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SARS冠状病毒非结构蛋白质NSP3突变体构建及其对类泛素分子DUB活性
被引量：
1
1
作者
杨星星
邢雅玲
+1 位作者
陈晓娟
陈忠斌
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第11期1061-1069,共9页
SARS冠状病毒(SARS-CoV)非结构蛋白NSP3编码的木瓜蛋白酶样蛋白酶(PLpro)对泛素样分子(Ubl)具有去泛素化酶(DUB)活性,但目前有关NSP3 DUB活性研究的报道甚少.本研究构建包含Nsp3基因N末端不同结构域的突变体,并检测NSP3及其一系列突变...
SARS冠状病毒(SARS-CoV)非结构蛋白NSP3编码的木瓜蛋白酶样蛋白酶(PLpro)对泛素样分子(Ubl)具有去泛素化酶(DUB)活性,但目前有关NSP3 DUB活性研究的报道甚少.本研究构建包含Nsp3基因N末端不同结构域的突变体,并检测NSP3及其一系列突变体对类泛素分子ISG15和SUMO所修饰蛋白质分子的作用特性.实验结果表明,NSP3及其突变体NSP3AD,NSP3AE,NSP3AF具有一定的去ISG15活性,而其突变体NSP3AC则没有去ISG15(DeISGylation)活性.研究结果提示,SARS NSP3具有一定的体内去ISG15活性,并且这种活性主要依赖于Nsp3基因编码的PLpro.但SARS NSP3及其突变体NSP3AC,NSP3AD,NSP3AE和NSP3AF并不具有去SUMO(DeSUMOylation)活性.SARS冠状病毒NSP3对类泛素样分子作用特性的研究为后续NSP3的生物学特性及其对干扰素通路的调控研究奠定了基础.
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关键词
SARS冠状病毒
非结构蛋白质
3
(
nsp
3
)
去泛素化酶(DUB)
干扰素刺激基因15
(ISGl5)
SUMO
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职称材料
香菇多糖联合丙肝核酸疫苗诱导抗原特异性免疫应答研究
被引量：
1
2
作者
邹镇
彭佳蓓
+1 位作者
谢潜红
向明
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期348-351,共4页
目的:探讨香菇多糖(Lentinan,LNT)联合丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS3核酸疫苗诱导NS3抗原特异性免疫作用。方法:将不同剂量香菇多糖与等量HCVNS3质粒(100μg/只),采用初次加强免疫法联合免疫BALB/c小鼠。第二次免疫10天后取小鼠脾脏,...
目的:探讨香菇多糖(Lentinan,LNT)联合丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS3核酸疫苗诱导NS3抗原特异性免疫作用。方法:将不同剂量香菇多糖与等量HCVNS3质粒(100μg/只),采用初次加强免疫法联合免疫BALB/c小鼠。第二次免疫10天后取小鼠脾脏,制备脾细胞悬液,与NS3抗原多肽共育作为效应细胞。另培养NS3抗原致敏的P815细胞作为靶细胞。采用MTT法分别检测NS3抗原特异性T细胞增殖反应和细胞毒T细胞特异性杀伤反应(CTL)。同时采用ELISA方法检测血清中细胞因子IL-4和IFN-γ分泌水平。结果:研究发现高剂量及中剂量香菇多糖与NS3质粒联合在效靶细胞比为50:1时,可明显加强NS3抗原特异性CTL反应,与单用NS3质粒相比有显著差异(P<0.01和P<0.05);中剂量和低剂量香菇多糖与NS3质粒联用明显增强NS3抗原特异性T细胞增殖反应(均为P<0.01);细胞因子分析显示中剂量和低剂量香菇多糖与NS3质粒联用使IFN-γ分泌增加(均为P<0.01)。结论:采用初次加强免疫法将中剂量香菇多糖(0.1ml/10g)与HCVNS3质粒联合免疫BALB/c小鼠,可激发明显增强的抗原特异性T细胞增殖和CTL反应,并伴有大量的IFN-γ分泌,提示香菇多糖可作为丙肝病毒NS3核酸疫苗的免疫佐剂,加强抗原特异性免疫应答效应。
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关键词
丙型肝炎
非结构蛋白
3
香菇多糖
核酸疫苗
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职称材料
题名
SARS冠状病毒非结构蛋白质NSP3突变体构建及其对类泛素分子DUB活性
被引量：
1
1
作者
杨星星
邢雅玲
陈晓娟
陈忠斌
机构
安徽医科大学研究生院
军事医学科学院放射与辐射医学研究所
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第11期1061-1069,共9页
基金
国家自然科学基金项目(No.81172799
No.81273231)资助~~
文摘
SARS冠状病毒(SARS-CoV)非结构蛋白NSP3编码的木瓜蛋白酶样蛋白酶(PLpro)对泛素样分子(Ubl)具有去泛素化酶(DUB)活性,但目前有关NSP3 DUB活性研究的报道甚少.本研究构建包含Nsp3基因N末端不同结构域的突变体,并检测NSP3及其一系列突变体对类泛素分子ISG15和SUMO所修饰蛋白质分子的作用特性.实验结果表明,NSP3及其突变体NSP3AD,NSP3AE,NSP3AF具有一定的去ISG15活性,而其突变体NSP3AC则没有去ISG15(DeISGylation)活性.研究结果提示,SARS NSP3具有一定的体内去ISG15活性,并且这种活性主要依赖于Nsp3基因编码的PLpro.但SARS NSP3及其突变体NSP3AC,NSP3AD,NSP3AE和NSP3AF并不具有去SUMO(DeSUMOylation)活性.SARS冠状病毒NSP3对类泛素样分子作用特性的研究为后续NSP3的生物学特性及其对干扰素通路的调控研究奠定了基础.
关键词
SARS冠状病毒
非结构蛋白质
3
(
nsp
3
)
去泛素化酶(DUB)
干扰素刺激基因15
(ISGl5)
SUMO
Keywords
SARS coronavirus（SARS-CoV）
nonstructural protein 3 （nsp3）
deubiquitinase（DUB）
ISG15
small ubiquitin-related modifier（SUMO）.
分类号
Q5 [生物学—生物化学]
Q93 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
香菇多糖联合丙肝核酸疫苗诱导抗原特异性免疫应答研究
被引量：
1
2
作者
邹镇
彭佳蓓
谢潜红
向明
机构
华中科技大学同济药学院药理室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期348-351,共4页
基金
湖北省卫生厅科研基金项目(编号:NX200601)
文摘
目的:探讨香菇多糖(Lentinan,LNT)联合丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS3核酸疫苗诱导NS3抗原特异性免疫作用。方法:将不同剂量香菇多糖与等量HCVNS3质粒(100μg/只),采用初次加强免疫法联合免疫BALB/c小鼠。第二次免疫10天后取小鼠脾脏,制备脾细胞悬液,与NS3抗原多肽共育作为效应细胞。另培养NS3抗原致敏的P815细胞作为靶细胞。采用MTT法分别检测NS3抗原特异性T细胞增殖反应和细胞毒T细胞特异性杀伤反应(CTL)。同时采用ELISA方法检测血清中细胞因子IL-4和IFN-γ分泌水平。结果:研究发现高剂量及中剂量香菇多糖与NS3质粒联合在效靶细胞比为50:1时,可明显加强NS3抗原特异性CTL反应,与单用NS3质粒相比有显著差异(P<0.01和P<0.05);中剂量和低剂量香菇多糖与NS3质粒联用明显增强NS3抗原特异性T细胞增殖反应(均为P<0.01);细胞因子分析显示中剂量和低剂量香菇多糖与NS3质粒联用使IFN-γ分泌增加(均为P<0.01)。结论:采用初次加强免疫法将中剂量香菇多糖(0.1ml/10g)与HCVNS3质粒联合免疫BALB/c小鼠,可激发明显增强的抗原特异性T细胞增殖和CTL反应,并伴有大量的IFN-γ分泌,提示香菇多糖可作为丙肝病毒NS3核酸疫苗的免疫佐剂,加强抗原特异性免疫应答效应。
关键词
丙型肝炎
非结构蛋白
3
香菇多糖
核酸疫苗
Keywords
Hepatitis C infection
nonstructural
protein
3
Lentinan
Vaccine
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
SARS冠状病毒非结构蛋白质NSP3突变体构建及其对类泛素分子DUB活性
杨星星
邢雅玲
陈晓娟
陈忠斌
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
香菇多糖联合丙肝核酸疫苗诱导抗原特异性免疫应答研究
邹镇
彭佳蓓
谢潜红
向明
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008
1
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