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RNA干扰技术抑制人内皮细胞非肌肉肌球蛋白重链ⅡA(MYH9)表达的研究
1
作者
黄娅琳
寇俊萍
+1 位作者
宋佳希
余伯阳
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第12期1160-1163,共4页
目的:构建人MYH9(非肌肉肌球蛋白重链ⅡA)的siRNA表达体系,抑制原代人脐静脉内皮细胞(HUVEC)MYH9基因的表达。方法:针对人MYH9基因序列,构建siRNA表达质粒,通过酶切和测序鉴定确定其序列正确性。分别转染重组质粒pGCsi-MYH9-1/2/3至HUVE...
目的:构建人MYH9(非肌肉肌球蛋白重链ⅡA)的siRNA表达体系,抑制原代人脐静脉内皮细胞(HUVEC)MYH9基因的表达。方法:针对人MYH9基因序列,构建siRNA表达质粒,通过酶切和测序鉴定确定其序列正确性。分别转染重组质粒pGCsi-MYH9-1/2/3至HUVEC细胞,通过半定量RT-PCR和蛋白质印迹,分别检测在转染后24h、48h、72h MYH9在mRNA转录水平及蛋白表达的变化。结果:在构建的3种重组质粒中,pGCsi-MYH9-2、pGCsi-MYH9-3在转染后24h均表现出一定的干扰作用,转染后48h干扰作用最强,转染后72h干扰作用减弱;pGCsi-MYH9-3的干扰作用最明显,转染后48h,能明显下调HUVEC的MYH9蛋白表达,抑制率平均可达71.2%,此时MYH9基因mRNA转录明显减少,抑制率为86.5%。结论:在转染后48h pGCsi-MYH9-3可明显抑制HUVEC细胞内源MYH9的表达,为进一步研究MYH9在相关疾病中的功能奠定基础。
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关键词
RNA干扰
人脐静脉内皮细胞(HUVEC)
非肌肉肌球蛋白重链ⅡA(MYH9)
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职称材料
题名
RNA干扰技术抑制人内皮细胞非肌肉肌球蛋白重链ⅡA(MYH9)表达的研究
1
作者
黄娅琳
寇俊萍
宋佳希
余伯阳
机构
中国药科大学中药复方研究室
国家林业局野生动植物物证鉴定中心
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第12期1160-1163,共4页
基金
国家自然科学基金重大研究计划资助项目(90713042)
国家“十一五”科技支撑计划资助项目(2006BAI08B05-08)
教育部新世纪优秀人才支持计划(2007年)
文摘
目的:构建人MYH9(非肌肉肌球蛋白重链ⅡA)的siRNA表达体系,抑制原代人脐静脉内皮细胞(HUVEC)MYH9基因的表达。方法:针对人MYH9基因序列,构建siRNA表达质粒,通过酶切和测序鉴定确定其序列正确性。分别转染重组质粒pGCsi-MYH9-1/2/3至HUVEC细胞,通过半定量RT-PCR和蛋白质印迹,分别检测在转染后24h、48h、72h MYH9在mRNA转录水平及蛋白表达的变化。结果:在构建的3种重组质粒中,pGCsi-MYH9-2、pGCsi-MYH9-3在转染后24h均表现出一定的干扰作用,转染后48h干扰作用最强,转染后72h干扰作用减弱;pGCsi-MYH9-3的干扰作用最明显,转染后48h,能明显下调HUVEC的MYH9蛋白表达,抑制率平均可达71.2%,此时MYH9基因mRNA转录明显减少,抑制率为86.5%。结论:在转染后48h pGCsi-MYH9-3可明显抑制HUVEC细胞内源MYH9的表达,为进一步研究MYH9在相关疾病中的功能奠定基础。
关键词
RNA干扰
人脐静脉内皮细胞(HUVEC)
非肌肉肌球蛋白重链ⅡA(MYH9)
Keywords
RNA interference （RNAi）
human umbilicalvein endothelial cells （HUVEC）
nonmusclemyosin heavy chain ]] a （myhg）
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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作者
出处
发文年
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1
RNA干扰技术抑制人内皮细胞非肌肉肌球蛋白重链ⅡA(MYH9)表达的研究
黄娅琳
寇俊萍
宋佳希
余伯阳
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008
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