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转TaLEA基因小黑杨抗寒株系的筛选 被引量:7
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作者 王遂 刘梦然 +3 位作者 黄海娇 穆怀志 李志新 刘桂丰 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期5-7,16,共4页
为验证转TaLEA基因小黑杨耐低温能力并筛选抗寒的优良株系,对11个转LEA基因小黑杨株系与非转基因野生型小黑杨对照(WT)进行了低温胁迫处理,测定其丙二醛(MDA)的质量摩尔浓度、过氧化物酶(POD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、叶绿素质量分... 为验证转TaLEA基因小黑杨耐低温能力并筛选抗寒的优良株系,对11个转LEA基因小黑杨株系与非转基因野生型小黑杨对照(WT)进行了低温胁迫处理,测定其丙二醛(MDA)的质量摩尔浓度、过氧化物酶(POD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、叶绿素质量分数、冷害指数等。结果表明:低温胁迫条件下,除XL09外,其余各转基因株系的MDA质量摩尔浓度均低于WT,转基因株系MDA的质量摩尔浓度平均值低于WT的16.5%;抗氧化酶类活性在低温胁迫下仅XL10和XL11株系相对较高;叶绿素质量分数除XL01略低于WT外,其余转基因株系均高于WT,转基因株系叶绿素的质量分数平均值为35.1 mg.g-1,高于WT的6.4%;冷害指数方面,各转基因株系中除XL03高于WT外,其余均低于WT。采用隶属函数法综合评价各株系的抗寒性,从强到弱排序为:XL11>XL10>XL14>XL04>XL07>XL03>XL13>WT>XL06>XL01>XL05>XL09。外源基因LEA的导入不同程度地提高了小黑杨的抗寒性,其中XL11、XL10、XL14、XL04株系耐低温能力较强。 展开更多
关键词 小黑杨 leA基因 抗寒性
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扁蓿豆MrLEA2基因的克隆和原核表达 被引量:5
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作者 马超 沈迎芳 +1 位作者 吴小培 王海庆 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1944-1950,共7页
从扁蓿豆(Medicago ruthenica L.)幼苗中克隆到一个编码晚期胚胎发生丰富蛋白的基因MrLEA2,Pfam数据库检索表明其编码产物属于LEA_2蛋白家族。半定量RT-PCR分析发现MrLEA2在幼苗中表达水平不受非生物胁迫(脱水、高盐和低温)和脱落酸诱... 从扁蓿豆(Medicago ruthenica L.)幼苗中克隆到一个编码晚期胚胎发生丰富蛋白的基因MrLEA2,Pfam数据库检索表明其编码产物属于LEA_2蛋白家族。半定量RT-PCR分析发现MrLEA2在幼苗中表达水平不受非生物胁迫(脱水、高盐和低温)和脱落酸诱导。利用MrLEA2基因构建原核表达载体,在大肠杆菌中实现了过量表达。通过斑点试验和菌落计数实验,对过量表达MrLEA2蛋白的大肠杆菌细胞在高盐(0.5mol/L NaCl和0.5mol/L KCl)、55℃高温和-20℃冷冻胁迫处理下的生长存活情况检测发现,MrLEA2蛋白过量表达能够明显提高大肠杆菌对上述胁迫的耐受性。研究表明,MrLEA2蛋白对高盐和温度胁迫引起的细胞损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 扁蓿豆 晚期胚胎发生丰富蛋白 大肠杆菌 过量表达 盐胁迫 温度胁迫
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水稻OsLEA5c基因的克隆、表达和抗逆性分析 被引量:3
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作者 胡廷章 杨俊年 +2 位作者 周大祥 黄小云 陈再刚 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2014年第9期18-23,共6页
为了研究水稻胚胎发育后期丰富蛋白基因OsLEA5c 的抗逆性,利用 RT PCR技术从水稻中克隆到OsLEA5c的 cDNA。序列分析表明,OsLEA5c基因的读码框为456 bp,编码1个由151个氨基酸残基组成的蛋白。蛋白分子量为16.55 kD,等电点为5.07。OsL... 为了研究水稻胚胎发育后期丰富蛋白基因OsLEA5c 的抗逆性,利用 RT PCR技术从水稻中克隆到OsLEA5c的 cDNA。序列分析表明,OsLEA5c基因的读码框为456 bp,编码1个由151个氨基酸残基组成的蛋白。蛋白分子量为16.55 kD,等电点为5.07。OsLEA5c蛋白的平均亲水系数(GRAVY)为0.020,为疏水蛋白。OsLEA5c蛋白的44-140位氨基酸残基形成 LEA_2结构域。进化树分析表明,OsLEA5 c属于第5组LEA蛋白的C亚组。OsLEA5 c与5 C亚组LEA蛋白的氨基酸一致性为45.14%~61.59%。利用基因重组技术构建的原核表达载体 pET32a Os-LEA5c,转化到E.coli BL21 pLysS菌株中,诱导得到34 kD的融合蛋白。OsLEA5c在大肠杆菌中的表达增加了大肠杆菌对高温、高盐、高渗透压和反复冻融的抗性。OsLEA5c 基因在水稻抗逆和种子成熟脱水过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 水稻 胚胎发育后期丰富蛋白 OsleA5c基因 表达 抗逆性 ORYZA SATIVA l.
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丹参晚期胚胎蛋白基因SmLEA的克隆及表达分析 被引量:4
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作者 刘丛玲 王喆之 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期80-84,共5页
对丹参EST序列进行Blast分析,发现一条序列与晚期胚胎丰富蛋白(late embryogenesis abundant)基因有较高的相似性,在此基础上设计引物,分别从cDNA和gDNA水平克隆到该基因的全长(Genbank注册号:AY725206),命名为SmLEA。该序列全长739 bp... 对丹参EST序列进行Blast分析,发现一条序列与晚期胚胎丰富蛋白(late embryogenesis abundant)基因有较高的相似性,在此基础上设计引物,分别从cDNA和gDNA水平克隆到该基因的全长(Genbank注册号:AY725206),命名为SmLEA。该序列全长739 bp,无内含子,包含1个长为495 bp的开放阅读框,编码164个氨基酸。序列比对结果显示,该序列与番茄的晚期胚胎丰富蛋白Lemmi9有较高的相似性(69%),推测该编码蛋白属于晚期胚胎蛋白LEA14家族成员。生物信息学显示,SmLEA所编码蛋白SmLEA的相对分子质量为17.34 kD,理论等电点为4.51,富含天冬氨酸及AS、IP、KV、VS、TIP肽段,定位于细胞质中,为稳定类蛋白。实时荧光定量PCR结果显示,该基因在丹参的根、茎、叶中均有表达,为组成型表达基因。 展开更多
关键词 晚期胚胎丰富蛋白 生物信息学 组成型基因 丹参
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海马齿胚胎发育晚期丰富蛋白基因SpLea5的克隆与表达分析 被引量:2
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作者 付桂 范伟 +1 位作者 畅文军 张治礼 《热带作物学报》 CSCD 2011年第1期89-93,共5页
根据筛选文库时获得的EST序列信息,利用RACE技术从海马齿根中分离获得了一个海马齿胚胎发育晚期丰富蛋白基因的全长cDNA,命名为SpLea5。序列分析结果表明,SpLea5基因cDNA全长685 bp,含有一个294 bp的完整开放阅读框,编码97个氨基酸残基... 根据筛选文库时获得的EST序列信息,利用RACE技术从海马齿根中分离获得了一个海马齿胚胎发育晚期丰富蛋白基因的全长cDNA,命名为SpLea5。序列分析结果表明,SpLea5基因cDNA全长685 bp,含有一个294 bp的完整开放阅读框,编码97个氨基酸残基;推测编码的氨基酸序列与柽柳、杨木樨、烟草、甜橙、温州蜜柑、麻风树和陆地棉中相应基因的氨基酸序列一致性为54%、52%、48%、47%、47%、46%、44%、41%,在聚类分析时与高等植物聚为一类。SpLea5在海马齿植株中呈组成型表达,但根中表达最为丰富,茎和叶次之;海水、NaCl、PEG、ABA处理均能够诱导根部SpLea5基因的表达。这些结果表明,SpLea5基因可能参与了海马齿对盐和干旱胁迫的分子响应。 展开更多
关键词 海马齿 胚胎发育晚期丰富蛋白基因 表达分析
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植物低温诱导基因及其产物的生物学功能 被引量:5
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作者 陆小平 楼程富 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期562-567,共6页
植物在适应低温胁迫的过程中,体内将会发生一系列生理生化反应,多种基因得以诱导表达,这些基因的表达在时空上是有序发生的,并相互联系形成了低温应答的分子机制。为促进我国桑树抗寒分子育种的研究,结合植物的抗冻特性和桑树低温胁迫反... 植物在适应低温胁迫的过程中,体内将会发生一系列生理生化反应,多种基因得以诱导表达,这些基因的表达在时空上是有序发生的,并相互联系形成了低温应答的分子机制。为促进我国桑树抗寒分子育种的研究,结合植物的抗冻特性和桑树低温胁迫反应,对植物的3种主要低温诱导蛋白(抗冻蛋白、胚胎后期富集蛋白和转录因子)的研究进展进行了综述,并以此阐述了植物抗寒抗冻特性和植物低温应答的分子机制。 展开更多
关键词 植物 抗冻蛋白 胚胎后期富集蛋白 转录因子 低温诱导基因
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植物耐盐性的分子生物学研究进展 被引量:30
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作者 卢青 《生物学杂志》 CAS CSCD 2000年第4期9-11,共3页
研究证明植物的耐盐机制十分复杂 ,它与植物的小分子物质的积累 ,离子摄入和区域化 ,以及基因表达和大分子蛋白质的合成有关 ,如调渗蛋白、通道蛋白、晚期胚胎发生富集蛋白。同时 ,利用克隆技术分离到了一些盐诱导基因。现将这部分工作... 研究证明植物的耐盐机制十分复杂 ,它与植物的小分子物质的积累 ,离子摄入和区域化 ,以及基因表达和大分子蛋白质的合成有关 ,如调渗蛋白、通道蛋白、晚期胚胎发生富集蛋白。同时 ,利用克隆技术分离到了一些盐诱导基因。现将这部分工作做一综述。 展开更多
关键词 小分子物质 基因表达 盐诱导基因 植物 耐盐性
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利用数字表达谱分析拟南芥叶片中盐响应基因
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作者 程华 杨梅燕 +4 位作者 吴佳辉 孙楠 黄健子 郑易之 刘昀 《深圳大学学报(理工版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第6期631-639,共9页
为揭示拟南芥在盐胁迫下基因表达谱的变化,为解决盐害提出新的方向,以哥伦比亚野生型拟南芥为材料,利用数字表达谱技术(digital gene expression profiling,DGEP)分析盐胁迫组(200 mmol/L Na Cl处理2 h)和对照组的拟南芥叶片互补脱氧核... 为揭示拟南芥在盐胁迫下基因表达谱的变化,为解决盐害提出新的方向,以哥伦比亚野生型拟南芥为材料,利用数字表达谱技术(digital gene expression profiling,DGEP)分析盐胁迫组(200 mmol/L Na Cl处理2 h)和对照组的拟南芥叶片互补脱氧核糖核酸(complementary deoxyribonucleic acid,c DNA)文库,鉴定盐胁迫下拟南芥中差异表达的基因.结果显示,盐胁迫组中共有4 400个基因发生了差异表达,其中,1 513个基因上调表达,约占34.39%;2 887个下调表达,约占65.61%.这些基因主要富集于22个基因本体(gene ontology,GO)条目,包括核糖体构成、细胞膜和细胞器组成、应答胁迫、脯氨酸代谢等过程.进一步的KEGG(Kyoto encyclopedia of genes and genomes)分析表明,基础代谢、次生代谢以及光合和氧化代谢等32个通路的基因显著富集.此外,本研究筛选到6个显著差异表达的胚胎晚期富集蛋白(late embryogenesis abundant,LEA)基因,其中,3个LEA基因在盐胁迫条件下上调表达,3个下调表达,暗示着这6个LEA基因可能是拟南芥在应答盐胁迫过程发挥关键作用的抗逆基因. 展开更多
关键词 拟南芥 leA基因 乙烯应答因子 盐胁迫 数字基因表达谱 差异表达基因
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