期刊文献+
共找到14篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
原发性肝癌患者红细胞CR1数量基因型及活性的检测 被引量:1
1
作者 赵书平 郭峰 +2 位作者 张乐之 叶芳耘 张俊洁 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期228-230,共3页
目的:探讨红细胞免疫功能与原发性肝癌发病之间的关系。方法:应用PCR-RFLP方法检测94例肝癌、49例肝硬化、46例乙型肝炎患者及80例正常人红细胞CR1数量基因型;同时利用ELISA方法检测红细胞CR1活性,并进... 目的:探讨红细胞免疫功能与原发性肝癌发病之间的关系。方法:应用PCR-RFLP方法检测94例肝癌、49例肝硬化、46例乙型肝炎患者及80例正常人红细胞CR1数量基因型;同时利用ELISA方法检测红细胞CR1活性,并进行比较。结果:原发性肝癌、肝硬化患者红细胞CR1数量基因型与正常人比较相差显著(P<0.05),其红细胞免疫粘附(RCIA)活性明显低于正常人(P<0.01,<0.05);乙肝、肝硬化、肝癌患者红细胞免疫复合物(IC)高于正常人(P<0.05);不同疾病同基因型组间RCI-A活性相差不显著,而在于同种疾病不同基因型间RCIA活性相差显著(P<0.05)。 展开更多
关键词 红细胞 肝肿瘤 CR1 免疫功能
在线阅读 下载PDF
G蛋白偶联受体高阶聚化和信号转导中蛋白复合体的时空动态检测进展 被引量:6
2
作者 蔡欣 白波 陈京 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期8-12,共5页
传统观点认为,G蛋白偶联受体与G蛋白、调节蛋白、GRKs以及arrestins间的相互作用是连续的,其中涉及多个蛋白质之间快速的集合和解聚。而实际上,GPCRs和相关靶分子之间的作用是通过一系列细胞内蛋白质-蛋白质相互作用的信号转导网络来实... 传统观点认为,G蛋白偶联受体与G蛋白、调节蛋白、GRKs以及arrestins间的相互作用是连续的,其中涉及多个蛋白质之间快速的集合和解聚。而实际上,GPCRs和相关靶分子之间的作用是通过一系列细胞内蛋白质-蛋白质相互作用的信号转导网络来实现的。近10年,随着一些新兴技术的出现,如FRET、BRET和BiFC,实时动态观测二个蛋白质间相互作用的研究成为热点。最近,一些技术结合的方法为从"时间、空间、动态、连续"检测更多蛋白质之间的相互作用的研究拉开新的帷幕。从横向来看,这些技术的结合可以用来研究细胞膜上3种甚至更多蛋白质的高阶寡聚化;从纵向来看,可以对细胞膜-细胞质-细胞核中所发生的信号转导网络的研究提供新的技术手段,多种技术结合所发挥作用是最近出现的几种技术所无法企及的,这对于疾病发病机制的研究及新的药物靶点的发现具有深远意义。因此,本文就一些技术的结合及其应用做一简要综述。 展开更多
关键词 蛋白质-蛋白质相互作用 高阶寡聚体 信号转导 荧光共振能量转移 生物发光共振能量转移 蛋白片段互补技术
在线阅读 下载PDF
补体结合酶联免疫吸附试验方法的建立 被引量:3
3
作者 毛开荣 王楠 +5 位作者 李文平 蒋颖 程君生 刘轶秋 蒋玉文 丁家波 《中国兽药杂志》 2011年第11期4-8,共5页
为改进免疫学诊断技术的准确性,研究了一种基于补体结合的免疫学检测新技术———补体结合酶联免疫吸附试验(CF-ELISA)。CF-ELISA技术采用酶标记抗菊糖纯化豚鼠补体C3抗体及其酶显色系统作为补体参与反应的指示系统,用ELISA方法进行补... 为改进免疫学诊断技术的准确性,研究了一种基于补体结合的免疫学检测新技术———补体结合酶联免疫吸附试验(CF-ELISA)。CF-ELISA技术采用酶标记抗菊糖纯化豚鼠补体C3抗体及其酶显色系统作为补体参与反应的指示系统,用ELISA方法进行补体结合试验。经对布氏菌病抗体检测的初步试验结果显示,CF-ELISA技术可检测到0.01 IU的布氏菌病抗体,灵敏度与间接酶联免疫吸附试验(iELISA)相当,是虎红平板凝集试验(RBPT)试管凝集试验(SAT)的5 000倍、补体结合试验(CFT)的10 000倍。对349份确诊布氏菌病感染群牛、羊血清的检测结果显示,CF-ELISAi、ELISA、CFT、SAT、RBPT的阳性率分别为35.82%3、6.39%、31.81%、30.09%、36.1%,CF-ELISA与iELISA、CFT、SAT、RBPT的阳性符合率分别为:98.4%、88.8%、80.0%、90.6%。CF-ELISAi、ELISA、CFT、SAT、RBPT对490份布氏菌病阴性群牛、羊血清的阴性率分别为100%、99.6%、100%、99.4%、99.8%,CF-ELISA与iELISA、CFT、SAT、RBPT的阴性符合率分别为:99.6%1、00%、99.4%、99.8%。研究表明,CF-ELISA是具有高特异性和高敏感性的布氏菌病免疫学检测技术。 展开更多
关键词 CF-ELISA 布氏菌病 敏感性 特异性
在线阅读 下载PDF
双分子荧光互补试验研究水稻NH1家族蛋白之间相互作用 被引量:1
4
作者 白薇 孙海莲 +3 位作者 Mawsheng Chern Randy Ruan Pam Ronald 樊明寿 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2011年第2期30-34,共5页
NPR1(Non-expresser of pathogenesis related genes 1)是水杨酸(Salicilic acid,SA)介导的系统获得抗性(Sys-temic aquired resistance,SAR)的关键调控因子,在水稻中过量表达拟南芥NPR1和水稻NH1/OsNPR1(NPR1 homo-logue 1)(NPR1的同源... NPR1(Non-expresser of pathogenesis related genes 1)是水杨酸(Salicilic acid,SA)介导的系统获得抗性(Sys-temic aquired resistance,SAR)的关键调控因子,在水稻中过量表达拟南芥NPR1和水稻NH1/OsNPR1(NPR1 homo-logue 1)(NPR1的同源物)可增强抗病性。水稻基因组中还有4个NPR1旁系同源物(Paralog),为NH1的家族蛋白。本试验利用双分子荧光互补技术(Bimolecular Fluorescence Complementation,BiFC,or split YFP)研究了水稻NH1家族蛋白之间在活体内的相互作用,发现除NH2外,NH1、NH3、NH4和NH5都会和自身的蛋白互作,产生荧光信号,并且它们还会和家族成员的其他蛋白相互结合产生荧光信号。 展开更多
关键词 水稻 NH1家族蛋白 双分子荧光互补试验 蛋白互作
在线阅读 下载PDF
荧光素酶互补法对谷子中SiPKS32/SiCaBP5的互作研究 被引量:1
5
作者 潘教文 李丹 +4 位作者 吴建国 李臻 王庆国 管延安 刘炜 《山东农业科学》 2018年第10期1-5,12,共6页
盐害极大影响了作物的产量和品质。SOS信号途径作为植物耐盐性的重要信号通路,主要包括三类基因,即SOS1、SOS2和SOS3,其中SOS2和SOS3复合物的形成,对于激活SOS1从而行使SOS信号通路维持离子稳态及参与植物抗盐胁迫的功能具有重要作用。... 盐害极大影响了作物的产量和品质。SOS信号途径作为植物耐盐性的重要信号通路,主要包括三类基因,即SOS1、SOS2和SOS3,其中SOS2和SOS3复合物的形成,对于激活SOS1从而行使SOS信号通路维持离子稳态及参与植物抗盐胁迫的功能具有重要作用。谷子作为抗逆耐贫瘠作物,解析其是否存在SOS信号途径及其在盐胁迫下的响应模式具有重要意义。本研究参考已知SOS2、SOS3基因序列,在谷子中同源克隆SOS2基因SiPKS32、SOS3基因SiCaBP5,并进一步构建了SiPKS32、SiCaBP5基因与荧光素酶片段cLUC、nLUC的融合表达载体,利用烟草瞬时荧光素酶互补系统分析基因互作情况。结果显示,SiPKS32与SiCaBP5共侵染烟草可产生荧光,基因间存在互作。该结果为探索谷子中是否存在SOS信号通路及其调控网络,进而为利用基因工程手段培育抗逆作物新品种奠定基础。 展开更多
关键词 谷子 盐胁迫 SOS信号途径 SiPKS32/SiCaBP5复合物 荧光素酶互补法
在线阅读 下载PDF
选择HBV DNA多聚酶TP区VH抗体的一种新方法:蛋白片段互补法
6
作者 于俊岩 兰林 +1 位作者 王宇明 丁世涛 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期551-554,共4页
目的:用PCA(Prote in fragm ent comp lem entation assay,PCA,蛋白片段互补方法)选择HBV(Hepatitis B virus)多聚酶TP(Term inal prote in,TP,末端蛋白)区VH(Variab le fragm ents of heavy chain,VH,重链可变区)抗体。方法:用HepG2.2... 目的:用PCA(Prote in fragm ent comp lem entation assay,PCA,蛋白片段互补方法)选择HBV(Hepatitis B virus)多聚酶TP(Term inal prote in,TP,末端蛋白)区VH(Variab le fragm ents of heavy chain,VH,重链可变区)抗体。方法:用HepG2.2.15细胞分泌的HBV的多聚酶TP区作为抗原,用PCA方法进行VH抗体选择。抗原与抗体基因分别与二氢叶酸还原酶(DHFR)的两部分相连。特异性抗原、抗体相互识别,分别与他们相连的酶基因就会接触而恢复完整的DHFR酶活性,细菌得以存活。结果:对HBV DNA多聚酶TP区进行抗体选择,用PCA方法从抗体库中选择出3个对应抗体。3个TP区抗原特异性抗体有不同的氨基酸序列。结论:对HBV DNA多聚酶TP区进行抗体选择,用PCA方法可以从抗体库中较为简便的选择出对应抗体。PCA可以作为一个从抗体库中选择特异性抗体的强有力方法。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 抗体 PCA 甲氧苄氨嘧啶
在线阅读 下载PDF
应用酵母双杂交方法筛选与猪瘟病毒N^(pro)蛋白相互作用的宿主蛋白
7
作者 董泓 李素 +6 位作者 贺番 廖亚金 何文瑞 孙元 罗玉子 胡永浩 仇华吉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期755-758,共4页
为研究猪瘟病毒(CSFV)与宿主细胞间的相互作用,本研究采用酵母双杂交方法以猪瘟病毒Npro蛋白为诱饵,从猪外周血单个核细胞(PBMC)cDNA表达文库中筛选与之相互作用的蛋白,经共转化试验表明,共筛选到12个与Npro蛋白相互作用的宿主蛋白,应用... 为研究猪瘟病毒(CSFV)与宿主细胞间的相互作用,本研究采用酵母双杂交方法以猪瘟病毒Npro蛋白为诱饵,从猪外周血单个核细胞(PBMC)cDNA表达文库中筛选与之相互作用的蛋白,经共转化试验表明,共筛选到12个与Npro蛋白相互作用的宿主蛋白,应用Cytoscape 2.8.2软件绘制了蛋白质间相互作用关系图,根据GO分析结果,这些蛋白分别参与细胞代谢、细胞生长、免疫等过程,经双分子荧光互补(BiFC)试验表明筛得的部分宿主蛋白与CSFV Npro具有相互作用。本研究中筛选得到的蛋白质对CSFV复制的影响有待进一步深入研究。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 Npro蛋白 酵母双杂交试验 双分子荧光互补试验
在线阅读 下载PDF
人衰变加速因子在CHO细胞的表达及其衰变加速活性研究
8
作者 郭波 郑萍 +5 位作者 马正伟 许桂莲 李华 谢佩蓉 吴玉章 邹强 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期576-579,共4页
目的 获得稳定表达人衰变加速因子 (humandecay acceleratingactivity ,hDAF)的中国仓鼠卵巢 (Chineseham sterovary ,CHO)细胞系 ,观察在补体活化情况下 ,hDAF对异种细胞的保护作用。方法 构建真核表达载体DAF pcDNA3 .1,用脂质体转... 目的 获得稳定表达人衰变加速因子 (humandecay acceleratingactivity ,hDAF)的中国仓鼠卵巢 (Chineseham sterovary ,CHO)细胞系 ,观察在补体活化情况下 ,hDAF对异种细胞的保护作用。方法 构建真核表达载体DAF pcDNA3 .1,用脂质体转染法将其导入CHO细胞 ,有限稀释法筛选稳定表达hDAF的单细胞克隆 ,流式细胞仪检测hDAF的表达 ,C3沉积实验和51 Cr释放法测定其促补体衰变活性。结果 成功构建了真核表达载体DAF pcDNA3 .1,并获得了表达hDAF的单细胞克隆 ,表达hDAF的CHO能减少补体C3的沉积 ,减弱补体的杀伤作用。结论 获得在细胞膜上稳定表达具功能活性的hDAF的CHO克隆 ,为进一步研究其结构与功能的关系准备了条件。 展开更多
关键词 补体 衰变加速因子 CHO细胞 ^51Cr释放法
在线阅读 下载PDF
牙鲆补体C3 mRNA杂交保护检测技术
9
作者 张峰 徐晓宇 +1 位作者 张莉 吴迪 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第S1期45-48,共4页
应用杂交保护检测(Hybridization Protection Assay,HPA)技术研究建立检测补体C3 mRNA方法。选择牙鲆Paralichthys olivaceus补体C3 mRNA(Genebank accession no.AB021653)设计为长度24个碱基寡核苷酸片断的AE标记寡核苷酸探针(位置=232... 应用杂交保护检测(Hybridization Protection Assay,HPA)技术研究建立检测补体C3 mRNA方法。选择牙鲆Paralichthys olivaceus补体C3 mRNA(Genebank accession no.AB021653)设计为长度24个碱基寡核苷酸片断的AE标记寡核苷酸探针(位置=2327-2350,5 CGG GAG TTG TTTG#TG GGTTGA CAC 3),寡核苷酸探针合成过程中在#位加入烷基胺连接臂连接AE。人工合成与探针互补的标准靶寡核苷酸(5 GTGTCA ACC CAC AAA CAA CTC CCG 3)。AE标记寡核苷酸探针活性为6×104RLU/pmol。杂交时间为50 min时,在1×10-3~4×102pmol/mL探针浓度范围内,AE标记探针浓度与发光值之间具有良好的线性关系(R2=0.9996);标准靶寡核苷酸标准曲线说明,在标准靶寡核苷酸浓度为0~320 pmol/mL(含量为0~3200 fmol)时,具有良好的线性关系(R2=0.9922)。 展开更多
关键词 杂交保护检测 化学发光 吖啶酯 寡核苷酸探针 补体C3mRNA
在线阅读 下载PDF
快速凝集试验与补体结合试验检测牛边缘无浆体感染的效果对比 被引量:1
10
作者 张肖正 王君玮 +2 位作者 陈忠国 孟广校 吴三 《动物检疫》 1994年第1期17-18,共2页
从138份血清样品的比较试验结果显示,快速凝集试验(RCA)比补体结合试验(CF)检测边缘无浆体感染的敏感性高(88.9%:81.5%),假阴性率低(11.1%:18.5%),两者都具有良好的特异性和预测性,检测阳性符合率高,快速凝集试... 从138份血清样品的比较试验结果显示,快速凝集试验(RCA)比补体结合试验(CF)检测边缘无浆体感染的敏感性高(88.9%:81.5%),假阴性率低(11.1%:18.5%),两者都具有良好的特异性和预测性,检测阳性符合率高,快速凝集试验对一次感染牛的持续检出阳性时间更长久(303天:92天) 展开更多
关键词 凝集试验 边缘无浆体 牛病 检疫
在线阅读 下载PDF
补体4的免疫共振散射光谱分析
11
作者 梁爱惠 王素梅 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第4期891-894,共4页
在pH7.3Na2HPO4-KH2PO4缓冲溶液中及聚乙二醇-6000存在下,补体4(C4)与羊抗人补体4(goat anti-human C4)通过库力引力、范德华力、氢键结合力、疏水等作用力发生免疫反应,可聚集形成疏水的免疫复合物微粒,该微粒在350,390,440nm有3个共... 在pH7.3Na2HPO4-KH2PO4缓冲溶液中及聚乙二醇-6000存在下,补体4(C4)与羊抗人补体4(goat anti-human C4)通过库力引力、范德华力、氢键结合力、疏水等作用力发生免疫反应,可聚集形成疏水的免疫复合物微粒,该微粒在350,390,440nm有3个共振散射峰。激光散射法测得免疫复合物微粒的平均粒径为3440.0nm。分别研究了pH、羊抗人补体4和PEG浓度、温育时间和温度、共存物质的影响。在最佳条件下,补体4(C4)浓度在0.18~2.60μg.mL-1范围内与350,390nm处的散射强度均呈线性关系,其回归方程、相关系数、检出限分别为ΔI350nm=28.23c+9.17,ΔI390nm=31.36c+11.08,0.9939,0.9923,0.084μg.mL-1,0.11μg.mL-1。该法用于分析人血清中补体4(C4),结果与免疫透射比浊法结果一致,相对标准偏差在1.88%~4.36%,具有简便快速、灵敏度高、选择性好等特点,在临床检验上具有一定的应用价值。 展开更多
关键词 补体4(C4) 免疫共振散射光谱法
在线阅读 下载PDF
植物甘油脂合成途径第一步酰化反应的研究进展 被引量:8
12
作者 韩妮莎 丁硕 +5 位作者 郑月萍 魏琳燕 柯星星 刘宏波 刘娟 郑志富 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期699-711,共13页
甘油脂是生物膜的主要组成成分,参与能量与信号转导、蛋白转运等一系列生物学过程,在植物的生长发育过程中发挥着重要作用。3-磷酸甘油酰基转移酶(Glycerol-3-phosphate acyltransferase,GPAT)催化磷脂酸从头生物合成的第一步关键反应,... 甘油脂是生物膜的主要组成成分,参与能量与信号转导、蛋白转运等一系列生物学过程,在植物的生长发育过程中发挥着重要作用。3-磷酸甘油酰基转移酶(Glycerol-3-phosphate acyltransferase,GPAT)催化磷脂酸从头生物合成的第一步关键反应,磷脂酸不仅是膜脂与中性三酰甘油的合成前体,同时还是一个重要的信号分子。然而,目前仍不清楚植物中GPAT酶究竟由多少基因编码的,造成这种现象的一个主要原因是缺乏可简易且有效地鉴定此酶的方法。本文分析总结甘油脂生物合成及GPAT基因克隆与鉴定的研究进展;随后介绍GPATs的鉴定方法,特别是酵母遗传互补法的建立与运用;最后对甘油脂合成途径第一步反应的未来研究进行展望。 展开更多
关键词 甘油脂代谢 3-磷酸甘油酰基转移酶 遗传互补 酶学分析 植物 酵母
在线阅读 下载PDF
蛋白片段互补分析方法及其应用 被引量:2
13
作者 张洁 柳长柏 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期67-71,共5页
蛋白片段互补分析技术是近年发展起来的一种分析蛋白质-蛋白质相互作用的新方法。典型的蛋白片段互补分析技术已经成功地利用二氢叶酸还原酶,β-内酰胺酶,绿色荧光蛋白以及荧光素酶片段互补进行胞内蛋白分子相互作用研究。这一技术不仅... 蛋白片段互补分析技术是近年发展起来的一种分析蛋白质-蛋白质相互作用的新方法。典型的蛋白片段互补分析技术已经成功地利用二氢叶酸还原酶,β-内酰胺酶,绿色荧光蛋白以及荧光素酶片段互补进行胞内蛋白分子相互作用研究。这一技术不仅可以动态、定位分析细胞内蛋白质分子相互作用、绘制细胞内信号传导、蛋白质生物化学网络,还可以应用到蛋白质文库、cDNA文库和高通量药物筛选等。综述了蛋白片段互补分析技术的原理、方法及其应用。 展开更多
关键词 蛋白相互作用 蛋白片段互补分析 高通量药物筛选
在线阅读 下载PDF
蛋白质/多肽片段互补分析法检测alpha-突触核蛋白在细胞中的聚集
14
作者 郑媛 渠静 +3 位作者 任晓曦 郑焱 杨慧 张建亮 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1374-1378,共5页
Alpha-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)聚集是引起帕金森病(Parkinson’s disease,PD)发生发展主要原因。本文用蛋白质/多肽片段互补分析法(protein-fragment complementation assays,PCAs)检测α-syn在细胞内的聚集。分别构建融合α-... Alpha-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)聚集是引起帕金森病(Parkinson’s disease,PD)发生发展主要原因。本文用蛋白质/多肽片段互补分析法(protein-fragment complementation assays,PCAs)检测α-syn在细胞内的聚集。分别构建融合α-syn与人工改造的荧光素酶human Gaussiaprinceps luciferase(h GLuc)蛋白N端或C端蛋白的质粒,共转入人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞,通过检测酶活性来确定野生型(wild type,WT)及A53T突变体α-syn在细胞中的聚集情况。结果表明WT和A53T突变α-syn都能使荧光素酶活性增强,而且与野生型α-syn相比,突变体A53T的荧光素酶活性更强,说明二者都能聚集,而且A53T聚集程度高于WT。PCAs法具有高灵敏度,不仅能检测α-syn在细胞内的聚集,而且能反映其聚集的程度,为研究帕金森病提供了研究思路和相应药物筛选的有效工具。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 聚集 蛋白质/多肽片段互补分析法 荧光素酶
在线阅读 下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部