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来源于人外周血单核细胞的树突状细胞感染rAAV-HBsAg后的功能改变被引量：6: 1; 作者胡贵方吴小兵 +2 位作者俞守义康禹侯云德《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第7期696-698,701,共4页; 目的观察人外周血单核细胞来源树突状细胞(DCs)经重组腺相关病毒(rAAV)载体介导乙肝表面抗原(HBsAg)基因感染后的功能改变。方法采用ELISA试剂盒检测感染rAAV-HBsAg后的DCs (rAAV-HBsAg-DC)分泌IL-12水平以及rAAV-HBsAg-DCs与淋巴细胞... 展开更多; 关键词人外周血单核细胞树突状细胞感染重组腺相关病毒乙肝表面抗原; 在线阅读下载PDF 职称材料

生长抑素与乙肝表面抗原融合基因重组痘苗病毒的构建及其表达被引量：21: 2; 作者徐文忠杜念兴 +1 位作者李光地汪垣《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第3期74-80,共7页; 将生长抑素(ss)与乙肝表面抗原(HBsAg)融合基因(ss/HBs)克隆到痘苗病毒表达质粒pGJP-5中,通过与痘苗病毒天坛株体内重组和蚀斑挑选技术获得融合基因的重组病毒,它保持痘苗病毒原有的感染性,并能表达出 ss 和 HBsAg 产物.表达产物呈表面... 展开更多; 关键词生长抑制素乙型肝炎表面抗原痘苗病毒; 在线阅读下载PDF 职称材料

乙型肝炎表面抗原基因DNA介导的体液免疫初步研究被引量：3: 3; 作者沈心亮李文辉 +1 位作者蒋琳应莲芳《兰州大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期186-189,共4页; 用ＰＣＲ技术从纯化的乙型肝炎病毒核酸中扩增出ｐｒｅＳ２－Ｓ基因，并将其定向克隆于真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３．１（＋）中，构建成带有完整的乙肝表面前Ｓ２抗原基因和Ｓ基因的重组质粒．重组质粒经酶切及部分序列分析鉴定后，瞬时... 展开更多; 关键词 DNA免疫 HbSAG 乙肝表面抗原体液免疫基因疫苗; 在线阅读下载PDF 职称材料

含乙型肝炎表面抗原基因重组腺相关病毒的构建及其基因的表达和功能初步研究被引量：1: 4; 作者胡贵方吴小兵 +3 位作者俞守义董小岩陈清候云德《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第6期553-556,共4页; 目的构建含乙型肝炎表面抗原(HBsAg)基因的重组腺相关病毒(rAAV)并观察目的基因的表达和功能。方法采用PCR法从PTHBV-1质粒中扩增HBsAg基因(ayw 亚型);将PCR扩增产物插入腺相关病毒(AAV)表达质粒pSNAV中,构建重组质粒pSNAV-HBsAg;用脂... 展开更多; 关键词乙型肝炎表面抗原基因表达重组腺相关病毒 PCR法 PTHbV-1质粒; 在线阅读下载PDF 职称材料

表达含前S的乙肝病毒表面抗原重组CHO细胞株的建立和特性检测: 5; 作者刘新琼颜华王德彬《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期390-393,共4页; 为建立表达含前S基因乙肝病毒表面抗原的细胞株,将笔者所在实验室构建的表达含前S基因乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的真核表达质粒共转染CHO/dhfr-细胞,通过筛选,获得可表达含前S基因乙肝病毒表面抗原的重组CHO细胞,然后进行亚克隆,用氨甲喋... 展开更多; 关键词中国仓鼠卵巢/dhfr-细胞二氢叶酸还原酶转染 G-418 氨甲喋呤含前S乙肝病毒表面抗原; 在线阅读下载PDF 职称材料

硫酸铵浓度对疏水作用层析纯化重组乙肝表面抗原的影响: 6; 作者蔺芳《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期135-138,共4页; 以表面抗原活性收率和纯度为考察指标,转化乙肝病毒preS2-S基因重组酵母株,经甘油培养基充分增殖,转移到甲醇培养基中诱导表达。破碎细胞收集细胞原液,离心15 000 r·min-1除去细胞碎片,超滤浓缩。结果表明,硫酸铵0.12、0.16 mol... 展开更多; 关键词疏水作用层析纯化重组乙肝表面抗原硫酸铵; 在线阅读下载PDF 职称材料

两段发酵法培养重组酿酒酵母生产乙肝表面抗原被引量：1: 7; 作者张凌周祥山 +2 位作者邵明非范卫民张元兴《华东理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第1期68-71,75,共5页; 通过具有选择性压力合成培养基的使用和大豆蛋白胨的补加,建立了两段法重组酿酒酵母表达乙肝表面抗原的发酵生产工艺,使总的抗原表达量比原始批培养提高了25%,单位菌体抗原表达量提高了68%。对合成培养基和过程进行了优化,降低了生产成... 展开更多; 关键词重组酿酒酵母乙肝表面抗原 HbSAG 质粒; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名来源于人外周血单核细胞的树突状细胞感染rAAV-HBsAg后的功能改变被引量：6: 1; 作者胡贵方吴小兵俞守义康禹侯云德; 机构第一军医大学流行病教研室中国预防医学科学院病毒学研究所; 出处《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第7期696-698,701,共4页; 基金国家863高科技发展计划(863- BH03-05-02)~~; 文摘目的观察人外周血单核细胞来源树突状细胞(DCs)经重组腺相关病毒(rAAV)载体介导乙肝表面抗原(HBsAg)基因感染后的功能改变。方法采用ELISA试剂盒检测感染rAAV-HBsAg后的DCs (rAAV-HBsAg-DC)分泌IL-12水平以及rAAV-HBsAg-DCs与淋巴细胞共孵育后上清中γ-干扰素(IFN-γ)的含量;采用混合白细胞反应(MLR)检测rAAV- HBsAg感染前后DCs刺激同种异体淋巴细胞的增殖能力;用FACSort流式细胞仪检测rAAV-HBsAg-DCs表面分子CD80、CD83、CD86和HLA-DR的变化。结果rAAV-HBsAg感染可促进DCs分泌IL-12(P<0.05),感染后的DCs刺激淋巴细胞分泌IFN-γ的水平显著提高(P<0.01),感染前后的DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖能力及其特征性表面分子无明显改变。结论rAAV介导HBsAg基因感染的DCs能诱发淋巴细胞朝Th1型细胞分化,且不明显改变DCs的表型和刺激淋巴细胞增值的功能,rAAV载体介导HBsAg基因体外遗传修饰的DCs可以进一步用于乙型肝炎的免疫治疗研究。; 关键词人外周血单核细胞树突状细胞感染重组腺相关病毒乙肝表面抗原; Keywords dendritic cells recombinant adeno-associated virus/immunology hepatitis b surface antigens hepatitis b virus; 分类号 R392 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名生长抑素与乙肝表面抗原融合基因重组痘苗病毒的构建及其表达被引量：21: 2; 作者徐文忠杜念兴李光地汪垣; 机构南京农业大学兽医学系中科院上海生化研究所; 出处《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第3期74-80,共7页; 基金农业部"七五"生物技术课题; 文摘将生长抑素(ss)与乙肝表面抗原(HBsAg)融合基因(ss/HBs)克隆到痘苗病毒表达质粒pGJP-5中,通过与痘苗病毒天坛株体内重组和蚀斑挑选技术获得融合基因的重组病毒,它保持痘苗病毒原有的感染性,并能表达出 ss 和 HBsAg 产物.表达产物呈表面带 ss 决定簇的 HBsAg 杂合颗粒,并分泌到感染细胞之培养液中.杂合颗粒的大小和密度与报道的 HBsAg 颗粒相似。本文还对该重组痘苗病毒可能作为 ss 活载体苗的前景进行了讨论。; 关键词生长抑制素乙型肝炎表面抗原痘苗病毒; Keywords somatostatin hepatitis b surface antigen hybrid particles vaccinia virus recombinant gene expression; 分类号 Q789 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名乙型肝炎表面抗原基因DNA介导的体液免疫初步研究被引量：3: 3; 作者沈心亮李文辉蒋琳应莲芳; 机构卫生部兰州生物制品研究所; 出处《兰州大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期186-189,共4页; 文摘用ＰＣＲ技术从纯化的乙型肝炎病毒核酸中扩增出ｐｒｅＳ２－Ｓ基因，并将其定向克隆于真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３．１（＋）中，构建成带有完整的乙肝表面前Ｓ２抗原基因和Ｓ基因的重组质粒．重组质粒经酶切及部分序列分析鉴定后，瞬时转染小鼠Ｌ细胞，ＥＬＩＳＡ法检测到培养上清液有ＨＢｓＡｇ表达．用纯化的重组质粒静脉、肌肉和皮下注射免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，首次接种质粒ＤＮＡ３周后，血清抗体开始出现，再次加强２周后，阳性率明显提高．; 关键词 DNA免疫 HbSAG 乙肝表面抗原体液免疫基因疫苗; Keywords hepatitis b surface antigen recombinant eukaryotic expression plasmid DNA mediated immunization, humoral immune response; 分类号 R512.62 [医药卫生—内科学] R392－33 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名含乙型肝炎表面抗原基因重组腺相关病毒的构建及其基因的表达和功能初步研究被引量：1: 4; 作者胡贵方吴小兵俞守义董小岩陈清候云德; 机构第一军医大学流行病教研室中国预防医学科学院病毒学研究所; 出处《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第6期553-556,共4页; 基金国家863课题(863-BH03-05-02)~~; 文摘目的构建含乙型肝炎表面抗原(HBsAg)基因的重组腺相关病毒(rAAV)并观察目的基因的表达和功能。方法采用PCR法从PTHBV-1质粒中扩增HBsAg基因(ayw 亚型);将PCR扩增产物插入腺相关病毒(AAV)表达质粒pSNAV中,构建重组质粒pSNAV-HBsAg;用脂质体转染的方法将重组质粒转入BHK-21细胞中,G418筛选得到转入重组质粒并能表达目的基因的细胞系BHK-HBsAg;用具有rAAV包装功能的HSV-1- HSV1-rc/△UL2感染BHK-HBsAg,纯化后得到rAAV-HBsAg;ELISA检测重组病毒表面抗原基因在BHK-21细胞和293细胞中的表达;用rAAV-HBsAg免疫BalB/C小鼠,RIA法检测血清中表面抗体的滴度。结果ELISA法检测到混合细胞系BHK-HBsAg中HBsAg的表达量为(28.6±6.7)ng/5×106细胞;rAAV-HBsAg感染BHK-21细胞和293细胞后均能检测到HBsAg的表达,表达量随感染复数的增加而升高;rAAV-HBsAg免疫的BalB/C小鼠能产生表面抗体(抗-HBs抗体)。结论rAAV-HBsAg在体外能表达,免疫动物能诱导体液免疫反应的产生。rAAV-HBsAg有希望成为乙型肝炎候选疫苗,也可以进一步用于探索慢性乙型肝炎的免疫治疗。; 关键词乙型肝炎表面抗原基因表达重组腺相关病毒 PCR法 PTHbV-1质粒; Keywords hepatitis b surface antigens gene expression recombinant adeno-associated virus; 分类号 R392 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名表达含前S的乙肝病毒表面抗原重组CHO细胞株的建立和特性检测: 5; 作者刘新琼颜华王德彬; 机构中南民族大学生命科学学院/生物技术国家民委重点实验室武汉纽斯特生物技术有限公司; 出处《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期390-393,共4页; 基金国家自然科学基金项目(30600400)资助; 文摘为建立表达含前S基因乙肝病毒表面抗原的细胞株,将笔者所在实验室构建的表达含前S基因乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的真核表达质粒共转染CHO/dhfr-细胞,通过筛选,获得可表达含前S基因乙肝病毒表面抗原的重组CHO细胞,然后进行亚克隆,用氨甲喋呤(MTX)加压选择,以ELISA法检测目的蛋白表达量,筛选获得稳定表达目的蛋白的细胞株,并对其进行特性鉴定。最终获得了C10和A10两株稳定高表达含前S基因乙肝病毒表面抗原的细胞株。; 关键词中国仓鼠卵巢/dhfr-细胞二氢叶酸还原酶转染 G-418 氨甲喋呤含前S乙肝病毒表面抗原; Keywords CHO/dhfr^- cell dihydrofolate reductase （DHFR） transfection G-418 methotrexate（MTX） recombinant hepatitis b surface antigen carrying pre-s; 分类号 Q939.47 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名硫酸铵浓度对疏水作用层析纯化重组乙肝表面抗原的影响: 6; 作者蔺芳; 机构新乡学院生命科学与生物技术系; 出处《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期135-138,共4页; 基金河南省政府决策研究课题(B578) 2010年度河南教育学院青年科研课题(20100103); 文摘以表面抗原活性收率和纯度为考察指标,转化乙肝病毒preS2-S基因重组酵母株,经甘油培养基充分增殖,转移到甲醇培养基中诱导表达。破碎细胞收集细胞原液,离心15 000 r·min-1除去细胞碎片,超滤浓缩。结果表明,硫酸铵0.12、0.16 mol·L-1时盐浓度低,HBsAg未结合到疏水介质上;硫酸铵0.24 mol·L-1时疏水性强,HBsAg不宜从介质上洗脱。表明0.20 mol·L-1硫酸铵更适合重组HBsAg纯化。; 关键词疏水作用层析纯化重组乙肝表面抗原硫酸铵; Keywords hydrophobic interaction chromatography（HIC） purification recombinant hepatitis b surface antigen（HbsAg） ammonium sulfate; 分类号 G424.31 [文化科学—课程与教学论]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名两段发酵法培养重组酿酒酵母生产乙肝表面抗原被引量：1: 7; 作者张凌周祥山邵明非范卫民张元兴; 机构华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室; 出处《华东理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第1期68-71,75,共5页; 文摘通过具有选择性压力合成培养基的使用和大豆蛋白胨的补加,建立了两段法重组酿酒酵母表达乙肝表面抗原的发酵生产工艺,使总的抗原表达量比原始批培养提高了25%,单位菌体抗原表达量提高了68%。对合成培养基和过程进行了优化,降低了生产成本,使两段发酵法更适合于实际生产。通过测定发酵过程中质粒的稳定性,证明抗原产量的提高是由于质粒稳定性提高所致。; 关键词重组酿酒酵母乙肝表面抗原 HbSAG 质粒; Keywords recombinant Saccharomyces cerevisiae hepatitis b surface antigen HbsAg plasmid; 分类号 TQ920.6 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	来源于人外周血单核细胞的树突状细胞感染rAAV-HBsAg后的功能改变	胡贵方吴小兵俞守义康禹侯云德	《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心	2003	6	在线阅读下载PDF 职称材料
2	生长抑素与乙肝表面抗原融合基因重组痘苗病毒的构建及其表达	徐文忠杜念兴李光地汪垣	《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	1992	21	在线阅读下载PDF 职称材料
3	乙型肝炎表面抗原基因DNA介导的体液免疫初步研究	沈心亮李文辉蒋琳应莲芳	《兰州大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	1999	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	含乙型肝炎表面抗原基因重组腺相关病毒的构建及其基因的表达和功能初步研究	胡贵方吴小兵俞守义董小岩陈清候云德	《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心	2003	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	表达含前S的乙肝病毒表面抗原重组CHO细胞株的建立和特性检测	刘新琼颜华王德彬	《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	硫酸铵浓度对疏水作用层析纯化重组乙肝表面抗原的影响	蔺芳	《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	两段发酵法培养重组酿酒酵母生产乙肝表面抗原	张凌周祥山邵明非范卫民张元兴	《华东理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心	2005	1	在线阅读下载PDF 职称材料