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丝胶对糖尿病大鼠肾脏ERK信号通路的影响 被引量：10
1
作者 郝祥俊 于晓敏 +2 位作者 宋成军 王小杰 陈志宏 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期60-64,共5页
目的探讨彩色蚕茧提取物——丝胶对2型糖尿病大鼠肾脏细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的作用。方法雄性SD大鼠48只,随机均分为4组:正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和二甲双胍组。糖尿病模型组、丝胶治疗组和二甲双胍组大鼠均建... 目的探讨彩色蚕茧提取物——丝胶对2型糖尿病大鼠肾脏细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的作用。方法雄性SD大鼠48只,随机均分为4组:正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和二甲双胍组。糖尿病模型组、丝胶治疗组和二甲双胍组大鼠均建立链脲佐菌素(2%,25 mg.kg-1,3 d)致2型糖尿病大鼠模型;模型成功建立后,丝胶治疗组和二甲双胍组大鼠分别给予丝胶(2.4 g.kg-1.d-1)和二甲双胍(55.33 mg.kg-1.d-1)灌胃治疗35 d。分别采用Western blot和RT-PCR法检测ERK信号通路相关因子ERK、丝裂原活化蛋白激酶的激酶(MEK)和原癌基因c-fos蛋白和mRNA的表达。结果糖尿病模型组大鼠肾脏ERK、MEK、c-fos的表达较正常对照组大鼠增高,差异具有统计学意义(P<0.01);丝胶治疗组、二甲双胍组ERK、MEK、c-fos的表达较糖尿病模型组大鼠降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论肾脏ERK信号通路的激活可能参与了糖尿病肾脏损害的发生发展。丝胶可通过下调ERK及其上游MEK、下游c-fos的表达,抑制糖尿病大鼠肾脏ERK信号通路的激活,发挥对糖尿病大鼠肾脏损伤的保护作用。 展开更多
关键词 丝胶 糖尿病 ERK信号通路 胞外信号调节激酶 丝裂原活化蛋白激酶的激酶 C-FOS
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多重酪氨酸激酶受体抑制剂decorin对高糖低氧条件下血-视网膜内屏障的保护作用及机制研究 被引量：2
2
作者 李疏凤 王帅 +2 位作者 李婷婷 杜珊珊 吴强 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2017年第6期501-505,共5页
目的研究核心蛋白多糖(decorin)对高糖低氧条件下血-视网膜内屏障的保护作用及机制。方法培养人脐静脉内皮细胞,采用细胞计数试剂盒检测不同浓度decorin对人脐静脉内皮细胞存活率的影响;高糖低氧条件下(25 mmol·L^(-1)右旋葡萄糖+... 目的研究核心蛋白多糖(decorin)对高糖低氧条件下血-视网膜内屏障的保护作用及机制。方法培养人脐静脉内皮细胞,采用细胞计数试剂盒检测不同浓度decorin对人脐静脉内皮细胞存活率的影响;高糖低氧条件下(25 mmol·L^(-1)右旋葡萄糖+100μmol·L^(-1)CoCl_2)孵育人脐静脉内皮细胞,通过ELISA检测不同浓度decorin处理后,不同时间点人脐静脉内皮细胞分泌血管内皮生长因子水平。将细胞分为正常对照组(5.5 mmol·L^(-1)右旋葡萄糖)、高糖低氧组(25 mmol·L^(-1)右旋葡萄糖+100μmol·L^(-1)CoCl_2)、甘露醇对照组(5.5 mmol·L^(-1)右旋葡萄糖+19.5 mmol·L^(-1)甘露醇)及decorin处理组(25 mmol·L^(-1)右旋葡萄糖+100μmol·L^(-1)CoCl_2+100 nmol·L^(-1)decorin),通过检测跨内皮细胞电阻(transendothelial electrical resistance,TER)、异硫氰酸荧光素标记的右旋糖酐(fluorescein isothiocyanate,FITC-dextran)的渗漏率来评估单层人脐静脉内皮细胞的屏障功能;Western blotting检测内皮细胞间紧密连接蛋白(claudin-5、occludin、ZO^(-1))及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)的磷酸化水平。结果细胞计数试剂盒检测发现,10 nmol·L^(-1)、50 nmol·L^(-1)、100 nmol·L^(-1)、200 nmol·L^(-1)decorin处理人脐静脉内皮细胞24 h后,各组人脐静脉内皮细胞的存活率均大于90%,差异无统计学意义(均为P>0.05)。在接种后14 d,单层人脐静脉内皮细胞的TER达到最大值且趋于稳定为(170.67±9.07)Ω。与正常对照组比较,高糖低氧处理48 h后,高糖低氧组的TER显著降低至(97.33±6.11)Ω,而decorin组的TER能够维持在(157.67±11.72)Ω,与高糖低氧组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。高糖低氧处理48 h后,高糖低氧组FITC-dextran的渗透性明显增加,488 nm处的吸光度值为正常对照组的(2.12±0.07)倍(P<0.05)。加入100 nmol·L^(-1)的decorin处理后,FITC-dextran的渗透性明显减少,吸光度值是正常对照组的(1.16±0.03)倍,与高糖低氧组的差异有统计学意义(P<0.05)。高糖低氧处理48 h后,高糖低氧组紧密连接蛋白claudin-5表达量为0.38±0.05、occludin为0.43±0.02及ZO^(-1)为0.25±0.02与正常对照组表达量0.72±0.05、0.90±0.01和0.75±0.02相比,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。decorin组claudin-5、occludin及ZO^(-1)表达量分别为0.65±0.08、0.87±0.03和0.60±0.01,与高糖低氧组相比,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。高糖低氧组p-p38 MAPK/p38 MAPK的比值增加,为0.88±0.02,而decorin组p-p38 MAPK/p38 MAPK的比值(0.58±0.04)接近正常对照组水平(0.56±0.02),与高糖低氧组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 decorin能够保护高糖低氧条件下单层人脐静脉内皮细胞的屏障功能并下调p38 MAPK的表达水平,是治疗糖尿病视网膜病变的可能药物。 展开更多
关键词 核心蛋白多糖 血-视网膜屏障 糖尿病视网膜病变 p38丝裂原活化蛋白激酶
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丹酚酸B体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞 被引量：5
3
作者 李伟望 王海萍 +1 位作者 张娟娟 吕洋 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2013年第12期1312-1315,共4页
目的探讨丹酚酸B体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)分化为心肌细胞样的可行性。方法取SD大鼠四肢骨骨髓,分离培养BMSC,第2代BMSC经丹酚酸B诱导分化为诱导组,未诱导为对照组。相差显微镜观察细胞形态;免疫组织化学法检测结蛋白、心肌... 目的探讨丹酚酸B体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)分化为心肌细胞样的可行性。方法取SD大鼠四肢骨骨髓,分离培养BMSC,第2代BMSC经丹酚酸B诱导分化为诱导组,未诱导为对照组。相差显微镜观察细胞形态;免疫组织化学法检测结蛋白、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、连接蛋白43(Cx43)、p38丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)的表达;透射电镜观察分化细胞的超微结构。结果原代细胞接种4h后贴壁生长,48h后细胞呈纺锤形和长梭形,传代细胞经丹酚酸B诱导1周后细胞呈多角形、梭形等形状,部分细胞有分支,诱导4周后诱导组细胞形态明显改变,细胞核位于中央,呈柱状的细胞紧密平行排列,有明显方向性。诱导组细胞中均有结蛋白、cTnI、Cx43及p38MAPK表达,阳性率分别为40.0%、32.3%、53.5%和64.8%,对照组细胞呈弱阳性或阴性表达。免疫荧光检测显示,结蛋白与cTnI呈共表达。结论丹酚酸B体外可诱导大鼠BMSC分化为心肌样细胞。 展开更多
关键词 间质干细胞 肌细胞 心脏 肌钙蛋白I 连接蛋白43 P38丝裂原活化蛋白激酶类 丹参 丹酚酸B
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