猪NF-kappaB p65/p50基因克隆、序列鉴定及实时荧光定量PCR检测方法的建立

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作者 王潇娣 朱玲 +3 位作者 廖春燕 黄仆 徐志文 郭万柱 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1288-1296,共9页

NF-κB信号通路在病毒感染、免疫损伤性疾病、肿瘤疾病中发挥重要作用,其活化水平常作为机体免疫应答水平、疾病发展进程的检测指标。为获得猪NF-κB p65/p50基因序列特征并建立体外定量检测其表达水平的实时荧光定量PCR方法,作者对猪NF... NF-κB信号通路在病毒感染、免疫损伤性疾病、肿瘤疾病中发挥重要作用,其活化水平常作为机体免疫应答水平、疾病发展进程的检测指标。为获得猪NF-κB p65/p50基因序列特征并建立体外定量检测其表达水平的实时荧光定量PCR方法,作者对猪NF-κB p65ORF和成熟p50编码区进行RT-PCR扩增、克隆、测序及生物信息学分析;设计特异性荧光定量引物,建立检测p65、p50实时荧光定量PCR方法。结果显示:所扩增的猪NF-κB p65ORF长1 662bp,编码553aa,成熟p50编码区长1 653bp,编码551aa;与不同动物的p65、p50序列相似性均较高;56.5%p65位于细胞核内,78.3%p50存在于细胞质中,p65、p50均无信号肽及跨膜区。荧光定量结果表明:起始模板与Ct值之间线性关系好,相关系数达到0.999,扩增效率均在95%左右;敏感性高,初始模板的检出下限达到101 copies.μL-1;特异性强,扩增产物形成单一的特异性熔解峰;重复性好,组内变异系数均小于5‰。本试验为进一步研究猪NF-κB p65/p50生物学功能及其在猪相关疾病发生发展中表达量变化奠定了基础。 展开更多

关键词 猪 核转录因子-kappab 序列分析 实时荧光定量RT-PCR

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苦豆碱通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3通路改善香烟烟雾诱导的人支气管上皮细胞损伤 被引量：3

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作者 王慧 闫晓培 徐莉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期411-418,共8页

目的探究苦豆碱(Alo)对香烟烟雾诱导的人支气管上皮细胞损伤的作用及其可能的作用机制。方法16HBE人支气管上皮细胞经100 mL/L香烟烟雾提取物(CSE)和(50、100、200)μmol/L Alo共处理后,CCK-8法检测细胞活力,试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)... 目的探究苦豆碱(Alo)对香烟烟雾诱导的人支气管上皮细胞损伤的作用及其可能的作用机制。方法16HBE人支气管上皮细胞经100 mL/L香烟烟雾提取物(CSE)和(50、100、200)μmol/L Alo共处理后,CCK-8法检测细胞活力,试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)活性;原位末端转移酶标记技术(TUNEL)、Western blot法检测细胞凋亡,ELISA检测炎性因子水平;2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针和相关试剂盒检测氧化应激水平;Western blot法检测Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)/含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3)通路相关蛋白表达水平。16HBE细胞经100 mL/L CSE和200μmol/L Alo共处理后,采用上述方法检测过表达TLR4对TLR4/NF-κB/NLRP3通路、细胞LDH活性、凋亡、炎症反应及氧化应激的影响。结果CSE暴露可降低16HBE细胞活力,增加LDH释放和细胞凋亡,增强炎症反应和氧化应激水平,且激活TLR4/NF-κB/NLRP3通路;经Alo处理后,细胞活性升高,LDH释放减少、凋亡降低、炎症减轻、氧化应激水平下降,且TLR4/NF-κB/NLRP3通路失活;TLR4过表达可逆转Alo处理对CSE诱导的16HBE细胞损伤的保护作用。结论Alo可通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3通路减轻CSE诱导的人支气管上皮细胞损伤。 展开更多

关键词 支气管上皮细胞 香烟烟雾 苦豆碱 Toll样受体4(TLR4) 核因子κB(NF-κB) 含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3)

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慢病毒介导的解整合素-金属蛋白酶17RNA干扰对气道上皮细胞MMP-9表达及NF-κB活性的影响 被引量：9

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作者 严建平 李亚清 +2 位作者 钟晖 陈淳 顾超 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期559-565,共7页

目的探讨脂多糖(LPS)诱导的气道上皮细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的TNF-α/NF-κB信号转导机制及慢病毒介导的解整合素-金属蛋白酶17(ADAM17)RNA干扰(RNAi)对MMP-9表达的影响。方法构建ADAM17 siRNA慢病毒载体、包装重组慢病毒。以NF... 目的探讨脂多糖(LPS)诱导的气道上皮细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的TNF-α/NF-κB信号转导机制及慢病毒介导的解整合素-金属蛋白酶17(ADAM17)RNA干扰(RNAi)对MMP-9表达的影响。方法构建ADAM17 siRNA慢病毒载体、包装重组慢病毒。以NF-κB抑制剂(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)或TNF-α拮抗剂(etanercept)预处理HBE4-E6/E7细胞,以LPS刺激HBE4-E6/E7细胞24 h。以重组慢病毒感染HBE4-E6/E7细胞72 h后,以LPS或TNF-α刺激HBE4-E6/E7细胞24 h。以半定量RT-PCR检测MMP-9 mRNA表达;以酶联免疫吸附试验检测TNF-α蛋白含量;以Western blot检测MMP-9蛋白表达;以凝胶阻滞分析实验检测NF-κB活性。结果 LPS或TNF-α刺激均明显增加HBE4-E6/E7细胞MMP-9 mRNA和蛋白表达及NF-κB活性(P<0.05);etanercept和PDTC均明显抑制LPS诱导的MMP-9表达及NF-κB活性(P<0.05)。慢病毒介导的ADAM17 RNAi明显降低LPS诱导的HBE4-E6/E7细胞上清液中TNF-α蛋白含量(P<0.05),亦明显降低MMP-9 mRNA和蛋白表达及NF-κB活性(P<0.05),但不能降低TNF-α诱导的MMP-9mRNA和蛋白表达及NF-κB活性(P>0.05)。PDTC明显抑制TNF-α诱导的MMP-9 mRNA和蛋白表达及NF-κB活性(P<0.05)。结论 TNF-α/NF-κB信号通路参与调控LPS诱导的气道上皮细胞MMP-9的表达,ADAM17通过调节TNF-α释放在其信号通路上游起到重要作用。 展开更多

关键词 RNA干扰 慢病毒 气道上皮细胞 解整合素-金属蛋白酶17 基质金属蛋白酶 肿瘤坏死因子-α a DISINTEGRIN and METALLOPROTEINASE 17 tumor necrosis factor-α

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乌司他汀对内毒素休克兔肿瘤坏死因子-a与白介素6及核转录因子-κB的影响及其剂量关系 被引量：8

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作者 陈晓兵 李小民 +3 位作者 许铁 王言理 刘克喜 陈雪峰 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期971-975,共5页

目的观察内毒素(ET)致兔感染性休克血浆中肿瘤坏死因子-a(TNF-a)、IL-6和肺组织核转录因子-κB(NF-κB)水平变化,探讨不同剂量乌司他汀对感染性休克的保护机制。方法将50只日本长耳大白兔随机分为内毒素致伤空白组(空白组),地塞米松(DXM... 目的观察内毒素(ET)致兔感染性休克血浆中肿瘤坏死因子-a(TNF-a)、IL-6和肺组织核转录因子-κB(NF-κB)水平变化,探讨不同剂量乌司他汀对感染性休克的保护机制。方法将50只日本长耳大白兔随机分为内毒素致伤空白组(空白组),地塞米松(DXM)干预组(DXM组)及3种不同剂量乌司他汀(UTI)干预组(U1、U2、U3三个亚组)。用ET(2mg/kg)一次性静脉注射复制兔感染性休克模型,达休克标准后空白组应用0.9%氯化钠溶液2ml,DXM组用DXM(1mg/kg)、U1组用UTI(2.5×104U/kg)、U2组用UTI(5.0×104U/kg)、U3组用UTI(10.0×104U/kg)分别溶于2ml0.9%氯化钠溶液静脉注射进行干预,检测休克0h和干预后1、2、4、6、12h血浆中TNF-a、IL-6水平,观察肺组织免疫组化NF-κB的表达变化。结果5组兔达感染性休克标准时血浆中的TNF-a、IL-6水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05),兔休克后不同干预时间点TNF-a、IL-6的水平在UTI组与空白组及DXM组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);NF-κB在肺组织的表达空白组最高,U3组最低,差异有统计学意义(P<0.05)。TNF-a、IL-6的水平及NF-κB表达在U1、U2、U3组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论UTI可通过抑制NF-κB信号转导通路抑制TNF-a、IL-6的表达,剂量越大,作用越明显。 展开更多

关键词 乌司他汀 感染性休克 肿瘤坏死因子-A 白介素6 核转录因子NF-ΚB 剂量

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疏肝健脾方药对NASH大鼠Kupffer细胞NF-κB p65和IKKβ mRNA及蛋白表达的影响 被引量：9

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作者 韩莉 杨钦河 +10 位作者 杨雪松 胡巢凤 张玉佩 冯高飞 王文晶 何秀敏 王彦平 程少冰 金玲 闫海震 黄进 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期641-646,共6页

目的:探讨疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠Kupffer细胞核因子κB(NF-κB)p65和IκB激酶β(IKKβ)mRNA及蛋白表达的影响。方法:采用高脂饲料喂养复制大鼠NASH模型,在施以造模因素的同时分别灌服疏肝方(柴胡疏肝散)、健脾方(... 目的:探讨疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠Kupffer细胞核因子κB(NF-κB)p65和IκB激酶β(IKKβ)mRNA及蛋白表达的影响。方法:采用高脂饲料喂养复制大鼠NASH模型,在施以造模因素的同时分别灌服疏肝方(柴胡疏肝散)、健脾方(参苓白术散)和综合方(柴胡疏肝散和参苓白术散的合方)的高、低剂量进行干预,16周后分离Kupffer细胞,Typan blue染色和流式细胞术(FCM)分别对Kupffer细胞进行活性和纯度鉴定;实时定量PCR法检测Kupffer细胞IKKβ和NF-κB p65 mRNA的表达水平;Western blotting法检测Kupffer细胞IKKβ、p-IKKβ和NF-κB p65蛋白水平。结果:每只大鼠获得纯化的Kupffer细胞(1.5～2.0)×107,Typan blue染色显示这些细胞活力均在95%以上,FCM检测纯度均在90%以上;与正常组比较,模型组Kupffer细胞IKKβmR-NA及蛋白的表达水平均明显升高(P<0 01);与模型组比较,高剂量综合方、健脾方和疏肝方组IKKβmRNA的表达水平下调明显(P<0.01或P<0.05);IKKβ及磷酸化蛋白的表达水平以高剂量健脾方组下降最为显著(P<0.01或P<0.05);与正常组比较,模型组Kupffer细胞NF-κB p65 mRNA及蛋白的表达水平均明显升高(P<0.01),与模型组比较,NF-κB p65 mRNA的表达水平以综合方组及高剂量健脾方组下调明显(P<0.05),NF-κBp65蛋白的表达水平以高剂量健脾方组下降最为显著(P<0.01)。结论:Kupffer细胞IKKβ、NF-κB p65 mRNA及IKKβ、p-IKKβ、NF-κB p65蛋白的高表达可能参与NASH的发病,抑制这些信号分子的表达可能是疏肝健脾方药抗NASH的重要机制之一。 展开更多

关键词 非酒精性脂肪性肝炎 疏肝健脾方药 KUPFFER细胞 核因子ΚB IκB激酶β

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紫草素抑制ERK1/2-NF-κB通路对大鼠心房颤动的改善作用 被引量：6

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作者 舒礼良 黄功成 +3 位作者 郝爽 黄辰 朱效华 徐敬 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期757-762,共6页

目的探讨紫草素通过细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)/核转录因子-κB(NF-κB)介导心肌细胞纤维化对大鼠心房颤动(简称房颤)的改善作用。方法30只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、紫草素组,每组10只。紫草素组大鼠以4 mg/kg紫草素... 目的探讨紫草素通过细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)/核转录因子-κB(NF-κB)介导心肌细胞纤维化对大鼠心房颤动(简称房颤)的改善作用。方法30只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、紫草素组,每组10只。紫草素组大鼠以4 mg/kg紫草素灌胃给药,正常对照组和模型组大鼠等量生理盐水灌胃,1次/d,连续7 d;除正常对照组外,其余组大鼠按照1 ml/kg的剂量尾静脉注射乙酰胆碱-氯化钙(ACh-CaCl2)混合液1次/d、连续7 d建立房颤模型,正常对照组大鼠尾静脉注射等量生理盐水,7 d后取材。心电图检测各组大鼠房颤诱发时间和持续时间;超声心动图检测各组大鼠心功能;HE染色观察各组大鼠心肌组织病理学改变;Masson染色检测各组大鼠心肌组织胶原面积百分比;Western blotting检测各组大鼠胶原蛋白Ⅰ(ColⅠ)、ERK1/2、p-ERK1/2、NF-κB p65和p-NF-κB p65蛋白表达情况。结果正常对照组大鼠心肌细胞排列致密、整齐;模型组大鼠心肌细胞排列紊乱、肥大、间隙增宽;紫草素组大鼠心肌细胞形态和结构较模型组有所改善。与正常对照组比较,模型组及紫草素组大鼠左心室射血分数(LVEF)、左心室缩短分数(LVFS)降低,左心室收缩末期内径(LVESD)和左心室舒张末期内径(LVEED)增高,胶原面积百分比增加,ColⅠ、p-ERK1/2和p-NF-κB p65蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,紫草素组大鼠房颤诱发时间延长、持续时间缩短,LVEF、LVFS升高,LVESD、LVEED缩短,胶原面积百分比减小,ColⅠ、p-ERK1/2和p-NF-κB p65蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论紫草素可能通过抑制ERK1/2-NF-κB信号通路而减轻心肌纤维化,抑制房颤的发生,并改善心功能。 展开更多

关键词 心房颤动 紫草素 纤维化 细胞外信号调节蛋白激酶1/2 核转录因子-ΚB

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TNFα激活NF-κB促进宫颈癌细胞的侵袭 被引量：6

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作者 张丽瑞 李旭 +1 位作者 王月玲 李琛 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期568-571,共4页

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNFα)对人宫颈癌细胞HeLa侵袭能力的影响及其分子机制。方法 5ng/mL TNFα处理HeLa细胞,体外侵袭转移实验观察TNFα诱导后细胞的侵袭能力;免疫荧光及蛋白印迹观察核转录因子-κB p65(NF-κB p65)的定位及表达... 目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNFα)对人宫颈癌细胞HeLa侵袭能力的影响及其分子机制。方法 5ng/mL TNFα处理HeLa细胞,体外侵袭转移实验观察TNFα诱导后细胞的侵袭能力;免疫荧光及蛋白印迹观察核转录因子-κB p65(NF-κB p65)的定位及表达,蛋白印迹法检测基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达;使用NF-κB通路抑制剂Bay11-7082(2.5μmol/L)处理24h后TNFα(5ng/mL)诱导细胞,观察细胞侵袭能力及MMP9表达的改变。结果 TNFα促进了HeLa细胞的侵袭,诱导NF-κBp65核转位激活,上调了MMP9的表达。TNFα促进HeLa细胞的侵袭能力及MMP9的表达可以被NF-κB抑制剂阻断。结论 TNFα通过激活NF-κB信号促进了宫颈癌细胞侵袭,暗示NF-κB可能作为抑制宫颈癌进展的重要靶点。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子Α 核转录因子ΚB 宫颈癌 侵袭 基质金属蛋白酶9

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脂多糖通过核因子-κB途径影响腹膜间皮细胞生长及TNF的表达 被引量：8

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作者 李志明 马健飞 王力宁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期346-349,共4页

目的研究脂多糖(LPS)是否通过核因子κB,即IκBα、NF-κBp65途径引起腹膜间皮细胞(peritonealmesothelial cells,PMC)凋亡、抑制细胞生长和诱导肿瘤坏死因子(TNF)的表达。方法胰蛋白酶-EDTA消化法用于PMC的原代培养、传代,经鉴定分组... 目的研究脂多糖(LPS)是否通过核因子κB,即IκBα、NF-κBp65途径引起腹膜间皮细胞(peritonealmesothelial cells,PMC)凋亡、抑制细胞生长和诱导肿瘤坏死因子(TNF)的表达。方法胰蛋白酶-EDTA消化法用于PMC的原代培养、传代,经鉴定分组①不同浓度LPS组(正常对照组、0.1mg/L、1.0mg/L、10mg/L、50mg/L、100mg/L);②不同时间组LPS作用于PMC0、1、3、6、12、24h。Hoechst33258染色法检测PMC的凋亡;MTT法检测PMC的生长增殖抑制情况;免疫荧光法检测p65的活性;Western blot检测IκBα的表达;用L929细胞株检测TNF的活性;RT-PCR检测TNFα mRNA的表达。结果LPS抑制PMC生长并诱导凋亡、引起IκBα的降解、p65的核移位;LPS诱导PMC表达TNF,1hTNF-α mRNA达最大值、3hTNF-α活性达最大值。结论LPS可抑制PMC的生长及诱导凋亡;LPS诱导PMC表达TNF-α呈浓度依赖性,在LPS作用早期TNF-α明显升高,随后下降。这一过程中IκBα-NF-κBp65信号途径可能发挥了重要作用。 展开更多

关键词 脂多糖 腹膜间皮细胞 核因子kappab 肿瘤坏死因子 腹膜透析

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美满霉素对脑缺血再灌注大鼠脑组织COX-2、NF-κB表达的影响 被引量：4

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作者 蔡志友 余昌胤 +4 位作者 晏勇 张骏 黄良国 袁胜山 王凤英 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第21期2067-2069,共3页

目的观察美满霉素对脑缺血再灌注大鼠COX-2、NF-κB表达的影响。方法54只Wistar大鼠,适应性喂养1周,分为:正常组(N组)、假手术组(NS组)、美满霉素对照组(M组)、美满霉素预处理组(MP组),美满霉素治疗组(MT组),缺血再灌注组(IR组)。HE染... 目的观察美满霉素对脑缺血再灌注大鼠COX-2、NF-κB表达的影响。方法54只Wistar大鼠,适应性喂养1周,分为:正常组(N组)、假手术组(NS组)、美满霉素对照组(M组)、美满霉素预处理组(MP组),美满霉素治疗组(MT组),缺血再灌注组(IR组)。HE染色观察大鼠脑组织的病理改变;采用免疫组织化学法检测大鼠脑组织COX-2、NF-κB的表达,用图像分析仪测定光密度值。结果NF-κBp65和COX-2光密度值、阳性细胞百分率MP组较NS组明显增高(P<0.01),较IR组明显降低(P<0.01)。MT组较NS组明显增高(P<0.01),较IR组明显降低(P<0.05)。结论美满霉素能抑制大鼠脑缺血再灌注后脑组织COX-2、NF-κB的表达,发挥脑保护作用。 展开更多

关键词 脑缺血再灌注 美满霉素 环氧合酶-2 核转录因子-ΚB

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TNF-α激活NF-κB信号通路抑制培养成纤维细胞SDF-1α分泌 被引量：4

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作者 张玉龙 毋巨龙 +2 位作者 杨忠 丁可 李世荣 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第15期1509-1513,共5页

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)激活核因子-κB(NF-κB)信号通路对成纤维细胞生物学行为的影响。方法小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)进行体外培养,将细胞分为TNF-α组、TNF-α+吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)组及对照组,处理后的细胞采用CCK-8方... 目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)激活核因子-κB(NF-κB)信号通路对成纤维细胞生物学行为的影响。方法小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)进行体外培养,将细胞分为TNF-α组、TNF-α+吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)组及对照组,处理后的细胞采用CCK-8方法检测细胞增殖情况、Western blot和细胞免疫荧光检测IκBα蛋白表达与定位、ELISA检测基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)的分泌。结果 TNF-α在一定浓度范围内对成纤维细胞起到明显的促增殖作用,CCK-8检测显示TNF-α组在不同浓度和不同时相点MEF的光密度值与TNF-α+PDTC组及对照组相比差异显著(P<0.05);免疫荧光染色显示IκBα主要分布于细胞质,TNF-α组与对照组和TNF-α+PDTC组相比,IκBα荧光强度明显减弱。Western blot结果发现TNF-α刺激后30 min,TNF-α组和TNF-α+PDTC组IκBα蛋白表达[(3 070.0±39.0)vs(1 421.7±75.3),(3 212.2±57.5)vs(1 468.2±45.8),P<0.05]均降至最低值,随时间推移逐渐恢复,TNF-α+PDTC组IκBα蛋白表达显著高于TNF-α组[(3 112.3±89.7)vs(2 610.4±26.9),P<0.05];ELISA检测发现TNF-α作用后成纤维细胞SDF-1α的分泌呈减少趋势[(15.9±1.6)vs(12.7±0.6),P<0.05],TNF-α+PDTC组则能显著逆转TNF-α作用[(23.5±3.2)vs(15.0±1.2),(21.6±0.4)vs(12.7±0.6),P<0.05],促进SDF-1α分泌。结论 TNF-α能通过激活NF-κB通路,影响小鼠胚胎成纤维细胞的增殖并抑制SDF-1α分泌。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子-α 核因子-ΚB 小鼠胚胎成纤维细胞 吡咯烷二硫氨基甲酸

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PARP-1与NF-κB在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及意义 被引量：5

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作者 王哲 李燕 +1 位作者 吕树卿 田永杰 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期676-679,共4页

目的:研究卵巢上皮性肿瘤组织中聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)、核转录因子κB(NF-κB)的表达及意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测10例正常卵巢组织、30例卵巢良性肿瘤、30例卵巢交界性肿瘤和50例卵巢癌原发灶中的PARP-1和NF-... 目的:研究卵巢上皮性肿瘤组织中聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)、核转录因子κB(NF-κB)的表达及意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测10例正常卵巢组织、30例卵巢良性肿瘤、30例卵巢交界性肿瘤和50例卵巢癌原发灶中的PARP-1和NF-κBp65蛋白表达。结果:①PARP-1蛋白和NF-κBp65蛋白在卵巢癌组织中阳性表达率均高于卵巢交界性肿瘤、卵巢良性肿瘤和正常卵巢组织,差异均有统计学意义(P<0.05);而两者的阳性表达率在卵巢交界性肿瘤、卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。②PARP-1和NF-κBp65蛋白与卵巢癌的病理分级、临床分期和有无淋巴结转移有关(P<0.05)。③卵巢癌组织中PARP-1与NF-κBp65表达呈正相关(r=0.596,P<0.05)。结论:PARP-1和NF-κB在卵巢癌组织中过表达,与卵巢癌的发生、发展有关。PARP-1可能通过作用于NF-κB促进卵巢上皮性肿瘤细胞的恶性转化。 展开更多

关键词 卵巢上皮性肿瘤 聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1 核转录因子κB 免疫组织化学技术

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曲马多对致痛小鼠血清核因子-κB及白细胞介素-2的影响 被引量：3

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作者 张瑞霞 姜丽华 +1 位作者 李月光 黄巍 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期245-247,共3页

目的研究曲马多对致痛小鼠血清核因子-κB(NF-κB)和白细胞介素-2(IL-2)的影响。方法 112只BALB/c雄性小鼠,体重25～30g,随机均分为四组:曲马多组(T组,50mg/kg曲马多)、吗啡组(M组,5mg/kg吗啡)和假给药组(S组,生理盐水)、空白对照组(C组... 目的研究曲马多对致痛小鼠血清核因子-κB(NF-κB)和白细胞介素-2(IL-2)的影响。方法 112只BALB/c雄性小鼠,体重25～30g,随机均分为四组:曲马多组(T组,50mg/kg曲马多)、吗啡组(M组,5mg/kg吗啡)和假给药组(S组,生理盐水)、空白对照组(C组)。各组在给药后1h(T1)、3h(T2)、12h(T3)、24h(T4)时眶静脉采血,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清NF-κB及IL-2的含量,热板法测痛阈。结果与S组比较,T组和M组的各时点痛阈增高(P<0.05)。NF-κB:与C组比较,T4时T组升高(P<0.05),T3、T4时M组和S组降低(P<0.05);与S组比较,T2～T4时T组升高;与M组比较,T2～T4时T组升高(P<0.05)。T1～T3时T组IL-2含量高于M组(P<0.05)。结论吗啡对福尔马林致痛小鼠血清NF-κB和IL-2有抑制作用,曲马多对其具有增强作用,提示曲马多可能对疼痛所致的免疫抑制有改善作用。 展开更多

关键词 曲马多 吗啡 核因子-ΚB 白细胞介素-2

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子宫内膜异位症患者核转录因子-κB及细胞间粘附分子-1的表达 被引量：4

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作者 王芳 何援利 +1 位作者 彭冬先 刘木彪 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第6期703-705,共3页

目的检测核转录因子(NF-κB)及细胞间粘附分子-1(ICAM-1)在子宫内膜异位症(内异症)中的表达,探讨其在内异症发病中的作用。方法采用免疫组化SP法分别检测NF-κB及ICAM-1在35例正常子宫内膜、48例内异症患者的在位内膜及76例内异症患者... 目的检测核转录因子(NF-κB)及细胞间粘附分子-1(ICAM-1)在子宫内膜异位症(内异症)中的表达,探讨其在内异症发病中的作用。方法采用免疫组化SP法分别检测NF-κB及ICAM-1在35例正常子宫内膜、48例内异症患者的在位内膜及76例内异症患者的异位内膜中的表达,并对检测结果进行统计学分析。结果①NF-κB和ICAM-1主要表达于三组内膜的腺上皮细胞,在正常子宫内膜表达最弱,而在异位内膜的表达最强(P<0.001);②NF-κB和ICAM-1在正常子宫内膜、在位内膜及异位内膜中的表达呈正相关,相关系数分别为r=0.688、r=0.773及r=0.777(P<0.01)。结论NF-κB和ICAM-1在内异症在位内膜和异位内膜的高表达及二者之间的正相关性提示其在内异症发生发展过程中起重要的作用。 展开更多

关键词 核转录因子 细胞间粘附分子-1 子宫内膜异位症 免疫组织化学

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OPN、IKK-β、NF-κB p65和MMP-9在胃癌细胞中的表达及意义 被引量：4

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作者 张东涛 袁静 杨力 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第9期1359-1361,共3页

目的:检测骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、IκB激酶抑制剂-β(inhibitor of IκB kinase-beta,IKK-β)、核因子-κB p65(nuclear factor-κB p65,NF-κB p65)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)在具有转移潜能和低分... 目的:检测骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、IκB激酶抑制剂-β(inhibitor of IκB kinase-beta,IKK-β)、核因子-κB p65(nuclear factor-κB p65,NF-κB p65)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)在具有转移潜能和低分化的胃癌细胞系及永生化胃上皮细胞中的表达,为进一步研究OPN在胃癌侵袭转移中的可能作用机制及其临床应用提供实验基础。方法:免疫细胞化学SP法和Western blot检测OPN、IKK-β、NF-κB p65和MMP-9在具有转移潜能和低分化的胃癌细胞系MKN45、GC9811-C11、803、AGS、GC7901及永生化胃上皮细胞293中的表达。结果:(1)免疫细胞化学结果显示:胃癌细胞胞浆及胞周可见OPN和MMP-9弱阳性染色,尤以803明显。而在293细胞中,未见OPN和MMP-9阳性染色。IKK-β和NF-κB p65在胃癌细胞胞浆中均成阳性染色,胞核中还可见NF-κB p65弱阳性染色,而293细胞中IKK-β和NF-κB p65未见阳性染色。(2)Western blot结果显示:OPN、IKK-β和MMP-9在胃癌细胞MKN45、GC9811-C11、803、AGS、GC7901与293细胞中的表达有差异,细胞核中NF-κB p65的表达也有差异。结论:OPN、IKK-β、NF-κB p65和MMP-9与胃癌的侵袭转移密切相关,OPN参与胃癌侵袭转移的分子机制及其能否作为胃癌侵袭转移的生物学指标还需进一步的实验研究。 展开更多

关键词 胃肿瘤 骨桥蛋白 IκB激酶抑制剂-β 核因子-ΚBP65 基质金属蛋白酶-9

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抑制NF-κB活性对糖尿病大鼠肾脏TGF-β1 mRNA表达影响 被引量：2

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作者 丁鹤林 王佑民 +4 位作者 徐明彤 陈黎红 张少玲 黎锋 傅祖植 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期1020-1025,共6页

目的　研究抑制核因子 κB(NF κB)活性对糖尿病大鼠肾脏TGF β1mRNA表达影响。 方法　纯种♂Wistar大鼠分为 3组 :A组为正常对照组 (11只 ) ,B组为糖尿病大鼠未干预组 (11只 ) ,C组为糖尿病大鼠PDTC(NF κB活性抑制剂 )干预组 (9只 )... 目的　研究抑制核因子 κB(NF κB)活性对糖尿病大鼠肾脏TGF β1mRNA表达影响。 方法　纯种♂Wistar大鼠分为 3组 :A组为正常对照组 (11只 ) ,B组为糖尿病大鼠未干预组 (11只 ) ,C组为糖尿病大鼠PDTC(NF κB活性抑制剂 )干预组 (9只 )。饲养 18wk后取出肾脏 :以电泳迁移率变动分析技术检测肾组织NF κB活性 ,透射电镜检测肾小球基底膜厚度及系膜基质密度 (系膜基质面积 /系膜面积 ) ,RT PCR检测TGF β1mRNA表达。酶免疫分析法检测 2 4h尿白蛋白排泄 (UAE)。结果　肾组织NF κB活性在B组大鼠肾组织 (1 85± 0 5 4× 10 6)显著高于A组 (0 0 7± 0 11×10 6,P <0 0 1) ,C组 (0 2 5± 0 2 5× 10 6)显著低于B组 (P <0 0 1)。B组与A组比较 ,UAE (2 18± 1 98mgvs 0 4 1± 0 4 7mg,P <0 0 1)、肾小球基底膜厚度 (5 31 6± 10 7 6nmvs 312 4±2 5 4nm ,P <0 0 1)及系膜基质密度 (5 6 4 1± 6 78vs 33 95±5 2 2 ,P <0 0 1)均显著增高 ;C组大鼠UAE(0 5 6± 0 72 )mg、肾小球基底膜厚度 (315 8± 2 1 4 )nm及系膜基质密度 (37 97±7 37)均显著低于B组 (均P <0 0 1)。肾组织TGF β1mR NA表达在B组大鼠 (0 5 3± 0 2 0 )显著高于A组 (0 2 6±0 13,P <0 0 1) ,C组 (0 2 9± 0 10 )显? 展开更多

关键词 糖尿病肾病 核因子-ΚB TGF-Β1 吡咯烷二硫基甲酸酯 电泳迁移率变动分析

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胃癌组织中诱导型一氧化氮合酶、核转录因子-κB的表达 被引量：4

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作者 林锐 李晓丽 褚燕君 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第2期371-373,共3页

目的:检测胃癌组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与核转录因子-κB(NF-κB)的表达。方法:采用免疫组织化学法检测53例胃癌和15例正常胃黏膜组织中iNOS及NF-κB的表达情况。结果:胃癌组织中iNOS及NF-κB的阳性表达率为71.70%、83.02%,均高... 目的:检测胃癌组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与核转录因子-κB(NF-κB)的表达。方法:采用免疫组织化学法检测53例胃癌和15例正常胃黏膜组织中iNOS及NF-κB的表达情况。结果:胃癌组织中iNOS及NF-κB的阳性表达率为71.70%、83.02%,均高于正常胃黏膜组织的13.33%、26.67%,差异有统计学意义(P均<0.05)。胃癌组织中iNOS及NF-κB的表达与浸润深度和淋巴结转移有关(P均<0.05),且2者之间成正相关(r=0.642,P<0.01)。结论:iNOS及NF-κB的高表达参与了胃癌的侵袭及转移。 展开更多

关键词 胃癌 诱导型一氧化氮合酶 核转录因子-ΚB

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运动训练对核转录因子kappaB信号通路及炎性基因影响的研究进展 被引量：4

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作者 陈艳梅 郝选明 《体育学刊》 CAS CSSCI 北大核心 2011年第3期140-144,共5页

NF-κB(核转录因子-kappaB)信号通路在机体的免疫应答、细胞增殖、凋亡和生长发育中发挥重要作用。运动训练过程中机体产生的活性氧以及运动性肌肉损伤激活了NF-κB信号通路,对NF-κB活性的影响与运动训练的持续时间、频率和强度有关。... NF-κB(核转录因子-kappaB)信号通路在机体的免疫应答、细胞增殖、凋亡和生长发育中发挥重要作用。运动训练过程中机体产生的活性氧以及运动性肌肉损伤激活了NF-κB信号通路,对NF-κB活性的影响与运动训练的持续时间、频率和强度有关。急性剧烈运动导致了NF-κB活性一过性提高;长期有规律的运动训练能够降低由于衰老和慢性炎症反应而上调的NF-κB的活性;长期剧烈的运动训练导致了NF-κB的慢性持续激活,使通路上各指标的表达发生变化,细胞核中聚集NF-κB的亚基p65浓度增多,转录靶基因,从而使炎性基因的表达大幅度升高,一方面放大机体固有免疫系统对抗运动性应激,另一方面参与了骨骼肌运动性慢性炎症的形成。 展开更多

关键词 运动生物化学 核转录因子-kappab 核转录因子-kappab抑制蛋白激酶 氧化应激 运动训练 综述

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美满霉素抑制血管性痴呆大鼠脑组织NF-κB、GFAP与IL-1β的表达 被引量：1

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作者 蔡志友 晏宁 +7 位作者 晏勇 承欧梅 余昌胤 张骏 杨丽 黄良国 詹剑 周妮 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1171-1175,共5页

目的:观察美满霉素(minocycline)对血管性痴呆大鼠脑组织核因子κB(NF-κB)、星形胶质细胞标志物GFAP和炎症因子IL-1β表达的影响,探讨美满霉素对血管性痴呆脑保护作用的机制。方法:双侧颈总动脉结扎法建立血管性痴呆大鼠动物模型。随... 目的:观察美满霉素(minocycline)对血管性痴呆大鼠脑组织核因子κB(NF-κB)、星形胶质细胞标志物GFAP和炎症因子IL-1β表达的影响,探讨美满霉素对血管性痴呆脑保护作用的机制。方法:双侧颈总动脉结扎法建立血管性痴呆大鼠动物模型。随机分为假手术组,4、8、16周模型组,美满霉素治疗4、8、16周模型组。穿梭箱实验、Morris水迷宫实验检测认知行为学改变,ELISA法、蛋白质免疫印迹法和免疫组织化学法检测GFAP,ELISA法和免疫组织化学法检测NF-κB,ELISA法检测IL-1β。结果:美满霉素可以显著改善血管性痴呆的行为学症状,提高学习记忆力和反应能力。模型组和美满霉素治疗组NF-κB、GFAP与IL-1β表达均较假手术组显著增高(P<0.01),但美满霉素治疗组三者表达较模型组明显降低(P<0.01)。结论:美满霉素可能通过降低血管性痴呆大鼠脑组织NF-κB、GFAP与IL-1β的表达,抑制星形胶质细胞激活和脑内炎症反应,发挥脑保护作用。 展开更多

关键词 血管性痴呆 美满霉素 核因子ΚB 星形胶质细胞 炎症

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TNF-α对人脐静脉内皮细胞表达MCP-1及IL-8的影响 被引量：2

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作者 程海涛 杨彤 赵军 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期479-482,共4页

本研究探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC)后对细胞表达单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和白介素-8(IL-8)的影响及其可能的分子机制。用RT-PCR的方法检测MCP-1和IL-8mRNA的表达,免疫荧光染色法检测HUVEC核内转录因子κB(... 本研究探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC)后对细胞表达单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和白介素-8(IL-8)的影响及其可能的分子机制。用RT-PCR的方法检测MCP-1和IL-8mRNA的表达,免疫荧光染色法检测HUVEC核内转录因子κB(NF-κBp65)的激活。结果表明:TNF-α刺激HUVEC后,细胞内MCP-1和IL-8mRNA的表达增强,且有时相性变化;IL-8mRNA表达8小时达到高峰,MCP-1mRNA表达12小时达到高峰。细胞核内NF-κBp65蛋白表达增强,在感染后0.5小时开始增加,1小时达峰值。然后,胞浆染色逐渐减弱,而核染色增强,表明转录因子NF-κBp65明显的核移位。结论:TNF-α刺激HUVEC后能增加细胞内MCP-1、IL-8mRNA和NF-κBp65蛋白质的表达,提示TNF-α可能通过NF-κB途径诱导血管内皮细胞MCP-1和IL-8等炎症介子的过度表达。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子 内皮细胞 单核细胞趋化蛋白-1 白介素-8 核转录因子

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Survivin在NF-κB圈套寡核苷酸促进肝癌细胞HepG2凋亡中的作用 被引量：1

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作者 张万广 杨盛力 +4 位作者 李哲夫 张峰 徐宗全 王其 张志伟 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期603-606,701,共5页

目的观察核转录因子-κB(NF-κB)圈套寡核苷酸对NF-κB活性的影响,研究Survivin在其诱导肝癌细胞HepG2凋亡中的作用。方法将异硫氰酸荧光素(FITC)标记的NF-κB圈套寡核苷酸转染至HepG2细胞中,荧光倒置显微镜和共聚焦显微镜进行核内定位... 目的观察核转录因子-κB(NF-κB)圈套寡核苷酸对NF-κB活性的影响,研究Survivin在其诱导肝癌细胞HepG2凋亡中的作用。方法将异硫氰酸荧光素(FITC)标记的NF-κB圈套寡核苷酸转染至HepG2细胞中,荧光倒置显微镜和共聚焦显微镜进行核内定位观察,凝胶迁移率实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测转染前后NF-κB活性变化;流式细胞仪和TUNEL检测细胞凋亡率;Western blot检测凋亡抑制蛋白Survivin的改变。结果NF-κB圈套寡核苷酸转染后定位于细胞核内,EMSA显示转染后NF-κB活性明显下降。与未处理组、转染错义组相比,转染NF-κB圈套寡核苷酸组的HepG2细胞凋亡率增加,Survivin蛋白表达下调[(39.8±1.9)、(42.7±2.5)vs(20.1±3.1)]。结论NF-κB圈套寡核苷酸具有促进肝癌细胞HepG2凋亡的作用,其机制可能与下调Survivin的表达有关。 展开更多

关键词 核转录因子-ΚB 圈套寡核苷酸 SURVIVIN

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