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转H5禽流感病毒M2e基因烟草的研究 被引量:3
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作者 张保龙 杨郁文 +1 位作者 倪万潮 侯继波 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第1期51-54,共4页
将禽流感病毒M2e与鸡IgG Fc的融合基因转入烟草植株,利用烟草生产禽流感抗原蛋白,探索利用植物作为生物反应器生产禽流感疫苗的可行性。将M2e-Fc融合基因克隆到植物表达载体pBI121中,与CaMV35s启动子相连,以烟草子叶作为外植体,利用农... 将禽流感病毒M2e与鸡IgG Fc的融合基因转入烟草植株,利用烟草生产禽流感抗原蛋白,探索利用植物作为生物反应器生产禽流感疫苗的可行性。将M2e-Fc融合基因克隆到植物表达载体pBI121中,与CaMV35s启动子相连,以烟草子叶作为外植体,利用农杆菌介导法将外源基因转入烟草中。对抗性植株进行了PCR、RT-PCR分析。结果表明,M2e基因已经导入到烟草中,在转录水平得到了表达。为进一步利用转基因植物生产禽流感疫苗进行了前期的探索工作。 展开更多
关键词 H5亚型禽流感病毒 病毒基质蛋白2(M2) 烟草 转化
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禽流感病毒M2e基因与鸡IgG Fc基因在巴斯德毕赤酵母中的融合表达 被引量:3
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作者 尚书文 侯继波 +5 位作者 徐公豹 牛明福 王秀清 何家惠 陈溥言 姜平 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2008年第1期17-22,共6页
【目的】得到融合蛋白M2e-Fc,并检测其免疫学特性,为研制禽流感通用疫苗奠定基础。【方法】根据禽流感病毒H5N1的M2e蛋白氨基酸序列设计2条长互补引物,通过重叠区互补扩增基因法扩增出目的基因M2e,然后与鸡IgGFc片段基因一起克隆入毕赤... 【目的】得到融合蛋白M2e-Fc,并检测其免疫学特性,为研制禽流感通用疫苗奠定基础。【方法】根据禽流感病毒H5N1的M2e蛋白氨基酸序列设计2条长互补引物,通过重叠区互补扩增基因法扩增出目的基因M2e,然后与鸡IgGFc片段基因一起克隆入毕赤酵母表达质粒中,构建酵母表达载体。将阳性质粒线性化后电转化入感受态毕赤酵母X-33中,再经甲醇诱导后,通过Tricine-SDS-PAGE电泳及Western-blotting鉴定融合蛋白。之后用其免疫非免疫鸡,检验其免疫原性。【结果】成功构建了表达M2e和Fc融合蛋白的酵母表达载体pPICZαA-M2-Fc,并通过Zeocin筛选及PCR鉴定出了阳性重组子;阳性重组子经甲醇诱导后得到融合蛋白,Tricine-SDS-PAGE电泳及Western-blotting鉴定证实,融合蛋白得到正确表达,并且可以与M2e阳性血清反应。动物免疫试验证实,该融合蛋白可以诱导鸡产生抗M2e抗体,具有良好的免疫原性。【结论】融合蛋白M2e-Fc在巴斯德毕赤酵母表达系统中得到了成功表达,该融合蛋白具有较好的免疫原性,为后期进行其他免疫试验奠定了基础。 展开更多
关键词 禽流感病毒 M2e基因 鸡IGG Fc基因 巴斯德毕赤酵母
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人卵巢癌组织中Rac-1蛋白和基质金属蛋白酶-2的表达及临床意义 被引量:6
3
作者 黄晓园 吴明富 +4 位作者 庄亮 李箫 卢运萍 廖国宁 马丁 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期330-334,共5页
目的 研究Rac 1蛋白和基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )在人卵巢癌中的表达 ,探讨其与卵巢癌组织学类型、临床分期、病理分化程度和转移的关系。方法 应用辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素免疫组织化学方法 (SP法 )对 5 0例卵巢癌、 18例良... 目的 研究Rac 1蛋白和基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )在人卵巢癌中的表达 ,探讨其与卵巢癌组织学类型、临床分期、病理分化程度和转移的关系。方法 应用辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素免疫组织化学方法 (SP法 )对 5 0例卵巢癌、 18例良性卵巢肿瘤及 12例正常卵巢组织中的Rac 1蛋白和MMP 2蛋白进行检测。结果 Rac 1蛋白和MMP 2蛋白在卵巢癌中的表达明显比正常卵巢组织及良性病变高 ,差异有显著性意义 (均P <0 0 1)。Rac 1和MMP 2在不同组织学类型标本中表达差异无统计学意义 (均P >0 0 5 )。Rac 1及MMP 2在不同临床分期、分化程度和肿瘤转移的标本中的阳性表达率比较 ,差异有显著性意义 (P <0 0 1或P <0 0 5 )。Rac 1和MMP 2两者在肿瘤转移过程中密切相关 (r =0 74 0 ,P <0 0 1)。结论 Rac 1和MMP 2蛋白的表达与卵巢癌的临床分期、分化程度及转移密切相关 ;Rac 1/MMP 2通路在卵巢癌的侵袭转移中起着重要作用。 展开更多
关键词 人卵巢癌 MMP-2蛋白 表达差异 分化程度 临床分期 癌组织中 卵巢组织 标本 辣根过氧化物酶 显著性
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脑梗死患者血清基质金属蛋白酶2和C反应蛋白作用机制的研究 被引量:8
4
作者 刘丹 刘国荣 +2 位作者 张茂林 杨志甫 席富强 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2010年第1期40-43,共4页
目的探讨基质金属蛋白酶2(MMP-2)和C反应蛋白(CRP)在脑梗死发病过程中的作用机制。方法选择48例急性初发脑梗死患者为病例组,行牛津郡社区脑卒中项目(OCSP)临床分型,同期选择健康体检者50例为对照组。分别在发病48 h内、第7、14天用酶... 目的探讨基质金属蛋白酶2(MMP-2)和C反应蛋白(CRP)在脑梗死发病过程中的作用机制。方法选择48例急性初发脑梗死患者为病例组,行牛津郡社区脑卒中项目(OCSP)临床分型,同期选择健康体检者50例为对照组。分别在发病48 h内、第7、14天用酶联免疫吸附法测定MMP-2水平,同时用免疫比浊法测定CRP水平,并进行相关分析。结果病例组患者血清MMP-2、CRP水平均明显高于对照组(P<0.05),且增高幅度在OCSP不同临床分型中表现不同。血清MMP-2和CRP与脑梗死体积、患者神经功能缺损程度呈正相关。血清MMP-2与CRP呈直线正相关(r=0.829,P<0.05)。logistic回归显示,发病48 h内的血清MMP-2、CRP水平是患者预后的独立预测因素。结论血清MMP-2和CRP可能参与脑梗死后缺血再灌注脑损伤,而且两者存在密切联系。 展开更多
关键词 脑梗死 基质金属蛋白酶2 C反应蛋白质 酶联免疫吸附测定 预后
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高氧、维甲酸对早产大鼠肺成纤维细胞MMP-2及TIMP-2表达的调控 被引量:4
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作者 李文斌 常立文 +2 位作者 容志惠 汪鸿 刘伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期555-561,共7页
目的:探讨维甲酸(RA)对高氧暴露下早产大鼠肺成纤维细胞(LFs)基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其特异性组织抑制物-2(TIMP-2)表达的影响。方法:建立原代培养的早产大鼠LFs高氧暴露模型,采用半定量RT-PCR方法检测MMP-2和TIMP-2 mRNA表达,明胶... 目的:探讨维甲酸(RA)对高氧暴露下早产大鼠肺成纤维细胞(LFs)基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其特异性组织抑制物-2(TIMP-2)表达的影响。方法:建立原代培养的早产大鼠LFs高氧暴露模型,采用半定量RT-PCR方法检测MMP-2和TIMP-2 mRNA表达,明胶酶谱法检测MMP-2酶原和活酶表达,Western blot-ting检测其磷酸化和总的ERK1/2、JNK1/2、p38和c-Jun表达。结果:(1)与对照组比较,高氧可促进早产大鼠LFsMMP-2 mRNA及其酶原和活酶表达(P<0.05,P<0.01),同时使其p-ERK1/2、p-JNK1/2、p-p38和p-c-Jun表达水平显著提高(P<0.01,P<0.05);(2)RA能不同程度下调高氧诱导的早产大鼠LFsMMP-2 mRNA高表达和明显降低其p-JNK1/2、p-p38和p-c-Jun表达(P<0.01,P<0.05),但进一步提高p-ERK1/2表达;(3)高氧、RA对TIMP-2 mRNA和总ERK1/2、JNK1/2、p38及c-Jun表达无明显影响。结论:高氧暴露通过激活MAPKs信号转导通路(主要是JNK和p38)使c-Jun磷酸化水平提高,促进MMP-2表达和激活;RA通过抑制JNK和p38磷酸化,下调MMP-2表达与活化,从而拮抗高氧诱导的肺损伤。 展开更多
关键词 高氧症 维甲酸 肺成纤维细胞 早产大鼠 基质金属蛋白酶-2 有丝分裂素激活蛋白激酶素
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骨形态发生蛋白-2对软骨寡聚基质蛋白在软骨细胞内表达的影响 被引量:9
6
作者 田华 Carrie FANG Paul E.DICESARE 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期317-320,共4页
目的 :定量研究骨形态发生蛋白 (BMP 2 )对软骨寡聚基质蛋白 (COMP)基因在人软骨细胞及ATDC5 5细胞内表达的影响。方法 :原代培养成人及胚胎的关节软骨细胞 ,经BMP 2刺激后 ,利用real timeRT PCR定量分析COMP基因的表达情况 ;采用静息... 目的 :定量研究骨形态发生蛋白 (BMP 2 )对软骨寡聚基质蛋白 (COMP)基因在人软骨细胞及ATDC5 5细胞内表达的影响。方法 :原代培养成人及胚胎的关节软骨细胞 ,经BMP 2刺激后 ,利用real timeRT PCR定量分析COMP基因的表达情况 ;采用静息期不表达COMP基因的鼠源性成软骨细胞株ATDC5 5作为研究对象 ,给以BMP 2刺激 ,通过RT PCR检测COMP表达的变化 ;将COMP基因的全长启动子克隆到报告基因Luciferase的上游并转染入ATDC5 5细胞 ,分别给以 5 0 0 μg·L-1的BMP 2和 /或 10 μg·L-1的Noggin刺激 ,测定其对Luciferase活性的影响。结果 :BMP 2使成人软骨细胞内的COMP基因表达提高近 3倍 ,而对胚胎软骨细胞的作用较弱 ,提高了1.5倍 ;COMP基因在胚胎软骨细胞内的基础表达量约是在成人软骨细胞内的 2倍 ;经BMP 2刺激后ATDC5 5细胞株明显表达COMP基因 ,并且BMP 2的这种效应能够被其拮抗剂Noggin所抑制 ;BMP 2明显促进了Luciferase的活性 ,约提高了 5倍 ,且Noggin特异性的抑制了BMP 2的这种作用。 结论 :BMP 2能够明显促进COMP基因在人关节软骨细胞及鼠源性成软骨细胞株ATDC5 5内的表达。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白-2 软骨寡聚基质蛋白 软骨细胞 基因表达
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BMP-2、bFGF基因转染的大鼠骨髓干细胞与牙胚细胞在体外混合培养对成牙基因的影响 被引量:7
7
作者 邬薇薇 胡杨 +2 位作者 何惠宇 韩祥祯 王欢欢 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期18-22,共5页
目的:观察骨形态发生蛋白-2和(或)碱性成纤维细胞生长因子转染的大鼠骨髓干细胞(BMSCs)和牙胚细胞在体外混合培养对牙本质基质蛋白1、成釉蛋白、Ⅰ型胶原蛋白、同源异型盒基因1的影响。方法:采用实时定量PCR和Western blot的方法,检测BM... 目的:观察骨形态发生蛋白-2和(或)碱性成纤维细胞生长因子转染的大鼠骨髓干细胞(BMSCs)和牙胚细胞在体外混合培养对牙本质基质蛋白1、成釉蛋白、Ⅰ型胶原蛋白、同源异型盒基因1的影响。方法:采用实时定量PCR和Western blot的方法,检测BMP-2和(或)bFGF对成牙基因的影响。结果:对照组、bFGF组、BMP-2组、bFGF/BMP-2组四组间,AMBN、COLLAGEN-Ⅰ、DLX1、DMP1基因在mRNA和蛋白水平表达量上存在明显差异(P<0.05)。结论:BMP2和bFGF有一定的协同交互作用,BMP2/bFGF/BMSCs/牙胚细胞可以作为构建组织工程牙的种子细胞。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白-2 碱性成纤维细胞生长因子 牙本质基质蛋白1 成釉蛋白 Ⅰ型胶原蛋白同源异型盒基因1
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胎膜组织BMP-2及MMP-9的表达及与胎膜早破的关系 被引量:3
8
作者 李庆姝 漆洪波 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期139-142,I0001,共5页
目的:探讨胎膜组织骨形成蛋白-2(BMP-2)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与胎膜早破(PROM)发生的关系。方法:选择足月临产产妇、足月PROM产妇、早产临产产妇、早产PROM产妇及足月未临产产妇(对照组)各18例,分娩后取破口处胎膜组织,采用免疫组... 目的:探讨胎膜组织骨形成蛋白-2(BMP-2)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与胎膜早破(PROM)发生的关系。方法:选择足月临产产妇、足月PROM产妇、早产临产产妇、早产PROM产妇及足月未临产产妇(对照组)各18例,分娩后取破口处胎膜组织,采用免疫组织化学法染色,并使用病理影像多媒体图文操作系统对BMP-2、MMP-9阳性表达物的面积积分光密度(AIOD)进行半定量分析。结果:①胎膜组织中BMP-2和MMP-9阳性表达的AIOD在足月临产组、足月PROM组、早产临产组、早产PROM组均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.0071);②足月PROM组BMP-2和MMP-9高于足月临产组(P=0.0065,P=0.0069);早产PROM组BMP-2和MMP-9高于早产临产组(P=0.0069,P=0.0052);早产PROM组BMP-2和MMP-9高于足月PROM组(P=0.0037,P=0.0065);③5组胎膜组织中BMP-2和MMP-9的表达均呈明显正相关(rs=0.76159,P<0.0001)。结论:BMP-2和MMP-9与胎膜破裂的发生密切相关,胎膜组织中BMP-2与MMP-9的表达水平相关。 展开更多
关键词 骨形成蛋白-2 基质金属蛋白酶-9 胎膜早破
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WAVE1、MMP-2及MMP-9在卵巢癌组织中的表达及意义 被引量:7
9
作者 申丽媛 唐良萏 +1 位作者 张婧 周碎央 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第13期1406-1409,共4页
目的探讨WASP家族富含脯氨酸同源蛋白1(WASP-family verprolin-homologous protein 1,WAVE1)及基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在卵巢癌的表达及临床意义。方法采用免疫组化SABC三步法检... 目的探讨WASP家族富含脯氨酸同源蛋白1(WASP-family verprolin-homologous protein 1,WAVE1)及基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在卵巢癌的表达及临床意义。方法采用免疫组化SABC三步法检测47例卵巢癌、30例卵巢良性肿瘤和21例正常卵巢组织中WAVE1、MMP-2、MMP-9的表达,并对卵巢癌组织WAVE1与MMP-2、MMP-9的表达进行相关性分析。结果①WAVE1、MMP-2及MMP-9在卵巢癌中的表达均高于在正常卵巢组织及卵巢良性组织中的表达,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman相关分析显示,WAVE1和MMP-2、MMP-9两两表达成正相关(r=0.773,r=0.664,P<0.05)。②WAVE1的表达与卵巢癌的临床分期、组织分化及Ca-125水平有关(P<0.05),与年龄、肿瘤的直径无关(P>0.05)。MMP-2、MMP-9表达与卵巢癌的临床分期有关(P<0.05),与年龄、组织分化、Ca-125水平及肿瘤直径无关(P>0.05)。结论 WAVE1和MMP-2、MMP-9在卵巢癌中呈现高表达,早期联合筛查WAVE1和MMP-2、MMP-9指标对卵巢癌病情演变和预后评估有着重要的临床意义。 展开更多
关键词 卵巢癌 WAVE1 基质金属蛋白酶-2 基质金属蛋白酶-9
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PI3k/Akt信号通路及MMP-2、MMP-9在正常妊娠及自然流产绒毛组织中的表达 被引量:14
10
作者 刘丽媛 何俊琳 +3 位作者 刘学庆 丁裕斌 王应雄 陈雪梅 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1511-1515,共5页
目的:检测磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinotidol 3-kinase/protein kinase B,PI3k/Akt)信号通路及基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)与基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在早孕期正常... 目的:检测磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinotidol 3-kinase/protein kinase B,PI3k/Akt)信号通路及基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)与基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在早孕期正常妊娠和自然流产绒毛组织中的表达情况,并探讨其表达与自然流产的关系。方法:采用real-time PCR、免疫组织化学方法和Western blot技术检测20例早孕期自然流产绒毛组织与20例正常人工流产绒毛组织中PI3k、Akt、p-Akt、张力蛋白磷酸酶(phosphatase and tensin homolog,PTEN)、MMP-2、MMP-9等表达情况。结果:荧光定量PCR结果显示,PI3k(P=0.000)、Akt(P=0.005)、MMP-9(P=0.000)的m RNA水平在自然流产组(SPO组)明显低于正常人工流产组(NOR组),PTEN的m RNA水平在SPO组则高于NOR组(P=0.000)。免疫组化结果显示PI3k(P=0.006)、Akt(P=0.000)、p-Akt(P=0.000)、MMP-9(P=0.000)在SPO组表达明显低于NOR组,PTEN的表达则呈现相反的趋势(P=0.000),MMP-2在SPO组与NOR组没有明显变化(P=0.092)。Western blot结果与免疫组化结果一致,PI3k(P=0.047)、Akt(P=0.011)、p-Akt(P=0.001)、MMP-2(P=0.893)、MMP-9(P=0.005)。结论:PI3k/Akt信号通路参与了早孕期自然流产的发生,可能通过影响MMP-9的表达而影响其侵袭功能。本研究对于揭示自然流产发生的分子机制具有重要意义,为临床上预防与治疗早期流产的发生提供了新的方向。 展开更多
关键词 自然流产 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B 基质金属蛋白酶-2 基质金属蛋白酶-9
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珍珠层水溶性基质对兔骨髓基质干细胞BMP-2和Cbfα1基因表达的影响 被引量:9
11
作者 王建钧 陈建庭 杨春露 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1838-1840,共3页
目的从珍珠层水溶性基质(WSM)对兔骨髓基质干细胞分泌的骨形成蛋白-2和核心结合因子基因表达的影响入手,研究WSM产生成骨作用的机制和途径。方法培养新西兰大白兔的骨髓基质干细胞(BMSCs),并用低温下提取的珍珠层水溶性基质作用后,检测... 目的从珍珠层水溶性基质(WSM)对兔骨髓基质干细胞分泌的骨形成蛋白-2和核心结合因子基因表达的影响入手,研究WSM产生成骨作用的机制和途径。方法培养新西兰大白兔的骨髓基质干细胞(BMSCs),并用低温下提取的珍珠层水溶性基质作用后,检测不同浓度WSM作用下碱性磷酸酶的活性,制定剂量-效应曲线,确定量效关系;采用一步RT-PCR方法检测不同浓度WSM诱导兔BMSCs后骨形成蛋白-2和核心结合因子的基因表达量并进行统计学分析。结果WSM可以增加兔BMSCs中碱性磷酸酶的活性,在150~200μg/ml浓度之间作用明显,碱性磷酸酶活性增加显著;WSM诱导兔BMSCs后骨形成蛋白的表达量明显增加,核心结合因子的表达量无明显变化。结论WSM通过增加骨形成蛋白-2的基因表达量诱导兔BMSCs向成骨细胞分化,与核心结合因子的作用关系不明显。 展开更多
关键词 珍珠层水溶性基质 骨髓基质干细胞 骨形成蛋白-2 核心结合因子
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单核细胞趋化蛋白-1和基质金属蛋白酶-2在增生性玻璃体视网膜病变增生膜中的表达 被引量:2
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作者 贾洪真 韩泉洪 +4 位作者 惠延年 王琳 杜红俊 崔志利 马吉献 《眼科新进展》 CAS 2003年第5期310-313,共4页
目的 观察单核细胞趋化蛋白 1(monocytechemotacticprotein 1,MCP 1)和基质金属蛋白酶 2 (matrixmetalloproteinase 2 ,MMP 2 )在增生性玻璃体视网膜病变 (PVR)增生膜中的表达。方法 玻璃体手术取出的PVR增生膜 2 4例 ,其中C级膜 11... 目的 观察单核细胞趋化蛋白 1(monocytechemotacticprotein 1,MCP 1)和基质金属蛋白酶 2 (matrixmetalloproteinase 2 ,MMP 2 )在增生性玻璃体视网膜病变 (PVR)增生膜中的表达。方法 玻璃体手术取出的PVR增生膜 2 4例 ,其中C级膜 11例 ,D级膜13例 ,用免疫组织化学方法检测MCP 1和MMP 2的表达。结果 在全部 2 4例增生膜中 ,MCP 1和MMP 2均有表达 ,MCP 1阳性表达 8例 ,强阳性表达 16例 ;MMP 2阳性表达 7例 ,强阳性表达 17例。结论 MCP 1和MMP 2均存在于PVR增生膜中 ,提示 2者在PVR增生膜的形成和PVR发生发展过程中起重要作用。 展开更多
关键词 增生性玻璃体视网膜病变 单核细胞趋化蛋白-1 基质金属蛋白酶-2 免疫组 织化学染色
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尿酸对大鼠血管平滑肌细胞赖氨酰氧化酶和基质金属蛋白酶-2表达的影响 被引量:4
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作者 刘会 张曙影 +1 位作者 袁国军 荣季冬 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2018年第11期1113-1117,共5页
目的:研究尿酸对大鼠血管平滑肌细胞赖安酰氧化酶(LOX)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的影响。方法:人工传代培养大鼠血管平滑肌细胞,分为对照组、尿酸组(20、40、60 mg/L尿酸干预48 h;40 mg/L尿酸干预24、48、72 h)、β氨基丙腈组(40 m... 目的:研究尿酸对大鼠血管平滑肌细胞赖安酰氧化酶(LOX)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的影响。方法:人工传代培养大鼠血管平滑肌细胞,分为对照组、尿酸组(20、40、60 mg/L尿酸干预48 h;40 mg/L尿酸干预24、48、72 h)、β氨基丙腈组(40 mg/L尿酸干预48 h后加入LOX的特异性抑制剂β氨基丙腈10 mg/ml孵育24 h)。用激光共聚焦显微镜观察细胞内活性氧情况。提取大鼠血管平滑肌细胞RNA和蛋白,用逆转录聚合酶链式反应和免疫印迹法测定LOX及MMP-2信使核糖核酸(mRNA)和蛋白的表达水平。结果:尿酸组大鼠血管平滑肌细胞增殖量、细胞内活性氧、LOX及MMP-2的m RNA和蛋白水平均明显高于对照组;与尿酸组相比,β氨基丙腈组大鼠血管平滑肌细胞LOX及MMP-2 mRNA和蛋白表达均明显下调,差异均有统计学意义(P均<0.01)。结论:尿酸可上调大鼠血管平滑肌细胞LOX及MMP-2表达。 展开更多
关键词 尿酸 蛋氨酸-6-氧化酶 基质金属蛋白酶-2 血管平滑肌细胞
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MMP-2、MVD及MEK-2在子宫内膜异位症中的表达及临床意义 被引量:3
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作者 张伟 胡倩倩 +2 位作者 王璐 沈萌 李盛 《海南医学院学报》 CAS 2016年第5期463-466,共4页
目的:探讨基质金属蛋白酶2(MMP-2)、微血管密度(MVD)、丝裂原活化蛋白激酶上游激活酶(MEK-2)在子宫内膜异位症的临床表达及意义。方法:选择2008年9月1日~2014年12月18日在我院妇产科行手术治疗的42例子宫内膜异位症患者,术中... 目的:探讨基质金属蛋白酶2(MMP-2)、微血管密度(MVD)、丝裂原活化蛋白激酶上游激活酶(MEK-2)在子宫内膜异位症的临床表达及意义。方法:选择2008年9月1日~2014年12月18日在我院妇产科行手术治疗的42例子宫内膜异位症患者,术中将异位内膜取出设置为异位内膜组。取上述42例子宫内膜异位症患者的在位内膜,将其设置为在位内膜组。选择同期在我院妇产科行手术治疗的34例子宫肌瘤患者,取其正常的子宫内膜作为正常内膜组。测定、评估3组MMP-2、MVD、MEK-2的临床表达,并进行统计学分析。结果:异位内膜组的MVD值均明显高于在位内膜组和正常内膜组(P均〈0.05)。正常内膜组织中MEK-2、MMP-2表达主要以阴性及弱阳性为主,异位内膜以及在位内膜则100%表达为阳性。异位内膜中MEK-2、MMP-2的表达强度最高,在位内膜次之,正常内膜的表达强度最低(P〈0.05)。结论:MMP-2、MEK-2在异位内膜中均呈现出高表达,MVD值在异位内膜中升高,探讨MMP-2、MVD、MEK-2在子宫内膜异位症的临床表达,有助于进一步明确本病的发病机理,指导临床诊断和治疗。 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶2(MMP-2) 微血管密度(MVD) 丝裂原活化蛋白激酶上游激活酶(MEK-2) 子宫内膜异位症
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血清基质金属蛋白酶-9与2型糖尿病并发急性冠脉综合征的关系 被引量:5
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作者 段景琪 吕肖锋 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第22期2018-2020,2024,共4页
目的观察基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在糖尿病并发急性冠脉综合征(ACS)患者血清中的水平,评价其临床检测意义。方法选择28例健康志愿者(正常组)、27例单纯2型糖尿病患者(DM组)、52例ACS患者〔ACS组,其中不稳定型心绞痛(UAP)31例,急性心肌梗... 目的观察基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在糖尿病并发急性冠脉综合征(ACS)患者血清中的水平,评价其临床检测意义。方法选择28例健康志愿者(正常组)、27例单纯2型糖尿病患者(DM组)、52例ACS患者〔ACS组,其中不稳定型心绞痛(UAP)31例,急性心肌梗死(AMI)21例〕,46例2型糖尿病并发ACS患者〔DM+ACS组,其中糖尿病并发不稳定型心绞痛(DM+UAP)26例,糖尿病并发急性心肌梗死(DM+AMI)20例〕。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组血清MMP-9水平,免疫散射比浊法(immunoturbidimetric method)检测血清C反应蛋白(CRP)水平。制作受试者工作特性曲线(ROC曲线),判断血清MMP-9检测糖尿病并发ACS的临界值。结果DM+ACS组患者血清MMP-9水平〔(307±101)μg/L〕显著高于正常组〔(164±35)μg/L〕、DM组〔(184±35)μg/L〕及ACS组〔(239±74)μg/L〕,差异有统计学意义(P<0.01);DM+AMI组患者血清MMP-9水平显著高于DM+UAP组,差异有统计学意义(P<0.01)。MMP-9水平与血清CRP水平呈正相关(γ=0.61,P<0.01)。MMP-9水平用于DM并发ACS判断的临界值为211μg/L,其敏感性为84.8%,特异性为65.4%,ROC曲线下面积为0.813。结论血清MMP-9水平在糖尿病并发ACS患者中呈相对升高状态,提示血清MMP-9变化与糖尿病患者并发ACS的发生、发展有关,可作为预测该类患者动脉粥样斑块不稳定或破裂的血清学指标。 展开更多
关键词 糖尿病 2 急性冠状动脉综合征 基质金属蛋白酶9 C反应蛋白
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胶质母细胞瘤患者血浆胰岛素样生长因子结合蛋白-2影响因素研究
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作者 徐丽 崔云 +1 位作者 李桂林 江涛 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第33期3728-3730,共3页
目的探讨胶质母细胞瘤组织胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)表达和肿瘤侵袭性对患者血浆IGFBP-2表达水平的影响。方法应用ELISA法检测43例胶质母细胞瘤患者血浆IGFBP-2表达水平;应用免疫组化技术检测上述患者肿瘤组织IGFBP-2和基质... 目的探讨胶质母细胞瘤组织胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)表达和肿瘤侵袭性对患者血浆IGFBP-2表达水平的影响。方法应用ELISA法检测43例胶质母细胞瘤患者血浆IGFBP-2表达水平;应用免疫组化技术检测上述患者肿瘤组织IGFBP-2和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达情况;IGFBP-2以肿瘤细胞阳性与否分为两个水平("1"和"2"),MMP-9以肿瘤细胞阳性率"≤60%"和">60%"分为两个水平("1"和"2"),对患者血浆IGFBP-2表达水平进行2×2析因分析。结果胶质母细胞瘤患者肿瘤组织IGFBP-2、MMP-9表达(P=0.003、P=0.014)及二者的交互效应(P=0.049)均能影响患者血浆IGFBP-2水平。结论胶质母细胞瘤患者血浆IGFBP-2水平受肿瘤组织IGFBP-2表达、肿瘤侵袭性及其交互效应的影响。 展开更多
关键词 脑胶质母细胞瘤 胰岛素样生长因子结合蛋白-2 基质金属蛋白酶9
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基质金属蛋白酶-9、C反应蛋白与2型糖尿病患者颈动脉粥样硬化的相关性研究 被引量:1
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作者 刘宽芝 吕海莉 张文云 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2005年第5期356-358,共3页
目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、C反应蛋白(CRP)与2型糖尿病颈动脉粥样硬化的关系, 方法:用酶联免疫法测定50例单纯2型糖尿病患者(A组)及50例2型糖尿病合并颈动脉粥样硬化患者(B 组)的血清MMP-9、CRP水平,通过彩色多普勒超声测量颈... 目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、C反应蛋白(CRP)与2型糖尿病颈动脉粥样硬化的关系, 方法:用酶联免疫法测定50例单纯2型糖尿病患者(A组)及50例2型糖尿病合并颈动脉粥样硬化患者(B 组)的血清MMP-9、CRP水平,通过彩色多普勒超声测量颈动脉内中膜厚度、斑块及血管狭窄情况判断颈动脉粥样硬化。结果:B组血清MMP-9、CRP水平分别为600.30 ng/ml、5.98 mg/L,较A组血清MMP-9、CRP水平284.05 ng/ml、3.46 mg/L明显增高,两组相比均有极显著性差异(P<0.01)。调整混杂因素后B组血清MMP一9、CRP水平仍较A组高(369.52 ng/ml比153.16 n/ml及4.03 mg/ml比2.19 mg/L),且两组相比有极显著性差异(P<0.01)。结论:MMP-9、CRP在2型糖尿病大血管病变的发生发展中起着重要作用。 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶-9 C反应蛋白质 2型糖尿病 颈动脉粥样硬化
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MCP-2、MMP-1、TLR2在结核性胸膜炎胸腔积液中表达的意义及鉴别诊断价值 被引量:9
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作者 李丹华 李润浦 +1 位作者 闫姗姗 肖剑 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第16期2295-2298,共4页
目的观察单核细胞趋化蛋白-2(MCP-2)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、Toll样受体2(TLR2在结核性胸膜炎(TP)胸腔积液中表达的意义,分析三者对该病的鉴别诊断价值。方法选取90例胸腔积液患者,其中TP 33例,设为TP组,恶性肿瘤26例,设为恶性肿瘤... 目的观察单核细胞趋化蛋白-2(MCP-2)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、Toll样受体2(TLR2在结核性胸膜炎(TP)胸腔积液中表达的意义,分析三者对该病的鉴别诊断价值。方法选取90例胸腔积液患者,其中TP 33例,设为TP组,恶性肿瘤26例,设为恶性肿瘤组,细菌性肺炎31例,设为细菌性肺炎组。比较3组胸腔积液MCP-2、MMP-1、TLR2表达情况;绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析三者对TP的鉴别诊断价值。结果TP组胸腔积液MCP-2、MMP-1、TLR2水平均高于恶性肿瘤组、细菌性肺炎组(P<0.001);ROC结果显示,三者单独及联合诊断TP的曲线下面积(AUC)分别为0.793、0.734、0.786、0.827。结论MCP-2、MMP-1、TLR2在TP胸腔积液中异常高表达,三者联合检测可为TP诊断提供参考。 展开更多
关键词 结核性胸膜炎 胸腔积液 单核细胞趋化蛋白-1 基质金属蛋白酶-1 TOLL样受体2
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RNA干扰沉默VDR基因对小鼠成骨细胞Dmp1、Cbfa1及BMP-2 mRNA表达的影响 被引量:2
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作者 李婵娟 顾海燕 +2 位作者 赵德育 刘晓梅 张翔 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期669-673,共5页
目的:利用RNA干扰技术,阻断VDR在小鼠成骨细胞株mc3t3-E1中的表达,观察VDR表达受抑后对小鼠成骨细胞Dmp1、Cbfa1及BMP-2基因mRNA表达的影响。方法:针对小鼠VDRmRNA144、594、852、3628位点设计、合成4对21核苷酸siRNA(siRNA1、siRNA2、s... 目的:利用RNA干扰技术,阻断VDR在小鼠成骨细胞株mc3t3-E1中的表达,观察VDR表达受抑后对小鼠成骨细胞Dmp1、Cbfa1及BMP-2基因mRNA表达的影响。方法:针对小鼠VDRmRNA144、594、852、3628位点设计、合成4对21核苷酸siRNA(siRNA1、siRNA2、siRNA3、siRNA4);在阳离子脂质体介导下转染mc3t3-E1细胞,以空白及非特异性siRNA作为对照,各组于转染24h及72h后收集细胞分别抽提RNA及蛋白。采用RT-PCR法检测细胞中VDRmRNA表达水平的改变,Westernblot法检测VDR蛋白表达的变化,从而筛选有效序列。进一步应用SYBRGreen荧光实时PCR方法定量检测成骨细胞功能基因-Dmp1、Cbfa1及BMP-2基因mRNA表达情况。结果:与空白对照组相比,转染siRNA3、siRNA4的mc3t3-E1细胞VDRmRNA和蛋白表达明显下调(P<0.01),转染siRNA1、2及非特异性siRNA的mc3t3-E1细胞VDR的表达与对照组相比无显著差异(P>0.05)。荧光定量PCR结果显示,转染siRNA3、siRNA4的mc3t3-E1细胞Dmp1、Cbfa1、BMP-2mRNA表达明显下调(P<0.01)。结论:针对小鼠VDRmRNA852、3628位点设计、合成的siRNA可有效抑制小鼠成骨细胞株VDR的转录和表达;VDR表达受抑可下调mc3t3-E1细胞功能基因Dmp1、Cbfa1、BMP-2mRNA的表达;VDR在维持成骨细胞功能中起着一定的作用。 展开更多
关键词 小干扰RNA 维生素D受体 牙本质基质蛋白1 核心结合因子Α1 骨形态发生蛋白2
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骨形成蛋白-2对肺癌A549细胞膜型基质金属蛋白酶-1表达的影响 被引量:1
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作者 唐四元 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期634-637,共4页
目的:探讨骨形成蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)对人肺癌A549细胞膜型基质金属蛋白酶-1(membrane type 1-matrix metalloproteinase,MT1-MMP)表达的影响。方法:Western杂交检测MT1-MMP蛋白质表达。采用酶联免疫吸附法(enzy... 目的:探讨骨形成蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)对人肺癌A549细胞膜型基质金属蛋白酶-1(membrane type 1-matrix metalloproteinase,MT1-MMP)表达的影响。方法:Western杂交检测MT1-MMP蛋白质表达。采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)检测细胞培养液中活性基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的浓度。结果:BMP-2可促进A549细胞MT1-MMP蛋白质表达,并呈剂量和时间依赖关系。ELISA进一步显示BMP-2可增加A549细胞培养液中活性型MMP-2的含量。结论:BMP-2可促进A549细胞MT1-MMP的表达及MMP-2的激活。肺癌组织中BMP-2表达的增加可通过促进肺癌细胞MT1-MMP表达及MMP-2激活而促进肺癌细胞的侵袭转移,此可能为肺癌侵袭转移的另一重要机制。 展开更多
关键词 骨形成蛋白-2 膜型基质金属蛋白酶-1 人肺癌A549细胞
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