目的:通过分析微RNA(microRNA,miR)-21-5p及其靶基因含硬化蛋白域蛋白1(recombinant sclerostin domain containing protein 1,SOSTDC1)在甲状腺癌中的作用,深入了解甲状腺癌转移的分子机制。方法:通过生物信息学分析和细胞验证筛选出mi...目的:通过分析微RNA(microRNA,miR)-21-5p及其靶基因含硬化蛋白域蛋白1(recombinant sclerostin domain containing protein 1,SOSTDC1)在甲状腺癌中的作用,深入了解甲状腺癌转移的分子机制。方法:通过生物信息学分析和细胞验证筛选出miR-21-5p,通过miR-21-5p抑制剂转染甲状腺癌细胞系;采用MTT实验、流式细胞术和细胞划痕实验分别检测miR-21-5p抑制剂组和抑制剂对照组的甲状腺癌细胞增殖、凋亡和迁移的情况;采用荧光素酶报告实验验证miR-21-5p和SOSTDC1的靶向调控关系;采用蛋白质印迹法检测miR-21-5p抑制剂组和抑制剂对照组甲状腺癌细胞中SOSTDC1、下游磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPK)/细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)信号通路因子的表达水平及磷酸化水平。结果:MiR-21-5p在甲状腺癌细胞中显著上升,且与SOSTDC1呈负相关(r=-0.24,P<0.01);miR-21-5p抑制剂组甲状腺癌细胞增殖和迁移显著低于抑制剂对照组(均P<0.01),细胞凋亡率显著高于抑制剂对照组(P<0.01);荧光素酶报告实验表明miR-21-5p能够靶向调控SOSTDC1表达水平;甲状腺癌细胞中PI3K/Akt和MAPK/ERK信号通路检测显示miR-21-5p抑制剂组PI3K表达水平显著低于抑制剂对照组(P<0.01),Akt和ERK1/2水平无显著变化,但miR-21-5p抑制剂组Akt和ERK1/2磷酸化水平显著低于抑制剂对照组(均P<0.01)。结论:甲状腺癌细胞中miR-21-5p能够靶向抑制SOSTDC1的表达,影响PI3K/Akt和MAPK/ERK活性,从而抑制甲状腺癌细胞凋亡,促进细胞的增殖和迁移能力。展开更多
目的通过免疫组织化学方法检测翼状胬肉组织中环氧化酶-2(COX-2)和p21ras的表达,进一步证实氧自由基在翼状胬肉形成和发展中的作用。方法选择临床切除的静止期、进行期和复发期胬肉材料共40例,行苏木精-伊红染色及COX-2和p21ras免疫组...目的通过免疫组织化学方法检测翼状胬肉组织中环氧化酶-2(COX-2)和p21ras的表达,进一步证实氧自由基在翼状胬肉形成和发展中的作用。方法选择临床切除的静止期、进行期和复发期胬肉材料共40例,行苏木精-伊红染色及COX-2和p21ras免疫组织化学染色。结果COX-2及p21ras在正常球结膜中表达微弱,静止期胬肉组织中COX-2和p21ras阳性染色主要位于复层鳞状上皮化生细胞,在进行期及复发期翼状胬肉组织中COX-2及p21ras阳性染色弥漫性分布于复层鳞状上皮化生细胞的胞浆和杯状细胞的胞浆中,胬肉组织中的炎性细胞和血管内皮细胞胞浆可见少量COX-2及p21ras表达。结论p21ras and COX-2的过度表达在翼状胬肉的发生和发展过程中可能起重要作用。展开更多
文摘目的:通过分析微RNA(microRNA,miR)-21-5p及其靶基因含硬化蛋白域蛋白1(recombinant sclerostin domain containing protein 1,SOSTDC1)在甲状腺癌中的作用,深入了解甲状腺癌转移的分子机制。方法:通过生物信息学分析和细胞验证筛选出miR-21-5p,通过miR-21-5p抑制剂转染甲状腺癌细胞系;采用MTT实验、流式细胞术和细胞划痕实验分别检测miR-21-5p抑制剂组和抑制剂对照组的甲状腺癌细胞增殖、凋亡和迁移的情况;采用荧光素酶报告实验验证miR-21-5p和SOSTDC1的靶向调控关系;采用蛋白质印迹法检测miR-21-5p抑制剂组和抑制剂对照组甲状腺癌细胞中SOSTDC1、下游磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPK)/细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)信号通路因子的表达水平及磷酸化水平。结果:MiR-21-5p在甲状腺癌细胞中显著上升,且与SOSTDC1呈负相关(r=-0.24,P<0.01);miR-21-5p抑制剂组甲状腺癌细胞增殖和迁移显著低于抑制剂对照组(均P<0.01),细胞凋亡率显著高于抑制剂对照组(P<0.01);荧光素酶报告实验表明miR-21-5p能够靶向调控SOSTDC1表达水平;甲状腺癌细胞中PI3K/Akt和MAPK/ERK信号通路检测显示miR-21-5p抑制剂组PI3K表达水平显著低于抑制剂对照组(P<0.01),Akt和ERK1/2水平无显著变化,但miR-21-5p抑制剂组Akt和ERK1/2磷酸化水平显著低于抑制剂对照组(均P<0.01)。结论:甲状腺癌细胞中miR-21-5p能够靶向抑制SOSTDC1的表达,影响PI3K/Akt和MAPK/ERK活性,从而抑制甲状腺癌细胞凋亡,促进细胞的增殖和迁移能力。
文摘目的通过免疫组织化学方法检测翼状胬肉组织中环氧化酶-2(COX-2)和p21ras的表达,进一步证实氧自由基在翼状胬肉形成和发展中的作用。方法选择临床切除的静止期、进行期和复发期胬肉材料共40例,行苏木精-伊红染色及COX-2和p21ras免疫组织化学染色。结果COX-2及p21ras在正常球结膜中表达微弱,静止期胬肉组织中COX-2和p21ras阳性染色主要位于复层鳞状上皮化生细胞,在进行期及复发期翼状胬肉组织中COX-2及p21ras阳性染色弥漫性分布于复层鳞状上皮化生细胞的胞浆和杯状细胞的胞浆中,胬肉组织中的炎性细胞和血管内皮细胞胞浆可见少量COX-2及p21ras表达。结论p21ras and COX-2的过度表达在翼状胬肉的发生和发展过程中可能起重要作用。
