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题名小鼠 noggin 基因的重组腺病毒构建与鉴定
被引量：7
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作者
余资江
应大君
董世武
张伟
崔晓萍
糜建红
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机构
第三军医大学基础医学部解剖学教研室
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出处
《解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第1期51-54,共4页
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基金
国家自然科学基金(30400100)
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文摘
目的：构建小鼠 noggin 基因的重组腺病毒载体并鉴定。方法：采用基因工程技术。经过2次亚克隆将 noggin 基因片段克隆至穿梭质粒 AdTrack-CMV 上,利用 pAdEasy-1系统进行细菌内同源重组后,脂质体转染 293T 细胞包装、扩增。采用 PCR 方法对重组体腺病毒进行鉴定,利用穿梭质粒中带有绿色荧光蛋白 GFP 报告基因,对病毒滴度和感染效率进行监测。结果：酶切鉴定及 PCR 结果证明 noggin 基因重组腺病毒载体构建成功,病毒滴度达6．3×10^(10)pfu/ml。结论：应用细菌内同源重组法成功构建了含小鼠 noggin 基因的重组腺病毒载体。
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关键词
腺病毒
noggin基因
同源重组
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Keywords
adenovirus
noggin gene
homogenous recombination
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分类号
R346
[医药卫生—基础医学]
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题名腺病毒介导noggin基因修饰神经干细胞
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作者
余资江
应大君
崔晓萍
董世武
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机构
贵阳医学院基础医学院解剖学教研室
第三军医大学基础医学部解剖学教研室
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出处
《解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期702-706,共5页
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基金
国家自然科学基金(30660189)
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文摘
目的:以重组腺病毒介导的noggin基因修饰小鼠海马源性神经干细胞,为基因修饰的神经干细胞移植治疗中枢神经系统疾病提供依据。方法:以重组腺病毒介导的noggin基因转染体外培养的神经干细胞,MTT法检测转染前、后神经干细胞的生长活性,应用免疫细胞化学及Western blot检测转染后Noggin蛋白在神经干细胞中的表达及noggin基因对神经干细胞定向分化的影响。结果:重组腺病毒pAdEasy-1-noggin转染神经干细胞后,神经干细胞中Noggin蛋白表达持续增加;转染后的NSCs在含血清的培养液中能定向分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞,并且其分化为神经元的数量明显增加。结论:重组腺病毒介导的noggin基因在细胞中可持续稳定表达,noggin基因能够促进神经干细胞定向分化为神经元,抑制其向星形胶质细胞方向分化,为下一步进行神经干细胞体内移植治疗提供了实验依据。
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关键词
神经干细胞
基因修饰
noggin
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Keywords
neural stem cells
gene modificationg
noggin
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分类号
R329
[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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题名榕江香猪Noggin基因的组织表达
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作者
彭雷
冉雪琴
王嘉福
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机构
贵州大学贵州省农业生物工程重点实验室
贵州大学动物科学学院
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出处
《山地农业生物学报》
2006年第6期493-496,共4页
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基金
贵州省优秀青年科技人才培养计划资助项目(2005-0506)
贵州省"十一五"农业科技重大专项资助项目(2005NZ3002)
+1 种基金
贵州省"十五"农业科技攻关项目资助(2004NGY010)
贵州大学科技人才基金资助项目
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文摘
采用RT-PCR的方法对榕江香猪Noggin基因的组织表达进行研究，结果显示，Noggin基因在大脑、卵巢、子宫表达，其中大脑的表达量显著高于卵巢和子宫组织（P〈0．05）；脾、肺、脊髓、肝、肾等组织中未检测到Noggin基因的表达；对脑、子宫和卵巢检测分子长194bp的cDNA片段进行测序后，证实表达的片段为Noggin基因，与马、人、鼠、鸡和青蛙存在2～66个碱基的差别。研究结果证实Noggin基因在香猪的大脑、卵巢和子宫中表达，对这些组织可能有直接的调节作用。
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关键词
香猪
组织表达
noggin基因
RT—PCR
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Keywords
Xiang pig
tissue expression
noggin gene
RT - PCR
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分类号
S828.892
[农业科学—畜牧学]
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