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Development of Bovine Embryos from Two Different Activated-time Oocytes for Parthenogenesis and Two Kinds of Nucleus Donors for Cloning
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《Journal of Northeast Agricultural University(English Edition)》 CAS 1999年第1期79-79,共1页
TheaimofExperiment1wastocomparetheefectoftwodiferentactivatingtimeonparthenogeneticembryonicdevelopment.Oocy... TheaimofExperiment1wastocomparetheefectoftwodiferentactivatingtimeonparthenogeneticembryonicdevelopment.Oocyteswhichwereaspir... 展开更多
关键词 Activated-time DIFFERENT oocytes
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Development of the SCNT Embryo from Butyrolactone Ⅰ Prematured Bovine Oocytes
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作者 Zhou Jia-bo Zhang Li +3 位作者 Cao Xiao-zhang Yue Kui-zhong Liu Di Yue Shun-li 《Journal of Northeast Agricultural University(English Edition)》 CAS 2012年第2期42-46,共5页
The somatic cell nuclear transfer (SCNT) technique has been applied successfully in a range of mammalian species giving rise to offspring, however, the efficiency of development to term has remained low. Oocyte meio... The somatic cell nuclear transfer (SCNT) technique has been applied successfully in a range of mammalian species giving rise to offspring, however, the efficiency of development to term has remained low. Oocyte meiotic arrest is an important option to make the SCNT more flexible and increase the number of cloned embryos produced. This paper showed that the use of butyrolactone I to arrest the meiotic division for 24 h prior to in vitro maturation (IVM) provided bovine oocytes capability of supporting development of blastocysts as efficiently as non arrested oocytes. In the SCNT group, cleavage rates were not affected by prematuration when adding butyrolactone I during IVM (57.9% vs. 62.4%; control vs. 10 μmol.L^-1 butyrolactone I), developmental rates to biastocyst were unaffected (22.0% vs. 20.3%; control vs. 10 μmol.L^-1 butyrolactone I, p〉0.05) by the addition ofbutyrolactone I during IVM in cloned embryos. Moreover, the total cell numbers of blastocyst were not affected by butyrolactone I (total nucleus numbers, 132±16.5 vs. 128±19.4, p〉0.05). In conclusion, the SCNT embryos from butyrolactone I- prematured bovine oocytes had the same developmental potential as the non treated one. The present study provided a method for laboratories of in vitro embryos production, mainly those working on the SCNT, where prematuration could be used to iiacrease the flexibility of the procedure. 展开更多
关键词 BOVINE OOCYTE prematuration butyrolactone I
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热带爪蟾(Xenopus tropicalis)胚胎在生态毒理学中的应用前景 被引量:3
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作者 施华宏 朱静敏 +2 位作者 朱攀 杨红伟 吴粒铰 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期190-198,共9页
首先介绍了热带爪蟾(Xenopus tropicalis)作为新的模式动物的发展过程以及热带爪蟾基因组学方面的研究进展,概述了非洲爪蟾(X.laevis)胚胎在生态毒理学中的应用。在此基础上,详细讨论了热带爪蟾胚胎在污染物致毒效应和作用机理、毒理学... 首先介绍了热带爪蟾(Xenopus tropicalis)作为新的模式动物的发展过程以及热带爪蟾基因组学方面的研究进展,概述了非洲爪蟾(X.laevis)胚胎在生态毒理学中的应用。在此基础上,详细讨论了热带爪蟾胚胎在污染物致毒效应和作用机理、毒理学理论和环境样品生态毒性检测等方面的应用现状和前景。最后,简要介绍了目前国内外有关热带爪蟾网站、书籍和养殖等方面的信息资源。 展开更多
关键词 热带爪蟾 胚胎 模式动物 发育毒性
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全氟辛磺酸(PFOS)对非洲爪蟾(Xenopus laevis)生长发育、甲状腺和性腺组织学的影响 被引量:11
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作者 刘青坡 钱丽娟 +1 位作者 郭素珍 施华宏 《生态毒理学报》 CAS CSCD 2008年第5期464-472,共9页
为了揭示全氟辛磺酸(PFOS)的甲状腺激素和性激素干扰效应,并探索运用爪蟾动物模型同时检测多种环境内分泌干扰效应的可能性,将NF48阶段非洲爪蟾(Xenopus laevis)蝌蚪暴露于0.01、0.1和1mg·L-1PFOS中6个月,检测PFOS对爪蟾生长、变... 为了揭示全氟辛磺酸(PFOS)的甲状腺激素和性激素干扰效应,并探索运用爪蟾动物模型同时检测多种环境内分泌干扰效应的可能性,将NF48阶段非洲爪蟾(Xenopus laevis)蝌蚪暴露于0.01、0.1和1mg·L-1PFOS中6个月,检测PFOS对爪蟾生长、变态、甲状腺和性腺的影响.结果表明,在各取样时间,PFOS组爪蟾体长、体重和蝌蚪尾长与对照组均无显著差异(p>0.05);2个月后,PFOS组比对照组平均慢1个发育阶段,4和6个月后,0.01mg·L-1PFOS组反而比对照组分别快1和2个发育阶段.6个月后,PFOS组甲状腺出现滤泡上皮细胞增生、胶质减少甚至空泡化等现象,且随着PFOS浓度的增加而加重;各组幼蛙性腺出现间性、睾丸珍珠状和先天性萎缩等畸形现象,外观为间性的性腺主要表现为睾丸组织中产生类似雌性个体的卵巢腔.对照组幼蛙的雌雄比为0.5:1,而暴露组分别为2.3:1(0.01mg·L-1组)、4.5:1(0.1mg·L-1组)和5:1(1mg·L-1组).上述结果表明,PFOS对爪蟾的变态过程具有小剂量刺激效应,能引起甲状腺组织结构的损伤,导致睾丸组织的雌性化和雌雄性比的异常升高,表现出明显的甲状腺激素和性激素干扰效应,可以认定为一种环境内分泌干扰物.实验同时表明非洲爪蟾可以用于多种环境内分泌干扰效应的同时检测. 展开更多
关键词 全氟辛磺酸 非洲爪蟾 变态 甲状腺 性腺 内分泌干扰物
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瑞马唑仑复合丙泊酚在超声引导下取卵术中的麻醉效果
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作者 董麦娟 王宇锋 +2 位作者 袁伟 牛佳乐 朱耀民 《实用医学杂志》 北大核心 2026年第1期126-131,共6页
目的 观察瑞马唑仑复合丙泊酚用于超声引导下取卵术中的麻醉效果。方法 选取2024年7月至2025年1月行择期体超声引导下取卵术的患者145例,按随机数字表法分为3组:丙泊酚组(P组)、0.05 mg/kg瑞马唑仑复合合丙泊酚组(PR_(1)组)、0.1 mg/kg... 目的 观察瑞马唑仑复合丙泊酚用于超声引导下取卵术中的麻醉效果。方法 选取2024年7月至2025年1月行择期体超声引导下取卵术的患者145例,按随机数字表法分为3组:丙泊酚组(P组)、0.05 mg/kg瑞马唑仑复合合丙泊酚组(PR_(1)组)、0.1 mg/kg瑞马唑仑复合丙泊酚组(PR_(2)组)。3组均先静脉注射舒芬太尼0.1μg/kg,PR_(1)组静脉注射瑞马唑仑0.05 mg/kg和丙泊酚1~3 mg/kg,PR_(2)组静脉注射瑞马唑仑0.1 mg/kg和丙泊酚1~3 mg/kg;P组静脉注射等剂量的生理盐水和丙泊酚1~3 mg/kg。记录3组患者在麻醉诱导前(T_(0))、诱导成功后(T_(1))、穿刺时(T_(2))、取卵开始后5 min(T_(3))、苏醒时(T_(4))、苏醒后10 min(T_(5))的生命体征。记录丙泊酚用量,镇静成功率、记录术后1 min MOAA/S评分及PADSS评分≥9分所需时间。记录不良反应(呼吸抑制、低血压、心动过缓、恶心呕吐、呃逆)的发生情况。结果 与P组相比,PR_(1)组与PR_(2)组在T_(1)时心率、血压均较高(均P<0.05)。与P组和PR_(1)组相比,PR_(2)组在T_(2)时心率、血压较低(均P<0.05)。与P组相比,PR_(1)组和PR_(2)组在T_(3)时心率、血压均较低(均P<0.05),3组各时点的SpO_(2)差异无统计学意义(P>0.05)。与P组相比,PR_(1)组和PR_(2)组丙泊酚用量减少(均P<0.05),镇静成功率高(均P<0.05),术后1 min MOAA/S评分较高(均P<0.05),PADSS评分≥9分所需时间短(均P<0.05)。与PR_(1)组相比,PR_(2)组丙泊酚用量更少(P<0.05),镇静成功率更高(P<0.05)。与P组相比,PR_(1)与PR_(2)组呼吸抑制与低血压的发生率均较低(均P<0.05)。3组患者恶心呕吐、呃逆的发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 0.1 mg/mL的瑞马唑仑复合丙泊酚在取卵手术中的麻醉效果优于单独使用丙泊酚,值得临床推广应用。 展开更多
关键词 瑞马唑仑 丙泊酚 取卵术 镇静
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家畜卵母细胞玻璃化冷冻保护剂应用进展与优化策略
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作者 李伉 陈思颍 +3 位作者 孙雅雯 冷璇 王栋 庞云渭 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第2期521-531,共11页
卵母细胞玻璃化冷冻保存技术是保存优良畜禽种质资源和珍稀濒危物种的重要手段,也是推动品种改良和胚胎产业化生产的重要技术支撑。冷冻保护剂是玻璃化冷冻的关键媒介,通过降低溶液冰点、增加溶液黏度、抑制冰晶形成和重结晶、缓解渗透... 卵母细胞玻璃化冷冻保存技术是保存优良畜禽种质资源和珍稀濒危物种的重要手段,也是推动品种改良和胚胎产业化生产的重要技术支撑。冷冻保护剂是玻璃化冷冻的关键媒介,通过降低溶液冰点、增加溶液黏度、抑制冰晶形成和重结晶、缓解渗透损伤等机制发挥保护作用。然而,冷冻保护剂的细胞毒性是玻璃化冷冻中亟待解决的核心问题之一。开发低毒、高效的新型冷冻保护剂已成为提高家畜卵母细胞玻璃化冷冻效率的重要研究方向。文章系统分析了传统冷冻保护剂对卵母细胞的毒性损伤机制,重点综述了小分子渗透调节剂、脂质调节剂、抗氧化剂及细胞骨架稳定剂等新型冷冻保护剂的应用进展,旨在为优化家畜卵母细胞玻璃化冷冻体系提供理论依据和技术参考。 展开更多
关键词 卵母细胞 玻璃化冷冻 冷冻损伤 冷冻保护剂
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金刚烷胺和硒代蛋氨酸联合处理对猪卵母细胞与早期胚胎中猪圆环病毒2型复制的影响
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作者 余会芳 徐倩倩 +4 位作者 刘龑 尹智 邵雨彤 刘忠华 翁晓刚 《东北农业大学学报》 北大核心 2026年第1期92-99,共8页
研究旨在探究金刚烷胺与硒代蛋氨酸联合处理对猪圆环病毒2型(PCV2)在卵母细胞及早期胚胎中复制的抑制作用及其对发育能力的影响。2019—2021年,从屠宰场猪卵巢中分离16株PCV2,经ORF2序列进化分析表明,9株属于PCV2 a的亚基因型、7株属于P... 研究旨在探究金刚烷胺与硒代蛋氨酸联合处理对猪圆环病毒2型(PCV2)在卵母细胞及早期胚胎中复制的抑制作用及其对发育能力的影响。2019—2021年,从屠宰场猪卵巢中分离16株PCV2,经ORF2序列进化分析表明,9株属于PCV2 a的亚基因型、7株属于PCV2 b的亚基因型。首先,确认适当浓度的金刚烷胺和硒代蛋氨酸(SeMet)添加对卵母细胞成熟和孤雌囊胚发育率均无影响;再通过qPCR和免疫荧光法检测病毒复制水平。结果表明:适当浓度的硒代蛋氨酸与金刚烷胺联合处理显著降低卵母细胞、囊胚及培养液中PCV2核酸拷贝数(P<0.05)和Cap蛋白表达(P<0.01)。该联合处理可有效抑制PCV2复制且不影响胚胎发育,可为防控PCV2垂直传播提供依据。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 卵母细胞 胚胎 金刚烷胺 硒代蛋氨酸
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淀山湖翘嘴鲌配子冷冻保存技术研究
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作者 郭冰玉 蔡心清 +6 位作者 张全根 朱晶晶 谢婷婷 苏明 张杰 韩兵社 张俊芳 《水产科技情报》 2026年第1期1-10,共10页
为了保护翘嘴鲌(Culter alburnus)鱼类种质资源,对淀山湖翘嘴鲌精子和卵母细胞进行冷冻保存配方优化。结果显示:使用D-15为稀释液、含10%(体积分数)乙二醇和5 mg/mL海藻糖的抗冻剂、装样量为120μL、激活条件为0.4%(质量分数)氯化钠条... 为了保护翘嘴鲌(Culter alburnus)鱼类种质资源,对淀山湖翘嘴鲌精子和卵母细胞进行冷冻保存配方优化。结果显示:使用D-15为稀释液、含10%(体积分数)乙二醇和5 mg/mL海藻糖的抗冻剂、装样量为120μL、激活条件为0.4%(质量分数)氯化钠条件保存的翘嘴鲌精子具有较高活力,冷冻保存7 d的翘嘴鲌精子经人工授精可成功孵化出幼鱼,胚胎发育过程与鲜精对照无明显差异,表明冷冻保存的翘嘴鲌精子功能正常;使用以氯化钾缓冲液为稀释液,含3.00 mol/L二甲基亚砜、2.00 mol/L甲醇、2.00 mol/L丙二醇和1.00 mmol/L褪黑素的玻璃化冷冻保护剂,翘嘴鲌卵母细胞的存活率最高,为(63.52±2.17)%。该试验建立了一套完善的翘嘴鲌配子冷冻保存体系,可为翘嘴鲌的人工繁育、育种创新及种质资源保护提供技术支持。 展开更多
关键词 翘嘴鲌 冷冻保存 精子 卵母细胞
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N4-乙酰胞苷修饰在卵母细胞成熟过程中的调控机制
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作者 张一丹 姬鹏云 +4 位作者 郭晨云 宁昊泽 高佳心 王冰源 刘国世 《黑龙江动物繁殖》 2026年第1期40-46,共7页
表观转录组学揭示了RNA化学修饰在基因表达调控中的关键作用。N4-乙酰胞苷(N4-acetylcytidine,ac^(4)C)是一种新近在mRNA上被发现的高度保守的修饰,由N-乙酰转移酶10(N-acetyltransferase 10,Nat10)催化,参与调控mRNA的稳定性和翻译效... 表观转录组学揭示了RNA化学修饰在基因表达调控中的关键作用。N4-乙酰胞苷(N4-acetylcytidine,ac^(4)C)是一种新近在mRNA上被发现的高度保守的修饰,由N-乙酰转移酶10(N-acetyltransferase 10,Nat10)催化,参与调控mRNA的稳定性和翻译效率。在转录静默的卵母细胞成熟过程中,转录后调控成为决定蛋白质合成及细胞周期进程的核心机制。文章系统综述了ac^(4)C修饰的生物学基础及其检测技术的进展,重点阐述了Nat10介导的ac^(4)C修饰在调控卵母细胞减数分裂进程、母源mRNA翻译效率及其代谢清除等方面的分子机制。并深入探讨了ac^(4)C修饰在卵母细胞成熟这一关键生命事件中的调控网络,旨在为揭示卵母细胞发育潜能的分子基础、理解女性不孕相关机制及优化辅助生殖技术提供新的理论视角和研究思路。 展开更多
关键词 N4-乙酰胞苷(ac^(4)C) N-乙酰转移酶10(Nat10) 卵母细胞成熟 翻译调控 表观转录组学
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牛体外胚生产技术研究进展
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作者 余冬冬 李伟 +1 位作者 罗星 朱化彬 《中国奶牛》 2026年第1期22-29,共8页
近年来,奶牛胚胎移植在国内发展迅速,体外胚生产作为奶牛胚胎移植发展的方向和趋势,在品种改良和遗传育种中具有广泛的应用前景,已成为奶牛繁育的重要手段。但由于卵母细胞体外发育的环境与体内差异巨大,如何提高卵母细胞和胚胎的发育... 近年来,奶牛胚胎移植在国内发展迅速,体外胚生产作为奶牛胚胎移植发展的方向和趋势,在品种改良和遗传育种中具有广泛的应用前景,已成为奶牛繁育的重要手段。但由于卵母细胞体外发育的环境与体内差异巨大,如何提高卵母细胞和胚胎的发育效率是当下亟待解决的问题。随着体外成熟体系和胚胎成像系统快速发展,对卵母细胞和胚胎的体外发育的机理有了更深入的认识,也为优化体外胚生产体系提供了新的思路。本文就国内外奶牛体外胚生产的最新进展以及对包括体外成熟技术、胚胎成像技术等相关技术进行阐述,以期为更好地推广和应用体外胚生产提供理论参考和依据。 展开更多
关键词 卵母细胞 体外胚生产 活体采卵 体外成熟 延迟成像
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猪体外胚胎生产技术研究进展
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作者 于之涵 于洋 +2 位作者 秦天苗 杨静怡 李俊杰 《中国畜禽种业》 2026年第1期43-52,共10页
猪体外胚胎生产技术在种质资源保存、转基因猪制备及人类疾病模型构建中具有重要意义,该技术包括活体采卵、卵母细胞体外成熟、体外受精、猪胚胎体外培养等环节。目前猪体外胚胎生产系统仍存在多精入卵、卵母细胞核质成熟不同步等问题... 猪体外胚胎生产技术在种质资源保存、转基因猪制备及人类疾病模型构建中具有重要意义,该技术包括活体采卵、卵母细胞体外成熟、体外受精、猪胚胎体外培养等环节。目前猪体外胚胎生产系统仍存在多精入卵、卵母细胞核质成熟不同步等问题。该文综述了猪体外胚胎生产技术的核心过程和最新研究成果,重点讨论了多精入卵和卵母细胞核质成熟不同步等问题及其解决办法,以期为猪体外胚胎生产效率提高提供文献参考。 展开更多
关键词 养猪业 体外胚胎生产 多精入卵 卵母细胞核质同步成熟
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黄海细纹狮子鱼卵巢发育的组织学观察
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作者 陈云龙 张发扬 +3 位作者 单秀娟 滕广亮 戴芳群 金显仕 《渔业科学进展》 北大核心 2025年第4期67-77,共11页
细纹狮子鱼(Liparis tanakae)是黄海生态系统的优势种,阐明其种群繁殖规律是揭示优势种维持机制的前提,也是深层次认知生态系统结构与功能的基础。本研究采用石蜡切片和HE染色法对其卵巢各发育阶段进行了组织学研究,详细描述了各时相卵... 细纹狮子鱼(Liparis tanakae)是黄海生态系统的优势种,阐明其种群繁殖规律是揭示优势种维持机制的前提,也是深层次认知生态系统结构与功能的基础。本研究采用石蜡切片和HE染色法对其卵巢各发育阶段进行了组织学研究,详细描述了各时相卵母细胞的形态和卵径分布特征,并分析了细纹狮子鱼的产卵类型。结果显示,细纹狮子鱼卵母细胞发育可分为6个时相:第Ⅰ时相为刚从卵原细胞分化为卵母细胞时期,细胞体积小,细胞核占比较大;第Ⅱ时相,卵母细胞增大,细胞周围出现一层滤泡膜;第Ⅲ时相,细胞质中出现卵黄泡,卵黄开始积累,质膜与滤泡膜间出现放射带,滤泡膜变为2层;第Ⅳ时相,卵黄开始填充卵黄泡,并逐渐结成卵黄小板;第Ⅴ时相,卵黄融成单一大卵黄球,细胞核溶解;第Ⅵ时相卵母细胞退化,卵黄被逐渐吸收形成空腔,部分卵母细胞形态不规则。细纹狮子鱼卵巢发育分为6期,不同发育时期各时相卵母细胞的组成比例不同。其中,Ⅳ期卵巢内卵径呈单峰分布,优势粒径组为0.90~1.00 mm,主要由第Ⅲ、Ⅳ时相卵母细胞组成;Ⅴ期卵巢内卵径呈单峰分布,优势粒径组为1.70~1.80 mm,主要由第Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ时相卵母细胞组成,第Ⅴ时相卵母细胞增多;Ⅵ期卵巢卵径呈双峰分布,优势粒径组主要集中于0.50~0.70 mm和1.10~1.20 mm,处于小生长期的卵母细胞和退化的卵母细胞比例较高。细纹狮子鱼卵巢发育模式为非同步型分批产卵类型。研究结果揭示了细纹狮子鱼卵巢发育规律及特点,为进一步丰富该鱼的繁殖生态学提供了理论参考。 展开更多
关键词 细纹狮子鱼 组织切片 卵巢发育 卵径
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卵母细胞玻璃化冷冻保存中凋亡的机制及缓解策略
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作者 陈丹丹 齐雅天 李俊杰 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第6期2729-2735,共7页
作为一种在超低温环境下长期保存卵母细胞的技术,卵母细胞玻璃化冷冻保存在优良种质资源保存方面具有重要意义。然而,玻璃化冷冻保存技术面临的核心挑战在于细胞凋亡信号的激活致使凋亡细胞比例升高,影响细胞功能、活力和发育潜能。细... 作为一种在超低温环境下长期保存卵母细胞的技术,卵母细胞玻璃化冷冻保存在优良种质资源保存方面具有重要意义。然而,玻璃化冷冻保存技术面临的核心挑战在于细胞凋亡信号的激活致使凋亡细胞比例升高,影响细胞功能、活力和发育潜能。细胞凋亡是指一种程序化的细胞死亡过程,通常被称为“细胞自杀”,这一机制在生物体内发挥着关键作用,有助于维持细胞的平衡和组织的稳态。然而,异常的细胞凋亡会导致细胞死亡等不利影响。因此,有效抑制或减缓细胞凋亡过程,成为提高冷冻卵母细胞存活率和发育潜能的关键所在。应用凋亡抑制剂和抗氧化剂可以减少玻璃化卵母细胞凋亡,提高其存活率和发育能力,从而改善解冻后的细胞质量。作者简述了玻璃化冷冻保存技术对卵母细胞的影响,以及冷冻引起的细胞内源性和外源性凋亡机制,并分析了相关凋亡抑制剂与抗氧化剂的应用,未来可深入探究新型抑制剂与抗氧化剂在玻璃化冷冻技术中的作用机理,以及探究细胞凋亡与坏死性凋亡等细胞死亡途径之间的交互影响,为卵母细胞玻璃化冷冻保存技术提供新的思路和方法。 展开更多
关键词 冷冻保存技术 卵母细胞 细胞凋亡 凋亡抑制剂 抗氧化剂
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辅助生殖技术中的抗核抗体:临床相关性和治疗启示
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作者 丁凯 李欣 赵纯 《南京医科大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第3期301-310,共10页
在辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)的应用中,抗核抗体(antinuclear antibody,ANA)对不孕症患者妊娠结果的影响受到关注。ANA作为自身免疫异常的生物标志物,与不明原因不孕症的关联性及其对卵母细胞和胚胎质量的潜... 在辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)的应用中,抗核抗体(antinuclear antibody,ANA)对不孕症患者妊娠结果的影响受到关注。ANA作为自身免疫异常的生物标志物,与不明原因不孕症的关联性及其对卵母细胞和胚胎质量的潜在影响已被广泛研究。现有证据表明,ANA阳性可能与卵巢储备功能降低、胚胎发育不良、临床妊娠率下降和流产风险增加相关。卵泡液中的ANA水平被认为是预测自体免疫相关性不孕的敏感指标。特定的ANA亚类,如抗双链DNA抗体和抗着丝点抗体,与卵母细胞成熟障碍和胚胎发育迟缓有关。尽管如此,ANA阳性与女性生育能力下降及不良生殖结果之间的直接联系仍需进一步研究以明确。文章还讨论了针对ANA阳性患者的不同治疗方案,包括糖皮质激素、低剂量阿司匹林和羟氯喹等,旨在为ART的临床实践和研究提供指导。 展开更多
关键词 抗核抗体 辅助生殖技术 不孕症 卵母细胞 胚胎质量 治疗
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阿戈美拉汀对猪卵母细胞体外成熟及手工克隆胚胎发育潜能的影响
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作者 张家庆 沈开元 +6 位作者 孙如玉 胡湘云 刘明君 刘征 李仕彦 张冰 吕玲燕 《中国畜禽种业》 2025年第2期7-16,共10页
该试验在猪卵母细胞体外成熟的前20~22 h培养过程中添加10^(-11)、10^(-10)、10^(-9)和10^(-8)mol/L的阿戈美拉汀,不添加阿戈美拉汀的作为对照组,对猪卵巢中收集到的卵母细胞进行体外培养。卵母细胞体外成熟后,利用2',7'-二氯... 该试验在猪卵母细胞体外成熟的前20~22 h培养过程中添加10^(-11)、10^(-10)、10^(-9)和10^(-8)mol/L的阿戈美拉汀,不添加阿戈美拉汀的作为对照组,对猪卵巢中收集到的卵母细胞进行体外培养。卵母细胞体外成熟后,利用2',7'-二氯双氢荧光素二乙酸酯(DCHF-DA)染色方法检测卵母细胞中活性氧水平,采用绿色荧光素标记花生凝集素(FITC-PNA)染色方法检测卵母细胞中皮质颗粒分布情况;手工克隆重构胚激活后在第2天统计卵裂率、第7天统计囊胚发育率和囊胚细胞总数,采用实时荧光定量PCR法检测囊胚中多能性基因表达情况。结果表明院与对照组相比,添加10^(-11)、10^(-10)mol/L的阿戈美拉汀能显著降低卵母细胞内活性氧水平(P<0.05),且10^(-10)mol/L的阿戈美拉汀显著促进了卵母细胞皮质颗粒分布类型I比例(P<0.05)。10^(-11)、10^(-10)mol/L浓度的阿戈美拉汀添加都可以促进徒手克隆胚胎的卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数,但10^(-10)mol/L浓度下促进效果显著(P<0.05),据此确定猪卵母细胞体外成熟液中添加阿戈美拉汀浓度为10^(-10)mol/L。定量PCR结果显示,阿戈美拉汀组囊胚细胞中多能性基因NANOG、POU5F1、SOX2的mRNA的表达量均显著高于对照组(P<0.05)。可见,猪卵母细胞体外成熟液中添加10^(-10)mol/L的阿戈美拉汀可提高卵母细胞的体外成熟质量,改善克隆胚胎的体外发育潜能。 展开更多
关键词 阿戈美拉汀 卵母细胞 手工克隆胚胎 发育潜能
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哺乳动物卵泡发育阶段颗粒细胞增殖与分化的研究进展 被引量:3
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作者 郭妍岩 张羽欣 +7 位作者 陆瑞 李玉鹏 陈龙宾 张金龙 姚大为 阮维斌 张效生 郭晓飞 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第4期1484-1493,共10页
在哺乳动物的繁殖过程中,精子和卵子的发生以及受精卵的发育都至关重要。目前,有关哺乳动物卵母细胞成熟发育的研究不在少数,但对其保卫细胞-颗粒细胞是如何对卵母细胞发育产生作用的还有待深入探索。在雌性哺乳动物中,早期卵巢颗粒细... 在哺乳动物的繁殖过程中,精子和卵子的发生以及受精卵的发育都至关重要。目前,有关哺乳动物卵母细胞成熟发育的研究不在少数,但对其保卫细胞-颗粒细胞是如何对卵母细胞发育产生作用的还有待深入探索。在雌性哺乳动物中,早期卵巢颗粒细胞是由卵巢网和卵巢表皮细胞发育而来的;此后的前体颗粒细胞阶段就围绕于卵母细胞周围,通过间隙连接方式为卵母细胞提供营养物质并进行信息交流,并依赖繁殖激素(如AMH、FSH、LH)调节作用进而对卵母细胞成熟进行调控。本文通过综述哺乳动物卵巢颗粒细胞的来源、颗粒细胞在卵泡各发育阶段的分化及其在卵母细胞成熟过程的功能机制,以期为进一步研究哺乳动物卵巢颗粒细胞的生物学功能提供帮助,并为体外卵母细胞成熟培养体系提供优化思路。 展开更多
关键词 卵巢 颗粒细胞 卵母细胞 哺乳动物 增殖与分化
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猪卵母细胞玻璃化冷冻损伤的缓解策略 被引量:3
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作者 孙雅雯 陈思颍 +3 位作者 李伉 冷璇 王栋 庞云渭 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第1期36-44,共9页
卵母细胞的冷冻保存是人类和动物辅助生殖中长期储存遗传资源的重要策略之一。然而,由于卵母细胞的表面积/体积比小、细胞渗透性差,在冷冻过程中极易受到冰晶形成、渗透性休克、氧化应激和冷冻保护剂毒性等损伤,严重降低其解冻后的发育... 卵母细胞的冷冻保存是人类和动物辅助生殖中长期储存遗传资源的重要策略之一。然而,由于卵母细胞的表面积/体积比小、细胞渗透性差,在冷冻过程中极易受到冰晶形成、渗透性休克、氧化应激和冷冻保护剂毒性等损伤,严重降低其解冻后的发育能力。与其他动物相比,猪卵母细胞中丰富的脂滴含量降低了其低温耐受性,冷冻保存难度更大。尽管可以从玻璃化未成熟卵母细胞中获得活仔猪,但与新鲜卵母细胞相比,玻璃化冷冻卵母细胞的发育能力还有待进一步提升。本文主要从玻璃化冷冻猪卵母细胞的损伤类型、受损机制、缓解冷冻损伤的策略等方面进行综述,为进一步建立和完善猪卵母细胞玻璃化冷冻保存方案提供参考。 展开更多
关键词 卵母细胞 玻璃化冷冻 冷冻损伤
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甘氨酸提高水貂卵母细胞玻璃化冷冻保存效率的关键机制 被引量:1
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作者 唐毓 张颖 +3 位作者 杨镒峰 薛海龙 刘理想 许保增 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第7期3265-3277,共13页
旨在利用小分子渗透剂甘氨酸具有优化细胞体积调控的作用机理,探究水貂GV期卵母细胞玻璃化冷冻/解冻以及体外成熟(in vitro maturation,IVM)过程中添加甘氨酸对提高卵母细胞冷冻保存效率的影响。本试验在水貂繁殖季节(2~3月份)取1~3岁... 旨在利用小分子渗透剂甘氨酸具有优化细胞体积调控的作用机理,探究水貂GV期卵母细胞玻璃化冷冻/解冻以及体外成熟(in vitro maturation,IVM)过程中添加甘氨酸对提高卵母细胞冷冻保存效率的影响。本试验在水貂繁殖季节(2~3月份)取1~3岁性成熟雌性水貂的卵巢,收集的卵母细胞随机分成3组,分别为对照组、冷冻组以及甘氨酸组,每组至少20枚卵母细胞,每次试验至少重复3次。在玻璃化冷冻、解冻以及随后的体外成熟过程中添加5 mmol·L^(-1)甘氨酸,检测卵母细胞的存活率,体外成熟培养后细胞的核成熟率、线粒体和皮质颗粒分布情况、卵母细胞的活性氧(ROS)水平、细胞凋亡以及组蛋白修饰。利用qRT-PCR和免疫荧光分析凋亡相关基因和DNMT1表达。研究表明,经甘氨酸处理后的玻璃化冷冻方法显著提高了水貂卵母细胞冷冻后的生物学功能。主要表现为玻璃化以及IVM过程中添加甘氨酸组与玻璃化未添加组的卵母细胞相比,存活率和核成熟率显著提高(P<0.05),成熟卵母细胞的线粒体损伤,皮质颗粒易位,ROS水平发生减少(P<0.05);细胞凋亡率降低,促细胞凋亡相关基因CASP3和BAX的mRNA相对表达水平降低(P<0.05),BCL-2/BAX比值升高(P<0.05);此外,玻璃化冷冻后水貂MII期卵母细胞的DNMT1转录水平(P<0.05)、组蛋白H3K9甲基化表达水平得到明显改善(P<0.05)。综上所述,在玻璃化冷冻过程中添加或去除冷冻保护剂所造成的卵母细胞渗透损伤可通过添加甘氨酸调控卵母细胞体积稳态,提高水貂卵母细胞玻璃化冷冻/解冻后的发育能力。 展开更多
关键词 玻璃化冷冻 水貂卵母细胞 甘氨酸 体积调控
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Ghrelin对牛卵母细胞体外成熟和体外受精的影响 被引量:1
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作者 李阔 王子馨 +6 位作者 赵高平 鲁静 孙伟 李云霞 李喜和 曹贵方 张传强 《动物医学进展》 北大核心 2025年第3期64-69,共6页
研究不同浓度生长激素释放肽(growth hormone releasing peptide,GHRL)对牛卵母细胞体外成熟和发育的影响。应用免疫荧光染色法检测GHRL及生长激素促分泌素受体(growth hormone secretagogue receptor,GHSR)在牛卵和卵丘细胞中的定位,添... 研究不同浓度生长激素释放肽(growth hormone releasing peptide,GHRL)对牛卵母细胞体外成熟和发育的影响。应用免疫荧光染色法检测GHRL及生长激素促分泌素受体(growth hormone secretagogue receptor,GHSR)在牛卵和卵丘细胞中的定位,添加0、10、50、100 ng/mL的GHRL对牛卵母细胞进行体外成熟24 h后,检测卵丘细胞扩散程度;GDF 9、BMP 15 mRNA的相对表达量;统计卵母细胞成熟及胚胎发育情况。结果表明,牛卵胞质区有GHRL的表达,且GHSR主要定位于细胞膜上。与对照组相比,添加GHRL 50 ng/mL组卵丘细胞扩散程度显著增加(P<0.05),GHRL 100 ng/mL组显著减少(P<0.01);添加50 ng/mL组的极体排出率显著提高(P<0.05),且BMP 15和GDF 9 mRNA的相对表达量均显著高于对照组(P<0.01);体外成熟16 h时,添加50 ng/mL组极体排出率显著高于对照组(P<0.01),体外受精后,GHRL 50 ng/mL组卵裂率相比对照组无显著差异(P>0.05);添加GHRL 50 ng/mL体外成熟24 h和16 h受精后的卵裂率无显著差异(P>0.05),但24 h囊胚率(63.24%)显著高于16 h(P<0.05)。在试验条件下,添加50 ng/mL可促进卵母细胞的成熟,但抑制了囊胚的形成。研究结果可为牛卵母细胞体外成熟、体外受精的应用提供理论依据。 展开更多
关键词 生长激素释放肽 牛卵母细胞 体外成熟 体外受精
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海藻酸钠水凝胶包封卵母细胞结晶性质研究 被引量:1
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作者 林春燕 张宇琪 周新丽 《制冷学报》 北大核心 2025年第1期157-166,共10页
基于海藻酸钠水凝胶的微囊化技术可用于优化冷冻和复温程序,降低细胞和组织的冷冻损伤。观察了卵母细胞在不同体积分数(0.5%、1.0%、1.5%、2.0%)海藻酸钠水凝胶中的形态,确定其封装的安全浓度;利用低温显微镜系统研究了不同体积分数海... 基于海藻酸钠水凝胶的微囊化技术可用于优化冷冻和复温程序,降低细胞和组织的冷冻损伤。观察了卵母细胞在不同体积分数(0.5%、1.0%、1.5%、2.0%)海藻酸钠水凝胶中的形态,确定其封装的安全浓度;利用低温显微镜系统研究了不同体积分数海藻酸钠水凝胶的结晶温度及结晶行为,并对比卵母细胞在基础溶液、保护剂溶液中降/复温时形态和结晶情况;对比溶剂置换型和物理混合型制备的海藻酸钠抗冻水凝胶包封卵母细胞的冻存效果。结果表明:卵母细胞在0.5%和1.0%体积分数的海藻酸钠凝胶中整体形态与体积维持较好;1.0%体积分数海藻酸钠组和12.5%DMSO+12.5%EG+0.5 mol/L海藻糖的保护剂溶液组中的卵母细胞在降温过程中均未产生胞内冰;相比物理混合型,溶剂置换型组水凝胶中的卵母细胞在降温过程中无胞内冰产生,细胞复温后仍保持正常形态。 展开更多
关键词 海藻酸钠 卵母细胞 微囊化 结晶温度
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