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生鲜乳中16种致病微生物多重荧光定量PCR集成检测技术的建立与初步应用 被引量:2
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作者 肖沙 赵格 +6 位作者 赵建梅 向祝 宋时萍 刘娜 张喜悦 徐莹 王君玮 《中国动物检疫》 CAS 2024年第7期86-95,116,共11页
为满足生鲜乳中微生物快速通量检测的需求,建立多重荧光定量PCR集成方法,从而快速检测生鲜乳中潜在的16种致病微生物,通过设计致病性大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌等目标菌株的特异性引物和探针,优化反应体系,验证方法的特异性、敏... 为满足生鲜乳中微生物快速通量检测的需求,建立多重荧光定量PCR集成方法,从而快速检测生鲜乳中潜在的16种致病微生物,通过设计致病性大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌等目标菌株的特异性引物和探针,优化反应体系,验证方法的特异性、敏感性等,建立了稳定的4组多重集成荧光定量PCR反应体系,并利用人工污染的生鲜乳样品对所建立的方法和传统培养法进行了验证比较。结果显示:各对引物探针对目标菌株均能有效识别并扩增,每组体系中引物探针未发现交叉反应,对其余3组体系的12株非目标菌均未有特异性反应;组内和组间变异系数均低于3%;该方法对布鲁氏菌的最低检出限为10^(2) CFU/mL,对阪崎肠杆菌、志贺菌、沙门菌等7种致病微生物的最低检出限为10^(3) CFU/mL,对蜡样芽胞杆菌、弯曲杆菌、结核分枝杆菌等8种致病微生物的最低检出限为10^(4) CFU/mL;所建方法和传统培养法对人工污染不同致病菌的各25份样品检测结果基本一致。结果表明,本研究建立的多重集成荧光定量PCR方法灵敏度高,特异性及重复性好,可实现对生鲜乳样品中多种致病微生物的快速高效检测,为生鲜乳微生物性风险监测提供了技术支撑。 展开更多
关键词 致病微生物 多重荧光定量PCR 生鲜乳 集成检测技术
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上海地区长足大竹象初报 被引量:20
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作者 鞠瑞亭 夏翠华 +3 位作者 徐俊华 徐颖 池杏珍 李跃忠 《中国森林病虫》 北大核心 2005年第2期7-9,共3页
长足大竹象是慈孝竹上危害性较大的害虫 ,文章首次报道了其在上海的发生。在上海浦东局部地区 ,已有 63 2 8%的慈孝竹新笋受其危害而不能成竹。该虫在上海 1a发生 1代 ,以成虫在土中蛹室内越冬 ,7月上旬成虫开始出土 ,持续至 10月上旬 ... 长足大竹象是慈孝竹上危害性较大的害虫 ,文章首次报道了其在上海的发生。在上海浦东局部地区 ,已有 63 2 8%的慈孝竹新笋受其危害而不能成竹。该虫在上海 1a发生 1代 ,以成虫在土中蛹室内越冬 ,7月上旬成虫开始出土 ,持续至 10月上旬 ,幼虫危害的高峰期在 7- 9月 ,7月下旬- 10月下旬化蛹 ,8月上旬 - 11月上旬成虫在土中羽化。宝发 1号、氧化乐果、乐斯本、阿克泰等 4种农药喷雾防治长足大竹象 ,校正死亡率分别为 :31 70 %、31 4 2 %、31 4 2 %及 9 0 9%。 展开更多
关键词 初报 成虫 上海地区 室内越冬 阿克泰 乐斯本 喷雾防治 文章 危害性
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食源性致病菌多重分子生物学检测技术研究进展 被引量:12
3
作者 索标 汪月霞 艾志录 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2010年第6期71-75,共5页
快速、可靠的食源性致病菌高通量检测方法对于确保食品安全具有重要意义,近年基于DNA水平的多重分子生物学检测技术迅速发展,针对各种不同的食源性致病菌建立了多种多重分子检测技术,包括多重PCR、多重实时荧光PCR以及基因芯片等。对这... 快速、可靠的食源性致病菌高通量检测方法对于确保食品安全具有重要意义,近年基于DNA水平的多重分子生物学检测技术迅速发展,针对各种不同的食源性致病菌建立了多种多重分子检测技术,包括多重PCR、多重实时荧光PCR以及基因芯片等。对这些多重分子检测技术的最新研究进展作一综述,并且建议在今后该技术的研究中,仍需要在食品中多种致病菌同时选择性增菌培养、亚致死损伤修复以及检测内标的构建等方面取得突破,从而能够更好地实现食源性致病菌的高通量检测。 展开更多
关键词 多重分子方法 食源性致病菌 多重PCR 基因芯片 检测
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荧光假单胞菌、沙门氏菌和单增李斯特菌多重PCR检测方法的建立 被引量:22
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作者 胡冰雪 舒沿沿 +2 位作者 潘道东 曾小群 吴振 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第20期209-214,共6页
针对肉制品中易污染的荧光假单胞菌、沙门氏菌和单增李斯特菌等有害微生物,通过3种标准菌株及肉制品建立多重聚合酶链式反应方法,实现肉制品中这3种菌的同时、快速检测。利用荧光假单胞菌的gyrB基因、沙门氏菌的invA基因和单增李斯特菌... 针对肉制品中易污染的荧光假单胞菌、沙门氏菌和单增李斯特菌等有害微生物,通过3种标准菌株及肉制品建立多重聚合酶链式反应方法,实现肉制品中这3种菌的同时、快速检测。利用荧光假单胞菌的gyrB基因、沙门氏菌的invA基因和单增李斯特菌的hly A基因设计3对特异性引物,在确定引物特异性的基础上,对3种标准菌株及在冷却肉上过夜富集后进行灵敏度检测。结果表明,该多重聚合酶链式反应方法对于同时检测这3种有害微生物具有高度的特异性;同时检测这3种菌时,纯菌DNA检测限可达1 pg/μL;将3种菌一起接种到冷却肉中35℃过夜培养后,荧光假单胞菌、沙门氏菌和单增李斯特菌的检测限分别可达到9、5、70 CFU/m L。 展开更多
关键词 多重聚合酶链式反应 检测方法 荧光假单胞菌 沙门氏菌 单增李斯特菌
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靶序列富集多重PCR-液相芯片联合检测4种常见呼吸道病毒的初步应用 被引量:7
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作者 王洁 王卫萍 +4 位作者 胡毓安 孙宁 杨波 夏正坤 李晓军 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第9期958-963,共6页
目的呼吸道病毒是引起婴幼儿呼吸道感染的最主要病原体,为快速准确诊断其感染,文中建立一种基于液相芯片系统的4种常见呼吸道病毒快速分子检测方法,为有效防控其发生和流行提供有力手段。方法采集南京总医院儿科就诊的有急性呼吸道感染... 目的呼吸道病毒是引起婴幼儿呼吸道感染的最主要病原体,为快速准确诊断其感染,文中建立一种基于液相芯片系统的4种常见呼吸道病毒快速分子检测方法,为有效防控其发生和流行提供有力手段。方法采集南京总医院儿科就诊的有急性呼吸道感染症状的患儿咽拭子标本120例及30例正常对照标本,分别纳入患儿组和对照组。针对A型流感病毒(Flu A)、B型流感病毒(Flu B)、呼吸道合胞病毒A型(RSVA)和B型(RSVB)的保守区序列分别设计并合成了特异性引物、探针和通用引物,构建4种病原体阳性参比品,通过对扩增和杂交条件的优化,建立了靶序列富集多重PCR(Tem-PCR)和Luminex液相芯片(x MAP)技术相结合的检测系统,并对该检测系统进行了特异性、灵敏度评价。收集以急性上呼吸道感染为主要表现的患儿咽拭子标本,用上述建立的方法进行检测分析,分别与单病毒基因荧光定量PCR检测方法及x TAG液相芯片法进行比对检测。结果建立了Flu A、Flu B、RSVA和RSVB4种呼吸道病毒的特异性快速分子检测方法且灵敏度可达10拷贝/μL。用快速分子检测方法和单病毒基因荧光定量PCR法对120例疑似患儿咽拭子标本进行检测,快速法阳性检出率为31.7%(38/120),荧光定量法阳性检出率为29.2%(35/120)。经一致性检验分析提示2种方法一致性较强(k>0.7)。部分标本同时采用x TAG液相芯片试剂盒进行检测,经一致性检验分析提示2种方法一致性较好(k>0.6)。结论临床的初步应用证实了4种常见呼吸道病毒快速分子检测方法具备灵敏、特异、快速等优点,为临床早期、准确判断呼吸道感染的病原体提供实验依据。 展开更多
关键词 呼吸道病毒 靶序列富集多重-聚合酶链反应 液相芯片技术[
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孝顺竹RNA提取方法研究 被引量:18
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作者 杨卫东 王敬文 +1 位作者 张金萍 费学谦 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2005年第6期769-772,共4页
提取纯度高、完整性好、不含DNA或其它杂质的总RNA是进行Northern杂交、cDNA合成、cDNA文库构建、RT-PCR及mRNA差异显示等分子生物学研究的基础.目前提取植物RNA方法有多种,这些方法设计旨在RNA提取过程中清除多糖、多酚等杂质污染.在... 提取纯度高、完整性好、不含DNA或其它杂质的总RNA是进行Northern杂交、cDNA合成、cDNA文库构建、RT-PCR及mRNA差异显示等分子生物学研究的基础.目前提取植物RNA方法有多种,这些方法设计旨在RNA提取过程中清除多糖、多酚等杂质污染.在提取高质量RNA的过程中,植物尤其木本植物通常含有大量的酚类、多糖和其他一些水溶性化合物与RNA共沉淀,影响了RNA功能[1].目前应用较多和较广的有5种方法,商业试剂盒TRIzol,以异硫氰酸胍为代表异硫氰酸酸胍法[1,2]、以阳离子去污剂CTAB代表CTAB法[3,4,5]、热硼酸盐法[6,7],和阴离子去污剂SDS为代表SDS法[8~11]等.结合蛋白质、多糖和多酚去除,以及RNA沉淀形成的这些方法,往往要依据不同植物进行适当改进. 展开更多
关键词 孝顺竹 RNA 提取 改良SDS法
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网络地址解析实验方法研究 被引量:3
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作者 王玉春 高艳华 《实验室研究与探索》 CAS 2008年第12期66-68,共3页
针对如何实现网络地址解析静态、动态以及复用IP地址转换实验方法问题,本文不仅给出了设计目的与基本要求,而且还研究了实验方法、设计了实验教学内容、给出了常用算法与数据结构。最后,还列举了应用实例。
关键词 网络地址解析 静态 动态 复用 实验方法
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Y^(3+)掺杂ZnO/TiO_2复合纳米光催化剂的研究 被引量:4
8
作者 周艺 钟选斌 +1 位作者 杨波 朱志平 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2008年第2期87-90,共4页
采用固相法制备了Y3+掺杂ZnO/TiO2复合纳米光催化剂.以X射线粉末衍射(XRD)、透视电子显微镜(TEM)等分析手段对其晶相和形貌进行了表征,用紫外-可见漫反射光谱UV-Vis分析了微粒的光吸收能力和光吸收带边移动的情况,发现掺杂导致了TiO2光... 采用固相法制备了Y3+掺杂ZnO/TiO2复合纳米光催化剂.以X射线粉末衍射(XRD)、透视电子显微镜(TEM)等分析手段对其晶相和形貌进行了表征,用紫外-可见漫反射光谱UV-Vis分析了微粒的光吸收能力和光吸收带边移动的情况,发现掺杂导致了TiO2光吸收能力增强及吸收带边红移.以甲基橙溶液为目标降解物,自然光为光源,研究Y3+掺杂ZnO/TiO2复合纳米光催化剂的光催化活性,结果表明,Y3+掺杂能够扩大纳米二氧化钛吸收光的波长范围,提高对太阳光的利用率,发现当复合光催化剂中TiO2的质量分数为70%,复合ZnO中Y3+掺杂量为3%时,催化剂的活性最高. 展开更多
关键词 掺杂 复合光催化剂 固相法 光催化活性
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实验动物皮肤病原真菌多重PCR检测方法的建立与初步应用 被引量:3
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作者 邢进 冯育芳 +1 位作者 岳秉飞 贺争鸣 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第12期65-70,共6页
目的建立石膏样毛癣菌(Tm)、石膏样小孢子菌(Mg)、犬小孢子菌(Mc)和猴类毛癣菌(Am)的多重PCR检测方法,用于实验动物皮肤病原真菌的快速检测。方法根据Genbank公布的四种皮肤病原真菌的18S-28S rRNA序列设计特异性引物,通过引物、d NTP、... 目的建立石膏样毛癣菌(Tm)、石膏样小孢子菌(Mg)、犬小孢子菌(Mc)和猴类毛癣菌(Am)的多重PCR检测方法,用于实验动物皮肤病原真菌的快速检测。方法根据Genbank公布的四种皮肤病原真菌的18S-28S rRNA序列设计特异性引物,通过引物、d NTP、Taq DNA聚合酶浓度及退火温度和时间的优化,建立四种皮肤病原真菌的多重PCR体系。经特异性和敏感性检验后,对15份人工感染真菌大鼠毛和260份实验动物毛发样本进行检测。结果所建多重PCR方法能够有效区分四种皮肤病原真菌,产生192 bp(Tm)、460 bp(Mg)、290 bp(Mc)和602 bp(As)的目的片段,最低检测限分别为5.9 pg/μL、6.6 pg/μL、9.5 pg/μL和5.1 pg/μL。被检的15份人工感染样本扩增结果准确,260份毛发样本中未检测出四种真菌。结论所建立的多重PCR方法能够同时对实验动物中的四种皮肤病原真菌进行快速的检测,具有较高的应用价值。 展开更多
关键词 皮肤病原真菌 多重PCR 检测方法 实验动物
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改良酚-氯仿法提取及不同试剂盒扩增检测陈旧性人骨DNA 被引量:2
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作者 张玥 徐国昌 +3 位作者 徐凯 王友政 任甫 李红卫 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1134-1137,共4页
目的:探讨改良酚-氯仿法提取及不同试剂盒扩增对陈旧性人骨DNA检测的效果。方法:用传统和改良的酚-氯仿法对30例陈旧性人骨进行DNA提取,用Identifiler-plus试剂盒、Minifiler试剂盒和Godeneye TM 20A试剂盒行荧光标记和复合扩增,Genetic... 目的:探讨改良酚-氯仿法提取及不同试剂盒扩增对陈旧性人骨DNA检测的效果。方法:用传统和改良的酚-氯仿法对30例陈旧性人骨进行DNA提取,用Identifiler-plus试剂盒、Minifiler试剂盒和Godeneye TM 20A试剂盒行荧光标记和复合扩增,Genetic Analyzer软件对基因位点进行检测和分析。结果:改良酚-氯仿法提取及3种试剂盒对陈旧性人骨DNA基因位点检出469、262、588个,高于传统法的307、175、436个。结论:改良酚-氯仿法、3种试剂盒PCR复合扩增能对陈旧性人骨DNA进行有效提取和检测。 展开更多
关键词 DNA检验 酚-氯仿法 复合扩增 陈旧性骨
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一种AOS遥测源包多路调度算法 被引量:13
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作者 王向晖 王同桓 +1 位作者 李宁宁 田贺祥 《航天器工程》 2011年第5期83-87,共5页
高级在轨系统(AOS)体制的核心是调度策略,文章针对我国航天器遥测数据及信道特点,提出了一种高效的AOS遥测源包调度算法,该算法基于优先级调度,对各种数据可以设计不同的优先级,在调度时满足了低速数据的传送要求以及突发数据等高实时... 高级在轨系统(AOS)体制的核心是调度策略,文章针对我国航天器遥测数据及信道特点,提出了一种高效的AOS遥测源包调度算法,该算法基于优先级调度,对各种数据可以设计不同的优先级,在调度时满足了低速数据的传送要求以及突发数据等高实时性的要求,尤其是信道空闲时算法在优先调度高优先级源包的同时,也兼顾了低优先级源包的下传需求。能够满足大多数航天器的应用需求,并已经成功在一些型号中应用。 展开更多
关键词 空间数据系统咨询委员会 高级在轨系统 源包 调度算法 遥测 多路业务
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利用神经网络进行近似分析的结构优化设计 被引量:3
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作者 李文勇 李泉永 《广西科学》 CAS 2001年第2期86-89,共4页
利用人工神经网络的高度并行和非线性映射的功能 ,提出用多层 BP网络描述任一弹性结构的应力、位移等量和结构设计变量之间的映射关系 ,建立了基于人工神经网络的结构全局近似分析方法。利用复合形优化思想对 BP网络进行设计和学习 ,建... 利用人工神经网络的高度并行和非线性映射的功能 ,提出用多层 BP网络描述任一弹性结构的应力、位移等量和结构设计变量之间的映射关系 ,建立了基于人工神经网络的结构全局近似分析方法。利用复合形优化思想对 BP网络进行设计和学习 ,建立结构近似分析的神经网络模型。桁架算例分析表明 。 展开更多
关键词 神经网络 结构近似分析 复合形法 结构优化设计
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同时检测美洲型及欧洲型PRRSV的多重RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量:12
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作者 施开创 莫胜兰 +3 位作者 张步娴 屈素洁 赵日浪 钟诚 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期810-814,共5页
为建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的快速鉴别检测方法,本研究针对PRRSV基因序列设计3对特异性引物,即第1对通用引物扩增美洲型和欧洲型病毒株ORF7基因(433 bp/398 bp)、第2对引物扩增美洲型经典病毒株和高致病性变异株(HP-PRRSV)Nsp... 为建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的快速鉴别检测方法,本研究针对PRRSV基因序列设计3对特异性引物,即第1对通用引物扩增美洲型和欧洲型病毒株ORF7基因(433 bp/398 bp)、第2对引物扩增美洲型经典病毒株和高致病性变异株(HP-PRRSV)Nsp2基因(338 bp/248 bp)、第3对引物扩增欧洲型病毒株ORF5基因(614 bp)。经过反应条件的优化,建立了能够同时检测并区分美洲型经典病毒株、HP-PRRSV株以及欧洲型病毒株的多重RT-PCR检测方法。该方法可以特异扩增3种病毒的基因,其重组质粒标准品的检出下限均为1.67×103拷贝;而与猪的其它重要病原均无交叉反应。应用该方法检测176份临床疑似病料样品,结果 PRRSV阳性45份,其中美洲型变异病毒株41份、经典病毒株4份,未检测到欧洲型病毒株。表明本研究建立的多重RT-PCR检测方法可以用于PRRSV的快速鉴别诊断和流行病学调查。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 美洲型病毒株 欧洲型病毒株 多重RT.PCR 检测方法
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溶剂热法制备N-S共掺杂TiO_2/MWCNT复合材料及其光催化活性的研究 被引量:1
14
作者 关卫省 李姣 +1 位作者 霍鹏伟 赵欢 《应用化工》 CAS CSCD 2013年第4期637-640,共4页
采用溶剂热法,以四氯化钛为前驱体,以硫脲为氮源和硫源,将纳米二氧化钛负载在多壁碳纳米管的表面,制备氮、硫共掺杂的纳米二氧化钛/碳纳米管复合材料,以盐酸土霉素的光催化降解为探针反应,研究复合材料的光催化降解活性。结果表明,溶剂... 采用溶剂热法,以四氯化钛为前驱体,以硫脲为氮源和硫源,将纳米二氧化钛负载在多壁碳纳米管的表面,制备氮、硫共掺杂的纳米二氧化钛/碳纳米管复合材料,以盐酸土霉素的光催化降解为探针反应,研究复合材料的光催化降解活性。结果表明,溶剂热法制备的纳米二氧化钛以锐钛矿相存在,均匀、致密的包覆在多壁碳纳米管的管壁上,添加硫脲的复合材料比未添加硫脲的样品在紫外和可见光区域均有较好的光吸收性能。硫脲的添加增强了复合材料的光催化活性,当二氧化钛和硫脲的摩尔比为1∶6时,催化剂的光催化活性最好,用过的样品经洗涤、烘干再生后用于实验,仍具有较好的光催化活性。 展开更多
关键词 多壁碳纳米管 二氧化钛 复合材料 溶剂热法 光催化
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光纤Bragg光栅测量汽轮机叶片频率的试验研究 被引量:2
15
作者 黄雪峰 李蔚 +3 位作者 盛德仁 岑可法 陈坚红 任浩仁 《浙江大学学报(工学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1770-1774,1784,共6页
利用光纤Bragg光栅(FBG)来测量汽轮机叶片的模态频率.在无约束条件下,FBG测得叶片4阶模态频率分别为1005.00、2048.00、2297.25和2786.00 Hz.当叶片受约束时,FBG测得叶片3阶模态频率分别为921.50、1482.00和2454.75 Hz.为分析FBG测量结... 利用光纤Bragg光栅(FBG)来测量汽轮机叶片的模态频率.在无约束条件下,FBG测得叶片4阶模态频率分别为1005.00、2048.00、2297.25和2786.00 Hz.当叶片受约束时,FBG测得叶片3阶模态频率分别为921.50、1482.00和2454.75 Hz.为分析FBG测量结果的可靠性,采用加速度传感器(AT)进行对比测量,在无约束条件下其结果分别为1005.00、2048.00、2297.00和2786.00 Hz;在有约束条件下,其结果分别为917.00、1480.75和2454.25 Hz.结果表明,FBG和AT对叶片模态频率的测量结果十分吻合.通过研究FBG的解调和波分复用方式,实现两个FBG对叶片进行同时测量.因此FBG可组成传感网络,进行多点测量,用于汽轮机叶栅频率的测量.通过实现进入FBG和出射的光路非接触耦合方式,FBG可用于旋转部件的测量和叶片的动频测量. 展开更多
关键词 光纤BRAGG光栅 汽轮机叶片 模态频率 解调方法 波分复用
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Cu(Ⅱ)和Fe(Ⅲ)掺杂非晶相Ni(OH)_2的结构与电化学性能 被引量:3
16
作者 孙丹 刘长久 +1 位作者 吴华斌 谷得龙 《桂林工学院学报》 北大核心 2008年第4期535-538,共4页
采用微乳液快速冷冻沉淀法制备Cu(Ⅱ)和Fe(Ⅲ)复合掺杂的非晶相氢氧化镍。利用XRD、SEM、EDS、Raman光谱测试分析样品的结构形态,同时将其作为正极活性材料组装成MH-Ni电池,测试其电化学性能。测试结果表明,Cu(Ⅱ)和Fe(Ⅲ)较好的溶于Ni(... 采用微乳液快速冷冻沉淀法制备Cu(Ⅱ)和Fe(Ⅲ)复合掺杂的非晶相氢氧化镍。利用XRD、SEM、EDS、Raman光谱测试分析样品的结构形态,同时将其作为正极活性材料组装成MH-Ni电池,测试其电化学性能。测试结果表明,Cu(Ⅱ)和Fe(Ⅲ)较好的溶于Ni(OH)2的微结构内部,样品粉体材料微粒均匀,微结构无序性强、缺陷较多。在制备体系采用在55℃、pH=11,搅拌反应2 h的工艺条件下,复合掺杂比Fe为3%、Cu为5%(质量分数)所制备样品合成的电极,在80 mA/g恒电流充电5 h,40 mA/g恒电流放电,终止电压为1.0 V的充放电制度下,其首次放电比容量达353.82 mAh/g,放电平台为1.268 V,电极材料结构稳定,循环可逆性良好,表现出较高的电化学活性。 展开更多
关键词 微乳液快速冷冻沉淀法 CU Fe复合掺杂 非晶相氢氧化镍 微结构 电化学性能
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静态波长路由光网络中路由和波长分配算法的统计修正 被引量:4
17
作者 叶亚斌 张汉一 +4 位作者 秦涛 戴无惧 奉飞飞 霍晓莉 郭奕理 《电子学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第7期961-964,共4页
本文采用统计的方法对以网络最小所需波长数为优化目标的路由和波长分配算法进行了修正 .数值模拟计算表明 ,经过统计方法修正之后 ,可以求得更接近波长下限的网络所需波长数 .另外本文还首次提出用统计的方法对路由和波长分配算法进行... 本文采用统计的方法对以网络最小所需波长数为优化目标的路由和波长分配算法进行了修正 .数值模拟计算表明 ,经过统计方法修正之后 ,可以求得更接近波长下限的网络所需波长数 .另外本文还首次提出用统计的方法对路由和波长分配算法进行比较 ,通过比较两个算法在经过统计修正之后求得的网络所需波长数的分布可以知道它们的优劣 . 展开更多
关键词 全光网 波长分配算法 静态波长路由 光通信
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侵染甘薯的SPCSV、SPVG、SPFMV多重RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量:15
18
作者 李华伟 许泳清 +4 位作者 邱思鑫 刘中华 邱永祥 汤浩 余华 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1464-1470,共7页
为建立可同时检测甘薯褪绿矮化病毒(SPCSV)、甘薯G病毒(SPVG)和甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)多重RT-PCR检测方法,本文根据SPCSV热激蛋白基因(hsp70)及SPVG、SPFMV外壳蛋白基因(CP)基因核苷酸序列的保守区域设计特异性引物,通过引... 为建立可同时检测甘薯褪绿矮化病毒(SPCSV)、甘薯G病毒(SPVG)和甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)多重RT-PCR检测方法,本文根据SPCSV热激蛋白基因(hsp70)及SPVG、SPFMV外壳蛋白基因(CP)基因核苷酸序列的保守区域设计特异性引物,通过引物筛选,优化多重RT-PCR反应条件,建立了能同时检测SPCSV、SPVG和SPFMV 3种病毒的多重RT-PCR检测方法。该体系能有效扩增出大小为304、433、601 bp 3个特异性片段。测序结果表明3种病毒与参考序列的一致性达94%-99%。应用建立的多重RT-PCR检测方法可稳定、准确、灵敏地同时检测单一或复合侵染3种甘薯病毒,为甘薯脱毒和病毒病诊断奠定基础。 展开更多
关键词 甘薯病毒 褪绿矮化病毒 G病毒 羽状斑驳病毒 多重RT-PCR 检测方法
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转基因植物快速检测方法的研究 被引量:16
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作者 谢为龙 陈其文 +4 位作者 喻国泉 李冠雄 乐海洋 谭群英 廖力 《生物技术通报》 CAS CSCD 2002年第4期39-42,46,共5页
本试验对转基因植物检测中的DNA提取和PCR扩增程序作了改进。经试验 ,本研究建立的DNA快速提取法与目前广泛使用的CTAB法相比更为简便、快速和经济 ,提取的DNA质量及扩增效果无明显差异 ,可用于多种转基因植物、多种植物组织的DNA提取... 本试验对转基因植物检测中的DNA提取和PCR扩增程序作了改进。经试验 ,本研究建立的DNA快速提取法与目前广泛使用的CTAB法相比更为简便、快速和经济 ,提取的DNA质量及扩增效果无明显差异 ,可用于多种转基因植物、多种植物组织的DNA提取。利用复合PCR法可在同一反应管中同步检测 35S、NOS及CP4-EPSPS基因 ,明显提高了检测效率。应用本试验建立的DNA快速提取 -复合PCR扩增 -银染检测技术可在 6小时内得出结果 ,达到了快速、简便、灵敏、可靠的检测目的。 展开更多
关键词 转基因植物 快速检测方法 DNA快速提取法 复合PCR 银染
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猪繁殖与呼吸综合征病毒一步多重RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量:2
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作者 吴锦艳 田宏 +6 位作者 尚佑军 陈妍 魏衍全 侯相民 赵娜 何建辉 刘湘涛 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1485-1490,共6页
本研究旨在建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的一步多重RT-PCR检测方法。通过多序列比对以及反应条件的优化,从4对引物中精选了3对特异性和敏感性较好、扩增片段分别为228、345和490bp的引物,并应用所建立的方法对4种分离株的细胞毒... 本研究旨在建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的一步多重RT-PCR检测方法。通过多序列比对以及反应条件的优化,从4对引物中精选了3对特异性和敏感性较好、扩增片段分别为228、345和490bp的引物,并应用所建立的方法对4种分离株的细胞毒和组织毒、田间样品及临床症状相似的疾病猪瘟和猪伪狂犬病毒做了检测;并对田间及实验室样品进行符合率试验,对阳性样品进行重复性试验。与常规RT-PCR法进行比较,证明该方法比常规RT-PCR法敏感性提高了10倍;而且利用该方法可使检测时间大大缩短;特异性试验证实该方法无交叉反应;阳性和阴性样本的符合率均为100%;3次阳性样品重复性检测结果完全相同;稳定性试验显示该试剂盒至少可保存1年以上。本研究所建立的PRRSV一步多重RT-PCR检测方法的敏感性高、特异性强、操作简便、省时、结果重复性好,不仅适用于临床病例尤其低微含量样品的诊断,而且在筛查隐形带毒动物及兽医检疫方面具有重要的应用价值。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 一步多重RT-PCR 检测方法
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