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伪狂犬病毒粤A株gE基因真核表达质粒的构建被引量：2: 1; 作者吴德铭黄毓茂 +2 位作者罗满林刘镇明邬苏晓《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期69-72,共4页; 根据伪狂犬病毒(PRV)NIA 3和Rice株的gE基因序列,设计了1对含有起始密码子和HindⅢ、BamHⅠ酶切位点的引物,以PRV粤A毒株(PRV YA)基因组为模板,利用聚合酶链反应(PCR)扩增获得gE基因片段,将这一片段克隆至PMD18 T载体中,获得重组质粒PMD... 展开更多; 关键词猪伪狂犬病毒粤A株 GE基因真核表达质粒构建 BarnHI酶切位点序列测定; 在线阅读下载PDF 职称材料

大鼠神经肽Y前体cDNA克隆、测序及哺乳动物细胞表达载体的构建被引量：2: 2; 作者张亮林杨贵贞《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期69-71,共3页; 利用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）从大鼠脑组织中钓得神经肽Ｙ前体ｃＤＮＡ编码区序列，将该ｃＤＮＡ定向亚克隆入哺乳动物细胞表达载体ｐＲｃ／ＣＭＶ中，构建了重组质粒ｐＲｃ／ＣＭＶ－ＮＰＹ。经双脱氧核苷酸终止法对插入... 展开更多; 关键词神经肽Y 聚合酶链反应哺乳动物细胞表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

hOP-1全长基因克隆及真核表达载体的构建: 3; 作者岳玲史俊南 +3 位作者柴玉波孙叶方荫俊文玲英《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期118-121,共4页; 目的　证实人牙乳头细胞中OP 1的表达 ,获得hOP 1全长基因及其高效真核表达载体。方法　提取人牙乳头细胞总RNA ,反转录合成cDNA ,以特异性引物扩增hOP 1全长基因并克隆入T载体 ,筛选阳性克隆进行序列测定后。构建高效真核表达载体pCI O... 展开更多; 关键词 hOP-1 全长基因克隆人牙乳头细胞真核表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

AANAT基因转染成肌细胞及其微囊化研究: 4; 作者黄美贤廖华《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2009年第2期208-211,共4页; 目的:构建pTARGETTM-AANAT真核表达载体并转化L6成肌细胞,检测目的基因的表达;制备pTARGETTMAANAT转基因细胞微囊,初步探讨AANAT转基因细胞微囊的生物活性。方法:RT-PCR技术扩增大鼠AANATcDNA,酶切连接pTARGETTM载体,脂质体法转染L6细... 展开更多; 关键词 AANAT L6细胞 pTARGETTM载体 APA微囊; 在线阅读下载PDF 职称材料

DLL1-ICD基因真核表达载体的构建及转染鉴定被引量：3: 5; 作者郭政崔丽娟黄瑾《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2011年第1期54-58,共5页; 通过克隆DLL1-ICD(Delta-like1细胞内区域)的cDNA及测序鉴定,构建pEGFP-C1-DLL-ICD真核表达载体并进行细胞转染,为研究Notch信号通路与Neuritin的关系奠定基础。首先根据小鼠全长DLL1 cDNA序列,设计DLL-ICD PCR引物,以小鼠胎脑cDNA文库... 展开更多; 关键词 DLL1-ICD 真核表达载体转染Notch信号通路; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名伪狂犬病毒粤A株gE基因真核表达质粒的构建被引量：2: 1; 作者吴德铭黄毓茂罗满林刘镇明邬苏晓; 机构华南农业大学兽医学院; 出处《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期69-72,共4页; 基金广东省科技计划项目(2KM03507N) 国家自然科学基金资助项目(39770033); 文摘根据伪狂犬病毒(PRV)NIA 3和Rice株的gE基因序列,设计了1对含有起始密码子和HindⅢ、BamHⅠ酶切位点的引物,以PRV粤A毒株(PRV YA)基因组为模板,利用聚合酶链反应(PCR)扩增获得gE基因片段,将这一片段克隆至PMD18 T载体中,获得重组质粒PMD18 gE;用HindⅢ和BamHⅠ酶切该重组质粒,回收得到含有以上2个酶切位点粘端的gE基因,将此基因片段克隆至相同酶切、回收后的pcDNA3 1(+)真核表达载体中,获得真核表达重组质粒pcDNA3 1 gE,经PCR鉴定、限制性内切酶分析和克隆片段的序列测定、比较,证实了克隆片段的可靠性.; 关键词猪伪狂犬病毒粤A株 GE基因真核表达质粒构建 BarnHI酶切位点序列测定; Keywords pseudorabies virus PCR gE gene PMD18-T vector mammalian expression vector pcDNA3.1(+); 分类号 S858.28 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大鼠神经肽Y前体cDNA克隆、测序及哺乳动物细胞表达载体的构建被引量：2: 2; 作者张亮林杨贵贞; 机构白求恩医科大学免疫学教研室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期69-71,共3页; 基金国家自然科学基金; 文摘利用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）从大鼠脑组织中钓得神经肽Ｙ前体ｃＤＮＡ编码区序列，将该ｃＤＮＡ定向亚克隆入哺乳动物细胞表达载体ｐＲｃ／ＣＭＶ中，构建了重组质粒ｐＲｃ／ＣＭＶ－ＮＰＹ。经双脱氧核苷酸终止法对插入片段作序列分析，证明ＮＰＹｃＤＮＡ序列的准确性及插入方向正确。; 关键词神经肽Y 聚合酶链反应哺乳动物细胞表达载体; Keywords Neuropeptide Y PCR mammalian expression vector; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名hOP-1全长基因克隆及真核表达载体的构建: 3; 作者岳玲史俊南柴玉波孙叶方荫俊文玲英; 机构第三军医大学大坪医院野战外科研究所口腔科第四军医大学口腔医学院牙体病科第四军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室军事医学科学院微生物流行病学研究所; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期118-121,共4页; 文摘目的　证实人牙乳头细胞中OP 1的表达 ,获得hOP 1全长基因及其高效真核表达载体。方法　提取人牙乳头细胞总RNA ,反转录合成cDNA ,以特异性引物扩增hOP 1全长基因并克隆入T载体 ,筛选阳性克隆进行序列测定后。构建高效真核表达载体pCI OP 1并筛选鉴定。结果　PCR扩增得到一特异性的约 13 0 0bp的片段 ,序列测定结果表明与国外已发表的序列完全一致。构建的pCI OP 1质粒 ,用于基因转染纯度较好。结论　人牙乳头细胞中首次克隆到hOP 1全长基因。; 关键词 hOP-1 全长基因克隆人牙乳头细胞真核表达载体; Keywords hOP 1 full length gene clone human dental papilla mesenchymal cell mammalian expression vector; 分类号 Q516 [生物学—生物化学] Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名AANAT基因转染成肌细胞及其微囊化研究: 4; 作者黄美贤廖华; 机构南方医科大学解剖学教研室; 出处《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2009年第2期208-211,共4页; 基金广东省科技计划攻关项目(2002C31306); 文摘目的:构建pTARGETTM-AANAT真核表达载体并转化L6成肌细胞,检测目的基因的表达;制备pTARGETTMAANAT转基因细胞微囊,初步探讨AANAT转基因细胞微囊的生物活性。方法:RT-PCR技术扩增大鼠AANATcDNA,酶切连接pTARGETTM载体,脂质体法转染L6细胞并检测pTARGETTM-AANAT的基因表达产物;将高表达活性的L6细胞进行APA微囊化处理,倒置显微镜观察微囊形态,Western-blot检测囊内细胞AANAT蛋白表达活性。结果:酶切、DNA测序及凝胶电泳检测结果证实,pTARGETTM-AANAT真核表达载体构建成功。转染后的L6细胞表达AANATmRNA,胞浆中能检测到AANAT蛋白的表达。转染细胞微囊体外存活良好,微囊外形完整无粘连,大小较均一,囊内细胞清晰可见,体外培养两周后破囊检测证实囊内细胞具有AANAT蛋白表达活性。结论:pTARGETTM-AANAT真核表达载体在L6细胞中成功表达,转染细胞微囊体外存活良好,囊内细胞具备AANAT蛋白表达活性。; 关键词 AANAT L6细胞 pTARGETTM载体 APA微囊; Keywords The arylalkylamine-N-acetyltransferase （AANAT） L6 myoblast pTARGET^TM mammalian expression vector system APA microcapsule; 分类号 R318.1 [医药卫生—生物医学工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名DLL1-ICD基因真核表达载体的构建及转染鉴定被引量：3: 5; 作者郭政崔丽娟黄瑾; 机构石河子大学医学院生化教研室/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室; 出处《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2011年第1期54-58,共5页; 基金国家自然科学基金项目(30760063); 文摘通过克隆DLL1-ICD(Delta-like1细胞内区域)的cDNA及测序鉴定,构建pEGFP-C1-DLL-ICD真核表达载体并进行细胞转染,为研究Notch信号通路与Neuritin的关系奠定基础。首先根据小鼠全长DLL1 cDNA序列,设计DLL-ICD PCR引物,以小鼠胎脑cDNA文库为模板,利用PCR技术扩增DLL1-ICD cDNA。将扩增出的基因片段克隆至pEGFP-C1载体,进行DNA序列测定。并进一步将测序正确的pEGFP-C1-DLL1-ICD真核表达载体转染HEK293细胞。结果显示:成功克隆了DLL1-ICD的cDNA片段,测序结果与基因文库中的DLL1-ICD序列一致,并在转染真核细胞后获得了较好地表达。表明pEGFP-C1-DLL1-ICD真核表达载体构建成功,并在293细胞中成功表达了DLL1-ICD-EGFP融合蛋白。研究结果为进一步探讨Notch信号通路与神经系统疾病的分子机制奠定基础。; 关键词 DLL1-ICD 真核表达载体转染Notch信号通路; Keywords DLL1-ICD mammalian expression vector Transfection Notch Signaling pathway; 分类号 R735.8 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	伪狂犬病毒粤A株gE基因真核表达质粒的构建	吴德铭黄毓茂罗满林刘镇明邬苏晓	《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2003	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	大鼠神经肽Y前体cDNA克隆、测序及哺乳动物细胞表达载体的构建	张亮林杨贵贞	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	1996	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	hOP-1全长基因克隆及真核表达载体的构建	岳玲史俊南柴玉波孙叶方荫俊文玲英	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2004	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	AANAT基因转染成肌细胞及其微囊化研究	黄美贤廖华	《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心	2009	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	DLL1-ICD基因真核表达载体的构建及转染鉴定	郭政崔丽娟黄瑾	《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS	2011	3	在线阅读下载PDF 职称材料