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基于新型昆虫杆状病毒flashBACTM表达系统表达鸭腺病毒3型Fiber-1蛋白
1
作者 肖雅清 孟凯 +4 位作者 董雯雯 袁小远 李桂明 刘明超 翟向和 《山东农业科学》 北大核心 2025年第7期139-144,共6页
鸭腺病毒3型(DAdV-3)近些年来被多地报道,给我国的养禽业带来较大损失。纤突蛋白(Fiber)在介导鸭腺病毒感染和诱导体液免疫中发挥着重要作用。本研究基于昆虫杆状病毒flashBACTM表达系统对DAdV-3的Fiber-1蛋白进行重组表达,获得目的蛋... 鸭腺病毒3型(DAdV-3)近些年来被多地报道,给我国的养禽业带来较大损失。纤突蛋白(Fiber)在介导鸭腺病毒感染和诱导体液免疫中发挥着重要作用。本研究基于昆虫杆状病毒flashBACTM表达系统对DAdV-3的Fiber-1蛋白进行重组表达,获得目的蛋白。因该系统将LacZ基因整合到苜蓿银纹蛾核型多角体病毒(AcMNPV),重组后开启LacZ表达,其借助蓝白斑实现对阳性病毒的筛选,免除空斑筛选过程,大大节省实验时间;通过Western blot验证Fiber-1蛋白在昆虫Sf9细胞中成功表达。本研究结果可为深入探究Fiber-1蛋白在DAdV-3感染机制中的作用以及相关的生物制品制备奠定基础。 展开更多
关键词 昆虫杆状病毒表达系统 鸭腺病毒3型 蛋白表达 fiber-1
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血清4型禽腺病毒fiber-2基因在昆虫细胞中的表达及其免疫原性分析 被引量：7
2
作者 梅梅 陆吉虎 +3 位作者 张雪花 唐应华 卢宇 侯继波 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1251-1255,共5页
为研究I群血清4型禽腺病毒(FAdV-4)fiber-2蛋白的免疫原性,本研究利用杆状病毒表达系统构建了含fiber-2基因的重组杆状病毒穿梭载体,将其转染Sf9细胞后获得重组杆状病毒rBA-fiber-2,并采用悬浮放大工艺表达重组fiber-2蛋白。通过间接免... 为研究I群血清4型禽腺病毒(FAdV-4)fiber-2蛋白的免疫原性,本研究利用杆状病毒表达系统构建了含fiber-2基因的重组杆状病毒穿梭载体,将其转染Sf9细胞后获得重组杆状病毒rBA-fiber-2,并采用悬浮放大工艺表达重组fiber-2蛋白。通过间接免疫荧光试验(IFA)和western blot鉴定重组蛋白fiber-2的表达,并采用免疫琼扩试验(AGP)检测fiber-2蛋白效价。以fiber-2蛋白作为免疫原制备油乳剂疫苗免疫SPF鸡进行免疫效力试验,分别设fiber-2疫苗组、fiber-2疫苗配伍免疫增强剂CVCVA5组及生理盐水对照组。免疫后14 d、21 d和28 d采集SPF鸡外周血分离血清,利用AGP法检测其血清抗体水平。IFA结果显示fiber-2蛋白在昆虫细胞中获得表达;western blot结果显示该蛋白能够与FAdV-4阳性血清发生特异性免疫反应,蛋白分子量约62 ku;AGP结果显示fiber-2蛋白AGP效价达1:16。免疫后14 d两组实验组鸡均可检测到特异性琼扩抗体,免疫后28 d fiber-2疫苗组SPF鸡抗体AGP效价平均值可达1:24,配伍CVCVA5疫苗组SPF鸡抗体AGP效价平均值可达1:104。以上结果表明fiber-2蛋白具有一定的免疫原性,免疫后可诱导机体产生特异性抗体,本研究为进一步研制FAdV-4亚单位疫苗提供实验依据。 展开更多
关键词 血清4型禽腺病毒 纤突蛋白 表达 免疫原性
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我国主要流行的4种血清型禽腺病毒-Ⅰ群Fiber蛋白的交叉中和研究 被引量：4
3
作者 栾庆东 孙举 +3 位作者 刘均华 张本清 尹燕博 王建琳 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2020年第5期214-219,共6页
为确定FAdV-4、FAdV-8a、FAdV-8b、FAdV-11这4个血清型FAdV间存在的交叉保护是否与病毒的纤维蛋白(Fiber)有关,制备4个血清型FAdV Fiber蛋白抗血清,在细胞水平研究其对本血清型和其他3种血清型病毒感染的中和作用。针对4个血清型FAdV的F... 为确定FAdV-4、FAdV-8a、FAdV-8b、FAdV-11这4个血清型FAdV间存在的交叉保护是否与病毒的纤维蛋白(Fiber)有关,制备4个血清型FAdV Fiber蛋白抗血清,在细胞水平研究其对本血清型和其他3种血清型病毒感染的中和作用。针对4个血清型FAdV的Fiber基因设计引物,进行PCR扩增,构建pCold-FAdV-Fiber重组质粒,分别转入BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE和Western Blot鉴定表达产物;表达产物纯化后免疫SPF鸡,采集抗血清,通过LMH细胞研究不同血清型Fiber蛋白血清对各血清型FAdV感染的中和作用。PCR扩增结果显示,FAdV-4、FAdV-8a、FAdV-8b、FAdV-11 Fiber基因产物大小分别为1440,1575,1566,1719 bp;重组菌在16℃培养条件下,1.0 mmol/L的IPTG诱导24 h可溶性重组蛋白的表达量最高;SDS-PAGE和Western Blot结果显示,FAdV-4、FAdV-8a、FAdV-8b、FAdV-11表达的蛋白分子量大小分别为102,107,107,112 ku;中和结果显示,FAdV-4、FAdV-8b和FAdV-11 Fiber蛋白抗血清能中和自身血清型FAdV对细胞的感染,不能中和其他血清型FAdV的感染,而FAdV-8a Fiber蛋白抗血清不能中和这4种血清型中的任何一种血清型FAdV的感染。综上,Fiber蛋白与4个血清型FAdV全病毒之间存在的交叉保护无直接关系。 展开更多
关键词 FAdV fiber蛋白 原核表达 交叉中和
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1群4型禽腺病毒的分离鉴定及Fiber-2蛋白的免疫效果分析 被引量：7
4
作者 程增青 范根成 +4 位作者 窦小龙 刘红祥 申茂欣 徐全刚 杨汉春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期2463-2471,共9页
旨在鉴定河南某蛋鸡场以心包积液、肝肿大出血为特征的病原,并对病原的免疫原性蛋白进行表达和效果分析。本研究采用病毒分离、血清学试验、PCR检测及测序分析、动物回归试验、大肠杆菌表达、蛋白纯化、攻毒保护等方法进行研究。结果显... 旨在鉴定河南某蛋鸡场以心包积液、肝肿大出血为特征的病原,并对病原的免疫原性蛋白进行表达和效果分析。本研究采用病毒分离、血清学试验、PCR检测及测序分析、动物回归试验、大肠杆菌表达、蛋白纯化、攻毒保护等方法进行研究。结果显示,所采集样品经卵黄囊途径接种7日龄SPF鸡胚,盲传2代后获得病毒;PCR可扩增出约900 bp的Hexon基因片段,经测序,其Hexon基因与血清C4型毒株的相似性为100%;血清中和试验结果表明分离的禽腺病毒为1群血清4型禽腺病毒,命名为HN-ZK株。该毒株可在鸡胚原代肝细胞上产生CPE,病毒含量可达10^(7.5)TCID50·0.1 mL^-1。动物回归试验表明,该分离毒株可使35日龄SPF鸡100%(10/10)表现出发病症状。以分离株的DNA为模板,利用大肠杆菌原核表达系统,获得相对分子质量约为33 ku的Fiber-2蛋白,离心浓缩、纯化后蛋白含量为300 mg·mL^-1。将表达的Fiber-2蛋白用不同的剂量免疫SPF鸡,结果表明20μg·只^-1的剂量能使鸡完全抵抗强毒株的攻击,说明Fiber-2蛋白具有较好的免疫原性。本研究可为禽心包积水-肝炎综合征的诊断和基因工程亚单位疫苗的研制提供数据参考。 展开更多
关键词 I群禽腺病毒 鉴定 fiber-2蛋白 亚单位疫苗
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血清1型Ⅰ群禽腺病毒Fiber-2蛋白的表达及其中和作用研究 被引量：2
5
作者 高永娟 栾庆东 +6 位作者 曲雪婷 原昆鹏 王潘龙 赵梓靓 卢艳敬 尹燕博 王建琳 《中国家禽》 北大核心 2022年第8期35-41,共7页
为研究血清1型Ⅰ群禽腺病毒(FAdV-1)的Fiber-2蛋白对FAdV-1在细胞水平上的中和作用,研究根据FAdV-1亚型Fiber-2基因序列设计引物,进行Fiber-2全基因序列PCR扩增并构建重组质粒,转入BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,表达产物纯化后免... 为研究血清1型Ⅰ群禽腺病毒(FAdV-1)的Fiber-2蛋白对FAdV-1在细胞水平上的中和作用,研究根据FAdV-1亚型Fiber-2基因序列设计引物,进行Fiber-2全基因序列PCR扩增并构建重组质粒,转入BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,表达产物纯化后免疫SPF鸡制备抗血清,通过鸡LMH细胞研究Fiber-2蛋白抗血清对FAdV-1感染的中和作用。结果显示,FAdV-1 Fiber-2基因扩增产物大小为1 233 bp,构建了pCold-FAdV-1-Fiber-2重组质粒,表达的FAdV-1 Fiber-2蛋白分子量大小为105 ku;FAdV-1 Fiber-2蛋白的抗血清孵育LMH细胞后,与阳性对照组相同第4天细胞出现病变,而阴性对照组细胞均无病变。结果表明,FAdV-1 Fiber-2蛋白抗血清在体外试验中不能中和本血清型病毒的感染,FAdV-1 Fiber-2蛋白作为亚单位疫苗的研究存在风险。 展开更多
关键词 血清1型Ⅰ群禽腺病毒 fiber-2蛋白 LMH细胞 中和作用
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禽腺病毒4型Fiber-2蛋白原核表达及间接ELISA的构建 被引量：1
6
作者 潘静 孟凯 秦晓冰 《山东农业科学》 北大核心 2021年第11期100-105,共6页
禽腺病毒(FAdV)是世界范围内流行的禽类常见传染病病原,2015年暴发的由新型血清4型禽腺病毒(FAdV-4)引起的急性传染病,给养殖户造成巨大的经济损失。为做到早期诊断和检测,并防控、净化该病毒病,本试验利用Fiber-2蛋白建立了检测FAdV-4... 禽腺病毒(FAdV)是世界范围内流行的禽类常见传染病病原,2015年暴发的由新型血清4型禽腺病毒(FAdV-4)引起的急性传染病,给养殖户造成巨大的经济损失。为做到早期诊断和检测,并防控、净化该病毒病,本试验利用Fiber-2蛋白建立了检测FAdV-4的ELISA方法。根据禽腺病毒4型SDJN0105株Fiber-2基因的核苷酸序列,经序列优化后合成1 440 bp基因序列,连入pET-30a(+)载体构建pET-30a(+)-Fiber-2重组质粒,在BL21(DE3)感受态细胞中诱导表达Fiber-2蛋白,利用亲和层析柱纯化重组Fiber-2蛋白,经SDS-PAGE和Western-Blot鉴定后,以Fiber-2蛋白作为包被抗原,通过反应条件优化建立检测禽腺病毒4型抗体的间接ELISA方法。结果表明,获得了以上清形式表达的重组Fiber-2蛋白,Western-Blot鉴定表明重组Fiber-2蛋白具有良好的免疫学活性;重组Fiber-2蛋白的最佳包被浓度为4.0μg/mL,待检血清最佳稀释度为1∶400;该方法特异性好,仅与禽腺病毒4型阳性抗体发生反应,敏感度可达1∶6400;批内和批间重复性变异系数均小于5%;构建的间接ELISA试剂盒在4℃环境下放置12个月仍然有效。本研究建立的禽腺病毒4型抗体间接ELISA检测方法特异性强、敏感性高、重复性好、保质期长,可用于禽腺病毒4型的监测和流行病学调查。 展开更多
关键词 禽腺病毒4型 fiber-2蛋白 原核表达 间接ELISA
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Ⅰ群禽腺病毒(4型)Fiber-2蛋白亚单位疫苗免疫效果研究 被引量：6
7
作者 杜东颖 盛东北 +7 位作者 霍环艳 段佳蕾 王孟月 谭镜明 陈宇明 胡鹏辉 刘武杰 田克恭 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2022年第6期77-82,共6页
为评价Ⅰ群禽腺病毒(4型)Fiber-2重组蛋白亚单位疫苗的免疫保护效果,本研究利用FAV-HN株Fiber-2基因构建pET-30a-Fiber-2重组质粒,转化至BL21感受态诱导表达Fiber-2重组蛋白;Fiber-2蛋白纯化后制备不同抗原含量的亚单位疫苗,免疫SPF鸡... 为评价Ⅰ群禽腺病毒(4型)Fiber-2重组蛋白亚单位疫苗的免疫保护效果,本研究利用FAV-HN株Fiber-2基因构建pET-30a-Fiber-2重组质粒,转化至BL21感受态诱导表达Fiber-2重组蛋白;Fiber-2蛋白纯化后制备不同抗原含量的亚单位疫苗,免疫SPF鸡进行免疫效力评价。结果表明,Fiber-2蛋白部分为可溶性表达,纯化后纯度约90%,AGP效价达1∶64。亚单位疫苗抗原含量AGP效价不低于1∶2时,SPF鸡免疫后第21 d AGP抗体10/10阳性,可抵抗Ⅰ群禽腺病毒(4型)强毒株的攻击,提供100%的免疫攻毒保护。 展开更多
关键词 禽腺病毒 fiber-2蛋白 亚单位疫苗 免疫攻毒保护
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血清4型禽腺病毒Fiber-2蛋白截短表达及单克隆抗体制备 被引量：8
8
作者 韦悠 谢芝勋 +6 位作者 邓显文 李小凤 谢志勤 范晴 张艳芳 黄娇玲 王盛 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期2341-2349,共9页
【目的】获得截短表达的血清4型禽腺病毒(FAdV-4)Fiber-2重组蛋白及其单克隆抗体,为建立快速灵敏的病毒检测方法提供基础材料。【方法】对Fiber-2基因序列进行密码子优化,截取Fiber-2蛋白抗原性集中片段,PCR扩增其基因序列,连接至pET-32... 【目的】获得截短表达的血清4型禽腺病毒(FAdV-4)Fiber-2重组蛋白及其单克隆抗体,为建立快速灵敏的病毒检测方法提供基础材料。【方法】对Fiber-2基因序列进行密码子优化,截取Fiber-2蛋白抗原性集中片段,PCR扩增其基因序列,连接至pET-32a(+)构建原核表达载体。将表达的重组蛋白进行纯化,并通过Western blotting验证其在大肠杆菌中的表达情况。将重组蛋白免疫BALB/c小鼠后取脾细胞与SP2/0细胞融合,利用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法筛选阳性细胞株,再利用秋水仙素裂解法、间接ELISA法和间接免疫荧光法(IFA)对其进行鉴定。【结果】成功构建Fiber-2基因截短片段的原核表达系统,获得大小约为67 kD的Fiber-2截短蛋白,以包涵体的形式出现,经纯化后可获得单一的特异性条带,经Western blotting鉴定证明其可与FAdV-4阳性血清结合从而产生一条特异性条带。经过4次亚克隆后筛选到5株能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株(2C2、4F6、5A5、6G10和10B5),其抗体分泌稳定性、特异性好,诱生的细胞上清液抗体效价为1:1600~1:6400,腹水抗体效价为1:320000~1:1280000,秋水仙素裂解检测染色体数目为94~110条。2C2、4F6和10B5杂交瘤细胞分泌的抗体重链为IgG2b亚型,轻链为Kappa链;5A5和6G10杂交瘤细胞分泌的抗体重链为IgG1亚型,轻链为Kappa链。5株杂交瘤细胞株与感染FAdV-4的鸡肝癌上皮细胞系(LMH)进行IFA检测,结果均为阳性。【结论】制备的Fiber-2截短重组蛋白及单克隆抗体具有良好的反应原性和特异性,可用于FAdV-4病毒检测试剂盒研发。 展开更多
关键词 血清4型禽腺病毒(FAdV-4) fiber-2 基因克隆 重组蛋白 单克隆抗体 Western blotting
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Ⅰ群禽腺病毒(4型)Fiber-2蛋白亚单位疫苗与全病毒灭活疫苗的免疫效果比较 被引量：2
9
作者 杜东颖 霍环艳 +5 位作者 田辉 王璐璐 王孟月 洪素梅 高晓静 田克恭 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第3期67-73,共7页
为了比较不同抗原含量的Ⅰ群禽腺病毒(4型)Fiber-2蛋白亚单位疫苗与全病毒灭活疫苗的免疫效力差异,本研究制备不同抗原含量的亚单位疫苗和全病毒灭活疫苗,采用超低免疫剂量20μL/只免疫SPF鸡,免疫21 d后攻毒,通过死亡率、临床症状、大... 为了比较不同抗原含量的Ⅰ群禽腺病毒(4型)Fiber-2蛋白亚单位疫苗与全病毒灭活疫苗的免疫效力差异,本研究制备不同抗原含量的亚单位疫苗和全病毒灭活疫苗,采用超低免疫剂量20μL/只免疫SPF鸡,免疫21 d后攻毒,通过死亡率、临床症状、大体剖检病变、免疫组化和泄殖腔拭子排毒等进行免疫效力比较。试验结果表明,亚单位疫苗抗原含量AGP效价不低于1∶8,全病毒灭活疫苗抗原含量为10^(7.0)TCID_(50)/0.1 mL时,可抵抗Ⅰ群禽腺病毒(4型)强毒株的攻击,提供100%的免疫攻毒保护,攻毒后3、5、7 d泄殖腔拭子均未见排毒,且免疫组化均为阴性。亚单位疫苗抗原含量AGP效价为1∶4,全病毒灭活疫苗抗原含量为106.5 TCID_(50)/0.1 mL时,在超低免疫剂量情况下,仍可提供至少80%的免疫攻毒保护,且攻毒后3、5、7 d泄殖腔拭子排毒率仅为2/10~3/10,免疫组化阳性率仅为1/10。但全病毒灭活疫苗抗原含量为106.0 TCID_(50)/0.1 mL时,免疫攻毒保护效果不理想。综合以上结果表明,Fiber-2蛋白具有良好的免疫原性,抗原含量AGP效价不低于1∶4,与全病毒灭活疫苗抗原含量为106.5 TCID_(50)/0.1 mL免疫效力相当,可用于疫苗研制开发。 展开更多
关键词 禽腺病毒 fiber-2蛋白 亚单位疫苗 全病毒灭活疫苗 免疫攻毒保护
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丝素蛋白冷冻干燥处理对兔毛性能影响的研究
10
作者 田俊莹 赵鹏昊 +1 位作者 刘保杰 朱若英 《针织工业》 北大核心 2025年第9期50-54,共5页
探讨丝素蛋白溶液冷冻干燥处理对兔毛织物相关性能的影响,测试分析丝素蛋白冷冻干燥整理前后兔毛纤维表面形态、基团变化及超分子微结构的变化;并测试丝素蛋白冷冻干燥整理对兔毛织物的染色性能、保暖率、防紫外线性能和服用风格的影响... 探讨丝素蛋白溶液冷冻干燥处理对兔毛织物相关性能的影响,测试分析丝素蛋白冷冻干燥整理前后兔毛纤维表面形态、基团变化及超分子微结构的变化;并测试丝素蛋白冷冻干燥整理对兔毛织物的染色性能、保暖率、防紫外线性能和服用风格的影响。结果表明:丝素蛋白结合到兔毛纤维表面,使纤维表面变得粗糙;冷冻干燥整理对纤维的超分子微结构有一定的影响,结晶度降低;冷冻干燥整理可提高兔毛纤维用天然染料染色的上染率和K/S值;丝素蛋白冷冻干燥整理也可明显提高兔毛织物的热阻、保暖率和防紫外线性能;同时,丝素蛋白冷冻干燥整理对兔毛织物的服用风格影响不明显。 展开更多
关键词 兔毛 丝素蛋白 染色性能 保暖性 防紫外线 冷冻干燥
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蚕丝/大豆蛋白纤维交织物的抗菌与远红外性能 被引量：3
11
作者 郑梦雨 张金珍 +3 位作者 丁圆圆 雷斌 祝成炎 张红霞 《现代纺织技术》 北大核心 2025年第1期36-43,共8页
针对纺织功能整理剂对环境产生的负面影响及其安全性问题,开发了一种健康环保、多功能的纺织服装面料。选取桑蚕丝为经纱原料,绢丝与维纶基大豆蛋白纤维为纬纱原料,织造了15组不同规格的织物,测试织物的抗菌性能和远红外性能,并借助回... 针对纺织功能整理剂对环境产生的负面影响及其安全性问题,开发了一种健康环保、多功能的纺织服装面料。选取桑蚕丝为经纱原料,绢丝与维纶基大豆蛋白纤维为纬纱原料,织造了15组不同规格的织物,测试织物的抗菌性能和远红外性能,并借助回归方程进行显著性分析。结果表明:大豆蛋白纤维含量对织物的抗菌和远红外性能均具显著性影响,当纬纱中大豆蛋白纤维的质量分数为100%时,织物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌率均达99%,远红外发射率为0.988,辐射温升为2.05℃,复合功能最优。研究结果说明蛋白质纤维在功能性纺织品开发方面具有巨大的应用潜力。 展开更多
关键词 大豆蛋白纤维 丝织物 抑菌 远红外 功能纺织品
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萌发燕麦蛋白质营养价值及功能性物质含量研究
12
作者 洪慧晨 郑文琪 +4 位作者 王迪 梅俊霞 李晨 陆利霞 熊晓辉 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第12期167-173,共7页
该文以燕麦为原料,评价其在萌发72 h过程中芽长、干物质损耗、蛋白质营养价值的变化,以及萌发对燕麦中总酚、可溶性膳食纤维、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)等功能性成分含量的影响。结果表明,萌发过程中芽长及干物质损耗率... 该文以燕麦为原料,评价其在萌发72 h过程中芽长、干物质损耗、蛋白质营养价值的变化,以及萌发对燕麦中总酚、可溶性膳食纤维、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)等功能性成分含量的影响。结果表明,萌发过程中芽长及干物质损耗率均不断增加,至72 h时芽长为8.09 mm;干物质损耗率为15.13%。萌发时间为48 h时,燕麦芽粉氨基酸态氮含量最高,显著增加了2.9倍(P<0.05),蛋白质溶解性增加31%,必需氨基酸总量由37.88 mg/g显著增加到54.54 mg/g(P<0.05),可溶性膳食纤维占总膳食纤维比例由45%增加到58%,GABA和总酚含量分别增加了33%与65%,植酸含量由1.79%显著降低至0.47%(P<0.05)。各必需氨基酸含量超过牛奶和鸡蛋中的各必需氨基酸含量,必需氨基酸评分除蛋氨酸外均高于世界卫生组织/联合国粮农组织标准模式,化学评分均接近或超过鸡蛋蛋白。通过萌发处理可提高燕麦中必需氨基酸、总酚、可溶性膳食纤维、GABA等功能性成分含量,利于改善其营养价值。 展开更多
关键词 萌发 燕麦 蛋白质 膳食纤维 总酚 植酸
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蚕丝基创面修复材料的研究进展
13
作者 程岚 李晓冉 +1 位作者 孟思雨 代方银 《蚕学通讯》 2025年第1期55-64,共10页
蚕丝蛋白材料因其优异的生物相容性、可降解性和力学性能,在创面修复领域展现出重要的应用潜力。本文系统地综述了蚕丝基创面修复材料的3种主要形式——蚕丝纤维基敷料、再生丝素蛋白敷料和丝胶蛋白敷料,并探讨了其作用机制及研究进展... 蚕丝蛋白材料因其优异的生物相容性、可降解性和力学性能,在创面修复领域展现出重要的应用潜力。本文系统地综述了蚕丝基创面修复材料的3种主要形式——蚕丝纤维基敷料、再生丝素蛋白敷料和丝胶蛋白敷料,并探讨了其作用机制及研究进展。蚕丝纤维基敷料(蚕茧结构、织物和平板丝)通过仿生结构设计和抗菌改性,兼具良好的透气性、机械性能和成本优势;再生丝素蛋白敷料(海绵、水凝胶、微纳米颗粒和薄膜)能够模拟细胞外基质,提供力学支撑,并通过负载生长因子和调节氨基酸代谢促进组织再生;丝胶蛋白敷料(水凝胶、薄膜及3D打印支架)则凭借抗氧化、保湿和促细胞迁移等特性,在慢性创面修复中表现出显著优势。蚕丝基敷料在创面修复领域的研究仍处于快速发展阶段,未来应进一步加强基础研究和临床转化,探索多功能复合材料、智能敷料以及大规模生产工艺,以促进其在医学领域的广泛应用,为临床创面修复提供更高效、安全的解决方案。 展开更多
关键词 蚕丝基敷料 蚕丝纤维 再生丝素蛋白 丝胶蛋白 创面修复
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副干酪乳酪杆菌层层组装体的构建及其稳定性分析
14
作者 苏巍 甘婉玲 +3 位作者 蒙朝雄 范琳琳 任晓锋 刘小莉 《食品工业科技》 北大核心 2025年第20期164-171,共8页
为提高副干酪乳酪杆菌(PC18)在加工和消化条件下的稳定性,使用大豆分离蛋白纳米纤维(Soy Protein Isolate Nanofiber,SPIN)和透明质酸(Hyaluronic Acid,HA)通过层层组装(ayer-by-Layer Self-Assembly,LbL)技术对其进行包覆,并研究了组... 为提高副干酪乳酪杆菌(PC18)在加工和消化条件下的稳定性,使用大豆分离蛋白纳米纤维(Soy Protein Isolate Nanofiber,SPIN)和透明质酸(Hyaluronic Acid,HA)通过层层组装(ayer-by-Layer Self-Assembly,LbL)技术对其进行包覆,并研究了组装体的结构特征及其在冷冻干燥、酸性环境、耐胆盐和体外连续胃肠消化过程的稳定性。Zeta电位分析显示PC18表面电荷随SPIN和HA的逐层吸附而上下波动,表明包覆成功。透射电镜观察到涂层紧密贴合在PC18表面,生长曲线分析表明包覆后的细胞仍可进行正常代谢。涂层层数对PC18稳定性起着重要作用,其中包覆三层的副干酪乳酪杆菌层层组装体PC18(SPIN/HA)1.5稳定性最好。当包覆层数为三层时,PC18在冷冻干燥处理6 h后存活率为85.04%±0.01%,远高于未包覆的PC18存活率59.07%±0.56%,在pH2环境下处理2 h后存活率为86.12%±0.93%,是未包覆的3.34倍,在1%胆盐条件下处理30 h后的存活率是未包覆的1.79倍,在连续体外胃肠消化后的存活率为56.56%±0.7%,比未包覆的PC18的存活率提高了37.48%。研究结果表明通过SPIN和HA构建的副干酪乳酪杆菌层层组装体稳定性增强,尤其是在冷冻干燥和1%胆盐条件下,包覆三层的PC18表现出更好的保护效果,这为益生菌的保护和递送提供了新材料,并为拓宽PC18应用范围提供思路。 展开更多
关键词 大豆分离蛋白纳米纤维 副干酪乳酪杆菌 透明质酸 层层组装 益生菌稳定性
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梨渣的营养成分及抗氧化性分析
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作者 田夏雨 张楠 +2 位作者 程玉豆 王永霞 关军锋 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第15期303-312,共10页
梨渣是梨加工过程中常见的副产物,其利用价值值得深入研究。该文选取了6个品种梨果渣,对其营养组成和抗氧化能力进行测定,并用主成分分析法进行综合评价。结果表明,6个品种梨渣的脂肪、蛋白质、总膳食纤维含量范围分别为0.36~1.44、1.67... 梨渣是梨加工过程中常见的副产物,其利用价值值得深入研究。该文选取了6个品种梨果渣,对其营养组成和抗氧化能力进行测定,并用主成分分析法进行综合评价。结果表明,6个品种梨渣的脂肪、蛋白质、总膳食纤维含量范围分别为0.36~1.44、1.67~4.22、50.97~68.2 g/100 g,其中,鸭梨和黄冠梨渣脂肪含量较高,秋月梨和黄冠梨渣蛋白质含量较高,安梨渣总膳食纤维含量最高。梨渣总氨基酸含量平均值为1.64 g/100 g,必需氨基酸占总氨基酸含量的32.6%~36.3%,接近FAO/WHO模式蛋白。4种可溶性总糖含量最高的是秋月梨渣(351.96 mg/g)。分析的9种有机酸中,黄冠梨渣总有机酸含量最高为6.54 mg/g。安梨、玉露香和黄冠梨渣总酚和总黄酮含量较高,与其DPPH自由基清除率和羟自由基清除率较高相对应。矿质元素分析发现梨渣有低钠(平均为24.46 mg/kg)高钾(平均为7466.72 mg/kg)的特点。梨渣品质综合评价排名由高到低为黄冠、秋月、玉露香、鸭梨、雪花、安梨渣。不同品种梨渣品质存在一定差异,黄冠梨渣各营养成分含量均处于较高水平。该研究发现梨渣营养成分全面,可为梨果渣的进一步应用和开发提供理论依据。 展开更多
关键词 梨渣 蛋白质 膳食纤维 总黄酮 总酚 抗氧化活性
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柑橘纤维与菊粉添加量对羊肉蛋白结构及肉糜品质的影响 被引量：1
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作者 马可心 相海峤 +4 位作者 于潇 潘德胤 李昌博 陈洪生 刁静静 《食品工业科技》 北大核心 2025年第8期43-51,共9页
为了探究柑橘纤维与菊粉对羊肉蛋白结构及肉糜品质的影响。本文分别考察了柑橘纤维(0.5%、1.0%、1.5%、2.0%)与菊粉(2.0%、3.0%、4.0%、5.0%)的添加对羊肉蛋白质构象、水分分布、质构和微观结构等指标的影响。结果表明:添加2.0%柑橘纤... 为了探究柑橘纤维与菊粉对羊肉蛋白结构及肉糜品质的影响。本文分别考察了柑橘纤维(0.5%、1.0%、1.5%、2.0%)与菊粉(2.0%、3.0%、4.0%、5.0%)的添加对羊肉蛋白质构象、水分分布、质构和微观结构等指标的影响。结果表明:添加2.0%柑橘纤维显著(P<0.05)提高了二硫键含量(增加12%)、疏水相互作用(增加14%),并增加了蛋白质β-折叠含量(增量8.14%)和无规则卷曲含量(增量1.29%)。添加2.0%柑橘纤维使蛋白质内部结构发生交联,提高了不易流动水的相对含量,促进形成有序、致密、连续的蛋白质三维网络结构,显著提升了肉糜的保水性和硬度(P<0.05)。当菊粉添加量为3.0%时,蛋白质的β-折叠含量显著增加了8.68%(P<0.05),无规则卷曲含量增加了0.31%,显著提高了肉糜的保水性。然而,与柑橘纤维不同的是,3.0%的菊粉添加,促进了色氨酸残基的暴露且对二硫键以及酪氨酸残基无显著影响(P>0.05)。综上,2.0%柑橘纤维与3.0%菊粉均可不同程度地修饰蛋白质结构,有效地提高肉糜的保水性、改善肉制品品质。 展开更多
关键词 柑橘纤维 菊粉 羊肉 蛋白结构 保水性
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禽4型腺病毒单克隆抗体的制备、鉴定与初步应用
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作者 张宇 程凡玉 +7 位作者 俞赵荣 邵颖 魏宁波 陈芳芳 王振宇 宋祥军 涂健 祁克宗 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第5期2364-2371,共8页
本研究旨在制备禽4型腺病毒(fowl adenovirus type 4,FAdV-4)的单克隆抗体,鉴定其特异性结合位点,并评估其在免疫组化(immunohistochemistry,IHC)和免疫沉淀反应中的应用价值。使用纯化的FAdV-4-AH-F41株全病毒免疫小鼠,通过间接酶联免... 本研究旨在制备禽4型腺病毒(fowl adenovirus type 4,FAdV-4)的单克隆抗体,鉴定其特异性结合位点,并评估其在免疫组化(immunohistochemistry,IHC)和免疫沉淀反应中的应用价值。使用纯化的FAdV-4-AH-F41株全病毒免疫小鼠,通过间接酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)方法筛选出一株阳性杂交瘤细胞并进行亚克隆,并对所制备的单克隆抗体进行效价检测。利用间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay,IFA)与蛋白免疫印迹(Western blot)方法鉴定单克隆抗体生物学特性,构建了pCold TF-Hexon、pET-32a(+)-Fiber1、pCold TF-Penton、pCold TF-Fiber2的原核表达载体,并通过Western blot初步鉴定所得单克隆抗体的特异性结合位点,在检测出抗体的亚型后,将其初步应用于IHC和免疫沉淀试验。结果表明本试验获得1株稳定分泌抗Fiber1蛋白的单克隆抗体,并将其命名为5C7。该抗体效价为1∶102400,亚型为IgG-2b,表现出良好的生物学特性。在IHC中,能够观察到明显的病变特征;在免疫沉淀试验中,5C7可作为捕获抗体,与病毒感染细胞中的Fiber1蛋白特异性结合。结果提示,本试验通过全病毒粒子免疫小鼠所制备的单克隆抗体能够特异性识别Fiber1蛋白,并在IHC和免疫沉淀反应中显示出良好的应用前景,为FAdV-4实验室病理诊断方法的建立和Fiber1蛋白的功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 血清4型禽腺病毒 单克隆抗体 抗体鉴定 fiber1蛋白 IHC 免疫共沉淀
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改性玉米纤维胶-大豆分离蛋白共价复合物乳化特性的研究 被引量：1
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作者 赵舒頔 孙晓培 +6 位作者 张继翔 于硕 常军辉 刘欢欢 李贞景 郭庆彬 康继 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第6期42-49,共8页
为探究多糖-蛋白类乳化剂的分子结构(支链度、相对分子质量)对水包油乳液乳化特性的影响,对玉米纤维胶(corn fiber gum,CFG)分别进行酸水解和木聚糖酶水解,得到不同支链度和相对分子质量的CFG,通过美拉德反应与大豆分离蛋白(soy protein... 为探究多糖-蛋白类乳化剂的分子结构(支链度、相对分子质量)对水包油乳液乳化特性的影响,对玉米纤维胶(corn fiber gum,CFG)分别进行酸水解和木聚糖酶水解,得到不同支链度和相对分子质量的CFG,通过美拉德反应与大豆分离蛋白(soy protein isolate,SPI)形成CFG-SPI共价复合物,并制备水包油乳液。利用SDS-PAGE、傅里叶变换红外光谱、粒径和Zeta电位等方法对复合物的结构表征和乳化特性进行研究。结果表明,CFG与SPI通过美拉德反应发生了共价连接,且低支链度/低相对分子质量的CFG更有利于与SPI上的氨基形成共价键;与SPI相比,复合物在等电点(pI 4.5)时的溶解度由11.39%升高至23.25%,说明共价结合可明显提高SPI的溶解性;CFG-SPI共价复合物的乳化性能均优于阿拉伯胶、SPI、CFG及CFG-SPI物理混合物,且CFG支链度是影响乳液特性的关键因素;当CFG相对分子质量相近时,支链度越高,其乳化性能越好,CFG支链度相近时,相对分子质量对乳化特性无明显影响。研究结果将为糖-蛋白类乳化剂的研发和应用提供理论依据。 展开更多
关键词 支链度 相对分子质量 乳化特性 玉米纤维胶 大豆分离蛋白 共价复合物
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不同沼液施用量对紫花苜蓿产量及品质的影响
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作者 孙群策 严保卫 +6 位作者 张树振 陈述明 徐婉宁 王瑛 彭凤君 岳海燕 张博 《草学》 2025年第2期28-32,共5页
为了实现沼液高效利用和紫花苜蓿优质高产,试验设置4个沼液施用梯度分别为:均匀喷施沼液200kg/667m^(2)(T1)、均匀喷施沼液400kg/667m^(2)(T2)、均匀喷施沼液800kg/667m^(2)(T3)、均匀喷施沼液1200kg/667m^(2)(T4),仅施用清水(T0)为对照... 为了实现沼液高效利用和紫花苜蓿优质高产,试验设置4个沼液施用梯度分别为:均匀喷施沼液200kg/667m^(2)(T1)、均匀喷施沼液400kg/667m^(2)(T2)、均匀喷施沼液800kg/667m^(2)(T3)、均匀喷施沼液1200kg/667m^(2)(T4),仅施用清水(T0)为对照组,探究沼液施用量对紫花苜蓿生产性能及营养品质的影响。结果表明;喷施沼液的各处理均显著提升了紫花苜蓿株高(P<0.05),T3、T4处理紫花苜蓿茎粗显著高于T0处理(P<0.05),T4处理紫花苜蓿鲜草产量显著高于T0处理(P<0.05),T1处理紫花苜蓿干草产量和蛋白质产量显著高于T0处理(P<0.05);营养品质方面T2处理紫花苜蓿粗蛋白含量显著高于T0处理(P<0.05),施用沼液各处理的中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、相对饲喂价值同对照组无显著差异(P>0.05)。说明试验区沼液施用量范围为200~400kg/667m^(2)时可有效提升紫花苜蓿生产性能并提升其粗蛋白含量。 展开更多
关键词 沼液 紫花苜蓿 产量 品质 粗蛋白 中性洗涤纤维 酸性洗涤纤维
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胰蛋白酶法制备马铃薯蛋白纤维及其结构性质和功能特性研究
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作者 周向军 李苗 《食品与机械》 北大核心 2025年第4期54-62,共9页
[目的]基于酶法制备马铃薯蛋白纤维(PPF),并分析其结构特性和功能特性。[方法]以马铃薯分离蛋白(PPI)为原料,采用胰蛋白酶(Tyr)法和酸热处理技术制备PPF,分析蛋白质量浓度、加热时间、Tyr酶活、加热温度对PPF荧光强度的影响,并利用红外... [目的]基于酶法制备马铃薯蛋白纤维(PPF),并分析其结构特性和功能特性。[方法]以马铃薯分离蛋白(PPI)为原料,采用胰蛋白酶(Tyr)法和酸热处理技术制备PPF,分析蛋白质量浓度、加热时间、Tyr酶活、加热温度对PPF荧光强度的影响,并利用红外光谱、荧光光谱等分析PPF的结构性质;以姜黄素(Cur)为包埋对象,通过包封率和装载量、热稳定性和抗氧化性探讨PPF-Cur的功能特性。[结果]PPF纤维化过程中β-折叠含量由28.12%增至32.29%,α-螺旋含量由22.53%增至25.87%。当蛋白质量浓度为0.2~0.8 mg/mL时,PPF的Trp荧光峰发生红移且荧光强度高于PPI。当Cur质量浓度为20~100μg/mL时,PPF-Cur包封率由(64.66±0.25)%增至(96.16±0.20)%,增加了48.72%;装载量由(3.25±0.01)μg/mg增至(19.62±0.02)μg/mg,增加了5.04倍。当加热至120 min时,游离Cur、PPF-Cur保留率分别为(74.40±0.32)%,(87.83±0.61)%。当Cur质量浓度为20~40μg/mL时,PPF-Cur对DPPH自由基和ABTS+自由基的清除率分别为66.46%和47.87%。[结论]采用酶法结合酸热处理技术制备的食品蛋白纤维,能改善蛋白质的结构性质和功能特性。 展开更多
关键词 蛋白纤维 结构性质 功能特性 负载 姜黄素
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