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小鼠胚胎成纤维细胞对Lewis肺癌细胞增殖及凋亡的影响被引量：2: 1; 作者耿智敏姬乐 +1 位作者郑见宝王林《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期286-289,共4页; 目的探讨小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)是否具有肿瘤相关成纤维细胞相似的生物学活性。方法原代培养MEF并经细胞免疫组化法鉴定α-SMA的表达情况;收集培养48h无血清高糖DMEM培养基上清并制备条件培养基MEF-CM,根据实验中Lewis肺癌细胞(LLC)... 展开更多; 关键词小鼠胚胎成纤维细胞 LEWIS肺癌细胞肿瘤微环境肿瘤相关成纤维细胞细胞增殖细胞凋亡细胞培养; 在线阅读下载PDF 职称材料

HP1α在Zmpste24-缺陷早老小鼠胚胎成纤维细胞中表达和磷酸化水平升高被引量：1: 2; 作者刘佳周光前 +5 位作者尹献辉刘宝华郑慧玲李雪芹王优雅王子梅《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期624-629,共6页; 本实验旨在研究异染色质蛋白1(heterochromatin protein 1,HP1)在Zmpste24基因敲除早老小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)中的表达量和磷酸化水平,探索异染色质功能异常与早老发病机制的内在联系.首先取雄雌Zmpste2... 展开更多; 关键词异染色质蛋白1(HP1) A型核纤层蛋白早老症小鼠胚胎成纤维细胞蛋白质磷酸化; 在线阅读下载PDF 职称材料

HCMV基因在人和小鼠胚胎成纤维细胞中表达的差异性研究: 3; 作者杨瑞王斌 +6 位作者钱冬萌李玲周雯王桐梅胡明陈豪宋旭霞《微生物学杂志》 CAS CSCD 2013年第5期25-31,共7页; 人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)种属特异性机制尚不清楚。研究通过检测HCMV AD169体外感染人胚胎成纤维细胞(Human embryo fibroblast,HEF)和小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryo fibroblast,MEF)后病毒基因的表达情况,探讨HCM... 展开更多; 关键词人巨细胞病毒人胚胎成纤维细胞鼠胚胎成纤维细胞即刻早期基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

一种新的培养人胚胎干细胞的包被基质: 4; 作者朱海林巩慧 +3 位作者周向雅杨金亮魏于全陈慧敏《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2014年第3期88-92,I0005,共6页; 目的：开发一种新的培养人胚胎干细胞（ hESCs）的包被基质，使hESCs的培养更加简便。方法用甲醇固定的小鼠胚胎成纤维细胞（ MEF）作为包被基质，人胚胎干细胞系X-01在该基质上生长，每隔5～6 d传代一次，培养10代后，对人胚胎干细胞... 展开更多; 关键词人胚胎干细胞小鼠胚胎成纤维细胞甲醇固定基质 mef蛋白质复合物; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠胚胎成纤维细胞对Lewis肺癌细胞增殖及凋亡的影响被引量：2: 1; 作者耿智敏姬乐郑见宝王林; 机构西安交通大学医学院第一附属医院肝胆外科西安交通大学医学院第一附属医院普外科; 出处《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期286-289,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.30971340)~~; 文摘目的探讨小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)是否具有肿瘤相关成纤维细胞相似的生物学活性。方法原代培养MEF并经细胞免疫组化法鉴定α-SMA的表达情况;收集培养48h无血清高糖DMEM培养基上清并制备条件培养基MEF-CM,根据实验中Lewis肺癌细胞(LLC)细胞培养基不同,分为MEF条件培养基组、DMEM组,应用MTT法检测不同培养基对LLC增殖率的影响;再根据5-Fu作用与否,进一步应用流式细胞仪检测不同培养基对LLC凋亡的影响。结果成功获得原代培养的MEF,表达α-SMA;MEF-CM较DMEM能够明显促进LLC细胞增殖(P<0.05);MEF-CM较DMEM能够明显抑制LLC细胞凋亡,并能够明显拮抗5-Fu的肿瘤杀伤作用(P<0.05)。结论 MEF是一种活化的成纤维细胞,具有肿瘤相关成纤维细胞相似的生物学活性,有促进LLC增殖及抑制凋亡的作用,可以作为肿瘤相关成纤维细胞用于肿瘤微环境的研究。; 关键词小鼠胚胎成纤维细胞 LEWIS肺癌细胞肿瘤微环境肿瘤相关成纤维细胞细胞增殖细胞凋亡细胞培养; Keywords mouse embryonic fibroblast （mef） Lewis lung carcinoma cell tumor microenvironment tumorassociated fibroblasts proliferation apopotosis cell culture; 分类号 R733.5 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HP1α在Zmpste24-缺陷早老小鼠胚胎成纤维细胞中表达和磷酸化水平升高被引量：1: 2; 作者刘佳周光前尹献辉刘宝华郑慧玲李雪芹王优雅王子梅; 机构深圳大学医学院四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室香港大学李嘉诚医学院; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期624-629,共6页; 基金国家自然科学基金面上项目(No.81070270) 深圳市科技基金基础研究计划面上项目(No.JC201005280552A)~~; 文摘本实验旨在研究异染色质蛋白1(heterochromatin protein 1,HP1)在Zmpste24基因敲除早老小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)中的表达量和磷酸化水平,探索异染色质功能异常与早老发病机制的内在联系.首先取雄雌Zmpste24杂合子小鼠胚胎,原代培养MEFs;分别用PCR和Western印迹检测MEFs基因型和A型核纤层蛋白(laminA)表达以区分野生型与Zmpste24-缺陷型早老细胞;用与衰老相关的β-半乳糖苷酶染色法(senescence associated-β-galactosidase assay,SA-β-gal)确定早老细胞出现衰老表型的传代数.用Western印迹和phos-tagWestern印迹分别检测HP1在Zmpste24+/+和Zmpste24-/-MEFs中表达量和磷酸化水平的差异.实验结果显示,Zmpste24-/-MEFs中存在异常的LaminA,且在传代培养第5代出现明显的细胞衰老现象.选用培养至第3代或第4代的MEFs细胞进行下述实验发现,Zmpste24-/-MEFs中HP1α表达量明显高于Zmpste24+/+MEFs,而HP1β未发现明显升高;Zmpste24+/+MEFs中HP1α以非磷酸化状态为主,但在Zmpste24-/-MEFs中磷酸化HP1α比例明显升高;2种细胞中均未检测到磷酸化HP1β.本研究结果证明,HP1α在Zmpste24-缺陷型早老小鼠传代早期MEFs中的表达量和磷酸化水平均有升高,提示HP1α参与A型核纤层蛋白相关的早老小鼠发病机制.; 关键词异染色质蛋白1(HP1) A型核纤层蛋白早老症小鼠胚胎成纤维细胞蛋白质磷酸化; Keywords heteroehromatin protein 1 （HP1） lamin A Hutehinson-Gilford progeria syndrome（HGPS） mouse embryonie fibroblasts （mefs） protein phosphorylation; 分类号 Q255 [生物学—细胞生物学] R3 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HCMV基因在人和小鼠胚胎成纤维细胞中表达的差异性研究: 3; 作者杨瑞王斌钱冬萌李玲周雯王桐梅胡明陈豪宋旭霞; 机构青岛大学医学院病原生物学教研室; 出处《微生物学杂志》 CAS CSCD 2013年第5期25-31,共7页; 基金国家自然科学基金(81070501) 山东省"病原生物学"泰山学者工程资助项目; 文摘人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)种属特异性机制尚不清楚。研究通过检测HCMV AD169体外感染人胚胎成纤维细胞(Human embryo fibroblast,HEF)和小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryo fibroblast,MEF)后病毒基因的表达情况,探讨HCMV种属特异性的可能分子机制。首先用HCMV AD169(MOI=5)分别感染HEF和MEF,相差显微镜逐日观察细胞的形态学变化;RT-PCR检测HCMV即刻早期(IE1、IE2)、早期(UL84)和晚期基因(UL83)的表达情况;Western-blot和免疫荧光检测病毒基因编码蛋白表达的情况。形态学观察发现HEF感染HCMV后逐渐变大变圆并相互融合,第4天可见典型的HCMV特征性病变效应,而MEF则未出现上述的变化;RT-PCR和Western-blot表明HEF组表达即刻早期基因IE1和IE2、早期基因UL84和晚期基因UL83 mRNA以及各基因所编码的蛋白,且相对表达量显著高于模拟感染组(P﹤0.01);而MEF组仅IE1和IE2 mRNA和蛋白相对表达量显著低于HEF组(P﹤0.05),而高于模拟感染组(P﹤0.01)。免疫荧光检测发现HEF感染72 h表达IE和UL83蛋白,而MEF则无明显表达。以上结果表明,HCMV不能在MEF中复制并产生完整子代病毒颗粒,且病毒基因表达阻止在IE2基因表达之后和UL84基因表达之前,其种属特异性可能与即刻早期蛋白低水平的表达量有关。; 关键词人巨细胞病毒人胚胎成纤维细胞鼠胚胎成纤维细胞即刻早期基因; Keywords human cytomegalovirus （HCMV） human embryo fibroblast （HEF） mouse embryo fibroblast （mef） immediate-early （IE） gene; 分类号 R373.9 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一种新的培养人胚胎干细胞的包被基质: 4; 作者朱海林巩慧周向雅杨金亮魏于全陈慧敏; 机构四川大学生物治疗国家重点实验室江阴司特易生物技术有限公司; 出处《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2014年第3期88-92,I0005,共6页; 文摘目的：开发一种新的培养人胚胎干细胞（ hESCs）的包被基质，使hESCs的培养更加简便。方法用甲醇固定的小鼠胚胎成纤维细胞（ MEF）作为包被基质，人胚胎干细胞系X-01在该基质上生长，每隔5～6 d传代一次，培养10代后，对人胚胎干细胞特性进行检测，包括细胞形态、碱性磷酸酶染色、相关多能性基因的表达和分化能力。结果 hESCs在新的基质上生长良好，经10次传代后仍能保持典型的hESCs克隆形态。碱性磷酸酶染色阳性，免疫荧光染色 Oct4、SSEA4、Tra-1-60为阳性，体外分化可形成拟胚体。结论此种固定的基质可以大量制备，长期保存，并可以长期维持hESCs的未分化状态，为人胚胎干细胞的体外扩增探索出了一个新的途径。; 关键词人胚胎干细胞小鼠胚胎成纤维细胞甲醇固定基质 mef蛋白质复合物; Keywords Human embryonic stem cell mouse embryonic fibroblast Methanol fixation mouse embryonic fibro-blast mef-protein complex; 分类号 Q95-33 [生物学—动物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	小鼠胚胎成纤维细胞对Lewis肺癌细胞增殖及凋亡的影响	耿智敏姬乐郑见宝王林	《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2011	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	HP1α在Zmpste24-缺陷早老小鼠胚胎成纤维细胞中表达和磷酸化水平升高	刘佳周光前尹献辉刘宝华郑慧玲李雪芹王优雅王子梅	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	HCMV基因在人和小鼠胚胎成纤维细胞中表达的差异性研究	杨瑞王斌钱冬萌李玲周雯王桐梅胡明陈豪宋旭霞	《微生物学杂志》 CAS CSCD	2013	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	一种新的培养人胚胎干细胞的包被基质	朱海林巩慧周向雅杨金亮魏于全陈慧敏	《中国实验动物学报》 CAS CSCD	2014	0	在线阅读下载PDF 职称材料