期刊文献+
共找到9篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
液相色谱—质谱法(LC-MS)分析细胞色素C酶解肽谱及一级结构 被引量:6
1
作者 邵晓霞 曾嵘 夏其昌 《质谱学报》 EI CAS CSCD 1998年第4期1-7,共7页
本文采用液相色谱—质谱联用法(LC/MS),对一种蛋白质—细胞色素C(Cyt.C)的胰蛋白酶酶解产物进行了质量肽谱分析,确定了各肽段在蛋白质中的位置。并用串联质谱(MS/MS)分析了大部分肽段的序列,均获得满意的结果。
关键词 细胞色素C 质量肽谱 蛋白质 多肽 酶解 序列
在线阅读 下载PDF
重组人生长激素胰蛋白酶肽图谱的微径LCMS研究 被引量:4
2
作者 韩俊 盛龙生 +2 位作者 杨仲元 相秉仁 安登魁 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期269-274,共6页
采用电喷雾离子化为接口的液相色谱 质谱联用技术测定了重组人生长激素(rh G H) 胰蛋白酶水解的肽图谱。以此为例,讨论了微径柱对质谱检测灵敏度的影响,运用柱后“ T F Afix”修饰技术大大提高了质谱检测灵敏度。根... 采用电喷雾离子化为接口的液相色谱 质谱联用技术测定了重组人生长激素(rh G H) 胰蛋白酶水解的肽图谱。以此为例,讨论了微径柱对质谱检测灵敏度的影响,运用柱后“ T F Afix”修饰技术大大提高了质谱检测灵敏度。根据肽图谱的分析结果,验证了rh G H 的一级结构,并区分了rh G H 及其甲硫氨酰化产物,综合肽段检出率100 % 。 展开更多
关键词 液相色谱 ESI 重组人生长激素 肽图谱
在线阅读 下载PDF
基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱法测定重组人促红细胞生成素 被引量:1
3
作者 周国华 罗国安 +2 位作者 周勇 周克瑜 章杰兵 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期124-127,共4页
采用基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱法(MALDI/TOFMS)准确测定了基因工程人促红细胞生成素(rhEPO)的分子量、纯度、糖基化程度和胰酶消解肽图;提出了以MALDI/TOF质谱峰半峰宽作为判断不均一程度的指... 采用基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱法(MALDI/TOFMS)准确测定了基因工程人促红细胞生成素(rhEPO)的分子量、纯度、糖基化程度和胰酶消解肽图;提出了以MALDI/TOF质谱峰半峰宽作为判断不均一程度的指标。初步研究了MALDI-TOF/MS基质种类和浓度对测定的影响。 展开更多
关键词 促红细胞生成素 RHEPO MALDI TOF MS 基因工程
在线阅读 下载PDF
重组人角质细胞生长因子-Ⅰ的聚乙二醇修饰及体外活性
4
作者 冯一建 陈勇 +4 位作者 张增涛 黄程 李红亮 胡春兰 范开 《重庆理工大学学报(自然科学)》 CAS 2012年第4期40-44,共5页
研究大肠杆菌表达的重组人角质细胞生长因子-Ⅰ型N端缺失突变体(△N23KGF-Ⅰ)的mPEG-马来酰亚胺(mPEG-maleimide、mPEG-Mal)修饰工艺及修饰位点和初步体外生物活性。首先修饰得到聚乙二醇化的△N23KGF-Ⅰ,然后对△N23KGF-Ⅰ作还原和非... 研究大肠杆菌表达的重组人角质细胞生长因子-Ⅰ型N端缺失突变体(△N23KGF-Ⅰ)的mPEG-马来酰亚胺(mPEG-maleimide、mPEG-Mal)修饰工艺及修饰位点和初步体外生物活性。首先修饰得到聚乙二醇化的△N23KGF-Ⅰ,然后对△N23KGF-Ⅰ作还原和非还原质量肽图,确定其各肽段,对△N23KGF-Ⅰ-m PEG-Mal-20K做还原质量肽图,确定修饰位点。最后,通过BAF-3细胞对△N23KGF-Ⅰ国际标准品、△N23KGF-Ⅰ、△N23KGF-Ⅰ-m PEG-Mal-20K测活。结果表明,在尿素环境下,mPEG-MAl被均一修饰在△N23KGF-I的Cys40位。与国际活性标准品相比,△N23KGF-Ⅰ的活性保留了116%,△N23KGF-Ⅰ-m PEG-Mal-20K的活性保留了36%。 展开更多
关键词 重组人角质细胞生长因子 质量肽图 聚乙二醇修饰
在线阅读 下载PDF
单克隆抗体-白介素2融合蛋白一级结构的确证
5
作者 董标 梁月琴 +1 位作者 王杰 董方霆 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期125-127,共3页
建立单克隆抗体-白介素2融合蛋白一级结构确证的方法。用基质辅助激光解吸飞行时间质谱测定单克隆抗体-白介素2融合蛋白的精确相对分子质量,毛细管等电聚焦方法测定其等电点,通过N_末端氨基酸序列的测定以及肽图分析,证实了抗体-白介素... 建立单克隆抗体-白介素2融合蛋白一级结构确证的方法。用基质辅助激光解吸飞行时间质谱测定单克隆抗体-白介素2融合蛋白的精确相对分子质量,毛细管等电聚焦方法测定其等电点,通过N_末端氨基酸序列的测定以及肽图分析,证实了抗体-白介素2融合蛋白一级结构表达的正确性,同时为单克隆抗体-白介素2融合蛋白的质量标准研究奠定了基础。 展开更多
关键词 单克隆抗体-白介素2融合蛋白 结构确证 基质辅助激光解吸飞行时间质谱 肽图 毛细管等电聚焦
在线阅读 下载PDF
2709碱性蛋白酶水解BSA蛋白肽谱变化的研究 被引量:8
6
作者 王淼 王洪彬 +3 位作者 杨霁菡 刘子铭 刘晓光 路福平 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1050-1054,共5页
以2709碱性蛋白酶酶解牛血清白蛋白为研究对象,采用液相色谱-飞行时间质谱联用分析方法和位点非特异性酶切肽谱鉴定方法,分析水解过程中肽谱的动态变化。蛋白电泳分析结果显示,2709碱性蛋白酶在0.1%的添加比例条件下,0.5 h内可将全部蛋... 以2709碱性蛋白酶酶解牛血清白蛋白为研究对象,采用液相色谱-飞行时间质谱联用分析方法和位点非特异性酶切肽谱鉴定方法,分析水解过程中肽谱的动态变化。蛋白电泳分析结果显示,2709碱性蛋白酶在0.1%的添加比例条件下,0.5 h内可将全部蛋白降解,表明其具有极强的水解能力。肽谱分析结果显示,该酶酶解BSA蛋白过程中肽谱变化复杂多样,不同序列多肽具有不同的动态变化特征。酶切位点分析结果显示,2709碱性蛋白酶几乎能在所有种类的氨基酸位点发生酶切,但酶切的频率并不相同,这表明该酶在水解位点上具有宽泛的选择性和一定的倾向性,其中在肽键C端氨基酸种类的选择上具有明显的亮氨酸倾向性。该文可为研究其他工业蛋白酶水解肽谱的规律提供借鉴,并有助于提高我国工业蛋白酶制剂的应用水平和蛋白质加工水平。 展开更多
关键词 2709碱性蛋白酶 肽谱 质谱 水解
在线阅读 下载PDF
毛细管电泳质谱联用技术测定肽和蛋白质混合物 被引量:11
7
作者 周国华 罗国安 +1 位作者 周克玉 古卓良 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1998年第3期353-358,共6页
以血管紧张素Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、P-物质和生长激素抑制剂混合物为测定对象,研究了未涂层柱、线性聚丙烯酰胺(LPA)涂层柱和胺涂层柱对毛细管电泳分离肽类混合物的影响.结果表明:适合质谱测定的缓冲液不能在未涂层柱上有效地分离5种... 以血管紧张素Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、P-物质和生长激素抑制剂混合物为测定对象,研究了未涂层柱、线性聚丙烯酰胺(LPA)涂层柱和胺涂层柱对毛细管电泳分离肽类混合物的影响.结果表明:适合质谱测定的缓冲液不能在未涂层柱上有效地分离5种肽类混合物,而pH为5.0和4.5的NH4Ac缓冲液却能在LPA涂层柱和胺涂层柱上很好地分离上述物质.用CE-ESI-MS法分离鉴定了5种生物活性肽和蛋白质混合物中的肌红蛋白、碳酸酐酶Ⅱ,实测了促红细胞生成素(EPO)的胰酶消解肽图,并对CE-MS联用测定中的影响因素进行了讨论. 展开更多
关键词 蛋白质 EPO胰酶肽图 CE-MS 血管紧张素
在线阅读 下载PDF
多次循环离子交换色谱纯化Cry1Ab蛋白及其肽质量谱图的分析 被引量:1
8
作者 栾明明 邬建敏 叶庆富 《浙江大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期529-532,537,共5页
采用Q-Sepharose FF离子交换柱对初步纯化的Cry1Ab杀虫蛋白样品进行了多次循环精细纯化,洗脱模式为离子强度台阶梯度,流动相为Tris-HCl缓冲液加NaCl,盐浓度从0.1 mol.L-1变化到1.0 mol.L-1.结果表明,Cry1Ab蛋白在NaCl浓度为0.4 mol.L-1... 采用Q-Sepharose FF离子交换柱对初步纯化的Cry1Ab杀虫蛋白样品进行了多次循环精细纯化,洗脱模式为离子强度台阶梯度,流动相为Tris-HCl缓冲液加NaCl,盐浓度从0.1 mol.L-1变化到1.0 mol.L-1.结果表明,Cry1Ab蛋白在NaCl浓度为0.4 mol.L-1时从柱上被洗脱,并与杂蛋白很好地分离.色谱分离机制符合顶替色谱机制.经3次循环分离后可获得高纯度的Cry1Ab蛋白.用SDS-PAGE分析了蛋白的纯度及表观分子量,电泳胶上分离的蛋白进行原位酶切后,用基质辅助激光解析-飞行时间质谱对纯化蛋白进行肽质量谱的分析,Mascot数据库搜索结果确证了该纯化蛋白酶解肽段80%符合已知的Cry1Ab蛋白特征肽段. 展开更多
关键词 Cry1Ab蛋白 离子交换色谱 循环分离 肽质量谱图分析
在线阅读 下载PDF
抗CD52单克隆抗体HPLC-肽图分析方法的建立 被引量:5
9
作者 乔玉玲 黄铮 +5 位作者 秦海艳 宋兰兰 陈继军 安晨 叶星 毛晓燕 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期216-222,共7页
建立高效液相色谱(HPLC)-肽图分析方法,用于抗人CD52单克隆抗体的专属性鉴别。抗CD52单抗样品经盐酸胍变性、DTT还原,释放出的游离半胱氨酸残基进行烷基化。超滤置换酶切缓冲液后进行胰蛋白酶酶切并终止。色谱条件:采用Eclipse XDB-C18 ... 建立高效液相色谱(HPLC)-肽图分析方法,用于抗人CD52单克隆抗体的专属性鉴别。抗CD52单抗样品经盐酸胍变性、DTT还原,释放出的游离半胱氨酸残基进行烷基化。超滤置换酶切缓冲液后进行胰蛋白酶酶切并终止。色谱条件:采用Eclipse XDB-C18 4.6×250 mm 5μm(Aglient)色谱柱,0.1%TFA水溶液与0.1%TFA乙腈溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长为214 nm,柱温为30℃;质谱条件:分析时长135 min;检测方式正离子,TOF;MS+扫描范围350-1 500 Da;Product Ion+扫描范围100-1 500 Da;质谱分辨率40 000;Exceeds,150 Cps。CD52单抗重链CDR1、CDR3、轻链CDR1对应肽段由质谱鉴定出。HPLC-肽图方法专属性验证显示辅料制剂及异种抗体对检测结果无干扰;精密度验证结果显示目标峰的峰面积RSD%均在1.7%-7.6%之间。且目标峰的保留时间RSD%均在0.1%-0.2%之间,小于5%的可接受标准;耐用性结果显示,3μg胰蛋白酶、37℃和18 h的酶切条件是最合适的样品处理条件。基于CDR相关肽段鉴别的HPLC-肽图分析方法可定性鉴定出抗CD52单抗,方法学验证结果显示该方法适用于抗人CD52单抗的专属性鉴别并可用于质量控制及批检验放行。 展开更多
关键词 单克隆抗体 肽图分析 高效液相色谱 质谱
在线阅读 下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部