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LALF对增敏小鼠内毒素致死性攻击的保护作用及其对炎症因子产生的调节 被引量:4
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作者 张秋玉 许伟群 +2 位作者 黄爱明 王依星 苏东辉 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期54-58,共5页
目的 观察LALF(鲎抗脂多糖因子 )对D -氨基半乳糖 (D -Gal)增敏的小鼠败血症休克的保护作用 ,以及LALF对内毒素 (LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮 (NO)和白介素 - 10 (IL - 10 )的影响。方法 体内实验用D -Gal增敏建立LPS休克模... 目的 观察LALF(鲎抗脂多糖因子 )对D -氨基半乳糖 (D -Gal)增敏的小鼠败血症休克的保护作用 ,以及LALF对内毒素 (LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮 (NO)和白介素 - 10 (IL - 10 )的影响。方法 体内实验用D -Gal增敏建立LPS休克模型 ;治疗组接受LALF处理 ,对照组给予缓冲液。体外实验提取小鼠腹腔巨噬细胞 ,分别给予单独LPS或LALF/LPS处理 ,收集培养上清 ,分别用比色法和ELISA法检测NO及IL - 10浓度。结果 体内实验表明 :LALF与LPS体外预混合后可明显改善小鼠的生存率 ,且在LPS攻击之后给予LALF仍有一定的保护作用。体外实验提示LALF可明显降低LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞释放NO ,并呈剂量依赖关系 ;与此相反 ,LALF能增加LPS诱导IL - 10的生成。结论 LALF能保护D -氨基半乳糖增敏小鼠抵抗内毒素休克。体外实验提示LALF的保护效应可能与LALF降低LPS诱导的炎症因子NO的产生而同时增加抗炎因子IL - 10的分泌有关。 展开更多
关键词 lalf 增敏 小鼠 内毒素 保护作用 炎症因子 调节 致死性攻击 败血症休克
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鲎抗脂多糖因子的基因克隆及其在COS-7细胞中的表达
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作者 张秋玉 许伟群 苏东辉 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期587-591,共5页
目的构建中国鲎的鲎抗脂多糖因子(LALF)基因序列的真核表达载体并尝试其在真核细胞COS-7中的表达。方法从鲎血细胞中提取mRNA,经RT-PCR扩增出LALF的基因片段,将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)中进行酶切鉴定和序列测定,重组... 目的构建中国鲎的鲎抗脂多糖因子(LALF)基因序列的真核表达载体并尝试其在真核细胞COS-7中的表达。方法从鲎血细胞中提取mRNA,经RT-PCR扩增出LALF的基因片段,将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)中进行酶切鉴定和序列测定,重组载体通过脂质体转染COS-7细胞进行表达,SDS-PAGE分析表达产物。结果酶切鉴定和序列分析证实重组质粒含有LALF的基因片段。经RT-PCR证实转染的COS-7细胞含有LALF的基因序列,经SDS-PAGE分析表明转染重组质粒的COS-7细胞表达融合蛋白。结论LALF真核表达载体构建成功并实现其在真核细胞COS-7中的表达,为进一步探讨rLALF的生物活性奠定了基础。 展开更多
关键词 鲎抗脂多糖因子 真核表达 COS-7细胞 RT-PCR
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鲎抗内毒素因子模拟肽4的体外生物活性实验研究 被引量:1
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作者 顾劲松 肖光夏 夏培元 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期385-387,403,共4页
目的研究鲎抗内毒素因子模拟肽4(m ode ling peptide 4 from the L im u lus an ti-lipopo lysaccharide factor,M 4)体外中和内毒素的活性。方法研究以对内毒素高亲和力的多粘菌素B(po lym yx in B,PM B)为对照,M 4设80、40、20、10、5... 目的研究鲎抗内毒素因子模拟肽4(m ode ling peptide 4 from the L im u lus an ti-lipopo lysaccharide factor,M 4)体外中和内毒素的活性。方法研究以对内毒素高亲和力的多粘菌素B(po lym yx in B,PM B)为对照,M 4设80、40、20、10、5μm o l/L浓度,结合内毒素的活性以生物传感技术分析;中和内毒素的能力以鲎试验动态浊度法测定;对LPS刺激THP-1细胞释放TNF-α的影响采用EL ISA试剂盒定量观察。结果M 4具有较好的内毒素亲和力和中和活性,在5、10、20、40和80μm o l/L浓度时对内毒素2EU/m l(1EU约等于100pg)的中和率分别为43.44%、47.76%、63.12%、81.54%和84.54%,呈明显的浓度梯度效应,20μm o l/L以上浓度时与PM B作用相当。对THP-1细胞释放TNF-α的影响结果显示,M 4可明显抑制LPS刺激的TNF-α释放,但M 4本身具有诱导THP-1细胞释放TNF-α的作用。结论M 4具有较强的中和内毒素活性,值得进一步深入研究。 展开更多
关键词 鲎抗内毒素因子 模拟肽 内毒素 TNF—α
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