的抗癫痫作用。 展开更多
关键词 癫痫/药物疗法 投药 鼻内 红细胞生成素 重组/治疗应用 经鼻给药 促红细胞生成素
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国产重组干扰素α-2b治疗45例慢性丙型肝炎疗效观察 被引量:1
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作者 张励 王豪 +11 位作者 孙焱 马小鹏 郭芳 高燕 房继莲 马慧 郗萌 孙卫 郑弘 王剑 冯百芳 陶其敏 《北京医科大学学报》 CSCD 1998年第3期279-281,共3页
目的:观察国产重组干扰素α2b治疗慢性丙型肝炎的近期疗效。方法:应用长春生物制品研究所生产的rIFNα2b治疗45例丙型肝炎患者,300万单位肌肉注射,隔日1次,共3个月;另24例患者给予一般保肝治疗作为对照组。... 目的:观察国产重组干扰素α2b治疗慢性丙型肝炎的近期疗效。方法:应用长春生物制品研究所生产的rIFNα2b治疗45例丙型肝炎患者,300万单位肌肉注射,隔日1次,共3个月;另24例患者给予一般保肝治疗作为对照组。结果:3个月后治疗组27/45ALT复常,35/45HCVRNA阴转,和对照组比较差异有显著性。结论:国产重组干扰素α2b在抗病毒和恢复肝功能方面均有较好疗效。 展开更多
关键词 丙型肝炎 药物疗法 重组干扰素 干扰素 疗效
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