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补中益气方通过MLCK/p-MLC_(20)通路调节慢性腹泻大鼠结肠动力的机制研究
1
作者 贾梦迪 张声生 +2 位作者 赵鲁卿 卢小芳 朱泠霏 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2024年第10期180-186,共7页
目的探讨补中益气方对慢性腹泻大鼠MLCK/p-MLC_(20)通路介导的结肠动力的影响。方法大鼠随机分为正常组,模型组和补中益气低、中、高剂量组。模型组及补中益气方组应用大黄灌胃的方法建立慢性腹泻大鼠模型。慢性腹泻模型建立成功后,补... 目的探讨补中益气方对慢性腹泻大鼠MLCK/p-MLC_(20)通路介导的结肠动力的影响。方法大鼠随机分为正常组,模型组和补中益气低、中、高剂量组。模型组及补中益气方组应用大黄灌胃的方法建立慢性腹泻大鼠模型。慢性腹泻模型建立成功后,补中益气汤颗粒低剂量:0.4725 g/(kg·d),中剂量:0.945 g/(kg·d),高剂量:1.89 g/(kg·d),正常组和模型组则每天给予等体积的生理盐水灌胃。在治疗结束时,检测各组大鼠一般情况如体质量、饮食量、悬空拉尾抵抗实验、免疫指标(胸腺指数、脾脏指数)变化和24小时粪便含水量。进一步探讨机制,采用离体张力测定灌流系统,测定各组大鼠结肠纵行平滑肌肌条收缩力(colonic longitudinal smooth muscle strips,CLSMs)和结肠环型平滑肌肌条(colonic circular smooth muscle strips,CCSMs)的变化,并蛋白印迹法测定磷酸化肌球蛋白轻链(phosphorylation level of myosin light chain,p-MLC_(20))水平及实时荧光定量PCR法检测大鼠结肠组织肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)的表达。结果各组大鼠一般情况比较有统计学意义(P<0.05),与正常组比较,模型组一般情况表现为(体质量下降:P<0.01;饮食量减少:P<0.01;悬空拉尾抵抗实验时间缩短:P<0.01;胸腺指数降低:P<0.01;脾脏指数降低:P<0.01),与模型组比较,补中益气低、中、高剂量组一般情况明显改善(体质量增加:低剂量:P<0.05,中、高剂量:P<0.01;饮食量增多:低剂量:P<0.05,中、高剂量:P<0.01;悬空拉尾抵抗实验时间延长:低剂量:P<0.05,中、高剂量:P<0.01;胸腺指数升高:P<0.01;脾脏指数升高:P<0.01)。各组大鼠粪便含水量差异有统计学意义(P<0.01),与正常组比较,模型组粪便含水量明显增加(P<0.01),与模型组比较,补中益气中、高剂量组粪便含水量明显下降(P<0.01)。同时,正常组、模型组和补中益气中剂量组大鼠结肠CLSMs和CCSMs收缩差异有统计学意义(P<0.05),与正常组比较,模型组大鼠CLSMs和CCSMs收缩张力、振幅、速率明显增加(P<0.01),与模型组比较,补中益气中剂量组大鼠CLSMs和CCSMs收缩张力、振幅、速率有所下降(P<0.05);三组大鼠结肠p-MLC_(20)含量差异有统计学意义(P<0.05),与正常组比较,模型组大鼠p-MLC_(20)含量明显增加(P<0.01),与模型组比较,补中益气中剂量组大鼠p-MLC_(20)含量明显下降(P<0.01);三组大鼠结肠MLCK的表达差异有统计学意义(P<0.01),与正常组比较,模型组大鼠MLCK的表达升高(P<0.01),与模型组比较,补中益气中剂量组MLCK的表达降低(P<0.01)。结论补中益气方对慢性腹泻大鼠治疗作用可能是通过调节MLCK/p-MLC20通路抑制结肠动力来实现的。 展开更多
关键词 慢性腹泻 补中益气方 动力 肌球蛋白轻链 肌球蛋白轻链激酶
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地塞米松对哮喘动物模型支气管平滑肌MLCK表达的影响 被引量：8
2
作者 桂淑玉 王勇生 +4 位作者 李永怀 周青 胡向阳 吴强 汪渊 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期872-875,共4页
目的观察地塞米松(DXM)对哮喘动物模型支气管平滑肌肌球蛋白轻链激酶(MLCK)表达的影响,探讨MLCK在哮喘发病中的作用。方法24只♂SD大鼠,随机等分为正常对照组、哮喘模型组和地塞米松组。以卵蛋白(OVA)诱发大鼠支气管哮喘模型。地塞米松... 目的观察地塞米松(DXM)对哮喘动物模型支气管平滑肌肌球蛋白轻链激酶(MLCK)表达的影响,探讨MLCK在哮喘发病中的作用。方法24只♂SD大鼠,随机等分为正常对照组、哮喘模型组和地塞米松组。以卵蛋白(OVA)诱发大鼠支气管哮喘模型。地塞米松组大鼠于每次激发前1h给予腹腔注射地塞米松0.5mg·kg-1。用免疫组织化学法和免疫印迹法分析三组大鼠支气管平滑肌中MLCK表达。结果免疫组织化学法分析显示DXM组大鼠支气管平滑肌MLCK的表达低于哮喘模型组(P<0.05),但与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05)。同时,免疫印迹法检测也表明哮喘模型组大鼠smMLCK表达高于正常对照组及地塞米松组。结论MLCK参与支气管哮喘的发病,地塞米松通过下调哮喘大鼠支气管平滑肌MLCK表达,可能是糖皮质激素治疗哮喘的一种机制。 展开更多
关键词 地塞米松 支气管哮喘 肌球蛋白轻链激酶 模型
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通便汤对慢传输型便秘大鼠结肠c-kit和MLCK表达的影响 被引量：16
3
作者 乐音子 王晓鹏 +3 位作者 甄曙光 孙明明 吴本升 颜帅 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第8期1215-1220,共6页
目的 探讨通便汤对慢传输型便秘(STC)大鼠结肠组织c-kit、MLCK蛋白及其他细胞因子的影响。方法 采用洛哌丁胺混悬液灌胃法复制STC大鼠模型,随机分为正常组、模型组、通便汤低、中、高剂量组和莫沙必利组。各组予以不同药物干预2周后,检... 目的 探讨通便汤对慢传输型便秘(STC)大鼠结肠组织c-kit、MLCK蛋白及其他细胞因子的影响。方法 采用洛哌丁胺混悬液灌胃法复制STC大鼠模型,随机分为正常组、模型组、通便汤低、中、高剂量组和莫沙必利组。各组予以不同药物干预2周后,检测各组大鼠粪便含水率、小肠活性炭推进率;HE染色观察大鼠结肠病理学特征;酶联免疫法检测结肠一氧化氮(NO)、一氧化氮酶(NOS)的含量;免疫组化法检测结肠c-kit、MLCK的表达情况。结果 与正常组比较,模型组大鼠粪便质地干硬,含水率明显下降,小肠活性炭推进率显著下降(P<0.05),结肠组织正常结构被破坏,炎性细胞浸润,结肠组织NO和NOS含量明显上升, c-kit和MLCK蛋白表达明显下降(P<0.05);与模型组比较,通便汤各剂量组增加粪便含水率以及结肠肌层厚度和绒毛高度(P<0.05),提高小肠活性炭推进率,显著上调结肠组织c-kit和MLCK蛋白表达,同时降低结肠组织NO和NOS含量(P<0.05)。结论 通便汤能提高STC大鼠小肠活性炭推进率,增加粪便含水率,改善结肠病理形态,其作用机制可能与调节NO、NOS水平,上调结肠c-kit、MLCK蛋白表达有关。 展开更多
关键词 通便汤 慢传输型便秘 一氧化氮 C-KIT mlcK
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鹿茸多肽介导心肌干细胞分化对终末心肌分化基因ANP和MLC-2v表达的影响 被引量：7
4
作者 黄晓巍 徐岩 +5 位作者 韩冬 林贺 律广富 李晓华 曲晓波 张冰 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期249-253,共5页
目的:探讨鹿茸多肽介导心肌干细胞(CSC)分化对终末心肌分化基因心房钠尿肽(ANP)和心肌肌凝蛋白轻链2(MLC-2v)表达的影响,阐明其修复受损心肌的作用机制。方法:选取出生2d的雄性Wistar大鼠,提取CSC,免疫荧光鉴定CSC表面标志物c-Kit,流式... 目的:探讨鹿茸多肽介导心肌干细胞(CSC)分化对终末心肌分化基因心房钠尿肽(ANP)和心肌肌凝蛋白轻链2(MLC-2v)表达的影响,阐明其修复受损心肌的作用机制。方法:选取出生2d的雄性Wistar大鼠,提取CSC,免疫荧光鉴定CSC表面标志物c-Kit,流式细胞术鉴定CSC纯度。以培养皿为实验单位,分为空白对照组(加等量缓冲液)、5-氮胞苷组(终浓度3μmol·L-1)、鹿茸多肽组(终浓度800mg·L-1)和联合组(3μmol·L-1 5-氮胞苷+800mg·L-1鹿茸多肽),于37℃、5%CO2培养箱中培养48h。ELISA法检测各组细胞上清液中ANP和MLC-2v表达水平,RT-PCR法检测各组细胞中ANP和MLC-2v mRNA表达水平。结果:获得纯度>95%的CSC。ELISA法检测,与空白对照组比较,5-氮胞苷组、鹿茸多肽组和联合组细胞上清中ANP和MLC-2v表达水平明显升高(P<0.05);联合组ANP和MLC-2v表达水平高于5-氮胞苷组和鹿茸多肽组,但差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR法检测,与空白对照组比较,5-氮胞苷组、鹿茸多肽组和联合组ANP和MLC-2vmRNA表达水平明显升高(P<0.05)。结论:鹿茸多肽可以通过增强心肌分化基因ANP和MLC-2v表达介导CSC分化为心肌细胞,且在一定程度上减轻5-氮胞苷所致的细胞毒性。 展开更多
关键词 鹿茸多肽 心肌干细胞 心房钠尿肽 心肌肌凝蛋白轻链2
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斑鳜轻链3基因(MLC3)cDNA的克隆及纵向表达分析 被引量：6
5
作者 农小献 赵发兰 +4 位作者 宾石玉 陈敦学 刘希良 史竸 褚武英 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2011年第2期79-83,共5页
提取斑鳜肌肉组织总RNA,逆转录得到cDNA,然后利用常规PCR法扩增得到斑鳜肌球蛋白轻链3基因(MLC3)序列.斑鳜MLC3基因cDNA序列的全长为532 bp,编码150个氨基酸.通过PROSITE tools软件预测显示该序列具有2个EF-手相结构.通过实时荧光定量PC... 提取斑鳜肌肉组织总RNA,逆转录得到cDNA,然后利用常规PCR法扩增得到斑鳜肌球蛋白轻链3基因(MLC3)序列.斑鳜MLC3基因cDNA序列的全长为532 bp,编码150个氨基酸.通过PROSITE tools软件预测显示该序列具有2个EF-手相结构.通过实时荧光定量PCR法对斑鳜MLC3纵向表达进行分析发现,MLC3在斑鳜背肌的近头部、中部和近尾部都有表达,近头部和中部的表达量差异不显著,近尾部表达量显著高于近头部和中部. 展开更多
关键词 斑鳜 肌球蛋白轻链3(mlc3) 纵向表达
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褪黑素通过p38／MAPK信号通路调控oxLDL诱导的人脐静脉内皮细胞MLCK的表达 被引量：4
6
作者 肖林林 朱华庆 +5 位作者 程筱雯 江志奎 左莉 周青 桂淑玉 汪渊 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2008年第1期16-20,共5页
目的探讨褪黑素(MLT)通过p38/MAPK信号通路调控oxLDL诱导的人脐静脉内皮细胞肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的表达。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HU-VEC),分空白对照组、DMSO对照组、DMSO+oxLDL组、DM-SO+oxLDL+SB203580组、DMSO+oxLDL+MLT组... 目的探讨褪黑素(MLT)通过p38/MAPK信号通路调控oxLDL诱导的人脐静脉内皮细胞肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的表达。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HU-VEC),分空白对照组、DMSO对照组、DMSO+oxLDL组、DM-SO+oxLDL+SB203580组、DMSO+oxLDL+MLT组、DMSO+oxLDL+MLT+SB203580组。RT-PCR、Western blot、γ-32P-ATP掺入法分别检测各组HUVEC MLCK转录、表达和活性及MLT对p38磷酸化的影响。结果RT-PCR显示oxLDL组MLCK转录增强,MLT组与SB203580组均抑制MLCK的转录;Western blot结果表明oxLDL组MLCK表达、p38磷酸化增强,MLT组与SB203580组均抑制MLCK的表达及p38磷酸化;γ-32P-ATP掺入法检测MLCK活性提示oxLDL组MLCK活性增强,MLT与SB203580降低MLCK活性。结论MLT可能通过p38/MAPK通路调控MLCK的转录、表达和活性。 展开更多
关键词 肌球蛋白轻链激酶 褪黑激素 磷酰化 脐静脉/细胞学
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健脾理气方对功能性消化不良大鼠十二指肠MLCK和PGE2-cAMP通路的影响 被引量：14
7
作者 赵鲁卿 常雄飞 张声生 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第3期335-339,共5页
目的观察健脾理气方对功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)模型大鼠十二指肠肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)和前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)-环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)通路的影响... 目的观察健脾理气方对功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)模型大鼠十二指肠肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)和前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)-环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)通路的影响。方法18只SD雄性大鼠采用数字表法随机分为正常组、模型组及中药治疗组(每组6只),以夹尾应激法建立功能性消化不良动物模型,正常组及模型组大鼠均给予0.9%(质量分数)氯化钠注射液灌胃,中药治疗组给予健脾理气方水煎剂灌胃。取大鼠十二指肠组织进行HE染色,观察组织形态,同时应用定量聚合酶链式反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测MLCK和PGE2受体EP1、EP4 mRNA含量,酶联免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法测定PGE2和cAMP的表达。结果模型组大鼠十二指肠MLCK表达升高,PGE2、EP4、cAMP表达下降,EP1未见明显异常,健脾理气方治疗后可明显抑制MLCK表达,升高PGE2、EP4和cAMP表达。结论健脾理气方可以抑制MLCK mRNA表达,同时上调PGE2-EP4-cAMP信号通路表达,这可能是健脾理气方治疗FD的机制之一。 展开更多
关键词 健脾理气方 功能性消化不良 十二指肠 肌球蛋白轻链激酶 前列腺素 E2
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MLC20磷酸化在PKCα、PKCε调节失血性休克大鼠血管钙敏感性中的作用 被引量：1
8
作者 徐竞 杨光明 +4 位作者 李涛 明佳 陈玮 张瑗 刘良明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第21期1972-1975,共4页
目的观察肌球蛋白轻链(MLC20)磷酸化在蛋白激酶Cα(protein kinase Cα,PKCα)、蛋白激酶Cε(protein kinase Cε,PKCε)调节大鼠失血性休克后血管钙敏感性中的作用,进一步探讨休克血管钙失敏的发生机制。方法采用缺氧大鼠血管平滑肌细... 目的观察肌球蛋白轻链(MLC20)磷酸化在蛋白激酶Cα(protein kinase Cα,PKCα)、蛋白激酶Cε(protein kinase Cε,PKCε)调节大鼠失血性休克后血管钙敏感性中的作用,进一步探讨休克血管钙失敏的发生机制。方法采用缺氧大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)和失血性休克后大鼠肠系膜上动脉(superior mesenteric artery,SMA),运用Western blot、底物磷酸化等技术方法,观察PKCα、PKCε激动剂作用下,以及抑制CPI-17、ILK、ZIPK后再给予PKCα、PKCε激动剂时,肌球蛋白轻链磷酸酶(myosin light chain phosphatase,MLCP)活性和MLC20磷酸化的变化。结果①缺氧2h后VSMC中MLCP活性增高至正常对照的150.1%(P<0.01),PKCα、PKCε激动剂可显著抑制其增高,使其分别降低至正常对照的103.0%和96.3%(P<0.01),抑制CPI-17、ILK、ZIPK,可显著抑制PKCα激动剂降低MLCP活性的作用,使其分别增高至正常对照的136.7%、127.6%和116.7%(P<0.01);抑制CPI-17、ILK、ZIPK,也可显著抑制PKCε激动剂降低MLCP活性的作用,使其分别增高至134.0%、128.5%和126.0%(P<0.01)。②失血性休克2h后SMA中MLC20磷酸化水平由32.4%显著降低至10.4%(P<0.01),PKCα、PKCε激动剂可显著抑制其降低,使其分别增高至26.4%和25.6%(P<0.01),抑制CPI-17、ILK、ZIPK,可显著削弱PKCα激动剂的增高MLC20磷酸化的作用,使其分别降低至12.7%、10.0%和15.7%(P<0.01);也可显著削弱PKCε激动剂增高MLC20磷酸化的作用,使其分别降低至10.1%、12.5%和10.3%(P<0.01)。结论PKCα、PKCε可能通过CPI-17、ILK、ZIPK调节MLCP活性和MLC20磷酸化,调节失血性休克血管平滑肌的钙敏感性。 展开更多
关键词 钙敏感性 PKCΑ PKCΕ mlcP mlc20
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凡纳滨对虾肌球蛋白轻链基因MLC的克隆及表达分析 被引量：4
9
作者 李文兰 盛小伟 +3 位作者 高永华 陈晓汉 马宁 熊建华 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第4期1558-1563,共6页
以生长性状分离凡纳滨对虾家系的肌肉组织,构建凡纳滨对虾生长性状差减cDNA文库,斑点杂交筛选获得MLC基因,克隆获得全长编码区序列。序列分析表明序列包含462 bp的开放阅读框,推测编码的蛋白质为153氨基酸,预测的分子量为17.5ku,等电点... 以生长性状分离凡纳滨对虾家系的肌肉组织,构建凡纳滨对虾生长性状差减cDNA文库,斑点杂交筛选获得MLC基因,克隆获得全长编码区序列。序列分析表明序列包含462 bp的开放阅读框,推测编码的蛋白质为153氨基酸,预测的分子量为17.5ku,等电点为4.67。通过荧光定量PCR的方法研究了MLC基因在凡纳滨对虾不同组织和不同生长期的肌肉组织中表达情况,显示MLC基因在凡纳滨对虾的心脏、肝胰腺、肌肉、胃、肠、眼柄、鳃和血等组织或器官中都有表达,在肌肉组织中表达量最高,在肝胰腺中表达量最低;在日龄为45 d的对虾肌肉组织中表达量最高,在日龄为10 d的对虾肌肉组织中表达量最低。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 肌球蛋白轻链 抑制性差减杂交 荧光定量PCR
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竞争性PCR检测MLC_2-糜酶融合基因在转基因小鼠中的组织特异性表达 被引量：3
10
作者 李鹏 陈兰英 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第4期629-632,共4页
用竞争性 Ｐ Ｃ Ｒ 方法定量检测了大鼠肌球蛋白轻链 ２ 启动子（ｍ ｙｏｓｉｎ ｌｉｇｈｔ ｃｈａｉｎ ２ ｐｒｏｍ ｏｔｅｒ， Ｍ Ｌ Ｃ２）糜酶（ｃｈｙｍ ａｓｅ）融合基因在转基因小鼠不同组织中的表达情况，发现 Ｍ Ｌ Ｃ... 用竞争性 Ｐ Ｃ Ｒ 方法定量检测了大鼠肌球蛋白轻链 ２ 启动子（ｍ ｙｏｓｉｎ ｌｉｇｈｔ ｃｈａｉｎ ２ ｐｒｏｍ ｏｔｅｒ， Ｍ Ｌ Ｃ２）糜酶（ｃｈｙｍ ａｓｅ）融合基因在转基因小鼠不同组织中的表达情况，发现 Ｍ Ｌ Ｃ２ｃｈｙｍ ａｓｅ融合基因在转基因小鼠的心脏中有较高水平的表达，在骨骼肌中表达水平较低，在肾脏中有微弱表达；而在肝脏和肺中未检测到．表明 Ｍ Ｌ Ｃ２ｃｈｙｍ ａｓｅ 融合基因改变了野生型 ｃｈｙｍ ａｓｅ 在生物体内的表达特性，不仅提高了表达效率，而且赋予了一定的心脏组织特异性，为进一步研究 ｃｈｙｍ ａｓｅ 基因在心脏中的功能奠定了基础． 展开更多
关键词 糜酶 基因表达 肌球蛋白轻链 启动子 竞争性 PCB
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细菌脂多糖诱导人肺动脉内皮细胞表达P-MLCK 被引量：1
11
作者 林闽加 白建文 +1 位作者 李锦师 许淑敏 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期385-387,共3页
目的探讨细菌脂多糖(LPS)对人肺动脉内皮细胞(HPAEC)表达磷酸化肌球蛋白轻链激酶(phosphorylated myosin lightchain kinase,P-MLCK)的诱导作用。方法体外培养HPAEC,分别给予生理盐水和2μg/mL LPS孵育1 h,经免疫荧光显微镜和Western bl... 目的探讨细菌脂多糖(LPS)对人肺动脉内皮细胞(HPAEC)表达磷酸化肌球蛋白轻链激酶(phosphorylated myosin lightchain kinase,P-MLCK)的诱导作用。方法体外培养HPAEC,分别给予生理盐水和2μg/mL LPS孵育1 h,经免疫荧光显微镜和Western blotting检测P-MLCK。结果与生理盐水组比较,LPS刺激HPAEC后较生理盐水组细胞数量减少,细胞形态无明显改变。HPAEC在LPS刺激30、60 min后,P-MLCK表达由0.41±0.05分别增加至0.82±0.43和1.56±0.07(P<0.05,P<0.01),同时LPS 30 min组和60 min组比较有显著性差异(P<0.05);LPS刺激60 min后P-MLCK免疫反应细胞由1.25±2.1增加至16.4±4.8(P<0.01)。结论P-MLCK可能与LPS诱导的急性肺损伤所致的内皮细胞屏障功能障碍有关。 展开更多
关键词 人肺动脉内皮细胞 细菌脂多糖 磷酸化肌球蛋白轻链激酶
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激活后增强效应与激活后表现提升:重塑定义与认知 被引量：1
12
作者 徐恺 唐文静 +1 位作者 路恒 王然 《中国体育科技》 北大核心 2025年第1期47-58,共12页
激活后增强(post-activation potentiation,PAP)效应是指最大或接近最大强度自主收缩后颤搐力(矩)的急性增强,激活后表现提升(post-activation performance enhancement,PAPE)则尤指运动表现的急性提升。然而,两种术语的定义与应用存在... 激活后增强(post-activation potentiation,PAP)效应是指最大或接近最大强度自主收缩后颤搐力(矩)的急性增强,激活后表现提升(post-activation performance enhancement,PAPE)则尤指运动表现的急性提升。然而,两种术语的定义与应用存在混淆。研究通过系统检索和文献分析发现,术语PAP在发展的历史中逐渐从宽泛的概念转变为具体、明确的术语。目前,PAP效应的主要机制被认为是肌球蛋白调节轻链磷酸化,这可能会提升运动表现相关测试的发力速率和向心负荷-速度关系。然而,在纳入的32篇同时报告PAP效应和PAPE的研究中,50%的研究未同时观察到PAP效应和PAPE,9.4%的研究在PAP效应无差异和显著下降的同时却观察到了PAPE的显著提升。PAP效应只有在激活后的早期(5 min以内)且幅度极高时,才可能影响PAPE,但并不是PAPE的主要机制。结合国外学者对PAP和PAPE的定义,认为在以运动表现作为测量结果时,应统一使用术语PAPE描述相关内容。建议将PAPE翻译为“激活后表现提升”,定义为“最大或接近最大强度自主收缩后运动表现的急性提升”;将PAP翻译为“激活后增强”,定义为“最大或接近最大强度自主收缩后颤搐力(矩)的急性增强”。 展开更多
关键词 激活后表现提升 激活后增强效应 运动表现 颤搐 肌球蛋白调节轻链磷酸化
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柞蚕肌球蛋白轻链1基因(MLC-1)的序列特征及表达谱与系统进化分析
13
作者 姚瑞 李艳 +6 位作者 陈默 谌苗苗 彭明辉 李群 朱绪伟 江幸福 刘彦群 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期893-899,共7页
从柞蚕蛹全长cDNA文库中分离和鉴定了柞蚕肌球蛋白轻链1(myosin light chain 1,MLC-1)基因。柞蚕MLC-1基因全长863 bp,包含一个453 bp的开放阅读框,编码150个氨基酸,预测蛋白质的分子质量为16.75 kD,等电点为4.62。柞蚕MLC-1基因在4个... 从柞蚕蛹全长cDNA文库中分离和鉴定了柞蚕肌球蛋白轻链1(myosin light chain 1,MLC-1)基因。柞蚕MLC-1基因全长863 bp,包含一个453 bp的开放阅读框,编码150个氨基酸,预测蛋白质的分子质量为16.75 kD,等电点为4.62。柞蚕MLC-1基因在4个发育阶段(卵、幼虫、蛹、成虫)和幼虫的10种组织(血液、脂肪体、中肠、丝腺、体壁、马氏管、精巢、卵巢、大脑和肌肉)中均有表达,表明该基因在柞蚕生长发育过程中起着重要作用。柞蚕MLC-1与已知鳞翅目昆虫MLC-1的序列相似度为88%～98%,与其它昆虫MLC-1的序列相似度为60%～74%,表明MLC-1在昆虫的进化过程中高度保守。利用MLC-1蛋白质序列构建的系统进化树中,无脊椎动物和脊椎动物明显地聚成2个类群,且鳞翅目、膜翅目、半翅目、双翅目等昆虫的聚类也与传统形态学分类相一致。 展开更多
关键词 柞蚕 肌球蛋白轻链1 序列特征 表达谱 系统进化
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单克隆抗体与抗血清联合应用建立血清CMLC测定方法的研究
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作者 霍勇 汪丽蕙 +3 位作者 刘新军 杨非易 杜国光 葛韵琴 《生物化学杂志》 CSCD 1993年第4期454-459,共6页
单克隆抗体(McAb)和抗血清各有特点。本文提纯人心肌肌球蛋白轻链(CMLC)并制备其单克隆抗体和抗CMLC兔血清(下称抗血清),试建立测定血清CMLC的酶联免疫(ELISA)方法。通过比较,McAb和抗血清联合应用可提高测定方法的灵敏度和特异性;并对... 单克隆抗体(McAb)和抗血清各有特点。本文提纯人心肌肌球蛋白轻链(CMLC)并制备其单克隆抗体和抗CMLC兔血清(下称抗血清),试建立测定血清CMLC的酶联免疫(ELISA)方法。通过比较,McAb和抗血清联合应用可提高测定方法的灵敏度和特异性;并对各反应试剂的工作浓度进行确定,建立了McAb(1C_(11)-D_7株)为铺底抗体,抗血清为覆盖抗体,碱性磷酸酶标记的羊抗兔IgG为第三抗体的三抗体酶联免疫夹心测定血清CMLC的方法(MP-ELISA)。血清CMLC最小可测浓度为2.5ng/mL。 展开更多
关键词 抗血清 ELISA 单克隆抗体
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MYLK2基因突变与一家族性扩张型心肌病的相关性分析
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作者 任重远 陶琴 +4 位作者 张郁青 程维礼 张莱 梁晴 方旭 《中国心血管杂志》 北大核心 2025年第3期292-298,共7页
目的对肌球蛋白轻链激酶2(MYLK2)基因c.704C>T(p.S235L)突变导致1例家族性扩张型心肌病(DCM)进行分析,探讨基因型与表型的相关性。方法临床观察性研究。收集2012年3月至2023年10月于南京医科大学附属江宁医院心血管内科诊治的1例72... 目的对肌球蛋白轻链激酶2(MYLK2)基因c.704C>T(p.S235L)突变导致1例家族性扩张型心肌病(DCM)进行分析,探讨基因型与表型的相关性。方法临床观察性研究。收集2012年3月至2023年10月于南京医科大学附属江宁医院心血管内科诊治的1例72岁男性先证者及其家系成员共48例的临床资料,并采集外周血样本进行全基因组测序,筛选可能的致病基因,通过Sanger测序进行一代验证。结合家系成员基因型与表型的关联性,通过一系列生物信息学分析手段对致病基因进行挑选和筛查。结果该家系筛查出包括先证者(Ⅱ5)在内的5例DCM患者(Ⅱ2、Ⅲ3、Ⅲ5、Ⅲ7),且基因检测发现均存在MYLK2基因的c.704C>T(p.S235L)突变。其他家系成员未见异常,均无临床表型,排除家族性DCM。生物信息学分析提示,该突变位点在多个物种之间保守性较高,氨基酸突变后极性发生改变,突变型MYLK2和野生型MYLK2蛋白二级结构无明显差异,三级结构突变位点处发生了变化。结论MYLK2基因c.704C>T(p.S235L)突变可能导致家族性DCM。 展开更多
关键词 扩张型心肌病 基因突变 蛋白质结构 肌球蛋白轻链激酶2
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人心肌肌凝蛋白轻链(CMLC)的分离及临床应用
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作者 顾郁 何忠效 袁煜 《生物化学杂志》 CSCD 1992年第5期547-552,共6页
从人心肌提取了肌凝蛋白,并检测了其ATP酶活力的稳定性。用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法纯化并鉴定了人心肌肌凝蛋白轻链(CMLC),结果表明CMLCI的分子量为27000;CMLCⅡ的分子量为20 000。它们的紫外吸收光谱显示A260>A280,表明... 从人心肌提取了肌凝蛋白,并检测了其ATP酶活力的稳定性。用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法纯化并鉴定了人心肌肌凝蛋白轻链(CMLC),结果表明CMLCI的分子量为27000;CMLCⅡ的分子量为20 000。它们的紫外吸收光谱显示A260>A280,表明其高含苯丙氨酸。制备了兔抗人CMLC抗血清,免疫双扩散的结果表明,纯化后的CMLC与肌凝蛋白有相同的抗原性。用阳性的兔抗人CMLC抗血清为对照作ELISA实验,不仅从免疫学角度进一步证实了人心肌CMLC的特性且为其在临床诊断应用提供了可靠的方法。 展开更多
关键词 肌凝蛋白 轻链 分离 临床应用
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光甘草定通过p38/MAPK通路调控动脉粥样硬化模型兔动脉MLCK表达 被引量：10
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作者 王淦娴 王怡 +4 位作者 丁俊丽 丁延辉 周青 汪渊 朱华庆 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第3期309-313,共5页
目的研究光甘草定能否通过p38/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路影响动脉粥样硬化(AS)兔模型主动脉内皮细胞肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的表达。方法建立AS兔模型,将新西兰大耳白兔随机分为3组:正常对照组、高脂模型组、光甘草定组。正常对照... 目的研究光甘草定能否通过p38/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路影响动脉粥样硬化(AS)兔模型主动脉内皮细胞肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的表达。方法建立AS兔模型,将新西兰大耳白兔随机分为3组:正常对照组、高脂模型组、光甘草定组。正常对照组用正常饲料喂养;高脂模型组、光甘草定组用高脂饲料喂养,12周后分析血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)成分的变化,通过苏木精-伊红(HE)染色分析兔动脉壁形态结构变化;免疫组织化学方法观察兔模型主动脉内膜MLCK的分布和表达;Western blot分析兔动脉内膜MLCK水平及p38蛋白磷酸化变化。结果成功建立AS兔模型,在给予高脂饮食12周以后,与正常对照组相比,血清中TC增高(P<0.05),TG有所增加,但差异无统计学意义;大体标本观察到大量兔动脉粥样斑块形成,HE染色显示高脂模型组兔主动脉血管内皮细胞间隙明显增大并伴有大量泡沫细胞,内膜增厚明显;免疫组化显示主动脉内膜MLCK表达量增多;Western blot显示动脉p38磷酸化水平增强(P<0.05)。而加喂光甘草定后,血管内膜病变程度有所下降,MLCK表达有所下降,动脉p38磷酸化水平有所下降(P<0.05)。结论光甘草定可能通过p38/MAPK通路影响AS兔模型主动脉内皮细胞MLCK的表达。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 肌球蛋白轻链激酶 光甘草定
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枳术方对慢传输型便秘大鼠结肠5-HTR及下游CaM-MLCK信号通路的影响 被引量：17
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作者 吴旻娜 王浩 +3 位作者 李悠然 王微 谷云飞 贡钰霞 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期891-896,共6页
目的通过观察枳术方对慢传输型便秘(STC)大鼠结肠组织中5-羟色胺4受体(5-HT_(4)R)、钙调蛋白(CaM)、肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的影响,探讨其作用机制。方法将大鼠随机分为正常组、模型组、枳术方组及阳性药(普芦卡必利)组。采用复方地芬... 目的通过观察枳术方对慢传输型便秘(STC)大鼠结肠组织中5-羟色胺4受体(5-HT_(4)R)、钙调蛋白(CaM)、肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的影响,探讨其作用机制。方法将大鼠随机分为正常组、模型组、枳术方组及阳性药(普芦卡必利)组。采用复方地芬诺酯片建立STC模型,枳术方组随后灌胃枳术方,阳性药组灌胃普芦卡必利。检测各组大鼠粪便含水量,肠道炭末推进率,结肠组织中5-HT_(4)R、CaM、MLCK的mRNA及蛋白相对表达水平。结果与正常组相比,模型组大鼠粪便含水量和炭末推进率明显降低(P<0.05,P<0.01),结肠组织中5-HT_(4)R、CaM、MLCK的mRNA和蛋白相对表达水平也明显降低(P<0.01)。与模型组相比,枳术方组和阳性药组大鼠粪便含水量和炭末推进率明显升高(P<0.05),结肠组织中5-HT_(4)R、CaM、MLCK的mRNA和蛋白相对表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。枳术方组与阳性药组比较,各项数据差异无统计学意义(P>0.05)。结论枳术方能改善STC大鼠的便秘症状,可能与上调大鼠结肠组织中5-HT_(4)R表达并激活下游CaM-MLCK信号通路有关。 展开更多
关键词 枳术方 慢传输型便秘 5-HT_(4)受体 钙调蛋白 肌球蛋白轻链激酶
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同型半胱氨酸调控MEK-ERK-MLCK通路影响结肠炎大鼠肠黏膜通透性的实验研究 被引量：14
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作者 丁少桢 丁浩 +4 位作者 梅俏 刘晓昌 胡静 胡咏梅 许建明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期498-502,共5页
目的探讨同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)是否通过调控MEK-ERK-MLCK通路影响结肠炎大鼠肠黏膜通透性的机制。方法 SD大鼠分为4组,A组为正常对照组(NS皮下注射+NS灌肠),B组为正常对照+Hcy注射组(Hcy皮下注射+NS灌肠),C组为TNBS模型组(NS... 目的探讨同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)是否通过调控MEK-ERK-MLCK通路影响结肠炎大鼠肠黏膜通透性的机制。方法 SD大鼠分为4组,A组为正常对照组(NS皮下注射+NS灌肠),B组为正常对照+Hcy注射组(Hcy皮下注射+NS灌肠),C组为TNBS模型组(NS皮下注射+TNBS灌肠),D组为TNBS模型+Hcy注射组(Hcy皮下注射+TNBS灌肠)。建立高Hcy血症的实验性结肠炎大鼠模型,实验结束时取大鼠结肠组织病理学检查,并进行结肠匀浆检测MPO活性,采用Western blot方法检测大鼠小肠组织中MEK、ERK、p-ERK、MLCK、p-MLCK的蛋白表达水平,采用RT-q PCR方法检测大鼠小肠组织中MLCK mRNA表达。结果与正常对照组及模型对照组相比,TNBS模型+Hcy皮下注射组大鼠DAI及HI评分增高,结肠匀浆MPO活性增高,小肠黏膜组织MEK、ERK、p-ERK、MLCK、p-MLCK蛋白表达水平增加,MLCK mRNA相对表达量增加。结论 Hcy增加实验性结肠炎大鼠肠黏膜通透性,可能与调控MEK-ERKMLCK信号通路有关。 展开更多
关键词 同型半胱氨酸 炎症性肠病 肠黏膜通透性 紧密连接 肌球蛋白轻链激酶 细胞外信号调节激酶
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MLC_2-糜酶融合基因克隆及转基因小鼠的产生 被引量：5
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作者 何泉 陈兰英 +2 位作者 戴蕴平 陈永福 刘力生 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第2期144-150,共7页
为研究糜酶基因在体内的结构与功能以及与心肌肥厚的关系，并提高糜酶基因在小鼠心脏中的表达，构建肌球蛋白轻链－２启动子（ｍｙｏｓｉｎｌｉｇｈｔｃｈａｉｎ－２ｐｒｏｍｏｔｅｒ，ＭＬＣ２）－糜酶融合基因并产生转基因小鼠．通过... 为研究糜酶基因在体内的结构与功能以及与心肌肥厚的关系，并提高糜酶基因在小鼠心脏中的表达，构建肌球蛋白轻链－２启动子（ｍｙｏｓｉｎｌｉｇｈｔｃｈａｉｎ－２ｐｒｏｍｏｔｅｒ，ＭＬＣ２）－糜酶融合基因并产生转基因小鼠．通过删除糜酶基因启动子序列，构建结构基因克隆，然后与大鼠心脏肌球蛋白轻链－２启动子序列相拼接，构建ＭＬＣ２－糜酶融合基因克隆，回收并纯化融合基因片段，显微注射入小鼠受精卵产生转基因小鼠，经ＰＣＲ扩增、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交和ＰＣＲ扩增产物的测序，筛选和确定转基因鼠．在新出生的４６只小鼠中有２只为转基因阳性鼠，且外源基因能稳定遗传给后代，从而获得了可用于研究糜酶基因在体内的结构与功能以及与心肌肥厚的关系的转基因小鼠模型． 展开更多
关键词 糜酶 肌球蛋白轻链 转基因
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