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白颖苔草热激转录因子(HSF1)真核表达载体的构建
被引量：
2
1
作者
孙彦
郭校民
周禾
《草业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期544-548,共5页
根据表达载体PBI 121特性及酶切位点设计合适的引物,由表达引物通过PCR技术从含有白颖苔草(Carex rigescens)CrHsf全长cDNA的克隆载体的大肠杆菌上扩增出带有特定酶切位点的CrHsf完整开放阅读框。再对载体和目的片段进行酶切处理,处理...
根据表达载体PBI 121特性及酶切位点设计合适的引物,由表达引物通过PCR技术从含有白颖苔草(Carex rigescens)CrHsf全长cDNA的克隆载体的大肠杆菌上扩增出带有特定酶切位点的CrHsf完整开放阅读框。再对载体和目的片段进行酶切处理,处理后将正确的目的基因片段亚克隆至PBI 121植物表达载体。通过PCR及酶切鉴定,结果证明,目的基因片段已被正确克隆到表达载体上,载体构建成功。
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关键词
HSF基因
植物表达载体
pbi
121
构建
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职称材料
玉米谷氨酰胺合成酶c-DNA导入根癌农杆菌15955
被引量：
1
2
作者
唐龙飞
刘中柱
董可文
《福建农业学报》
CAS
1998年第1期9-14,共6页
用粘端连接法将构建于ＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉＦＤＢ２１３菌株中的玉米谷氨酰胺合成酶（ＭＧＳ）ｃ－ＤＮＡ亚克隆于由农杆菌质粒改造的ｐＢＩ１２１载体中。在测定的７２个转化菌中有７株（９．２％）插入ＭＧＳｃ－ＤＮＡ片...
用粘端连接法将构建于ＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉＦＤＢ２１３菌株中的玉米谷氨酰胺合成酶（ＭＧＳ）ｃ－ＤＮＡ亚克隆于由农杆菌质粒改造的ｐＢＩ１２１载体中。在测定的７２个转化菌中有７株（９．２％）插入ＭＧＳｃ－ＤＮＡ片段。亚克隆后的质粒ＤＮＡ用ＨｉｎｄＩＩ和ＢｓｔｘＩ酶解可确定其ｃ－ＤＮＡ片段的插入方向。结果显示，Ｐ９、Ｐ１５、Ｐ１６与Ｐ１７为正向插入，Ｐ２为反向插入的菌株。Ｐ１６质粒ＤＮＡ进一步用直接基因转化法——冻融法（Ｆｒｅｅｚｅ－ｔｈａｗ）导入农杆菌１５９５５菌株。经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法与ＤＮＡ杂交法测定表明，转化菌Ａ１１已携带ＭＧＳｃ－ＤＮＡ片段。
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关键词
玉米
谷氨酰胺合成酶
基因导入
根癌农杆菌
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职称材料
题名
白颖苔草热激转录因子(HSF1)真核表达载体的构建
被引量：
2
1
作者
孙彦
郭校民
周禾
机构
中国农业大学动物科技学院草业科学系草业科学北京市重点实验室
出处
《草业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期544-548,共5页
基金
草业科学北京市重点实验室开放课题项目
国家牧草产业技术体系项目
文摘
根据表达载体PBI 121特性及酶切位点设计合适的引物,由表达引物通过PCR技术从含有白颖苔草(Carex rigescens)CrHsf全长cDNA的克隆载体的大肠杆菌上扩增出带有特定酶切位点的CrHsf完整开放阅读框。再对载体和目的片段进行酶切处理,处理后将正确的目的基因片段亚克隆至PBI 121植物表达载体。通过PCR及酶切鉴定,结果证明,目的基因片段已被正确克隆到表达载体上,载体构建成功。
关键词
HSF基因
植物表达载体
pbi
121
构建
Keywords
HSF genes
pbi
121
plant expression
vector
construction of
vector
分类号
S688.4 [农业科学—观赏园艺]
Q943.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
玉米谷氨酰胺合成酶c-DNA导入根癌农杆菌15955
被引量：
1
2
作者
唐龙飞
刘中柱
董可文
机构
福建省农科院红萍研究中心
东弗吉利亚医学院分子生物学试验室
出处
《福建农业学报》
CAS
1998年第1期9-14,共6页
文摘
用粘端连接法将构建于ＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉＦＤＢ２１３菌株中的玉米谷氨酰胺合成酶（ＭＧＳ）ｃ－ＤＮＡ亚克隆于由农杆菌质粒改造的ｐＢＩ１２１载体中。在测定的７２个转化菌中有７株（９．２％）插入ＭＧＳｃ－ＤＮＡ片段。亚克隆后的质粒ＤＮＡ用ＨｉｎｄＩＩ和ＢｓｔｘＩ酶解可确定其ｃ－ＤＮＡ片段的插入方向。结果显示，Ｐ９、Ｐ１５、Ｐ１６与Ｐ１７为正向插入，Ｐ２为反向插入的菌株。Ｐ１６质粒ＤＮＡ进一步用直接基因转化法——冻融法（Ｆｒｅｅｚｅ－ｔｈａｗ）导入农杆菌１５９５５菌株。经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法与ＤＮＡ杂交法测定表明，转化菌Ａ１１已携带ＭＧＳｃ－ＤＮＡ片段。
关键词
玉米
谷氨酰胺合成酶
基因导入
根癌农杆菌
Keywords
Maize glutamine synthetase
pbi 121 vector
Gene introduction
Agrobacterium tumefaciens
分类号
S513.035.3 [农业科学—作物学]
Q7 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
白颖苔草热激转录因子(HSF1)真核表达载体的构建
孙彦
郭校民
周禾
《草业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
玉米谷氨酰胺合成酶c-DNA导入根癌农杆菌15955
唐龙飞
刘中柱
董可文
《福建农业学报》
CAS
1998
1
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职称材料
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