散养土鸡J亚群禽白血病病毒和网状内皮组织增生症病毒混合感染的诊断 被引量：2

1

作者 刘兰 梁雄燕 +2 位作者 李拓凡 顾玉芳 杨玉莹 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第4期47-49,I0003,共4页

湖北某农户散养的土鸡,鸡群精神委靡、整体消瘦,对病鸡进行剖检,发现部分鸡体表和脏器可见大小不等的肿瘤结节。取病变典型的组织制作病理切片,镜检可看到髓样细胞瘤和网状细胞。提取病鸡组织DNA,用两组Multi-PCR分别检测A、B、J亚群禽... 湖北某农户散养的土鸡,鸡群精神委靡、整体消瘦,对病鸡进行剖检,发现部分鸡体表和脏器可见大小不等的肿瘤结节。取病变典型的组织制作病理切片,镜检可看到髓样细胞瘤和网状细胞。提取病鸡组织DNA,用两组Multi-PCR分别检测A、B、J亚群禽白血病病毒(ALV-A、ALV-B、ALV-J)和马立克病病毒(MDV)、禽网状内皮增生症病毒(REV)。结果仅扩增出与ALV-J和REV相应的条带,表明该鸡群为ALV-J和REV混合感染。 展开更多

关键词 J亚群白血病 网状内皮组织增生症 混合感染 病理组织切片 multi-pcr

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多重PCR筛选临床细菌耐药整合子基因 被引量：9

2

作者 肖增璜 石磊 +5 位作者 邱春嫦 付强 苏健裕 冯洁 陈洵 李琳 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期480-485,共6页

目的:建立多重PCR方法并对临床菌株进行扩增及整合子分类。方法:采用多重PCR对21株来自临床的耐药菌株进行了第一、二和三类整合酶基因(intI)筛选。结果:16株携带第一类整合酶基因;1株携带第一和第二类整合酶基因;2株含第二类整合酶基... 目的:建立多重PCR方法并对临床菌株进行扩增及整合子分类。方法:采用多重PCR对21株来自临床的耐药菌株进行了第一、二和三类整合酶基因(intI)筛选。结果:16株携带第一类整合酶基因;1株携带第一和第二类整合酶基因;2株含第二类整合酶基因;1株含第三类整合酶基因;1株不含第一、二和三类整合酶基因。结论:筛选细菌耐药整合子基因分类的多重PCR方法简便可靠;整合子广泛存在于临床耐药细菌中。 展开更多

关键词 多重PCR 整合子 整合酶基因 耐药菌株 酶基因 合子 临床 细菌 筛选 PCR方法

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犬瘟热、犬冠状病毒联合RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量：24

3

作者 乔军 孟庆龄 +2 位作者 夏咸柱 何宏彬 范泉水 《西南农业学报》 CSCD 2002年第1期93-95,共3页

用CDV、CCV特异性引物对同一样品中CDV和CCVRNA模板进行联合RT PCR扩增 ,并对扩增条件进行了优化。结果同时得到了两条大小与试验设计完全相符的特异性扩增带 ,且不扩增犬细小病毒、犬腺病毒、犬副流感病毒、轮状病毒的核酸。敏感性试... 用CDV、CCV特异性引物对同一样品中CDV和CCVRNA模板进行联合RT PCR扩增 ,并对扩增条件进行了优化。结果同时得到了两条大小与试验设计完全相符的特异性扩增带 ,且不扩增犬细小病毒、犬腺病毒、犬副流感病毒、轮状病毒的核酸。敏感性试验表明 ,该联合PCR能检测出 10 - 4倍稀释的CDV模板 (10 6 6 TCID50 / 0 1mL)和 10 - 3倍稀释的CCV模板 (10 5 9TCID50 /0 1mL)。通过对 7份临床发病犬病料的检测 ,其阳性检出率高于电镜负染检查。初步应用表明 ,此法具有高度敏感、特异、准确、快速等特点 ,适用于兽医临床对CDV。 展开更多

关键词 犬瘟热 犬冠状病毒 RT-PCR检测 应用 特异性引物 核酸 敏感性 CCV模板 电镜负染 兽医临床

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分子标记辅助培育水稻抗白叶枯病和稻瘟病三基因聚合系 被引量：68

4

作者 倪大虎 易成新 +7 位作者 李莉 汪秀峰 张毅 赵开军 王春连 章琦 王文相 杨剑波 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期100-105,共6页

水稻的白叶枯病和稻瘟病是水稻的两大主要病害，通过分子标记辅助选择与传统的杂交、自交相结合的方法，将抗稻瘟病的Pi9（t）基因和抗白叶枯病的Xa21及Xa23基因聚合到同一株系中，经多代大田或／和温室接菌鉴定、室内标记选择和田间农... 水稻的白叶枯病和稻瘟病是水稻的两大主要病害，通过分子标记辅助选择与传统的杂交、自交相结合的方法，将抗稻瘟病的Pi9（t）基因和抗白叶枯病的Xa21及Xa23基因聚合到同一株系中，经多代大田或／和温室接菌鉴定、室内标记选择和田间农艺性状的筛选，获得了4个三基因聚合且农艺性状优良的株系L17-L20。用不同国家和地区的20个稻瘟病小种、中国流行的7个白叶枯病菌系c1-c7以及安徽省流行的白叶枯病菌系进行大田或，和温室抗病性鉴定，结果显示，株系L17-L20对20个稻瘟病小种均表现出抗性，抗性水平与Pi9（t）基因的供体亲本75-1-127相当，抗谱相同；对白叶枯病的抗性和抗谱与Xa23基因相似，不论在苗期还是在成株期均抗白叶枯病。与Xa21、Xa23基因的供体亲本M12和CBB23相比，成株期的抗性水平有所增强。利用多重PCR技术，在同一PCR反应中可同时选择Pig（t）和Xa21基因，提高了PCR选择效率。 展开更多

关键词 白叶枯病 稻瘟病 Pi9(t)基因 XA21基因 Xa23基因 分子标记辅助选择 多重PCR

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细菌耐药整合子intI分类的多重PCR方法的建立及应用 被引量：12

5

作者 冯洁 石磊 +7 位作者 肖增璜 李琳 陈洵 苏健裕 李心晖 郑美萍 邱春嫦 付强 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期599-603,630,共6页

目的建立快速筛选细菌耐药整合子的分类方法,并对21株来自临床的菌株进行整合子筛选和分类。方法根据G enB ank/EM BL内的第一、第二和第三类的整合酶序列,通过软件C lustalW的多重比对分析设计出各类整合子的特异性引物,用对照菌株建... 目的建立快速筛选细菌耐药整合子的分类方法,并对21株来自临床的菌株进行整合子筛选和分类。方法根据G enB ank/EM BL内的第一、第二和第三类的整合酶序列,通过软件C lustalW的多重比对分析设计出各类整合子的特异性引物,用对照菌株建立多重PCR方法并对21株临床菌株进行PCR扩增,通过其PCR扩增产物片段大小的不同进行整合子分类。结果对照菌株实验结果显示,21株临床分离菌株中,15株在565bp处有扩增片段,即为含有第一类整合酶基因;4株在403bp处有扩增片段,即含有第二类整合酶基因;1株在565bp和403bp处均有扩增片段,提示其同时含有第一、二类整合酶基因;1株没有得到任何扩增片段,即不含有这三类整合酶基因;在被测菌株中未发现第三类整合酶基因的阳性菌株。结论本文报道的筛选细菌耐药整合酶基因分类的多重PCR方法效果良好,具有可行性,为更加全面细致研究整合子类型以及整合子介导的细菌耐药机制提供了一种简单易行、快捷有效的方法。 展开更多

关键词 多重PCR 整合子 整合酶基因

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多重PCR方法快速鉴别猪伪狂犬疫苗毒和野毒 被引量：23

6

作者 蔺芳 尹双辉 +3 位作者 尚佑军 刘艳红 刘湘涛 胡永浩 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第13期5889-5891,共3页

根据Genbank中PRV的gB、gE、TK基因序列设计并合成引物,对样品中PRVDNA进行多重PCR扩增及反应条件优化,得到与设计相符合的3条特异性条带,分别为427 bp(gB)、298 bp(gE)和208 bp(TK)。用这3对引物对四种伪狂犬疫苗样品DNA进行多次多重PC... 根据Genbank中PRV的gB、gE、TK基因序列设计并合成引物,对样品中PRVDNA进行多重PCR扩增及反应条件优化,得到与设计相符合的3条特异性条带,分别为427 bp(gB)、298 bp(gE)和208 bp(TK)。用这3对引物对四种伪狂犬疫苗样品DNA进行多次多重PCR扩增,其中1种疫苗得到与设计相符的1条特异性条带,其余为2条。该结果表明,此检测方法敏感度较高,适用于科学研究、临床诊断以及流行病学调查,对根除伪狂犬病具有重要意义。 展开更多

关键词 伪狂犬病病毒 多重PCR 鉴别诊断

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中国对虾微卫星四重PCR技术的建立及其在模拟放流效果评估方面的应用 被引量：6

7

作者 李伟亚 王伟继 +3 位作者 孔杰 金显仕 阮晓红 罗坤 《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期213-220,共8页

1引言 在中国对虾（Fenneropenaeus chinensis）选择育种过程中,需要建立家系进行育种参数评估。家系的混养有利于消除家系单独养殖情况下环境差异对遗传参数估计的影响,因此育种实践中常采用物理荧光标记实现家系的区分。但这种方法... 1引言 在中国对虾（Fenneropenaeus chinensis）选择育种过程中,需要建立家系进行育种参数评估。家系的混养有利于消除家系单独养殖情况下环境差异对遗传参数估计的影响,因此育种实践中常采用物理荧光标记实现家系的区分。但这种方法易对个体造成伤害,不易于大规模操作,且养殖过程中会有标记丢失现象，在一定程度上影响了育种参数的精确估算。 展开更多

关键词 中国对虾 微卫星 多重PCR 家系识别

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利用多重PCR反应同时筛选番茄Cf-9和Tm-1基因 被引量：9

8

作者 宋燕 陈丽静 +4 位作者 李君明 张智 李天来 徐和金 周永健 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 2006年第2期165-169,共5页

利用同一PCR反应体系,对分别与番茄抗叶霉病的Cf-9基因和抗番茄烟草花叶病毒病的Tm-1基因紧密连锁的PCR标记进行了同时扩增筛选,扩增的特异性片段与单引物扩增片段吻合。其中与Cf-9基因紧密连锁的CAPs标记在抗感试材均可扩增出560bp的... 利用同一PCR反应体系,对分别与番茄抗叶霉病的Cf-9基因和抗番茄烟草花叶病毒病的Tm-1基因紧密连锁的PCR标记进行了同时扩增筛选,扩增的特异性片段与单引物扩增片段吻合。其中与Cf-9基因紧密连锁的CAPs标记在抗感试材均可扩增出560bp的特异片段,且都存在TaqI酶切位点,抗病基因型酶切后分别产生了450bp、330bp和290bp的不同特异性片段,而感病基因型试材酶切后产生450bp和290bp的特异性片段;与Tm-1基因紧密连锁的SCAR标记为显性标记,只有抗病试材产生750bp的特异片段,不能被TaqI酶切。经反复验证,结果稳定准确,可用于在同一PCR反应体系中对两个抗病基因进行同时筛选鉴定。该体系的建立不仅省时、省工、节省费用,而且可用于苗期辅助选育,加快番茄抗病育种进程。 展开更多

关键词 番茄 多重PCR反应 叶霉病 番茄烟草花叶病毒病

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大白菜细胞质雄性不育的分子鉴定及序列分析 被引量：6

9

作者 张德双 张凤兰 +4 位作者 王永健 余阳俊 赵岫云 徐家炳 方智远 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2007年第6期53-59,共7页

为了获得3种大白菜细胞质雄性不育系Ogu CMS,Pol CMS,CMS96和保持系间的多态性以及定位大白菜CMS96不育系所属的不育类型,利用设计的atp6,orf222单一和混合引物PCR扩增3组11份同核异质大白菜细胞质雄性不育系和保持系mtDNA。结果表明,a... 为了获得3种大白菜细胞质雄性不育系Ogu CMS,Pol CMS,CMS96和保持系间的多态性以及定位大白菜CMS96不育系所属的不育类型,利用设计的atp6,orf222单一和混合引物PCR扩增3组11份同核异质大白菜细胞质雄性不育系和保持系mtDNA。结果表明,atp6引物在大白菜Ogu CMS不育系扩增的200 bp片段为其特异带;orf222引物仅在大白菜Pol CMS和CMS96不育系有扩增产物,但二者有3点完全不同:大白菜Pol CMS不育系扩增产物为675bp,CMS96不育系扩增产物为669 bp,二者相差6个核苷酸,后者定名为大白菜CMS96-orf222。大白菜CMS96-orf222与甘蓝型油菜Nap CMS的nad5c基因和Nap-orf222基因同源性均为99%,E值为0.0;大白菜Pol CMS的675 bp序列具有ORF224开放阅读框,没有保守结构域,而大白菜CMS96的669 bp序列具有ORF222开放阅读框和保守结构域YMF19。另外,atp6和orf222混合引物多重PCR扩增产物存在明显多态性:800 bp为大白菜保持系的差异带型;2 300 bp和1 500 bp为大白菜Pol CMS不育系特异带型;200 bp为大白菜Ogu CMS不育系特异带型;690 bp为大白菜CMS96不育系特异带型。该方法仅用一次PCR反应快速地将3种大白菜细胞质雄性不育系和保持系一次性全部区分开,为大白菜分子育种和常规育种更好地相结合提供了简单、快速、准确和重复性好的方法和手段。 展开更多

关键词 大白菜 细胞质雄性不育 CMS96 ATP6 orf222 多重PCR

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活动性肺结核患者α/βTCR基因重排及CDR3谱型分析 被引量：11

10

作者 张建波 方毅敏 +5 位作者 黄艳 江丽芳 董涛 朱晓敏 方丹云 赖小敏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1136-1139,1143,共5页

目的:建立多重PCR方法扩增α/βTCR全长序列,分析活动性肺结核患者病变局部T淋巴细胞α/βTCR基因重排特点及CDR3谱型。方法:分离结核患者肺泡灌洗液中的淋巴细胞,提取RNA后用SMART方法逆转录,运用根据现有文献设计的α和βTCR扩增引物... 目的:建立多重PCR方法扩增α/βTCR全长序列,分析活动性肺结核患者病变局部T淋巴细胞α/βTCR基因重排特点及CDR3谱型。方法:分离结核患者肺泡灌洗液中的淋巴细胞,提取RNA后用SMART方法逆转录,运用根据现有文献设计的α和βTCR扩增引物,进行多重PCR扩增以获得其全长序列,构建重组质粒并测序,利用DNAstar及网上TCR资源分析序列。结果:3例患者共获得24个α链序列,13个β链序列。α链以AV1S2(54%)、AV12S3(41%)、AV12S2(5%)为主;β链以BV2(38%)、BV29S1(46%)、BV14(3%)、BV4S2(3%)为主。同一病例及不同病例之间CDR3区呈现多样性,但是标本1、标本3各有一条β链的CDR3氨基酸序列相同:SVGTGTLHQETQY;标本2和标本3的各有2条α链CDR3序列相同:AVRDWAGNMLT;标本2的一个α链和标本3的一个α链的CDR3均有:AV…DNN…RLM序列。结论:建立了TCRα和β链全长序列的多重PCR扩增方法。结核患者病变局部克隆性增殖的TCRα和β链谱型呈限制性取用,克隆增生的T淋巴细胞来自不同的亚群,但是相同的CDR3序列对于识别MTB多肽可能具有特异性。 展开更多

关键词 活动性肺结核 T细胞受体 基因重排 CDR3 多重PCR

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牛布鲁菌病奶液PCR检测方法的建立及初步应用 被引量：5

11

作者 李彦伟 高明春 +4 位作者 张文龙 王倩 王君伟 K. Nielsen YU Wei-ling 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2011年第4期25-27,共3页

为探讨以牛奶为材料检测牛布鲁菌感染的可行性,本试验建立了可鉴定布鲁菌属的单重PCR以及可鉴定布鲁菌种的多重PCR。结果显示,单重PCR方法的特异性强,只特异性的扩增布鲁菌DNA,对照菌株大肠杆菌、牛败血性波氏杆菌、根瘤农杆菌和苍白杆... 为探讨以牛奶为材料检测牛布鲁菌感染的可行性,本试验建立了可鉴定布鲁菌属的单重PCR以及可鉴定布鲁菌种的多重PCR。结果显示,单重PCR方法的特异性强,只特异性的扩增布鲁菌DNA,对照菌株大肠杆菌、牛败血性波氏杆菌、根瘤农杆菌和苍白杆菌的扩增结果均为阴性;奶液中细菌检测灵敏度为1.08×104CFU/mL。用建立的多重PCR对7株不同种的布鲁菌体和基因组进行鉴定,表明该方法可以区分不同种布鲁菌。本试验中建立的PCR方法能够鉴定所有致病性布鲁菌并对疫苗株和野生毒株加以区分,适用于实验室布鲁菌的快速鉴定。 展开更多

关键词 布鲁菌病 奶液 单重PCR 多重PCR

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利用微卫星标记进行凉山半细毛羊亲权鉴定的研究 被引量：25

12

作者 高爱保 吴登俊 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期85-90,共6页

经多重PCR扩增20个微卫星标记,对凉山半细毛羊进行亲权鉴定。荧光标记检测扩增产物,并用Cervus2.0分析。结果表明:当双亲未知时,累积排除概率为0.998666,在父系半同胞基础上进行母子亲权鉴定,累积排除概率为0.999994,置信度为95%,最终从... 经多重PCR扩增20个微卫星标记,对凉山半细毛羊进行亲权鉴定。荧光标记检测扩增产物,并用Cervus2.0分析。结果表明:当双亲未知时,累积排除概率为0.998666,在父系半同胞基础上进行母子亲权鉴定,累积排除概率为0.999994,置信度为95%,最终从8个候选父亲中找出215个后裔的父亲,又从147个候选母亲中找出它们的母亲,构建了一个混合家系系谱,为进行连锁分析、QTL定位奠定了基础,并对研究绵羊群体结构、历史及多样性有重要意义。 展开更多

关键词 凉山半细毛羊 微卫星标记 多重PCR 亲权鉴定

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猪圆环病毒血清I型和II型的PCR鉴别 被引量：4

13

作者 姜焱 张常印 +1 位作者 张敬友 陈国强 《动物医学进展》 CSCD 2003年第5期101-103,共3页

根据基因库中猪圆环病毒 (PCV)的基因序列 ,设计并合成了 3条引物 ,建立复合PCR,对 2株 PK-1 5细胞及一些疑似 PCV感染的病料进行了 PCV检测。结果 2株 PK-1 5细胞和所有病料都可扩增出 PCV-1的基因片段 ,其中 1株 PK-1 5细胞和一些病... 根据基因库中猪圆环病毒 (PCV)的基因序列 ,设计并合成了 3条引物 ,建立复合PCR,对 2株 PK-1 5细胞及一些疑似 PCV感染的病料进行了 PCV检测。结果 2株 PK-1 5细胞和所有病料都可扩增出 PCV-1的基因片段 ,其中 1株 PK-1 5细胞和一些病料还扩增得到了PCV-2的 DNA片段。证明应用设计的引物进行复合 PCR快速检测 PCV可行 ,为 PCV的检测分型及 展开更多

关键词 猪 圆环病毒 血清 PCR鉴别 PCV 基因

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香港海鸥形菌多重PCR及嵌合荧光PCR检测方法的建立与应用 被引量：3

14

作者 沈林海 孔庆鑫 +6 位作者 孙建荣 徐虹 金慧 韦凌娅 查捷 王英红 倪晓平 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期659-662,668,共5页

目的建立香港海鸥形菌(Laribacer hongkongensis,LH)的多重PCR(multi-PCR)及嵌合荧光法(SYBR Green I)PCR检测方法,并对其在临床及环境微生物方面的应用前景进行评价。方法通过对62株香港海鸥形菌16SRNA基因和16S-23SrRNA基因间隔区(16-... 目的建立香港海鸥形菌(Laribacer hongkongensis,LH)的多重PCR(multi-PCR)及嵌合荧光法(SYBR Green I)PCR检测方法,并对其在临床及环境微生物方面的应用前景进行评价。方法通过对62株香港海鸥形菌16SRNA基因和16S-23SrRNA基因间隔区(16-23SrRNA intergenic spacer region,ISR)进行PCR扩增和多序列比对,设计两对特异性引物,建立多重PCR体系,用15种细菌性腹泻标准菌株及临床菌株进行PCR特异性和敏感性检验;并在此基础上针对两对引物分别用嵌合荧光PCR法进行浓度梯度检测,以确定最低检测限。结果香港海鸥形菌多重PCR法特异性为100%,最低检出限为5×103 CFU/mL菌液;而嵌合荧光PCR法两对引物的最低检出限均达到5×102 CFU/mL菌液。结论该法的建立为临床及环境微生物学提供了一种快速和灵敏的香港海鸥形菌检测手段。 展开更多

关键词 香港海鸥形菌 多重PCR 嵌合荧光 PCR

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多重PCR方法鉴定牛结核分枝杆菌的研究 被引量：5

15

作者 张喜悦 呼西旦 +5 位作者 曹瑞 杜鹏飞 努尔拜合提 古努尔.吐尔逊 孙照刚 范伟兴 《中国动物检疫》 CAS 2013年第7期68-71,共4页

牛结核病主要是由牛结核分枝杆菌引起的是一种人畜共患病,该病确诊需要病原分离与鉴定。我们采集了病牛的结核结节,接种于培养基上,获得了临床分离菌株,灭活后经Ziehl-Neelsen(Z-N)方法染色镜鉴怀疑为分枝杆菌。用分枝杆菌群多重PCR鉴定... 牛结核病主要是由牛结核分枝杆菌引起的是一种人畜共患病,该病确诊需要病原分离与鉴定。我们采集了病牛的结核结节,接种于培养基上,获得了临床分离菌株,灭活后经Ziehl-Neelsen(Z-N)方法染色镜鉴怀疑为分枝杆菌。用分枝杆菌群多重PCR鉴定,结果MYCGEN引物扩增有1030bp片段,TB1引物扩增有372bp片段,证实分离菌株属于结核分枝杆菌群。用分枝杆菌群内多重PCR对其鉴定,结果分离菌株的16SrRNA、Rv0577、IS1561和Rv38774对引物扩增均为阳性,片段大小依次为543bp、786bp、943bp和999bp;而Rv1510、Rv1970和Rv31203对引物扩增为阴性,证实分离菌株为牛结核分枝杆菌。 展开更多

关键词 牛结核分支杆菌 细菌分离 多重PCR

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2006-2008年江苏地区不同宿主感染空肠弯曲菌及其耐药性 被引量：12

16

作者 薛峰 栾军 +7 位作者 张小荣 祝长青 徐飞 陈国强 张常印 徐帮兴 蒋原 陆承平 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1206-1209,共4页

目的检测2006-2008年江苏地区鸡、水禽、奶牛、丹顶鹤、猪、实验猴等标本感染空肠弯曲菌及其耐药性。方法采用APICampy System进行生化与分类鉴定,结合弯曲菌多重PCR检测方法对来自江苏地区的禽、牛、猪、猴3 010份标本,检测分离株及其... 目的检测2006-2008年江苏地区鸡、水禽、奶牛、丹顶鹤、猪、实验猴等标本感染空肠弯曲菌及其耐药性。方法采用APICampy System进行生化与分类鉴定,结合弯曲菌多重PCR检测方法对来自江苏地区的禽、牛、猪、猴3 010份标本,检测分离株及其耐药性。结果共检测样本3010份,402份空肠弯曲菌阳性,阳性率13.36%,其中家禽样阳性率15.83%(258/1630);水禽10.40%(52/500);奶牛7.65%(39/510);猪18.75%(30/160);猴15.00%(15/100);丹顶鹤12.50%(10/80);糜鹿0%(0/30)。选择不同宿主来源的108株对10大类27种抗生素高度敏感率的是:氯霉素100%、阿莫西林99.07%、阿米卡星92.59%、头孢噻肟91.67%、阿齐霉素90.74%;高度耐药率的是:头孢哌酮99.07%、复方新诺明99.07%、头孢孟多99.07%、磺胺甲基异噁唑97.22%、头孢拉丁91.67%。结果显示,108株分离株的耐药主要集中在9耐～20耐,占85.19%,猪分离株的多重耐药性较其它宿主来源分离株严重。结论江苏地区空肠弯曲菌的流行和耐药状况呈现多样化和复杂化,不同宿主来源分离株耐药性和多重耐药性存在差异。 展开更多

关键词 空肠弯曲菌 多重PCR API弯曲菌鉴定系统 流行病学分析 药敏试验

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多重PCR方法鉴别牛、羊、猪种布鲁氏菌株 被引量：17

17

作者 彭小兵 程君生 +3 位作者 夏业才 毛开荣 蒋玉文 丁家波 《中国兽药杂志》 2010年第2期12-14,共3页

用eri作为布鲁氏菌属特异性基因,以IS711基因拷贝数差异作为布鲁氏菌种间特异性标志,建立了鉴别牛、羊、猪种布鲁氏菌株的多重PCR方法。结果:牛种布鲁氏菌2308株扩增出大小为494 bp和178 bp的两条带,羊种布鲁氏菌M28株扩增出大小为733 b... 用eri作为布鲁氏菌属特异性基因,以IS711基因拷贝数差异作为布鲁氏菌种间特异性标志,建立了鉴别牛、羊、猪种布鲁氏菌株的多重PCR方法。结果:牛种布鲁氏菌2308株扩增出大小为494 bp和178 bp的两条带,羊种布鲁氏菌M28株扩增出大小为733 bp和178 bp的两条带,猪种布鲁氏菌S1330株扩增出大小为285 bp和178 bp的两条带,均与预期吻合;而胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、流产沙门菌、都柏林沙门菌、大肠杆菌均未扩增出任何条带。硫化氢和血清学试验结果也符合相应种布鲁氏菌的特点。结果表明,本研究的多重PCR方法可用于牛、羊、猪种布鲁氏菌株的快速鉴定。 展开更多

关键词 布鲁氏菌 eri基因 IS711基因 多重PCR

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SSEL结合多重PCR同时快速检测生菜中4种食源性致病菌 被引量：3

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作者 瞿洋 索玉娟 +4 位作者 徐斐 赵志勇 曹慧 晏绍庆 周昌艳 《上海农业学报》 CSCD 2017年第4期121-126,共6页

为实现生菜中肠炎沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157:H7和单增李斯菌的同时快速检测,将前期开发的SSEL增菌技术与多重PCR联用,对SSEL的增菌性能、SSEL增菌液的处理方式、多重PCR的灵敏度和特异性进行了分析。结果表明:生菜样品经S... 为实现生菜中肠炎沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157:H7和单增李斯菌的同时快速检测,将前期开发的SSEL增菌技术与多重PCR联用,对SSEL的增菌性能、SSEL增菌液的处理方式、多重PCR的灵敏度和特异性进行了分析。结果表明:生菜样品经SSEL增菌24 h后,4种目的菌含量均可达10~5 CFU/mL;以SSEL增菌液及其DNA提取物为模板的多重PCR均能检测出生菜中的4种目的菌,灵敏度分别为10~5 CFU/mL和10~2 ng/μL;SSEL结合多重PCR对测试菌株的特异性达100%。 展开更多

关键词 共增菌培养基 多重PCR 食源性致病菌 生菜

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基于多传感器融合技术的PCR仪温度校准系统 被引量：30

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作者 薛生虎 李东升 +2 位作者 叶子弘 俞晓平 方荣瑞 《仪器仪表学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1232-1237,共6页

提出了一种基于多传感器融合技术的PCR仪温度校准系统。系统对特征点的温度检测和处理后能给出PCR仪基座的温度均匀性和对称性,同时对采集到的多点温度数据运用多传感器数据融合技术进行处理,得到更接近真实基座温度的融合温度,从而可... 提出了一种基于多传感器融合技术的PCR仪温度校准系统。系统对特征点的温度检测和处理后能给出PCR仪基座的温度均匀性和对称性,同时对采集到的多点温度数据运用多传感器数据融合技术进行处理,得到更接近真实基座温度的融合温度,从而可以得到仪器的温度示值误差,以实现对PCR仪的设定温度进行校准。系统选择LabVIEW作为开发软件,能自动生成检测报告。系统的温度校准不确定度优于0.03℃。实验表明,建立的温度校准系统可以用于目前大多数使用中的PCR仪温度的在线校准。 展开更多

关键词 PCR仪 多传感器技术 温度校准 不确定度

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鉴定牛早期胚胎性别PCR反应体系的建立及优化研究 被引量：2

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作者 杨波 朱化彬 +3 位作者 程金华 仲跻峰 王栋 郝海生 《中国畜牧兽医》 CAS 2006年第2期26-29,共4页

根据牛Y染色体特异重复序列设计了一对引物,同时设计了一对牛常染色体引物作内标引物,研究了引物浓度、dNTP浓度、M g2+浓度、酶浓度、退火温度以及循环次数等因素对PCR方法鉴定牛胚胎性别的影响。试验结果表明,引物浓度、退火温度和循... 根据牛Y染色体特异重复序列设计了一对引物,同时设计了一对牛常染色体引物作内标引物,研究了引物浓度、dNTP浓度、M g2+浓度、酶浓度、退火温度以及循环次数等因素对PCR方法鉴定牛胚胎性别的影响。试验结果表明,引物浓度、退火温度和循环次数对该反应体系影响较大,而dNTP浓度、T aq酶含量以及M g2+浓度的影响较小。 展开更多

关键词 多重PCR 性别鉴定 反应条件

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