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内蒙古鄂尔多斯地区传统发酵乳制品中乳酸菌优势菌群q-PCR定量分析 被引量:2
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作者 张冬蕾 陈红霞 +2 位作者 德亮亮 刘文俊 孙天松 《乳业科学与技术》 2015年第6期1-5,共5页
采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitive polymerase chain reaction,q-PCR)技术对从内蒙古鄂尔多斯地区采集的28份传统发酵乳制品(7份酸绵羊乳、8份酸山羊乳以及13份酸牛乳)样品中分离到的乳酸菌优势菌群L.helveticus、Leu... 采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitive polymerase chain reaction,q-PCR)技术对从内蒙古鄂尔多斯地区采集的28份传统发酵乳制品(7份酸绵羊乳、8份酸山羊乳以及13份酸牛乳)样品中分离到的乳酸菌优势菌群L.helveticus、Leu.mesenteroides及Lac.lactis subsp.lactis的数量进行比较分析。结果表明:酸山羊乳和酸牛乳中,3种优势菌属的数量关系为Leu.mesenteroides>L.helveticus>Lac.lactis subsp.lactis;酸绵羊乳中,3种优势菌属数量关系为L.helveticus>Leu.mesenteroides>Lac.lactis subsp.lactis。 展开更多
关键词 传统发酵乳制品 乳酸菌 实时荧光定量聚合酶链反应
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星状病毒核酸检测标准物质的研制 被引量:9
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作者 徐蕾蕊 魏海燕 +9 位作者 林长军 马丹 汪琦 张西萌 李丹 付溥博 刘莉 魏永新 赵晓娟 曾静 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第6期172-177,共6页
目的:研制用于食品中星状病毒核酸检测的c RNA标准物质。方法:利用基因克隆体外转录方法制备星状病毒c RNA纯品,初步定量后稀释至适宜浓度进行分装,其中一部分分装样品添加RNAsafe处理,剩余部分不做处理,制备2种标准物质样品。采用实... 目的:研制用于食品中星状病毒核酸检测的c RNA标准物质。方法:利用基因克隆体外转录方法制备星状病毒c RNA纯品,初步定量后稀释至适宜浓度进行分装,其中一部分分装样品添加RNAsafe处理,剩余部分不做处理,制备2种标准物质样品。采用实时荧光定量实时聚合酶链式反应(real-time-polymerase chain reaction,RTPCR)方法检验2种标准物质样品均匀性和稳定性。样品中RNA浓度(拷贝/μL)通过荧光定量RT-PCR和数字PCR联合定值获得,并进行不确定度分析。结果:均匀性结果显示2种样品组间精密度与组内精密度差异均无统计学意义(P〉0.05)。稳定性检验表明20-25℃10 d、4℃14 d、-20℃3个月及-80℃和液氮6个月2种样品c RNA含量无显著变化。RNAsafe(-)标准物质定值为:(1.652±0.143)×10^8拷贝/μL(-80℃)和(1.652±0.135)×10-8拷贝/μL(液氮)。结论:RNAsafe(-)标准物质样品可作为用于星状病毒核酸检测的标准物质。 展开更多
关键词 星状病毒 核酸 定量实时聚合酶链式反应 数字聚合酶链式反应 标准物质
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实时荧光定量PCR技术监测腌制麻竹笋中乳酸乳球菌动态变化 被引量:6
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作者 夏雪娟 郑炯 +2 位作者 叶秀娟 吴金松 阚建全 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第4期88-92,共5页
采用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR)技术定量监测6 g/100 m L盐质量浓度腌制麻竹笋中乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)的动态变化。经乳酸乳球菌标准菌株基因组DNA提取、... 采用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR)技术定量监测6 g/100 m L盐质量浓度腌制麻竹笋中乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)的动态变化。经乳酸乳球菌标准菌株基因组DNA提取、标准阳性质粒制备、标准曲线绘制、各时期竹笋腌制发酵液中细菌基因组DNA提取和乳酸乳球菌qRTPCR特异性扩增,对腌制液中乳酸乳球菌进行定量检测。结果表明,在腌制过程中(0-63 d),随着腌制时间的延长,乳酸乳球菌含量逐渐升高,在腌制14 d时达到最大值(4.63×10^8 copies/μL),与0 d(2.41×10^2 copies/μL)相比增加了6个数量级,而后浓度缓慢降低,在腌制63 d时浓度为5.02×10^6 copies/μL。qRT-PCR技术为定量监测腌制麻竹笋中微生物的动态变化提供了一条可靠、快速的有效途径。 展开更多
关键词 大叶麻竹笋 腌制 实时荧光定量PCR 乳酸乳球菌 动态变化
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基于转录组研究MPEF对毕赤酵母的致死机理 被引量:2
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作者 朱宁 于宁 +3 位作者 朱月 韦玉龙 张嘉颖 孙爱东 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第4期130-137,共8页
探究微芯片脉冲电场(microchip pulse electric field,MPEF)技术对毕赤酵母的致死效果和致死机理。在400 V电压和80个脉冲条件下,MPEF技术可以很好地钝化毕赤酵母。借助新一代高通量测序技术对MPEF处理前后毕赤酵母基因的表达水平进行分... 探究微芯片脉冲电场(microchip pulse electric field,MPEF)技术对毕赤酵母的致死效果和致死机理。在400 V电压和80个脉冲条件下,MPEF技术可以很好地钝化毕赤酵母。借助新一代高通量测序技术对MPEF处理前后毕赤酵母基因的表达水平进行分析,将差异表达基因在基因本体(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)数据库中进行比对。测序结果表明,MPEF组和对照组差异变化显著的基因共794个,其中上调基因361个,下调基因433个;在MPEF作用下,半胱天冬蛋白酶活性、丙酮酸转运等显著上调,而核苷酸代谢、核糖体生物合成、蛋白质转录翻译、RNA聚合酶活性、超氧化物歧化酶活性、跨膜运输调节、维生素代谢等显著下调。采用实时荧光定量聚合酶链式反应对6个差异基因进行验证,得到与转录组测序结果一致的基因表达量变化趋势。毕赤酵母体内细胞结构的破坏、基因损伤、蛋白质合成和功能受限以及酶活性的改变可能是MPEF处理导致其死亡的主要原因。 展开更多
关键词 毕赤酵母 MPEF杀菌技术 致死机理 转录组 实时荧光定量聚合酶链式反应
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定量PCR技术在食源性致病微生物检测中的应用 被引量:10
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作者 杜巍 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第4期260-263,共4页
食源性致病微生物是影响食品质量和安全的主要因素之一,建立和完善食品中致病微生物快速定量检测技术具有重要的现实意义。定量PCR能快速、敏感、特异而准确定量,深入有效地利用该技术,必将有力促进食源性致病微生物快速检测工作的发展。
关键词 定量PCR 致病微生物 快速检测
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低温诱导球等鞭金藻3011脂肪酸去饱和酶基因片段的筛选及mRNA表达分析 被引量:1
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作者 王婷 赵培 +1 位作者 李楠 王雪青 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第5期132-137,共6页
本实验通过设计特异引物序列,对经低温诱导处理的球等鞭金藻3011的脂肪酸去饱和酶基因片段进行筛选,以实时荧光定量聚合酶链式反应检测酶的表达量,探索低温对该多不饱和脂肪酸脱饱和酶基因表达量的影响。结果表明:用prime5设计包括内参... 本实验通过设计特异引物序列,对经低温诱导处理的球等鞭金藻3011的脂肪酸去饱和酶基因片段进行筛选,以实时荧光定量聚合酶链式反应检测酶的表达量,探索低温对该多不饱和脂肪酸脱饱和酶基因表达量的影响。结果表明:用prime5设计包括内参基因在内的14条引物,其中7条引物具有特异性扩增,根据扩增效果对其扩增体系进行优化。结果表明:Des4、Des5、Des6、Des8、Des9和Des12 m RNA相对最大表达量分别为7.71、11.33、42.58、22.02、73.91和16.01。随温度的降低均呈现先增加后降低的趋势。根据SPSS 19.0统计分析,6个基因在其m RNA相对表达量最大的诱导时间时,18℃的m RNA相对表达量与其在12、15、21℃3个温度条件下的相对表达量相比具有极显著差异(P<0.01)。18℃条件下诱导24 h可以有效增加Des9基因在球等鞭金藻3011中的表达。此研究结果为人为调控微藻的多不饱和脂肪酸含量提供了一条可行的方法。 展开更多
关键词 低温 脂肪酸去饱和酶 球等鞭金藻3011 实时荧光定量聚合酶链式反应 基因表达
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Cx40 mRNA expression in crista terminalis and left atrium of patients with rheumatic heart disease associated chronic atrial fibrillation
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作者 Zhao Feng Li Li +2 位作者 Xu Zhiyun Huang Xing Zhou Yong 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 2008年第1期26-30,共5页
Objectives: To explore possible mechanisms of connexin40 (Cx40) remodeling by detecting Cx40 mRNA expression of the crista terminalis and left atrium (LA) in patients with rheumatic heart disease (RHD) associat... Objectives: To explore possible mechanisms of connexin40 (Cx40) remodeling by detecting Cx40 mRNA expression of the crista terminalis and left atrium (LA) in patients with rheumatic heart disease (RHD) associated chronic atrial fibrillation (AF). Methods: Twenty patients were enrolled in this study, who underwent surgical operation for RHD-associated mitral disease, including l0 with sinus rhythms (rhythm group) and l0 with AF (AF group). Another 6 patients with non-RHD sinus rhythms were divided into the control group. A small amount of myocardial tissue was cut from the crista terminalis and the LA posterior wall during the valvular replacement operation. Cx40 mRNA expression was assayed by real-time fluorescent quantitation polymerase chain reaction (RT-PCR). Results: There was no significant difference in Cx40 mRNA expression in the crista terminalis and LA posterior wall between the 3 groups, and there was no significant difference in Cx40 mRNA expression between the crista terminalis and LA within each group. Conclusion: Based on the finding in previous studies that there existed evident remodeling of atrial Cx40 protein in patients with chronic RHD, the results of the present study suggest that the mechanism of Cx40 remodeling probably lies in the post transcriptional level. 展开更多
关键词 CARDIOLOGY Rheumatic heart disease Connexin40 Atrial fibrillation real-time fluorescent quantitation polymerase chain reaction
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