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一步法实时定量RT-PCR检测小反刍兽疫病毒方法的建立
被引量：
38
1
作者
包静月
李林
+3 位作者
王志亮
李金明
刘春菊
肖肖
《中国动物检疫》
CAS
北大核心
2007年第8期21-23,共3页
建立了检测小反刍兽疫病毒的快速、特异的基于Taqman的一步法实时定量RT-PCR方法。通过对GenBank已公布的小反刍兽疫病毒N基因序列进行序列比较分析,设计了一对特异性引物和一条Taqman探针。利用这对引物和探针对来自不同疫源地的小反...
建立了检测小反刍兽疫病毒的快速、特异的基于Taqman的一步法实时定量RT-PCR方法。通过对GenBank已公布的小反刍兽疫病毒N基因序列进行序列比较分析,设计了一对特异性引物和一条Taqman探针。利用这对引物和探针对来自不同疫源地的小反刍兽疫病毒RNA样本进行检测,都获得了特异性扩增,但是,不与牛瘟病毒、海豚麻疹病毒等其他种的麻疹病毒属病毒发生交叉反应。本方法具有高度灵敏性,最低可检测到810拷贝的RNA模板。在模板浓度为8.1×102到8.1×108拷贝范围内,都呈现良好的线性关系,而且无论是组内和或组间重复的变异系数都很低。
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关键词
小反刍兽疫病毒
一步法实时定量RT—
pcr
检测
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职称材料
体外转录法制备新城疫病毒荧光定量RT-PCR标准阳性模板
被引量：
4
2
作者
孙军峰
刘华雷
+1 位作者
张维
王志亮
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2010年第4期43-46,共4页
本研究针对新城疫病毒M基因设计了1对荧光定量RT-PCR引物和Taqman探针,在上游引物的5′端引入T7启动子,采用RT-PCR方法获得了体外转录模板,并对转录产物RNA的浓度及D值进行了测定。线性试验和特异性试验结果表明,该模板具有良好的线性...
本研究针对新城疫病毒M基因设计了1对荧光定量RT-PCR引物和Taqman探针,在上游引物的5′端引入T7启动子,采用RT-PCR方法获得了体外转录模板,并对转录产物RNA的浓度及D值进行了测定。线性试验和特异性试验结果表明,该模板具有良好的线性范围和特异性,模板稀释度为2.95×104～2.95×108拷贝/L时,相关系数为0.998。该模板稳定性好,-80℃保存30 d后无显著变化。浓度为2.95×104～2.95×108拷贝/μL的标准品的变异系数分别为0.20%、0.28%、1.00%、0.54%、0.52%,表明以此模板进行荧光定量PCR具有较好的重复性。
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关键词
新城疫病毒
体外转录
一步法荧光定量RT-
pcr
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职称材料
外周血AFPmRNA、h-TERTmRNA检测对肝细胞肝癌患者预后的意义
被引量：
3
3
作者
张利国
周杰
林建华
《山东医药》
CAS
北大核心
2010年第16期5-7,共3页
目的检测肝细胞肝癌(HCC)患者外周血甲胎蛋白信使核糖核酸(AFPmRNA)、人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的表达,探索其在HCC预后中的应用价值。方法FQ-PCR检测60例HCC患者外周血中AFPmR-NA、hTERTmRNA的表达量,并与对照组进行比较。结果HCC患...
目的检测肝细胞肝癌(HCC)患者外周血甲胎蛋白信使核糖核酸(AFPmRNA)、人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的表达,探索其在HCC预后中的应用价值。方法FQ-PCR检测60例HCC患者外周血中AFPmR-NA、hTERTmRNA的表达量,并与对照组进行比较。结果HCC患者AFPmRNA、hTERTmRNA的表达量及阳性率均高于对照组(P<0.01)。术后随着时间的推移,其表达数量相应减少,阳性率也明显降低,以1周后下降最为显著(P<0.05)。在肿瘤标志物持续表达阳性的患者中,其术后复发率也明显高于阴性者(P<0.01)。结论外周血中定量检测AFPmRNA、hTERTmRNA的表达可以及时发现患者术后HCC的微转移,预测肿瘤的复发倾向,为术后的合理治疗提供依据。
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关键词
肝细胞肝癌
微转移
荧光定量
甲胎蛋白信使核糖核酸
人端粒酶逆转录酶
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职称材料
题名
一步法实时定量RT-PCR检测小反刍兽疫病毒方法的建立
被引量：
38
1
作者
包静月
李林
王志亮
李金明
刘春菊
肖肖
机构
中国动物卫生与流行病学中心国家外来动物疫病诊断中心
出处
《中国动物检疫》
CAS
北大核心
2007年第8期21-23,共3页
基金
受农业部重大外来动物疫病诊断方法研究及防治技术推广储备项目
农业部948项目
文摘
建立了检测小反刍兽疫病毒的快速、特异的基于Taqman的一步法实时定量RT-PCR方法。通过对GenBank已公布的小反刍兽疫病毒N基因序列进行序列比较分析,设计了一对特异性引物和一条Taqman探针。利用这对引物和探针对来自不同疫源地的小反刍兽疫病毒RNA样本进行检测,都获得了特异性扩增,但是,不与牛瘟病毒、海豚麻疹病毒等其他种的麻疹病毒属病毒发生交叉反应。本方法具有高度灵敏性,最低可检测到810拷贝的RNA模板。在模板浓度为8.1×102到8.1×108拷贝范围内,都呈现良好的线性关系,而且无论是组内和或组间重复的变异系数都很低。
关键词
小反刍兽疫病毒
一步法实时定量RT—
pcr
检测
Keywords
peste des petits ruminants virus
one-step real-time quantitative reverse transcriptase pcr
detection
分类号
S858.2 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
体外转录法制备新城疫病毒荧光定量RT-PCR标准阳性模板
被引量：
4
2
作者
孙军峰
刘华雷
张维
王志亮
机构
青岛农业大学
中国动物卫生与流行病学中心
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2010年第4期43-46,共4页
基金
青岛市科技发展计划项目(07-2-3-5-jch)
文摘
本研究针对新城疫病毒M基因设计了1对荧光定量RT-PCR引物和Taqman探针,在上游引物的5′端引入T7启动子,采用RT-PCR方法获得了体外转录模板,并对转录产物RNA的浓度及D值进行了测定。线性试验和特异性试验结果表明,该模板具有良好的线性范围和特异性,模板稀释度为2.95×104～2.95×108拷贝/L时,相关系数为0.998。该模板稳定性好,-80℃保存30 d后无显著变化。浓度为2.95×104～2.95×108拷贝/μL的标准品的变异系数分别为0.20%、0.28%、1.00%、0.54%、0.52%,表明以此模板进行荧光定量PCR具有较好的重复性。
关键词
新城疫病毒
体外转录
一步法荧光定量RT-
pcr
Keywords
Newcastle disease virus
in vitro transcription
one-step real-time quantitative reverse transcriptase pcr
分类号
S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
外周血AFPmRNA、h-TERTmRNA检测对肝细胞肝癌患者预后的意义
被引量：
3
3
作者
张利国
周杰
林建华
机构
南方医科大学附属南方医院
出处
《山东医药》
CAS
北大核心
2010年第16期5-7,共3页
基金
广东省科技计划项目(2007B031514004)
文摘
目的检测肝细胞肝癌(HCC)患者外周血甲胎蛋白信使核糖核酸(AFPmRNA)、人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的表达,探索其在HCC预后中的应用价值。方法FQ-PCR检测60例HCC患者外周血中AFPmR-NA、hTERTmRNA的表达量,并与对照组进行比较。结果HCC患者AFPmRNA、hTERTmRNA的表达量及阳性率均高于对照组(P<0.01)。术后随着时间的推移,其表达数量相应减少,阳性率也明显降低,以1周后下降最为显著(P<0.05)。在肿瘤标志物持续表达阳性的患者中,其术后复发率也明显高于阴性者(P<0.01)。结论外周血中定量检测AFPmRNA、hTERTmRNA的表达可以及时发现患者术后HCC的微转移,预测肿瘤的复发倾向,为术后的合理治疗提供依据。
关键词
肝细胞肝癌
微转移
荧光定量
甲胎蛋白信使核糖核酸
人端粒酶逆转录酶
Keywords
hepatocellular carcinoma
micrometastasis
fluorescent
quantit
ation
pcr
alpha-fetoprotein messenger ribonucleic acid
human telomerase
reverse
transcriptase
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一步法实时定量RT-PCR检测小反刍兽疫病毒方法的建立
包静月
李林
王志亮
李金明
刘春菊
肖肖
《中国动物检疫》
CAS
北大核心
2007
38
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
体外转录法制备新城疫病毒荧光定量RT-PCR标准阳性模板
孙军峰
刘华雷
张维
王志亮
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2010
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
外周血AFPmRNA、h-TERTmRNA检测对肝细胞肝癌患者预后的意义
张利国
周杰
林建华
《山东医药》
CAS
北大核心
2010
3
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