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PTHrP促进RANKL诱导巨噬细胞分化为破骨细胞参与中耳胆脂瘤骨破坏 被引量:1
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作者 谢淑敏 金丽 +4 位作者 符金凤 袁秋林 殷团芳 任基浩 刘伟 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期655-666,共12页
目的:骨质进行性吸收破坏是中耳胆脂瘤最重要的临床特征之一,可导致一系列颅内外并发症,而目前中耳胆脂瘤骨破坏的机制尚未明确。本研究旨在探究甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone-related protein,PTHrP)参与中耳胆脂瘤骨破坏... 目的:骨质进行性吸收破坏是中耳胆脂瘤最重要的临床特征之一,可导致一系列颅内外并发症,而目前中耳胆脂瘤骨破坏的机制尚未明确。本研究旨在探究甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone-related protein,PTHrP)参与中耳胆脂瘤骨破坏的机制。方法:收集后天性中耳胆脂瘤患者的25例胆脂瘤标本和13例外耳道正常皮肤组织标本。采用免疫组织化学染色方法检测PTHrP、核因子κB受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-kappa B ligand,RANKL)和骨保护素(osteoprotegerin,OPG)在中耳胆脂瘤和外耳道正常皮肤组织中的表达,抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色法检测中耳胆脂瘤和外耳道正常皮肤组织中是否存在TRAP阳性多核巨噬细胞。选取小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞进行干预,分为RANKL干预组和PTHrP+RANKL共同干预组,采用TRAP染色法检测2组破骨细胞的生成情况,实时聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)检测干预后2组破骨细胞相关基因TRAP、组织蛋白酶K(cathepsin K,CTSK)和活化T细胞核因子1(nuclear factor of activated T cell cytoplasmic 1,NFATc1)的mRNA表达水平,骨吸收陷窝实验检测2组破骨细胞的骨吸收功能。结果:免疫组织化学染色结果显示,PTHrP和RANKL在中耳胆脂瘤组织中的表达均显著增高,OPG表达降低(均P<0.05),且PTHrP的表达与RANKL、RANKL/OPG比值均呈显著正相关,与OPG表达呈显著负相关(分别r=0.385、r=0.417、r=-0.316,均P<0.05)。同时,PTHrP、RANKL的表达水平与中耳胆脂瘤的骨破坏程度均呈显著正相关(分别r=0.413、r=0.505,均P<0.05)。TRAP染色结果显示中耳胆脂瘤上皮周围基质中有大量TRAP阳性细胞,并存在细胞核数量为3个或3个以上的TRAP阳性破骨细胞。RANKL或PTHrP+RANKL联合干预5 d后,与RANKL干预组相比,PTHrP+RANKL联合干预组的破骨细胞数量显著增加(P<0.05),且破骨细胞相关基因TRAP、CTSK和NFATc1的mRNA表达水平均升高(均P<0.05)。骨吸收陷窝扫描电镜结果显示RANKL干预组、PTHrP+RANKL联合干预组的骨片表面均形成骨吸收陷窝;与RANKL干预组相比,PTHrP+RANKL联合干预组的骨片表面骨吸收陷窝数量显著增加(P<0.05),面积也更大。结论:PTHrP可能通过促进RANKL诱导胆脂瘤组织周围基质中的巨噬细胞分化为破骨细胞,参与中耳胆脂瘤骨破坏。 展开更多
关键词 甲状旁腺激素相关蛋白 中耳胆脂瘤 核因子κb受体活化因子配体 骨保护素 破骨细胞 巨噬细胞
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类风湿性关节炎患者外周血T细胞RANKL增加且血清Dickkopf1降低 被引量:7
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作者 陈林 李立新 +5 位作者 黄卓春 牛倩 黄凤誉 张君龙 杨滨 王兰兰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期373-377,共5页
目的探讨骨代谢相关分子在类风湿性关节炎(RA)患者骨代谢异常和疾病进展过程中的作用。方法纳入RA患者66例及健康对照20例,搜集相关临床信息。利用电化学发光免疫分析法检测受试者血清中骨钙素N端中段(OC-N-MID)和1型胶原蛋白交联羧基... 目的探讨骨代谢相关分子在类风湿性关节炎(RA)患者骨代谢异常和疾病进展过程中的作用。方法纳入RA患者66例及健康对照20例,搜集相关临床信息。利用电化学发光免疫分析法检测受试者血清中骨钙素N端中段(OC-N-MID)和1型胶原蛋白交联羧基末端肽(CTX)水平。采用液相悬浮芯片法检测Wnt抑制因子Dickkopf1(DKK1)、核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)含量。利用流式细胞术检测外周血T细胞上RANKL的水平。结果与健康对照组相比,RA患者血清中OC-N-MID、CTX含量无显著性差异,RANKL水平升高,DKK1水平降低。RA患者外周血T细胞上RANKL水平增加,尤其CD3+T细胞亚群上RANKL增加显著。结论 RA患者T细胞上RANKL水平增加,血清中RANKL含量升高,DKK1水平降低。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 骨代谢 Dickkopf1(DKK1) 核因子κb受体激活蛋白配体(rankl)
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RANKL、OPG在初发系统性红斑狼疮患者中的表达及意义 被引量:7
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作者 郑一君 胡大伟 +3 位作者 陈顺乐 鲍春德 敖文 袁敏 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2009年第1期36-39,共4页
目的研究初发系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血淋巴细胞中细胞核因子-κB受体激活剂配体(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)、护骨素(osteoprotegerin,OPG)基因mRNA的... 目的研究初发系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血淋巴细胞中细胞核因子-κB受体激活剂配体(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)、护骨素(osteoprotegerin,OPG)基因mRNA的表达情况,探讨其表达水平与初发SLE患者骨质疏松的关系。方法选择初发SLE患者45例及正常对照42例,运用实时定量PCR方法检测患者外周血淋巴细胞RANKL、OPG的mRNA表达水平。采用双能X线骨密度仪分别检测患者腰椎(L1-4)和股骨近端2个部位的骨密度,单因素分析RANKL、OPG基因mRNA表达水平与SLE患者骨密度的关系。结果SLE患者RANKL、OPG基因mRNA表达水平较正常对照组明显减低(P〈0.01);SLE患者2个部位的骨密度均低于正常对照组(P〈0.05),骨量异常发生率为28-89%,骨量异常降低的SLE患者OPG基因mRNA的表达水平比骨量正常的患者显著降低,两者间的差异有统计学意义(P〈0.01);而RANKL基因mRNA表达水平的差异无统计学意义(P〉0.05);OPG基因mRNA表达水平与初发SLE患者骨密度间存在正相关(r=0.461;P=0.001),即OPG表达水平越低,骨量减少越明显;而RANKL基因mRNA表达降低与初发SLE患者骨密度无明显相关性(r=-0.189,P=0.214);初发SLE患者疾病活动度与骨量减少、RANKL及OPG基因表达水平间不存在相关性(r=0.293,P=0.138;r=-0.099,P=0.493;,=0.138,P=0.493)。结论初发SLE患者骨量减少的发病率较正常人群增高,并且初发SLE患者体内RANKL和OPG基因表达存在异常;其中OPG表达水平的降低可能与初发SLE患者的骨量减少有密切关系。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 护骨素 细胞核因子-κb受体活化因子配体 骨密度 荧光实时定量聚合酶链反应
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运动上调GPR48-RANKL通路影响2型糖尿病小鼠破骨细胞分化 被引量:2
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作者 陈祥和 孙朋 +3 位作者 杨念恩 李世昌 徐会金 张娜娜 《成都体育学院学报》 CSSCI 北大核心 2017年第3期90-95,共6页
目的:探究T2DM小鼠OC分化变化及不同力学刺激通过GPR48-RANKL通路对T2DM小鼠OC分化的分子调控作用。方法:40只4周龄雄性C57BL/6小鼠,适应性喂养1周后随机分为T2DM造模组(30只)和正常对照组(ZC,10只)。T2DM造模组小鼠6周高脂膳食结束空腹... 目的:探究T2DM小鼠OC分化变化及不同力学刺激通过GPR48-RANKL通路对T2DM小鼠OC分化的分子调控作用。方法:40只4周龄雄性C57BL/6小鼠,适应性喂养1周后随机分为T2DM造模组(30只)和正常对照组(ZC,10只)。T2DM造模组小鼠6周高脂膳食结束空腹12 h后注射STZ,2周后检测小鼠血糖,有27只造模成功并将其随机分为T2DM对照组(TC,9只)、T2DM游泳组(TS,9只)和T2DM游泳组(TD,9只),TS和TD组小鼠分别进行8周游泳和下坡跑训练。结束后,取右侧股骨并利用RT-PCR法检测相关因子mRNA表达;取左侧胫骨并利用West-blotting法检测相关因子蛋白表达;取小鼠BMM并诱导其向OC分化,利用TRAP染液对OC染色;取右侧胫骨并利用游标卡尺检测其大小。结果:与ZC组相比,TC组GPR48、OPG、RANKL、RANK、NFATc2、CTSK的mRNA和GPR48、RANKL、RANK蛋白表达均显著变化(P<0.05或P<0.01),OC数量显著增多,远端冠状面宽度和近端冠状面宽度显著变小(P<0.05)。与TC组相比,TS组GPR48、OPG、RANKL、NFATc2、CTSKmRNA和GPR48、RANKL蛋白表达均显著变化(P<0.05或P<0.01),OC数量显著减少;TD组GPR48、OPG、RANKL、RANK、NFATc2、CTSKmRNA和GPR48、RANKL、RANK蛋白表达均显著上调(P<0.05或P<0.01),OC数量显著减少,胫骨长度和中间矢状轴宽度显著减少(P<0.05或P<0.01)。与TS组相比,TD组OPG和CTSKmRNA及GPR48、RANK、RANKL蛋白表达均显著变化(P<0.05或P<0.01),OC数量显著减少。结论:T2DM小鼠OC分化显著增强;直接作用力激活T2DM小鼠骨中GPR48-RANKL通路,进而抑制RANK及其下游靶基因表达,抑制OC分化,且其作用效果优于间接作用力。 展开更多
关键词 G蛋白偶联受体48 核因子kb受体活化因子配体 不同力学刺激 Ⅱ型糖尿病 破骨细胞
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RANKL及iNOS在牙源性角化囊肿表达的相关性 被引量:1
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作者 胡砚平 赵炜 +2 位作者 程筠 陈弈 杨海东 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期767-769,共3页
目的:了解RANKL和iNOS在牙源性角化囊肿中的表达及相互关系。方法:对经病理诊断的牙源性角化囊肿组织切片26例,用免疫组化法检测RANKL和iNOS的表达。结果:所有标本均显示RANKL阳性,阳性细胞位于牙源性角化囊肿的上皮层,其中53.8%(14例)... 目的:了解RANKL和iNOS在牙源性角化囊肿中的表达及相互关系。方法:对经病理诊断的牙源性角化囊肿组织切片26例,用免疫组化法检测RANKL和iNOS的表达。结果:所有标本均显示RANKL阳性,阳性细胞位于牙源性角化囊肿的上皮层,其中53.8%(14例)为弱阳性,46.2%(12例)为阳性;iNOS的阳性细胞位于囊肿上皮细胞的细胞质,阳性率为84.6%(22例),其中36.4%(8例)为弱阳性,63.6%(14例)为阳性。两者的表达呈正相关。结论:RANKL和iNOS在牙源性角化囊肿引起的颌骨破坏中起协同作用。 展开更多
关键词 牙源性角化囊肿 核因子kb受体活化剂配体 一氧化氮合酶
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PTH加速下颌升支截骨术后正畸牙移动过程中RANKL/OPG的表达 被引量:8
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作者 李耀 唐正龙 +2 位作者 陈小燕 王冬香 高琼 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期371-375,共5页
目的:研究甲状旁腺激素(PTH)对下颌升支截骨术后正畸牙移动过程中骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的表达。方法:48只兔建立下颌升支截骨和下颌第一磨牙正畸移动模型,随机分成2组。实验组术后间歇性注射PTH 20μg/kg,... 目的:研究甲状旁腺激素(PTH)对下颌升支截骨术后正畸牙移动过程中骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的表达。方法:48只兔建立下颌升支截骨和下颌第一磨牙正畸移动模型,随机分成2组。实验组术后间歇性注射PTH 20μg/kg,对照组注射生理盐水。免疫组化方法和荧光定量PCR检测正畸牙牙周组织中RANKL和OPG表达变化。结果:实验组正畸牙压力侧牙周组织RANKL蛋白及mRNA表达大于对照组(P<0.05),而OPG蛋白及mRNA表达均小于对照组(P<0.05)。结论:外源性PTH可通过促进正畸牙压力侧牙周组织中RANKL表达,抑制OPG的表达,加速下颌升支截骨术后正畸牙的移动。 展开更多
关键词 甲状旁腺激素(PTH) 下颌升支截骨术 正畸牙移动 核因子κb受体活化因子配体(rankl) 骨保护素(OPG)
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姜黄素对去卵巢骨质疏松模型鼠的机制研究 被引量:11
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作者 李义 张建中 宋英 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1359-1362,共4页
目的探讨姜黄素对去卵巢骨质疏松模型大鼠形态计量学的影响及血清骨保护素和核因子κβ受体活化因子配基(RANKL)的变化。方法制备去卵巢骨质疏松大鼠模型后,将动物分为假手术组、模型对照组、姜黄素治疗组(110 mg/kg)、阳性对照组(结合... 目的探讨姜黄素对去卵巢骨质疏松模型大鼠形态计量学的影响及血清骨保护素和核因子κβ受体活化因子配基(RANKL)的变化。方法制备去卵巢骨质疏松大鼠模型后,将动物分为假手术组、模型对照组、姜黄素治疗组(110 mg/kg)、阳性对照组(结合雌激素片,100μg/kg),灌胃给药,连续60 d,腹主动脉采血,ELISA法检测血清中骨保护素、RANKL水平;并取左股骨远端作骨组织形态计量学测定。结果与假手术组比较,模型对照组骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁数目、骨小梁间隙等结构参数减小;成骨细胞减少,破骨细胞、骨吸收表面增加;骨保护素降低,RANKL升高。结论姜黄素(110 mg/kg)灌胃给药可扭转上述卵巢切除所引起的骨形态计量学及血清学指标改变,但对骨形成表面和类骨质体积无明显作用,其作用机制或与调控骨保护素/RANKL/RANK系统有关。 展开更多
关键词 姜黄素 骨质疏松症 骨保护素 核因子-κb受体活化因子配体(rankl)
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脱氧腺苷拮抗甲氨蝶呤对破骨细胞的抑制作用 被引量:1
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作者 屈鹏飞 李浩渤 +4 位作者 陈彪 张睿 贾志宇 张英怀 唐全勇 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期173-177,共5页
目的:研究在类风湿关节炎治疗过程中甲氨蝶呤(MTX)治疗效果不良的机制。方法:利用骨髓细胞培养系统和抗酒石酸磷酸酶(TRAP)染色来评价破骨细胞的形成。用半定量RT-PCR来评估破骨细胞相关因子mRNA水平的表达。结果:在细胞培养中,脱氧腺苷... 目的:研究在类风湿关节炎治疗过程中甲氨蝶呤(MTX)治疗效果不良的机制。方法:利用骨髓细胞培养系统和抗酒石酸磷酸酶(TRAP)染色来评价破骨细胞的形成。用半定量RT-PCR来评估破骨细胞相关因子mRNA水平的表达。结果:在细胞培养中,脱氧腺苷(dAdo)拮抗了甲氨蝶呤对破骨细胞形成的抑制作用;咖啡因阻断了dAdo对MTX的抑制作用。半定量RT-PCR显示:MTX抑制了受体活化核因子κB配体(RANKL)的mRNA的表达,脱氧腺苷的参与不仅抑制了骨保护素(OPG)的mRNA的表达,并且在一定程度上减弱了MTX对RANKL的抑制作用。结论:在类风湿关节炎治疗中,dAdo的聚集可能导致了MTX的药效减弱;MTX与咖啡因的联合应用可能是一个潜在的治疗手段。 展开更多
关键词 破骨细胞 甲氨蝶呤 脱氧腺苷 核苷受体感受器 咖啡因 Kb细胞活化核因子 骨保护素
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黄瓜籽总黄酮对MC3T3-E1细胞增殖分化的影响 被引量:1
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作者 孙银玲 陈丽艳 +4 位作者 张蕾 丁纯洁 郑宏宇 綦菲 王伟明 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 北大核心 2022年第4期362-369,共8页
目的探讨黄瓜籽总黄酮提取物(cucumber seed flavonoids,CSF)对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(mouse embryo osteoblast precursor cells,MC3T3-E1)增殖、分化和矿化的影响,以及对富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(secreted protein acidic and r... 目的探讨黄瓜籽总黄酮提取物(cucumber seed flavonoids,CSF)对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(mouse embryo osteoblast precursor cells,MC3T3-E1)增殖、分化和矿化的影响,以及对富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(secreted protein acidic and rich in cysteine,SPARC)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)/核因子κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factor kappa B,RANK)信号通路的作用。方法通过噻唑蓝(MTT)实验、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性检测、茜素红染色,考察不同浓度CSF对MC3T3-E1细胞增殖、分化及矿化的影响;采用RT-PCR方法检测SPARC、OPG/RANKL mRNA表达水平;Western blot检测OPG/RANKL的蛋白表达量。结果CSF高、中剂量组能够明显提高细胞增殖率(P<0.05),分别为阳性对照组的1.92和1.77倍;CSF高、中剂量组ALP活性为(2.756±0.073)和(1.961±0.107)U/mL,明显高于阳性对照组(0.453±0.029)U/mL(P<0.05);CSF高、中剂量组钙化结节面积为(34.899±0.811)和(22.112±0.914)mm 2/10个视野,与阳性对照组(16.577±0.649)mm 2/10个视野相比明显增加(P<0.05);与空白组相比,CSF高、中剂量组在不同时间点均明显上调SPARC、OPG/RANKL mRNA表达量,并促进OPG/RANKL蛋白表达水平(P<0.05)。结论黄瓜籽总黄酮类成分能够促进成骨细胞MC3T3-E1的增殖、分化及矿化能力,并通过上调SPARC、OPG/RANKL的表达水平提高MC3T3-E1细胞的成骨能力。 展开更多
关键词 黄瓜籽总黄酮 小鼠胚胎成骨细胞前体细胞 富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白 骨保护素/核因子κb受体活化因子配体
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